马铃薯茎尖脱毒培养影响因素研究

以马铃薯茎尖为外植体,通过组织培养研究了不同的茎尖大小、不同浓度和配比的细胞分裂素和生长素对脱毒效果的影响。结果表明:茎尖越小,脱毒率越高但成活率和成苗率越差;茎尖越大,成活率和成苗率高但脱毒率差。6种培养基中以MS+NAA 0.1 mg.L-1效果最好,成苗率为33.75%,为本试验中茎尖诱导分化成苗的最优培养基。     

马铃薯茎尖脱毒效果影响因素的研究

以克新2号、克新16号和克新17号等8个马铃薯品种为试验材料,对马铃薯茎尖脱毒效果的影响因素进行了研究。结果表明:不同种类的植物生长调节剂对茎尖的生长有不同的影响,茎尖在⑤号培养基(MS+1.0mg·L-1KT+0.5mg·L-1IAA+0.5mg·L-1GA3)上可不产生愈伤组织,直接成苗,是最适宜的培养基;6～8℃低温预处理和37℃热空气处理对茎尖脱毒有利;茎尖取材来源对成苗率没有影响,对脱毒效果影响较大,但脱毒效果依品种而异;为避免造成损失,需在15个月内准备出用于更换的基础苗。     

不同激素配比对马铃薯茎尖成苗率的影响

以本溪市马铃薯研究所保存的种质资源和自选品系为试验材料,进行茎尖剥离。通过添加不同种类、不同浓度激素,研究其对马铃薯茎尖培养成苗率的影响。结果表明,添加ZT处理的成苗率没有添加6-BA处理的成苗率高,6-BA和GA3浓度为0.5 mg/L的处理成苗率高于其他处理。适宜进行茎尖剥离的激素配比为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA+0.5 mg/L GA3。     

甘薯茎尖脱毒及快繁技术研究

以辽薯20等品种为试材,对辽宁省4个主栽甘薯品种的茎尖脱毒和脱毒苗快繁技术进行研究。结果表明,甘薯茎尖采用体积分数为0.05的NaClO溶液消毒10 min,采用高温（33～35℃）预培养植株2～5 mm茎尖作为外植体进行脱毒,可提高成苗率和脱毒效果。切取0.2～0.3 mm长的茎尖分生组织,在附加6-BA1.0mg/L＋NAA0.24 mg/L的MS培养基中,4个品种的茎尖培养成苗率平均为78.5%,成苗期45～60 d,加入IAA（0.02～0.05 mg/L）的MS培养基对甘薯无毒苗的快速繁殖更有利。     

马铃薯茎尖脱毒培养方法优化研究

以甘肃省主栽品种陇薯6号为材料,研究了茎尖大小及培养基中激素和活性炭对马铃薯茎尖培养成活的影响。结果表明,叶原基数为2的茎尖脱毒效果最好;MS培养基中加入0.5 mg·L~(-1)6-BA、0.1mg·L~(-1)GA_3和0.1 mg·L~(-1) NAA有助于陇薯6号茎尖分生组织分化;加入0.05%活性炭,茎尖成苗时间提前了13 d,成苗率增加了7.5%。     

苎麻茎尖的组织培养及其诱导植株的再生

对苎麻50号品系的茎尖进行组织培养并诱导植株再生。结果表明:最适茎尖转绿和分化的培养基是1/2MS 6-BA1.0mg/L CH300mg/L的液体培养基,茎尖分化率为100%。最适成苗培养基为MS 6-BA0.5mg/L IAA0.1mg/L CH300mg/L,成苗率是53.3%。扩繁培养基为MS 6-BA0.3￣1.0mg/L,繁殖系数达6.7。适宜生根培养基为1/2MS NAA0.01mg/L。最佳茎尖剥取材料是无菌试管苗,茎尖长以0.3mm带1￣2个叶原基为宜。从茎尖接种培养成苗到移栽需4个月左右。     

果蔗Badila花叶病茎尖脱毒技术的研究

本文利用热带种（Badila)茎尖培养进行脱毒研究。试验结果表明：细胞分裂素是茎尖成苗所必需的激素，萘乙酸则不是，0．5－1．0mm外植体在附加2．0mg/L BA和0．2mg/L NAA的MS液体培养基中进行离体培养，成苗率可达30％以上；采用液体培养和在培养基中添加少量的活性炭均能有效地防止酚污染，提高成苗率；茎尖培养结合热处理能有效地脱除花叶病毒，侧芽培养无法进行脱毒。田间调查表明，茎尖脱毒苗在光合速率、株高、茎径方面显著优于未脱毒的侧芽苗，分蘖数两者相近。     

马铃薯茎尖培养部分无机盐浓度对黄化苗发生的影响

为解决马铃薯茎尖脱毒培养过程中黄化苗形成的问题,以马铃薯品种B01-31-9为试验材料,研究了茎尖诱导培养基中NH4NO3,MgSO4.7H2O,CaCl2.2H2O和铁盐浓度改变对茎尖培养过程中黄化苗发生及成苗率的影响。结果证明:培养基中氮、镁、铁浓度的改变对黄化苗的预防有显著作用,当NH4NO3,MgSO4.7H2O和铁盐的浓度分别在1 600 mg·L-1、400 mg·L-1、83.4 mg·L-1时,黄化苗发生率最低;但以上各因素处理对茎尖诱导分化成苗的影响差异并不显著。     

愈伤组织再生马铃薯脱毒苗生产体系的建立

以马铃薯茎尖、茎段、全叶、半叶为外植体,进行愈伤组织的诱导、继代、根芽分化和植株再生的研究,建立马铃薯脱毒再生体系。结果表明:(1)马铃薯茎尖、茎段、半叶、全叶在MS+6-BA1.5 mg·L-1+NAA1 mg·L-1+3%蔗糖+0.6%琼脂培养基中,愈伤组织诱导率分别达到97.3%、75.6%、96.8%、97.4%;(2)在MS+6-BA1.5mg·L-(1或ZT2.0 mg·L-1)+NAA0.5 mg·L-1+GA3 5 mg·L-1+3%蔗糖+0.6%琼脂培养基中不同外植体芽诱导率在15.4%～67.7%,根的分化率21.3%～88.2%。     

马铃薯茎尖试管苗及微型试管薯繁育的影响因子研究

以广东省引种的荷兰马铃薯费乌瑞它(Favorita)品种为材料,研究了从茎尖脱毒分化到试管微型薯诱导过程中的一些影响因素。结果表明:MS+NAA0.10mg·L-1+6-BA1.0mg·L-1为诱导愈伤组织的合适培养基;愈伤组织分化培养时,GA3的最适浓度为0.1～0.2mg·L-1;壮苗阶段,液体基本培养基MS加矮壮素CCC1.0～1.5mg·L-1的效果较好;弱光照比连续强光照更有利于结薯,弱光处理40d后黑暗处理一周,结薯诱导培养的时间为50d左右,0.1%的活性炭对诱导结薯有重要的促进作用。     

马铃薯优化再生系统的建立

本试验研究了六种培养基系统对马铃薯东农３０３，Ｆａｖｏｒｉｔａ和极早三个品种来源的不同外植体的愈伤组织诱导和植株再生的影响，筛选出了适合植株再生的最佳外植体、最佳外植体大小及最佳培养基系统。适合植株再生的最佳外植体为叶片；最佳外植体大小为叶片０．５ｃｍ２、茎０．５ｃｍ、块茎０．２５ｃｍ２×０．３ｃｍ，适合于茎、块茎及叶的有效培养基系统分别为：①ＭＳ＋３ｍｇ·Ｌ-１ＢＡ＋０．０１ｍｇ·Ｌ-１ＮＡＡ（ｐｈ５．６）４周ＭＳ＋０．３ｍｇ·Ｌ-１ＧＡ３（ｏＨ５．６）；②ＭＳ＋１．７５ｍｇ·Ｌ-１ＺＴ＋０．８７ｍｇ·Ｌ-１ＩＡＡ（ｐＨ５．８）；③ＭＳ＋２．２５ｍｇ·Ｌ-１ＢＡ＋０．１８６ｍｇ·Ｌ-１ＮＡＡ（ｐＨ５．８）２周ＭＳ＋５ｍｇ·Ｌ-１ＧＡ３＋２．２５ｍｇ·Ｌ-１ＢＡ（ｐｈ５．８）。     

蔗糖和外源激素对马铃薯脱毒试管苗的影响

本试验以马铃薯品种大西洋脱毒试管苗为材料,采用正交试验设计,研究了蔗糖和外源激素(6-BA、B9、NAA)对脱毒试管苗生长状况的影响。研究结果表明,对于试管苗的不同指标,其最优组合不尽相同。有利于株高的组合:3%蔗糖+0.01mg·L-16-BA+20mg·L-1B9+0.1mg·L-1NAA;有利于茎粗的组合:12%蔗糖+1mg·L-16-BA+20mg·L-1B9+0.02mg·L-1NAA;有利于茎节数的组合:3%蔗糖+0.1mg·L-16-BA+35mg·L-1B9+0.1mg·L-1NAA;有利于叶片数的组合:3%蔗糖+0.1mg·L-16-BA+20mg·L-1B9+0.02mg·L-1NAA。     

滁州白头翁组织培养及再生体系的建立

为建立白头翁再生体系,以白头翁主根的切段和试管苗叶片为外植体,比较2种外植体离体培养差异,探讨不同植物生长调节剂对不定芽和愈伤组织诱导、愈伤增殖和再分化及芽苗生根的影响。结果表明:叶片可以通过愈伤组织再分化和直接产生不定芽2种途径建立再生体系,而根只诱导出了愈伤组织,增殖培养中逐渐褐化死亡;在含6-BA培养基上,叶块死亡,而根只诱导出少量愈伤组织;叶片诱导不定芽的培养基为MS+TDZ 0.3 mg/L+NAA 0.1 mg/L;愈伤组织增殖的培养基为MS+TDZ 0.2 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L;再分化时,需要转接到TDZ和NAA组合的培养基上,其中处理组合TDZ 0.3 mg/L+NAA0.1 mg/L的再分化率达100%;生根培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg/L+IBA 0.2 mg/L+蔗糖20 g/L。不同外植体离体培养存在差异,叶片较根易培养;TDZ对白头翁叶片培养效果较好,2,4-D对愈伤组织的诱导能力较强,而NAA适合于不定芽分化,NAA与IBA组合使用生根效果较好。     

不同基因型马铃薯的花药培养

马铃薯花药培养在马铃薯育种实践中具有重要的意义。现以杂交圃中77份亲本材料为试验材料,对花药高温前处理、培养基和基因型等因素进行了试验。结果表明:马铃薯花药培养对基因型有很大依赖性,不同基因型马铃薯愈伤诱导率范围是0.16%～9.50%,胚状体发生率范围是0.31%～15.63%。克97G8-4、讷16和白俄3的植株再生率范围为12.00%～23.08%,其余全部没有分化出植株。倍性鉴定表明:双单倍体的发生率为93.75%。诱导培养基以MS+0.5 mg·L-1 NAA+1.0 mg·L-12,4-D+1.0 mg·L-1 KT+0.5%活性炭+100 mg·L-1 AgNO3,即③号效果最好,植株分化培养基以MS+4.0 mg·L-1 GA3+2.0 mg·L-1 ZT+30 mg·L-1蔗糖+0.7%琼脂,即②号效果较好。高温预处理对胚状体的发生有利。     

Calcium translocation and accumulation into potato tubers

Summary Calcium uptake into potato plants was examined using test solutions containing 5% safranin dye (C₂₀H₁₉N₄C1 mw 350.85) and the radiotracer⁴⁵CaCl₂. When minitubers were suspended in test solutions for up to 5 days, safranin moved into the outer pith tissues while⁴⁵Ca²⁺ was located throughout the pith. Ca²⁺ is apparently taken up directly from the tubersphere by a slow diffusion process. Plantlets with one microtuber were used to investigate calcium uptake via basal roots.⁴⁵Ca²⁺ was well ahead of the safranin dye front in all plantlet stems.⁴⁵Ca²⁺ in shoot tips was significantly greater than in microtubers and no safranin entered the microtubers. Greenhouse-grown ex vitro plantlets with minitubers attached were used to determine the relative uptake by basal and stolon roots. Basal root feeding contributed significantly more⁴⁵Ca²⁺ to shoot tips and tubers than stolon root feeding while combined feeding gave the greatest shoot tip and tuber⁴⁵Ca²⁺ levels.     

发根农杆菌介导抗菌肽Shiva1基因转化马铃薯的初步研究

利用已构建载体530Shiva,转化马铃薯普通栽培种甘农薯1号、澳布、HLS和夏波蒂的试管苗及块茎盘的研究。结果表明,以Kan50mg·L-1和100mg·L-1作为筛选转基因细胞和植株的剂量。对于发根农杆菌侵染马铃薯试管苗应采用新鲜菌落直接涂抹伤口进行侵染,这种方法诱导生根率高且易于操作,根诱导率、成愈率及分化率远高于浸泡法;发根农杆菌转化试管苗,后期愈伤组织分化产生5个幼苗。发根农杆菌菌液侵染甘农薯1号和夏波蒂两品种的块茎盘,7d后就有很小的毛状根突起产生,2周后即有大量毛状根产生,3周后毛状根产生量有所减少,产生的毛状根3周时其成愈率分别为31.0%和27.0%,愈伤组织分化成苗比较困难,分化出3个幼苗,分化率分别为6.45%和3.70%。转化材料进行冠瘿碱检测表明,分化苗均为胭脂碱阳性反应。环腐病菌接种试管苗结果表明,分化植株与对照相比抗性明显增强。     

1个籼粳杂交F_1花药培养及其影响因素研究

以籼粳杂交(沈农265/R99)F1及其亲本为试验材料,对低温预处理、不同基本培养基、基因型、不同激素配比等影响花药培养效果的因素进行了研究。结果表明:(1)不同低温处理时间沈农265/R99 F1的愈伤诱导率、绿苗分化率和花药培养力差异达到极显著水平,低温预处理7 d的花药培养效果最好。(2)3个基因型的愈伤诱导率、绿苗分化率以及花药培养力差异很大,沈农265/R99适合在SK3培养基上培养,沈农265适合在改良N6培养基上培养,R99适合在M8培养基上培养,培养基与基因型存在互作效应。(3)沈农265/R99F1花药诱导愈伤的最佳的激素配比为2,4-D(2 mg.L-1)、NAA(1mg.L-1)、KT(0.5 mg.L-1)。     

利用农杆菌介导法将PVA-CP基因导入马铃薯品种东农303的研究

以马铃薯早熟品种东农303的微型薯为受体材料,对其再生和农杆菌介导的遗传转化体系进行了研究,成功地将PVA-CP基因导入马铃薯中。结果表明:在加入5mg·L-1ZT和1mg·L-1IAA的培养基上微型薯再生频率最高达95%;农杆菌侵染薯块时,用浓度为OD600=0.5的菌液,侵染5min,共培养2d转化频率最高;在诱导芽阶段加入75mg·L-1的卡那霉素,采用延迟筛选的方法。得到的抗性芽有22株在含100mg·L-1卡那霉素的培养基上生根。经PCR和PCR-Southern杂交检测,15株为阳性植株。初步证明了PVA-CP基因已导入并整合到马铃薯品种东农303的基因组中。