应用玻板凝集反应诊断牲畜布氐桿菌病的初步报告

目前我国牲畜布氏杆菌病的诊断,主要应用试管凝集反应法。这种方法操作较复杂,尚须一定的实验室设备,因此试管凝集反应法不适于在我国农牧区进行大规模的现地检疫用。玻板凝集反应具有许多试管凝集反应所缺少的优点:操作简便,易推广:不需实验室设备,可以在牧场及田间操作;仅用10—12分钟的时间就可以得出结果(试管凝集反应需28小时以上);敏感性也较试管法高。因此很多文献对(?)种诊断方法给予很高的评价。     

高压聚乙烯输血管在动物检疫采血中的应用

兽医人员历来应用试管进行采取血样,需血量多时以大试管接血,需采血量少则用小试管或小青瓶,多用小试管或小青瓶分离血清。近年我们将医务人员使用的输血器材——高压聚乙烯输血管用于临床检疫采取血样,代替了传统的试管法。在近60万只种鸡雏进口检疫的抽样采血应用中,对其深有体会,总结报告如下。 1 使用方法 1.1 使用前的处理选取外径为3mm、内径为2mm规格的高压聚乙烯输血管,剪成每根约12cm长,两端的剪口呈锐角。需无菌采取血样时,用蒸馏     

鸭病毒性肠炎(鸭瘟)的诊断

鸭病毒性肠炎,是鸭科动物的疱疹病毒性疾病,严重危害家鸭,也侵袭野鸭等多种水禽。在美国1967年首次确诊。最先用接种鸭胚和幼鸭分离病毒,再用鸭胚原代成纤维细胞培养,作中和试验进行病毒鉴定。而病毒分离与鉴定需1—2个星期,故需要一种更快速的诊断技术。     

应用离子捕捉电镜技术对鸡粪便中新城疫病毒的快速鉴定

应用电镜技术的负染法直接观察粪便中病毒粒子,由于粪便中的各种杂质干扰,造成图象模糊的背景,影响对目的物的观察。去除这些杂质,最常用的方法为差异离心、密度梯度超速离心以及柱层析等。但这些方法操作复杂,需时较长。我们采用了磷酸氢钙(CaHPO_4)离子交换捕捉法纯化粪便中的病毒,方法简便易行、节省时间、纯化高度,适用于电镜快速鉴定,现介绍如下。     

猪精液离心冷冻技术试验

<正> 我站通过2年的试验研究,根据创造一个无氧的环境,可增强精子耐冻性的理论,提出以下四项操作技术: 1.精液离心浓缩。 2.在“葡—卵—甘”稀释液内,加入适量的抗菌素和抗氧化剂。 3.快速冷冻。 4.干试管中37℃解冷。     

“胺法”测定乳脂率

乳脂含量的高低是衡量乳质的重要标志。在测定方法上国外最先进的快速“乳成分分析仪”价格昂贵,不适宜我国当前普及应用。目前国内一般多用酸法“盖氏法”和“巴氏法”,公认以“盖氏法”为标准。酸法测定必须备有离心设备。另一方法是碱法“伊尼霍夫法”,测定时虽不需离心设备,但测定结果不够稳定,准确性差且较繁琐。我们应用Claus测定孕酮提取脂肪的方法即“胺法”,方法简便、准确,不需离心设备。主要利用乳脂瓶和两种化学药品,适宜于农牧区一般养牛单位、专业户自己测定。     

水貂肠炎病毒的提纯及部分生化特性分析

应用高速离心—PEG沉淀—蔗糖和氯化铯密度离心—氯化铯平衡密度梯度离心等方法,从水貂肠炎病毒猫肾细胞培养物中提纯病毒粒子。提纯的病毒粒子分为氯化铯浮密度为1.32～1.36g/ml的空壳病毒粒子和氯化铯浮密度为1.40～1.42g/ml的实心病毒粒子。应用SDS—PAGE分析,实心病毒粒子有结构蛋白3种,(VP_1,VP_2、VP_3),空壳病毒粒子有2种(VP_1、VP_2);从第5d培养物中提纯的实心粒子的VP_3含量少于第7d培养物的量。从第7d培养物中提纯的实心病毒粒子经尿素、NP_(40)、TritonX—100裂解后,在薄层聚丙烯酰胺等电聚焦电泳中出现4条蛋白带。从感染48h的细胞培养物中提取到水貂肠炎病毒线状双股复制型DNA(RF—DNA)。通过琼脂糖凝胶电泳测定,该RF—DNA大约有5000个硷基对。经限制性内切酶分析,RF—DNA有2个HindⅢ酶切点,1个PstⅠ酶切点和1个ECoRⅠ酶切点。     

猪囊虫病生前快速诊断的研究——血片定量法间接血球玻璃板凝集试验

间接血球凝集反应对猪囊虫病生前诊断由朱彦鹏(1976)用试管法及刘文超(1984)用微量法已有报导。该方法具有敏感、特异、检出率高等优点。但因需要分离血清,操作程序复杂,实验器材要求较多,技术较难掌握,而且需要1—1。5小时才能出现结果,不适于在现地生产上应用。为了解决现地分离血清的困难,缩短反应时间,在上述研究基础上,又试     

兔病毒性出血症病毒的提纯及部分特性鉴定

应用建立的SDS—蔗糖密度梯度超速离心法,纯化了从兔肝组织中粗提的兔病毒性出血症病毒。通过血凝、电镜观察、SDS-PAGE、琼脂双向免疫扩散、免疫印迹等试验,证明SDS—蔗糖梯度柱分离的病毒纯度高,具有4种结构多肽。     

鸡新城疫血球凝集抑制价β—微量法与试管法符合率的比较试验

应用鸡新城疫血球凝集抑制价(HI值)的传统试管法和β—微量法进行测定鸡群的新城疫弱毒苗免疫和雏鸡母源抗体水平,多处报道β—微量法较试管法有操作简易、快速、准确的优点,但两种方法的符合率未见报道。为促进β—微量法的推广应用,我们对这两种方法的符合率进行了对比试验,现将试验结果报告如下。     

应用RT-PCR和病毒学方法诊断山东省鸡新城疫感染的比较研究

分别应用病毒分离和区分新城疫强弱毒株的RT—PCR技术，对山东各地疑似鸡新城疫感染的25份病料进行了实验室诊断。结果表明：从18份病料中既扩增到了新城疫强毒基因，也分离到了新城疫病毒；3份病料未分离到病毒，仅扩增到了新城疫强毒基因；4份病料分离到了新城疫病毒，但未检测到相关基因。研究表明，将RT—PCR和病毒分离鉴定两种方法相结合，可更好的满足快速、灵敏、准确的新城疫诊断要求。     

对蓝舌病血清学阳性种公牛精液的病毒分离试验

本试验是对人工配种站的3头长期和9头短期为血清学阳性公牛的85份精液检样作蓝舌病病毒分离。用于病毒分离的两种培养细胞对蓝舌病毒(BTV)都具有易感性,用超声波处理被检精液并离心沉淀,再用二甲基亚砜和二乙氨乙基葡聚糖处理细胞培养物以促进病毒对细胞的吸附和感染。所有检样的病毒分离结果都是阴性,此结果说明,蓝舌病阳性公牛的精液中没有长期潜伏的蓝舌病毒。     

猪圆环病毒病病原学及流行病学研究进展

猪圆环病毒（PCV）首先是由德国学者Tischer等在传代的PK—15细胞中发现，当时他观察到一种形态类似小RNA病毒的圆型小颗粒病毒，该病毒可以持续感染PK—15细胞，不会引起细胞病变。1982年，Tischer等用超速离心法提取了病毒及核酸，鉴定了病毒的核酸类型，观察了病毒形态，首次证实是一种单链环状DNA病毒，并命名为猪圆环病毒（PCV）。随后，Tischer、Allian用从PK—15细胞中分离的PCV人工感染猪，没有引起任何临床症状和病理变化，当时认为PCV只是一种可以感染猪但不引起发病的病毒，对猪不造成危害。1991年Clark报道，     

国内外科技

原作者从有发热、咳嗽、流鼻涕及呼吸急促等的呼吸器官症状的19群牛的鼻汁中,用组织培养法分离出38株病毒。这些病毒接种于初代牛肾培养细胞和MDBK细胞后,出现的CPE与牛鼻病毒(BRV—1和BRV—2)的CPE是一致的。38株分离病毒的特性是:病毒在IUDR条件下继续增殖,证明了分离病毒是RNA型的,有抗乙醚性,对酸易感性,经56℃     

宁夏地区牛场E种肠道病毒的分离与鉴定

牛肠道病毒感染是近年来国内新报道的一种传染病,其病原体为微RNA病毒科肠道病毒属中的肠道病毒。本研究应用双抗体夹心ELISA方法对宁夏地区的部分牛群肠道病毒感染进行了调查,其感染率为9.85%、27%、28.2%。应用Vero细胞从采自宁夏牛群的粪便样品中分离出2株病毒,采用病毒学技术、过氧化物酶单层细胞试验和分子生物学技术对分离毒鉴定发现,2株病毒均为肠道病毒。应用PCR技术扩增分离毒的部分核苷酸序列,并对其进行比对分析发现,分离的2株病毒均为E种肠道病毒。该结果将为宁夏地区肠道病毒感染的防控提供依据。     

猪流行性腹泻病毒检测方法研究进展

介绍了猪流行性腹泻病毒实验室检测方法的研究进展,在细胞生物学方面,主依靠病毒分离培养、病毒电镜形态检查、病毒特异性抗原及其抗体的检查等检测方法;在分子生物学方面,主依靠核酸杂交技术、RT—PCR法和实时荧光定量RT—PCR法等检测方法。介绍和比较了各种方法的优缺点和实用性,为临床兽医科技工作者提供参考。     

家蚕核型多角体病毒主要结构组分的血清学关系研究

用蔗糖密度梯度离心与琼脂糖凝胶柱层析相结合的方法,分离纯化家蚕核型多角体病毒的多角体蛋白和病毒粒子。用非离子型去污剂NP—40脱除病毒粒囊膜,制备核衣壳。经用多种方法对这三种主要结构组分进行纯度鉴定。制备相应的兔抗血清。用双向免疫扩散和免疫电泳对三者之间的血清学关系进行了比较。试验结果表明,家蚕核型多角体病毒的多角体蛋白与病毒粒子和核衣壳之间无交叉反应,核衣壳与病毒粒子囊膜之间亦无血清学关系。     

种公鸡精液禽白血病病毒检测方法研究及初步应用

研究旨在探讨种公鸡精液禽白血病病毒(ALV)检测的可行性与实用性,为种禽场禽白血病净化材料的选择与方案制定提供参考依据。对绿壳蛋鸡种公鸡精液不同处理和检测方法效果,以及不同精液稀释度对病毒分离效果的影响进行了研究,并将确定的检测方法应用于绿壳蛋鸡、矮脚鸡和芦花鸡3个地方鸡种合计551只种公鸡的检测净化中,同时与血浆病毒分离或血浆斑点杂交检测结果进行比较。结果显示,以血浆病毒分离为标准,精液样品经稀释离心后,取上清接种DF-1细胞,确保在培养基中最终稀释度为1∶28~1∶56时病毒分离效果最佳。初步应用结果显示,不同鸡种精液p27抗原ELISA检测阳性率均最高,但并不能将血浆和精液病毒分离检测为阳性的鸡均检出,存在"假阴性";同一鸡种血浆和精液病毒分离阳性率高低不同,在绿壳蛋鸡和矮脚鸡种公鸡中,二者阳性符合率均低于50%,两种方法不可互相取代;芦花种公鸡精液病毒分离阳性率显著高于血浆病毒分离,亦高于血浆斑点杂交,二者阳性符合率分别为100%和36.4%,精液病毒分离效果优于血浆病毒分离。结果表明,对种公鸡精液进行ALV检测具有可行性和必要性,由于不同鸡种净化进程不同、带毒排毒状态不一,检测方法也应灵活运用。     

膜分离技术在γ-氨基丁酸分离提取中的应用

γ-氨基丁酸（GABA）是一种具有生理活性的氨基酸。在饲料工业上，它是一种极具利用价值的添加剂。本文论述了膜分离技术在GABA分离提取中的应用。针对提取物成分的复杂性，采用高速离心进行初步的分离，然后运用超滤和纳滤相结合的方法，在去除大分子及色素同时，尽量提高GABA的回收率。     

兔病实验室诊断

正1病毒性疾病1.1病毒分离技术该技术能检测被检材料中存活的、能在体外复制的传染性病毒。病毒分离技术特异性强,假阳性少,但需时较长,对实验室要求较高。1.2病毒检测1.2.1红细胞凝集试验有些病毒具有凝集某些动物红细胞的能力,利用这种特性设计的试验称血凝试验。