中国矮马运铁蛋白遗传多态性的初步研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对中国矮马运铁蛋白多态性进行了测定。在运铁蛋白位点共发现5种表型，即F2F2，DF2，F2H2，F2O和F2R，由Tf^D,Tf^F2,Tf^F2,Tf^H2,Tf^O和Tf^R等5个等位基因控制，其基因频率分别为0.0312,0.7188,0.0625,0.0312和0.1563；基因的杂合度（H），个体鉴别概率（Dp)和亲仔关系排除概率（PE）分别为0.4530,0.6875和0.2586。     

三河马运铁蛋白型的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对 2 5匹三河马血清样品进行了分析。发现 1 2个运铁蛋白表现型 ,即DD ,F2 F2 ,RR ,DF2 ,DH2 ,DR ,F1 R ,F2 H2 ,F2 O ,F2 R ,H2 R和OR。其中F2 F2 ,DF2 和OR所占的比例最高 ,分别为 32 % ,1 6 %和 1 2 % ,其他表现型的比例都小于 8%。运铁蛋白型由 6个共显性常染色体等位基因控制 ,即TfD,TfF1 ,TfF2 ,TfH2 ,TfO 和TfR,其基因频率分别为 0 1 6,0 0 2 ,0 48,0 0 6 ,0 1 0和 0 1 8。基因杂合度 (H)和亲权排除概率 (PE)分别为 0 70和 0 47。     

新城疫病毒贵州分离株F基因的克隆和序列分析

根据GenBank中登录的新城疫病毒（NDV）F基因序列设计了一对引物,用RT-PCR方法扩增了8个NDV贵州分离株的F基因片段,并将其分别克隆到pMD-18T载体中。序列分析结果表明,上述分离株F基因长度为1662bp,编码553个氨基酸,核苷酸和氨基酸序列同源性分别为84.0%～99.7%和87.5%～99.3%,但与LaSota、B1及F48E9等常见毒株的氨基酸同源性为87.2%～97.7%。F蛋白裂解位点的氨基酸序列分别为112R-R-Q-R/K-R-F^117（其中P1、H2、N98、DQ、FW、BY、GZ7株为强毒）和112G-R-Q-G-R-L^117（TN1株为弱毒）。利用MegAlign软件绘制NDV的系统发育进化树,结果表明,4个分离株（P1、H2、、N98、DQ）为基因Ⅶ型,2株（GZ、TN）为基因Ⅱ型,2株（FW、BY）为基因Ⅸ型。     

双乾肉羊ATG5基因第1外显子多态性及与肉质性状的关联分析

实验旨在探索双乾肉羊ATG5(Autophagy-Related Gene 5,ATG5)基因多态性与肉质性状的连锁关系。选取49只双乾肉羊为研究对象，采用Sanger测序法寻找ATG5基因第1外显子的突变位点，利用Haploview软件进行单倍型分析，通过SPSS软件分析不同ATG5基因单倍型组合与双乾肉羊肉质性状的相关性，筛选部分肉质性状对应的ATG5基因优势单倍型组合。双乾肉羊ATG5基因第1外显子共检测到G61T、A64G、T215C3个SNPs位点，3个位点的等位基因频率与基因型频率一致，在该群体中处于哈代-温伯格平衡状态（P>0.05），且属于中度多态（0.25相似文献   

三河马蛋白酶抑制剂的遗传多态性

采用酸性梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳对三河马蛋白酶抑制剂的多态性进行了检测，结果如下：在蛋白酶抑制剂位点共发展11种表型，由6个等位基因PI^G、PI^1、PI^L、PI^N、PI^s和PI^U控制，基因型GL、IL、IN、IS、IU、LN、LS、LU、NS、SU和LL的频率分别为0.04,0.04,0.04,0.12,0.08,0.16,0.08,0.04,0.04和0.32，其中纯合型LL为优势基因型，等位基因PI^G、PI^I、PI^L、PI^s和PI^U的频率分别为0.020,0.120,0.520,0.080,0.140和0.120，单位点基因杂合度（H）、个体鉴别概率（Dp)和亲仔关系排除概率（PE）分别为0.674、0.835和0.369。     

金色葡萄球菌、伤寒沙门氏菌和副溶血弧菌单管多重PCR检测方法的建立及初步应用

本研究根据金黄色葡萄球菌（Staphylococcus auretls，SA）耐热核酸酶（nut）基因、伤寒沙门氏菌（Salmonella typhi，ST）鞭毛抗原（H1-d）基因和副溶血性弧菌（Vibrio parahaemolyticus，VP）热稳定直接溶血素（tdh）基因，分别设计了三对引物Nuc-F／Nu-R、H1-d—F／H1-d—R和Tdh-F／Tdh-R，预计PCR扩增的DNA片断分别为279bp、202bp和458bp。通过对单个基因PCR和单管多重PCR扩增的特异性、敏感性分析以及对单管多重PCR扩增条件如引物浓度、退火温度和dNTP浓度等的优化，建立了快速检测金黄色葡萄球菌、伤寒沙门氏菌和副溶血弧菌的单管多重PCR方法，该方法检测的敏感性分别为：47．8PgST的基因组DNA．22．7PgSA的基因组DNA和0．3745PgVP的基因组DNA。模拟试验显示最低检测限度为分别为：SA150CFU／反应体系，ST98CFU／反应体系，VP53CFU／反应体系。表明该方法具有很好的应用价值和开发前景。     

H9亚型禽流感病毒分离株A／Chick／Shandong／6／96的基因序列分析

对1株H9N2亚型禽流感病毒（AIV）A／Chick/Shandong/6/96（H9N2）进行了全病毒基因序列分析。结果表明，该毒株8个基因的核苷酸序列皆与1994年分离株A／Chicken/Beijing/1/94（H92）具有很高的同源性（96．0％－98．6％）；推导其血凝素（HA）裂解位点处的氨基酸序列为A－R－S－S－R，完全符合H9 AIV欧亚分支中的类A／Chicken/Beijing/1/94亚分支的特征；虽然其神经氨酸酶（NA）基因与A／Rhicken/Beijing/1/94（H9N2）相比，出现了9个核苷酸的缺失，然而其同源性仍然较高，为97．3％；而与欧亚分支中的类A／Chicken/Korea/323/96和类A／Quail/HongKong/G1/97亚分支的同源性却相对较低，分别为92．0％和84．2％；其它基因的比较情况也大体相近。提示该毒株是由1994年分离株进化而来，在遗传演化上属于H9亚型流感病毒欧亚分支中的类／A／Chicken/Beijing/1/94(H9N2)亚分支。     

6个绵羊群体骨形态蛋白受体1B基因多态性分析

试验旨在分析6个绵羊群体骨形态蛋白受体1B（bone morphogenetic protein receptor-1B，BMPR-1B）基因多态性，为绵羊繁殖力的标记辅助选择和育种提供理论依据。采集新吉细毛羊、中国美利奴羊（无角型）、东北细毛羊、杜×寒杂交羊（F1）、杜×寒杂交羊（F3）、白头杜泊羊6个绵羊群体共381只个体的血样，通过PCR-RFLP技术检测BMPR-1B基因多态性，并用DNAStar软件预测蛋白质二级结构，利用Excel 2003软件计算基因频率、基因型频率、Hardy-Weinberg平衡，以及遗传多样性参数（杂合度（He）、纯合度（Ho）、有效等位基因数（Ne）和多态信息含量（PIC））。结果显示，新吉细毛羊、东北细毛羊、中国美利奴羊（无角型）、白头杜泊羊BMPR-1B基因均不存在多态性；杜×寒杂交羊（F1）、杜×寒杂交羊（F3）具有多态性，存在3种基因型：++、B+和BB。杜×寒杂交羊（F1）χ²值达到显著水平，处于Hardy-Weinberg不平衡状态；杜×寒杂交羊（F3）χ²值未达到显著水平，处于Hardy-Weinberg平衡状态。杜×寒杂交羊（F1）、杜×寒杂交羊（F3）的PIC分别为0.311和0.264，为中度多态。推测BMPR-1B基因不是新吉细毛羊、东北细毛羊、中国美利奴羊（无角型）、白头杜泊羊4个绵羊群体多胎性状的主效基因，但可作为杜×寒杂交羊（F1）、杜×寒杂交羊（F3）多胎性状的主效基因。     

中国矮马血红蛋白多态性的初步研究

采用等电聚焦电泳对中国矮马进行了血红蛋白多态性的检测。结果表明 :在该位点共发现有 2种基因型 ,由 2个等位基因HbBⅡ 、HbBⅠ 控制。基因型BⅡ /BⅡ、BⅠ /BⅡ的频率分别为 0 62 5 0、 0 375 0 ,其中纯合型BⅡ /BⅡ为优势基因型。基因频率HbBⅡ 、HbBⅠ 分别为 0 81 2 5、0 1 875。其基因杂合度 (H)、个体鉴别概率 (Dp)和亲仔关系排除概率 (PE)分别为 0 30 4 7、 0 4690和 0 1 2 90。     

一株鸭源H1N6亚型禽流感病毒的分离鉴定及HA和NA基因序列分析

为了解禽流感病毒（AIV）在广西中越边境地区的流行情况，本研究在该地区活禽市场开展禽流感病原监测。监测过程中分离鉴定出1株H1N6亚型禽流感病毒，命名为A/Duck/Guangxi/F01/2016（H1N6），对其HA和NA基因进行序列测定，并与GenBank中下载的相关参考序列进行比对和遗传进化分析。结果显示，分离株HA基因与A/sparrow/Guangxi/GXs-1/2012（H1N2）的核苷酸同源性最高（96.9%），NA基因与A/Pavo cristatus/Jiangxi/JA1/2016（H5N6）的核苷酸同源性最高（98.2%）。HA基因裂解位点氨基酸序列为PSIQSR↓GLF，符合低致病性禽流感病毒分子特征；与部分N6亚型禽流感病毒一样，分离株NA基因有11个氨基酸缺失。此外，本研究还对分离毒株的受体亲和性进行了测定，结果显示该病毒优先结合唾液酸α-2，3-Gal受体。本研究结果表明A/Duck/Guangxi/F01/2016（H1N6）是一株重组低致病性禽流感病毒。