淫蜂佐剂对实验动物NK细胞活性的影响

用微量乳酸脱氢酶（LDH）释放法分别观察了淫羊藿－蜂胶佐剂（以下简称“淫蜂佐剂”）对小鼠脾脏和雏鸡外周血中自然杀伤细胞（NK细胞）活性的影响。结果：小鼠NK细胞活性在淫蜂佐剂（Ⅰ）组、生理盐水对照（Ⅳ）组、淫蜂＋环磷酰胺（Ⅱ）组和环磷酰胺（Ⅲ）组的上述各组间差异显著或极显著（P＜0．05或P＜0．01）（Ⅱ组和Ⅳ组间差异不显著，P＞0．05），这种差异在4周龄小鼠较8周龄小鼠更为明显。雏鸡NK细胞活性，35日龄时，注射淫蜂佐剂雏鸡极显著高于注射生理盐水雏鸡，0．4mL／羽组明显高于0．2mL/ 羽组。上述结果表明，淫蜂佐剂能提高实验动物NK细胞活性，并拮抗环磷酰胺对NK细胞活性的抑制作用。淫蜂佐剂的这种作用在适龄的幼年动物中表现更为显著，并存在一定的量效关系。     

淫羊藿—蜂胶佐剂对雏鸡和小白鼠腹腔巨噬细胞活性的影响

用淫羊藿－蜂胶佐剂０．２ｍＬ和０．４ｍＬ分别对３日龄雏鸡皮下注射,并于２４日龄时以相同剂量重复注射１次,以注射后不同时间检测鸡空巨噬细胞的吞噬活性。对２８日龄小白鼠隔日皮下注重注射淫羊藿－蜂胶佐剂０．２ｍＬ,并以环磷酰胺为对照。试验结果表明,淫羊藿佐剂捅显著提高雏鸡腹腔巨噬细胞的吞噬活性,其中０．４ｍＬ剂量组明显优地０．２ｍＬ剂量组;对小白鼠腹腔巨噬细胞的细胞毒效应能明显增强,并能拮抗环磷酰胺的免     

淫羊藿-蜂胶佐剂的免疫调节作用

用微量全血 3H-Td R掺入法测定了淫羊藿 -蜂胶 (以下简称淫 -蜂 )佐剂对 4周龄和 8周龄小鼠外周血中 T淋巴细胞转化率的影响。结果 :4周龄小鼠 T淋巴细胞转化率 ,淫 -蜂佐剂 ( YF)组显著高于阴性对照( C)组、淫 -蜂 /环磷酰胺 ( YF/ Cy)组和环磷酰胺 ( Cy)组 ( P <0 .0 5) ;YF/ Cy组略低于 C组 ,但此 2组均显著高于 Cy组 ( P <0 .0 5)。对于 8周龄小鼠 ,除 YF组与 Cy组之间表现出明显差异 ( P <0 .0 5)外 ,其他各组间均无显著差异 ( P >0 .0 5)。表明 :淫 -蜂佐剂不仅能提高外周血 T淋巴细胞的转化率 ,而且可对抗环磷酰胺对 T淋巴细胞活性的抑制作用 ,使受抑制的 T淋巴细胞转化活性基本恢复正常。上述作用在幼鼠中表现尤其明显。以间接 ELISA检测了淫 -蜂佐剂对家兔血清特异性抗体水平的影响。结果 :淫 -蜂佐剂抗原组兔血清特异性抗体水平显著高于无佐剂抗原组 ,抗体高水平维持的时间也更长 ;与油佐剂组相比 ,抗体产生的时间亦更早。说明淫 -蜂佐剂作为佐剂配合抗原应用 ,能提高抗原的免疫原性 ,促进抗体的早日生成     

淫蜂佐剂影响动物免疫功能的实验研究

分别以环磷酰胺、福氏佐剂作对照，观察淫蜂佐剂对小鼠、雏鸡Ｔ淋巴细胞转化率和家兔、母鸡特民划性抗体水平的影响。结果表明，淫佐剂不仅能显著提高４周龄小民２１、３５日龄雏鸡的细胞免疫功能，有铲地拮抗环磷酰胺的免疫抑制，并与其剂量和动物年龄有相关性而且能显著提高家兔、母鸡的体液免疫功能，效果与福氏佐剂类似，但比氏佐剂的副作用小、使用简便。     

牛磺鹅去氧胆酸对小鼠机体cAMP和cGMP含量的影响

为了研究牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)对小鼠机体环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)含量的影响,试验用环孢菌素A诱导特异性免疫低下模型,按相应组别对应的剂量对小鼠灌胃给药7 d,获取血清;体外培养正常小鼠腹腔巨噬细胞,用MTT方法筛选TCDCA作用于腹腔巨噬细胞的最佳药物浓度;用最佳药物浓度作用于巨噬细胞后超声破碎,获取上清液;ELISA方法测定血清和上清液中cAMP和cGMP的含量。结果表明:在TCDCA高剂量(0.2 g/kg)组小鼠血清中,cAMP含量极显著高于环孢菌素A组(P<0.01);各组小鼠血清cGMP含量差异不显著(P>0.05);TCDCA促进小鼠腹腔巨噬细胞增殖的体外浓度为1μg/mL、2.5μg/mL、5μg/mL、10μg/mL;1μg/mL、2.5μg/mL、5μg/mL的TCDCA均能显著或极显著提高细胞内cAMP含量(P<0.05或P<0.01),对cGMP含量均没有显著影响。说明TC-DCA能够显著提高正常和免疫抑制小鼠血清中和正常腹腔巨噬细胞内cAMP含量。     

绞股蓝水煎剂对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响

本研究通过不同给药途径、不同给药剂量和联合用药探讨绞股蓝水煎剂对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响。结果发现,绞股蓝水煎剂各剂量组的吞噬百分率、吞噬指数均显著高于对照组(P0.05),实验组各组间吞噬指数差异不显著;巨噬细胞吞噬百分率腹腔注射效果显著高于皮下和灌胃(P0.05),皮下注射效果与灌胃效果相比差异不显著,各组间吞噬指数相比较差异不显著;环磷酰胺-生理盐水组吞噬百分率显著低于生理盐水组(P0.05),绞股蓝水煎剂-环磷酰胺组吞噬百分率显著提高,其吞噬指数也高于生理盐水-环磷酰胺组和生理盐水组。结果表明,绞股蓝水煎剂具有促进吞噬细胞吞噬的能力,无显著的剂量差别;腹腔注射对巨噬细胞吞噬能力影响最显著。提示绞股蓝水煎剂具有很好的促进机体进行免疫作用,能提高吞噬细胞的活性,增强吞噬细胞吞噬能力,有效缓解环磷酰胺的免疫抑制作用。     

杨树花提取物对小鼠免疫功能的影响

为研究杨树花提取物对小鼠免疫功能的调节作用,每天给小鼠分别经口灌服0.1、0.2、0.4mg/kg的杨树花提取物和灭菌水30d后,测定其免疫器官指数、脾淋巴细胞增殖能力、抗体生成细胞水平、腹腔巨噬细胞吞噬功能、自然杀伤细胞(NK细胞)活性和IL-2的变化。结果表明,杨树花提取物的低剂量组可明显提高IL-2水平;中、高剂量组均可显著提高(P<0.05)小鼠的免疫器官指数、血清溶血素水平,极显著提高(P<0.01)脾淋巴细胞增殖能力、巨噬细胞吞噬率、巨噬细胞吞噬指数、NK细胞活性和IL-2水平。说明不同剂量的杨树花提取物均能提高小鼠免疫功能,中高剂量组效果更为显著。     

不同组分、不同纯度中药复方多糖对小鼠免疫活性影响的研究

试验旨在观察不同组分、不同纯度中药复方多糖对小鼠免疫活性的影响。用环磷酰胺作免疫抑制剂建立免疫功能低下动物模型,测定了小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和免疫器官脏器指数。结果表明,多糖组分A2和中间纯度的多糖B2能够显著提高正常小鼠和免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率、提高胸腺指数和脾脏指数,能够使环磷酰胺造成的免疫抑制逆转至正常水平,因此,具有合适分子质量的多糖组分和合适纯度的多糖能显著增强小鼠的免疫功能。     

中药增效抗菌复方对小鼠免疫功能的影响

为明确中药增效抗菌复方的抗感染作用机制,本实验进行其对小鼠免疫功能影响的研究.将受试药物按每千克体质量1 g、5 g和10 g的剂量对小鼠连续腹腔注射15 d,采用脏器系数测定法、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞法、乳酸脱氢酶释放法和MTT法分别对小鼠免疫器官指数、腹腔巨噬细胞吞噬功能、NK细胞活性、血清溶血素水平和淋巴细胞增殖能力进行测定.结果表明,该药物可以显著增加小鼠免疫器官指数,增强腹腔巨噬细胞吞噬功能和NK细胞活性,也可以明显提高血清溶血素水平和淋巴细胞增殖能力.因此,中药增效抗菌复方对小鼠非特异性免疫和特异性免疫功能均有增强作用.     

酵母多糖对免疫抑制小鼠的免疫调节作用

为研究酵母多糖(YPS)对免疫抑制小鼠的免疫调节作用,将180只小鼠随机分成5组,分别为空白对照组、CY模型组、试验Ⅰ组(低剂量组)、试验Ⅱ组(中剂量组)、试验Ⅲ组(高剂量组),每组3个重复,每个重复12只.除空白对照组外,其余各组小鼠均按40 mg/(kg·w)连续3d腹腔注射环磷酰胺制备免疫力低下小鼠模型,造模后,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组给小鼠分别每天灌服0.2、0.5、1 mg/mL的YPS 0.1 mL/10g体重,空白对照组和CY模型组灌服等量生理盐水.30 d后,检测各组小鼠免疫学指标.结果表明,试验Ⅰ组可显著提高免疫抑制小鼠的脾淋巴细胞增殖能力、迟发型变态反应、巨噬细胞吞噬率、巨噬细胞吞噬指数、NK细胞活性、血清中IL-4和IFN-γ的水平.试验Ⅱ、Ⅲ组显著提高免疫器官指数、抗体生成细胞溶血空斑数和血清溶血素抗体积数,极显著地提高免疫抑制小鼠的脾淋巴细胞增殖能力、迟发性变态反应、巨噬细胞吞噬率、巨噬细胞吞噬指数、NK细胞活性、血清中IL-4和IFN-γ的水平.说明YPS能不同程度的提高免疫抑制小鼠的免特异性和非特异性免疫功能.     

Effects of live attenuated and killed Salmonella vaccine on T-lymphocyte mediated immunity in laying hens

The impact of live and killed Salmonella vaccines on cell-mediated immunity (CMI) was investigated in 18- and 32-week-old White Leghorn chickens, by assessing splenic lymphocyte proliferation, expression of IL-2 mRNA in concanavalin A (Con A) stimulated cells and flow cytometric analysis of cell subpopulations. Con A and Salmonella enteritidis (SE) flagella induced proliferation of splenocytes were enhanced in the 18- and 32-week-old chickens treated with live vaccine, compared to the corresponding control chickens. Among the killed vaccine treated birds, Con A-mediated response was higher in the 18-week-old chickens compared to the corresponding control birds. Increased proliferation was accompanied by increased CD4 and reduced CD8 and gammadelta T-lymphocytes in the 18-week-old live vaccine treated chickens. Relative expression of IL-2 mRNA in Con A-stimulated splenocytes from 18-week-old birds was not affected by vaccine treatment. Overall, live vaccine was more effective in increasing the lymphocyte proliferation to Con A as well as SE antigen. This enhanced CMI may prove beneficial in protecting chickens against SE infection.     

A colorimetric assay to evaluate the cytotoxic activity of the intestinal intraepithelial lymphocytes of chickens

After the successful use of 3-[4,5-(dimethylthiazol-2-yl)]-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) in cell proliferation assays, its use has been established by different workers in cytotoxicity assays and research on leukaemia. In the present study, a colorimetric assay using MTT was adopted to evaluate the cytotoxic activity of chicken intestinal intraepithelial lymphocytes (iIELs), which constitute an important cellular component of the gut-associated lymphoid tissue (GALT). These iIELs are found to exhibit natural killer (NK) cell-like cytotoxic activity, which is spontaneous, non-MHC-restricted, and does not need to be primed. Hitherto, conventional chromium-release assays have been used to evaluate the cytotoxic activity of iIELs, but these assays have disadvantages such as radiation hazards and loss of the cells in washing steps. The mean percentage cytotoxic activity of chicken iIELs evaluated by the colorimetric assay was 90.37±2.53 in a group of 5-week-old chickens and 80.2±3.45 in a group of 8-week-old chickens. These findings established the successful use of a colorimetric assay using MTT for evaluating the cytotoxic activity of chickens iIELs.Abbreviations DMEM Dulbecco's modified Eagle's medium - DMSO dimethyl sulphoxide - E effector cells - GALT gut-associated lymphoid tissue - GM growth medium - iIELs intestinal intraepithelial lymphocytes - MTT 3-[4,5-(dimethylthiazol-2-yl)]-2,5-diphenyltetrazolium bromide - NK cell natural killer cell - OD optical density - RPMI Rosewell Park Memorial Institute medium - T target cells     

人参总皂苷及其衍生物对小鼠淋巴细胞和NK细胞免疫活性的影响

为了提高人参总皂苷的生物学活性,对其进行了硫酸化修饰,并探讨总皂苷及其衍生物对小鼠脾T、B淋巴细胞增殖（MTT法）和NK细胞杀伤活性（乳酸脱氢酶释放法）的影响。结果表明,2种衍生物质量浓度在50～500 mg/L时可以促进小鼠脾T、B淋巴细胞的分化增殖和NK细胞对YAC-1的杀伤作用,质量浓度较高时促进作用明显优于总皂苷;衍生物质量浓度达到1 400 mg/L时,仍然可以显著促进T淋巴细胞的增殖。试验结果提示,人参皂苷的这种衍生物有可能成为一种毒副作用较小、免疫活性更强的药物。     

肉鸡腹水综合征发病学的氧应激机制及其防治

用高能高盐日粮结合环境因子诱发肉鸡腹水综合征,并在饲料中添加抗氧化性药物硒(Se)和中草药对其防治,检测体内自由基及其相关指标.结果显示腹水症高发鸡群肝组织FRs水平和血清丙二醛(MDA)含量明显升高,Se-GSH-Px活力显著降低(P＜0.05);在饲料中添加Se和中草药能显著降低腹水症的发病率和死亡率,并提高Se GSHPx活力、降低FRs水平和MDA含量,Se的作用强于中草药.结果提示缺氧引起的应激反应是肉仔鸡腹水综合征发病学的主要生理性因子,自由基在该病发生过程中起着重要作用;日粮中添加抗氧化药物硒和中草药能通过改善机体的抗氧化机能、清除体内过盛的FRs,从而起到预防和治疗腹水症的作用.     

Histopathology of avian adenovirus group II splenomegaly of chickens

Chickens were infected with an avian adenovirus group II isolate previously obtained from chickens exhibiting splenomegaly in commercial broiler flocks. The isolate was inoculated orally in 6-week-old experimental chickens, which were euthanatized and necropsied 6 days postinoculation. The primary gross lesions found were splenomegaly and splenic mottling. Numerous tissues from 12 chickens were taken for histologic evaluation. Histologic lesions included splenic reticuloendothelial cell hyperplasia with intranuclear inclusions. Lymphocytic degeneration was seen in the lungs of most chickens examined. Lung hemorrhage and edema with endothelial disruption and congestion of pulmonary arterioles were found less frequently. The splenic lesions in the chickens were similar to those seen in turkeys naturally infected with hemorrhagic enteritis, and the lung lesions resembled those seen in pheasants naturally infected with marble spleen disease.     

猪支原体肺炎亚单位疫苗的免疫应答

利用分子克隆、定点突变以及重组表达技术获得猪肺炎支原体的主要免疫原蛋白p36、p46、p65和p97R1-Nrdf。设立以重组蛋白p36、p46和p65为试验Ⅰ组,以p36、p46、p65和p97R1-Nrdf为试验Ⅱ组,猪支原体疫苗安百克（M＋PAC）为试验Ⅲ组,PBS＋佐剂为空白对照组来免疫BALB/c小鼠。检测小鼠血清、肺脏以及经蛋白刺激脾淋巴细胞的猪肺炎支原体抗体、IFN-γ和IL-4。结果显示,Ⅱ组的猪肺炎支原体抗体水平极显著高于Ⅰ、Ⅲ组（P〈0.01）;Ⅱ组IFN-γ水平极显著高于Ⅲ组,而Ⅱ组与Ⅰ组、Ⅰ组与Ⅲ组的IFN-γ水平无显著差异（P〈0.05）;但Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组的IL-4水平差异不显著（P〈0.05）,但都极显著高于对照组（P〈0.01）;肺的检测结果中猪肺炎支原体抗体、IFN-γ和IL-4水平呈现一致性,都为Ⅱ组〉Ⅰ组〉Ⅲ组〉对照组;而经刺激脾淋巴细胞检测结果为Ⅱ组的猪肺炎支原体抗体和IFN-γ水平最高,而IL-4水平为Ⅲ组最高。由此可见,Ⅱ组通过激活体液免疫和细胞免疫途径,产生的猪支原体肺炎抗体水平最高;Ⅰ组亦能通过这2种免疫途径达到与Ⅲ组同样的免疫效果。     

狂犬病病毒HepFlury株P蛋白单克隆抗体的制备及间接免疫荧光检测方法的建立

本研究以原核表达的融合型的重组蛋白pET32a(+)-P(狂犬病病毒HepFlury株P蛋白)免疫6~8周龄的BALB/c小鼠,取脾细胞和SP2/0按常规杂交瘤技术进行细胞融合,经间接免疫荧光方法(IFA)筛选及对mAb进行初步鉴定。经3次亚克隆后获得1株稳定分泌表达的杂交瘤细胞株5G8。     

滴鼻途径感染猪血凝性脑脊髓炎病毒小鼠的免疫动态变化

应用石蜡切片、ELISA等方法,通过对小鼠脾脏病理组织学观察以及脾脏指数、IL-2、IFN-γ和TNF-α等重要细胞因子的检测,研究猪血凝性脑脊髓炎病毒（Hemagglutinatingencephalomyelitisvirus,HEV）感染不同周龄（4、6周龄）BALB／c小鼠后的免疫动态变化特点。结果显示,无论是4周龄还是6周龄小鼠,在被HEV感染后的1～3d,脾小体生发中心增大并在红髓有多量浆细胞出现,第4天脾小体开始缩小,其周边和中央动脉周围有多量淋巴细胞聚集,到第5天脾小体生发中心消失并在其周边和中央动脉周围淋巴细胞增多。另外,脾脏指数和血清中的TNF-α、IFN-γ、IL-4浓度均呈现先升高后降低的趋势,IL-2含量变化不明显,而IL-10含量较少几乎检测不到。结果表明,HEV感染初期,小鼠对侵入的病毒做出一定的免疫应答,但是随着病毒复制,病毒量的增大,小鼠的免疫反应受到抑制。同时不同周龄小鼠的被检指标降低或升高程度及持续时间不同,表明HEV的免疫、发病与小鼠感染年龄之间存在一定相关性。     

熟地黄多糖对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠的免疫调节作用研究

【目的】研究熟地黄多糖对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠的免疫调节作用,为熟地黄多糖用于临床治疗免疫低下疾病或开发相关保健食品提供科学依据。【方法】选用36只昆明系小鼠,随机分为6组：空白对照组、免疫抑制模型组、黄芪多糖组及熟地黄多糖低、中、高(分别灌胃熟地黄多糖50、100、200 mg/kg)剂量组(PRRPL、PRRPM、PRRPH),每组6只。除空白对照组外,其余各组小鼠均腹腔注射80 mg/kg环磷酰胺,建立免疫抑制模型。造模后各组小鼠分别灌胃相应药物,1次/d,连续15 d,测定小鼠体重、腹腔巨噬细胞吞噬能力、免疫器官系数、脾淋巴细胞增殖及细胞周期、血清细胞因子含量,观察脾脏和胸腺组织形态学、肠道派氏节数目等免疫指标。【结果】与空白对照组相比,模型组脾脏指数极显著升高(P<0.01),脾脏红髓、白髓界限不清,脾淋巴细胞数量减少;胸腺指数降低,皮质、髓质不清,结构破坏;脾淋巴细胞增殖能力、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力及血清白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、γ-干扰素(INF-γ)水平均显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01);脾淋巴细胞滞留在G0/G1期。...