高效液相色谱同步检测饲料中黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮及呕吐毒素的方法

本研究旨在建立同步检测饲料中黄曲霉毒素B_1、玉米赤霉烯酮及呕吐毒素的高效液相色谱(HPLC)法。样品用乙腈-水提取,经涡旋、高速离心,移取2 mL上清液加入28 mL含1%吐温-20的磷酸盐缓冲液(PBS,pH 7.0),过三合一免疫亲和柱净化,用2 mL甲醇洗脱;洗脱液经50℃浓缩氮气吹干后用50%甲醇-水复溶,采用高效液相色谱仪串联光化学衍生器、荧光检测器和紫外检测器进行检测。结果表明:黄曲霉毒素B_1标准品溶液浓度在2.5～50.0 ng/mL、玉米赤霉烯酮标准品溶液浓度在50～2 500 ng/mL、呕吐毒素标准品溶液浓度在250～5 000 ng/mL时线性关系良好,平均加标回收率为81.2%～92.3%,相对标准偏差(RSD)为4.3%～9.5%。采用该方法检测了4种不同饲料样品中的黄曲霉毒素B_1、玉米赤霉烯酮及呕吐毒素含量,所有样品均检测出1种以上霉菌毒素,说明饲料中霉菌毒素混合污染较为普遍。由此可见,本试验所建立的方法准确度和精密度高,稳定性好,可作为饲料中黄曲霉毒素B_1、玉米赤霉烯酮及呕吐毒素的同步检测方法。     

高效液相色谱法测定饲料中黄曲霉毒素含量的研究

旨在建立检测饲料中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2含量的高效液相色谱分析方法。样品用甲醇溶液提取,利用免疫亲和柱净化,以C18反相色谱柱分离,光化学衍生器衍生后应用荧光检测器检测。结果表明:4种黄曲霉毒素在0.5~20ng/mL范围内呈现良好的线性关系,回收率为71.6%~89.0%。采用该方法检测5种饲料样品中的黄曲霉毒素总量,检出率范围在74.0%~86.7%,检出值的范围为0.5~4.3μg/kg。建立的方法精密度高、重复性好,为监测饲料中黄曲霉毒素含量水平提供了有效的分析方法。     

哥仑比亚猪、鸡饲料的黄曲霉毒素分析

采用液体色谱仪(可检测含1μg/kg之aflatoxin B_1、B_2、G_1和G_2)分析哥仑比亚猪、鸡饲草和混合饲料中的黄曲霉毒素。从不同城市饲料工厂采取1995～1996年所收获的哥仑比亚生产之高粱、玉米、加工大豆、米粉、棉籽粉和猪、鸡饲     

超高效液相色谱-串联质谱法检测饲料中黄曲霉毒素B_1的比较研究

利用免疫亲和柱的方法对饲料中黄曲霉毒素B_1进行检测。饲料样品经70%甲醇水提取后,用水稀释,过黄曲霉毒素B_1免疫亲和柱、甲醇洗脱、去离子水稀释洗脱溶液,在超高效液相色谱串联质谱仪上进行检测。结果表明:黄曲霉毒素B_1,在2~20μg/kg上呈良好的线性关系,R~20.999;饲料黄曲霉毒素B_1添加浓度在2~20μg/kg上,回收率范围为83.50%~92.40%,RSD值小于2.0%,并用所建方法同标准NY/T 2071—2011的方法进行样品处理对比分析,从而为饲料中黄曲霉毒素B_1检测方法提供更多的选择。     

免疫亲和柱净化-高效液相法测定饲料中黄曲霉毒素B_1

笔者采用高速震荡提取饲料中黄曲霉毒素B_1,样品经过定量滤纸过滤和高速离心,比较在免疫亲和柱净化以及光化学柱后衍生条件下所得的回收率,以确定更加安全、快速、准确的处理方法。通过对0 ng/m L~60 ng/m L黄曲霉毒素B_1标准品的测定,其相关系数达到0.9999,平均回收率达到85%~90%,通过对质控样品的重复测定,其重复性较好,相对偏差为4.22%。     

利用沸石粉和膨化润土对霉菌毒素脱毒

<正> 一般来说,在30℃、相对湿度80%以上条件下,谷物的水分为14%时最适宜于黄曲霉毒素繁殖和生长,在24～30℃时,黄曲霉产毒量最高。黄曲霉素包括 B_1、B_2、G_1、G_2、M_1、M_2待,其中 B_1的毒性最强,B_2次之。饲料含有过量的黄曲霉毒素对家畜家禽造成严重的损害,因此各国都对饲料中的黄曲霉毒素的含量作了限制。     

花生黄曲霉毒素导致牛流产和死亡报告

奶牛吃了混有霉败花生的饲料后,第5天有2头牛流产,1头牛卧地不起。测定了病牛血清乳酸脱氢酶、天门冬氨酸转氨酶和总胆红素均有明显升高,说明具有急性肝损害。对胎盘进行了细菌学检查,未发现流产菌。用薄层层析法,测出发霉花中生含黄曲霉毒素B_177ug/g,未发现黄曲毒素B_2、G_1和G_2。肝组织含黄曲霉毒素B_15ng/g。从临床症状、检验剖检,确诊奶牛的流产是黄曲霉毒素B_1中毒的结果。     

饲料中黄曲霉毒素检测方法研究进展

饲料在自然条件下污染的黄曲霉毒素主要包括B_1、B_2、G_1、G_24种,因为黄曲霉毒素B_1具有致癌性,饲料和粮食中一般以黄曲霉毒素B_1作为黄曲霉毒素含量评价的主要指标,我国饲料卫生标准GB_13078-2001只对黄曲霉毒素B_1限量进行了规定。目前,对饲料黄曲霉毒素的检测方法有胶体金法、薄层分析法、酶联免疫法、高效液相色谱法,液相色谱—串联质谱法等。主要对近年来饲料中黄曲霉毒素检测方法研究进展进行了综述,讨论了各方法的优、缺点,以期为限量要求下的方法选择提供依据。     

黄曲霉毒素直接竞争法ELISA试剂盒的研制及其在花生和花生制品中的应用

本实验基于在黄曲霉毒素单克隆抗体基础上,建立酶联免疫(ELISA)直接法检测花生及其制品中黄曲霉毒素(B1、B2、G1、G2)的含量。应用黄曲霉毒素抗体和酶标记的黄曲霉毒素建立酶联免疫直接竞争法。试剂盒最低检出浓度为0.5ng/mL,标准曲线的线性范围为0.5～10.0ng/mL;对花生和花生粕的添加回收率为70.0%～110.0%,变异系数小于20%。本实验制备的黄曲霉毒素试剂盒能够应用于花生及其制品的检测,酶联免疫直接法是一种简单、快速、灵敏、准确的检测方法。     

抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的制备及定量ELISA方法的建立

采用黄曲霉毒素M1与牛血清白蛋白偶联物免疫8周龄BALB/c小鼠,4次免疫后,使小鼠产生免疫应答.取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合、筛选,最终获得1株能稳定分泌抗黄曲霉毒素M1的杂交瘤细胞株系.其染色体平均计数为90±10对,间接ELISA检测该株系培养上清的效价为1:6 400,纯化腹水效价为5 000×27.与黄曲霉毒素M1及其结构类似物黄曲霉毒素B1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇的反应率分别为100%、7%、0%.经传30代后.抗体效价稳定.并在此基础上建立了间接竞争ELISA检测方法,该方法的最低检出浓度是0.08 ng/mL,校正曲线的线性范围为0.08 ng/mL～ 5 ng/mL.该方法的加标回收率为80.0%～128.3%.