鸡胚法氏囊组织发育的电镜和组织学比较观察

本实验通过对孵化至１２～２１ 日龄的鸡胚法氏囊进行组织学和超微结构的连续性动态观察，较为详细的描述了早日龄鸡胚法氏囊分化发育过程中显微和超显微的变化过程。实验结果显示，尽管鸡胚发育到中、后期胚体内可能已经具有一定程度的免疫效应，但直至出壳前鸡胚法氏囊尚未形成较完整的能组织起有效体液免疫组织基础结构，其完善的形态结构需在后天环境中继续分化和发育。非炎性状态下法氏囊淋巴滤泡内自始至终出现异嗜性细胞，在法氏囊的分化发育中起着重要的组织改建作用。     

鸡胚免疫器官组织学发育过程观察

通过对孵化至12-21日龄鸡胚的免疫器官胸腺、脾及腔上囊进行组织学连续性观察，较为详细地描述了鸡胚免疫器官的组织发育过程。观察结果显示，胸腺的组织结构发育和形成较早，自12日龄起胸腺就已形成原始的胸腺小叶；虽然脾在12日龄时就已初具轮廓，但脾直到18日龄才开始隐约形成形态可辨的红髓和白髓；腔上囊淋巴滤泡自鸡胚发育到17日龄时即渐趋明显，但完整的滤泡皮质和髓质结构在出壳前仍然处于分化成熟阶段。     

胚胎接种组合型火鸡疱疹病毒疫苗后鸡胚免疫器官的组织学变化

本试验应用组合型火鸡疱疹病毒疫苗（ Ｈ Ｖ Ｔ＋ Ｚ４ ）,对孵化至１８ 日龄的鸡胚进行胚胎免疫注射,对行使胚胎免疫后１９～２１ 日龄鸡胚的免疫器官、胸腺、法氏囊和脾脏进行组织学连续观察并与对照组比较。结果表明,１８ 日龄鸡胚免疫接种 Ｈ Ｖ Ｔ＋ Ｚ４ 对免疫器官的早期发育具有明显的免疫促进作用。     

传染性法氏囊病病毒对法氏囊生长发育的影响

本试验运用传染性法氏囊病病毒变异 Ｅ 株，通过泄殖腔和鼻腔接种 １，８，１５，３０ 日龄雏鸡，通过尿囊腔接种８， １３，１８ 日龄鸡胚，全面而系统地观察了接毒后不同时间法氏囊的组织形态学变化，探讨了传染性法氏囊病病毒对胚胎发育时期和雏鸡发育时期法氏囊生长发育的影响。结果表明， Ｉ Ｂ Ｄ Ｖ 感染后１２～４８ ｈ，雏鸡法氏囊粘膜上皮细胞肿胀，坏死脱落，淋巴滤泡髓质部及皮质部淋巴细胞不同程度变性、坏死、排空，形成腺管样结构或囊状空泡： 接毒后７２～１４４ ｈ，法氏囊淋巴滤泡淋巴细胞坏死排空，淋巴滤泡萎缩，网状结缔组织大量增生，而胚胎发育时期，法氏囊粘膜上皮肿胀变性，法氏囊淋巴滤泡形成延迟或不完整，淋巴滤泡内淋巴细胞缺乏或空虚，说明传染性法氏囊病病毒变异 Ｅ 株对法氏囊造成严重的组织学危害，从而导致法氏囊生长发育阻滞，组织学形态和结构严重受损。     

鸡胚增殖病毒技术操作要点

目前病毒的培养有动物接种、组织培养和鸡胚培养3种方法,其中鸡胚培养是病毒培养中最常用的方法之一。鸡胚是正在发育中的机体,多种动物病毒能在鸡胚中增殖和传代。鸡胚的优点在于胚胎的组织分化程度低,而且可以选择不同的日龄和接种途径,病毒在鸡胚中易于增殖,部分病毒感染鸡胚以后可以产生疽斑,引起充血、出血、坏死灶和死亡等特异性的感染指征。感染病毒的鸡胚组织和液体中含有大量病毒,容易采集和处理,而且来源充足,设备和操作简便易行。     

红腹锦鸡胚胎期羽毛芽发育的研究

旨在了解红腹锦鸡胚胎期羽毛毛囊的组织结构及毛囊形态发生的变化过程,为研究红腹锦鸡羽毛毛囊发育的分子调控机理奠定组织学基础。分别对5、7、8、9、10、11、13、16、18日胚龄的红腹锦鸡胚胎发育情况进行实体观察;采集上述胚龄的红腹锦鸡背部皮肤,制作石蜡切片并进行HE染色,在显微镜下观察毛囊形态结构并拍照记录。红腹锦鸡胚胎于9日胚龄时羽毛芽开始发育,可以观察到色素在毛囊内的沉积,16日胚龄时毛囊发育基本完成,体表覆盖羽毛。该研究为进一步阐明红腹锦鸡羽毛发育的分子机制奠定了组织学基础。     

鸡成肌细胞及不同品种肌肉组织的FAFFAF1 mRNA表达特征分析

以矮小品系S2系鸡和隐性白羽鸡作为试验素材,采用q-PCR技术及SPSS分析软件,研究Fas相关因子1(Fas-associated factor 1,FAF1)在两个品种胚胎期至生长期骨骼肌发育中的差异性的表达模式及在成肌细胞增殖和分化期的表达特征。结果表明,FAF1在两品种胚胎期胸肌组织的表达都显著高于出雏后其他发育时期(P0.05),但FAF1在S2系鸡整个胚胎期及出雏当天的表达都显著高于隐性白羽鸡(P0.05);在腿肌组织中,隐性白羽鸡中,在10日胚龄时FAF1的表达量显著高于其他胚龄(P0.05),并随胚龄的增加表达量逐渐下降,在6周龄时表达量显著低于2、4、8、16周龄(P0.05),S2系鸡中,10日胚龄时FAF1的表达量显著高于其他发育时期(P0.05),从胚胎期至出雏后6周表达量随周龄的增加逐渐减少。除6周龄外,FAF1在S2系鸡其他发育时期的表达都显著高于隐性白羽鸡。在鸡原代成肌细胞中,FAF1 mRNA 在分化期的表达显著高于增殖期(P0.05),并随诱导分化时间的延长表达量逐渐升高。结果表明:FAF1 mRNA 表达呈现明显的品种和组织差异性,该基因可能以不同的方式参与调控胸肌、腿肌发育过程,为进一步研究该基因调控肌肉发育的分子机制提供了理论依据。     

中西药结合防治传染性法氏囊疾病

<正>传染性法氏囊病是由法氏囊病毒引起鸡的高度接触性传染病,属于双股节RNA病毒科病毒属,无囊膜晶格状,在鸡胚内生长发育。在外界环境中抵抗力较强,对乙醚、氯仿不敏感。自然感染仅发生于鸡,7~105日龄易感,最常见于14~56日龄。经消化道、呼吸道和眼睑膜感染,一年四季均可发生,以高温高湿的夏季最易发生。1发病机理该病毒侵入鸡体后主要作用于淋巴组织,大量破坏法氏囊及周围淋巴组织中来源于法氏囊的淋     

四氯联苯对鸡胚性腺原始生殖细胞的毒性影响

采用四氯联苯处理发育至Ⅹ期的白来航鸡种蛋,孵化5.5天后取出胚胎进行全固定,用石蜡切片和PAS染色(高碘酸希夫试剂)研究四氯联苯对鸡胚性腺原始生殖细胞(PGCs)的影响.结果表明,四氯联苯对发育至5.5日胚龄的鸡胚性腺PGCs数量和结构有明显影响,但雌二醇处理的5.5日胚龄鸡胚PGCs数量变化不显著,其结构无明显变化.表明四氯联苯对5.5日胚龄的鸡胚性腺PGCs的影响主要来自于其毒性作用.     

传染性法氏囊病的防控

正传染性法氏囊病是一种危害青年鸡的烈性、高度接触性的病毒病,主要侵害淋巴组织(法氏囊)。法氏囊是雏鸡和青年鸡重要的免疫器官,是抗体生成细胞成长和分化的部位,最早发生并提供B淋巴细胞,刺激机体产生更好的免疫应答。法氏囊在鸡出雏时已经存在,性成熟前(4~5月龄)体积最大,此后开始逐渐退化,10月龄几乎完全     

实验性肉雏维生素A缺乏对免疫器官影响的形态学研究

150只一日龄罗曼混合肉雏被随机分为四组,分别饲喂含维生素A为0、750、3000和6000IU的日粮。在20、30和45日龄时,每组剖检5只鸡,分离并称重免疫器官后,取材,石蜡包埋,切片,镜检。结果表明:维生素A缺乏和不足使免疫器官组织萎缩,间质结缔组织增生,上皮角化,腔上囊和胸腺的相对重量明显减少(P<0.01)。对免疫器官的损害程度是腔上囊>胸腺>脾脏>盲肠扁桃体。提高日粮中维生素A含量有提高肉雏增重、饲料报酬和免疫器官相对重量之趋势。     

雏鸭腔上囊的生长及组织发育

通过对1～49日龄雏鸭腔上囊绝对质量和生长指数测定以及组织学观察,探讨雏鸭腔上囊生长及组织发育规律。结果:随日龄增长,腔上囊绝对质量逐渐增高;腔上囊生长指数21日龄达最高;黏膜大皱褶高、宽度、淋巴滤泡面积、皮质宽度均不断增加;小结相关上皮向腔面形成突起,并不断增高增宽。结果表明,雏鸭腔上囊1～14日龄生长较为缓慢,14～35日龄生长较快,35～49日龄发育基本趋于稳定,其中21～28日龄是雏鸭腔上囊生长发育的高峰时期,28日龄时,雏鸭腔上囊组织结构基本发育成熟。     

肉鸽法氏囊、脾脏和胸腺的形态学、组织学观察

[目的]为今后研究肉鸽免疫功能提供其免疫器官的形态学、组织学观察依据。[方法]选取40日龄的肉鸽,摘除法氏囊、脾脏和胸腺进行形态学观察;通过制作常规石蜡切片,苏木精—伊红染色,显微照相进行组织学观察。[结果]40日龄肉鸽法氏囊黏膜上皮完整,黏膜固有层腔上囊小结数量减少,体积变小,中间出现空泡,淋巴细胞减少;法氏囊小结中皮质和髓质界限不明显,小结周围有大量的结缔组织增生,导致法氏囊免疫功能降低。脾脏各组织结构发育趋于完善,细胞排列紧密。胸腺髓质中淋巴细胞较少,可见胸腺小体;皮质中淋巴细胞较多。[结论]40日龄的肉鸽法氏囊开始萎缩,免疫功能降低,而脾脏和胸腺免疫功能正常。     

鸭胚腔上囊的组织结构发育动态研究

对孵化15-25日龄的鸭胚腔上囊进行连续动态研究，结果表明，从腔上囊形成开始到出壳的鸭胚尚法治形成较完整的具体体液免疫功能的组织结构；非炎性状态下腔上囊淋巴滤泡内出现的嗜异形细胞在腔上囊的分化发育中起着重要的组织改建作用。     

Functional restoration of the bursa of Fabricius following in ovo infectious bursal disease vaccination

The primary role of the avian bursa of Fabricius is to provide an essential microenvironment for B-lymphocytes to diversify their immunoglobulin genes by gene hyperconversion. Infectious bursal disease (IBD) vaccination using intermediate plus vaccine strains can temporarily deplete the bursal follicles and interrupt the normal B-cell development, which is generally followed by B-cell repopulation and histological regeneration. To find evidence that functional restoration of the bursa of Fabricius occurs in addition to the histological regeneration, we have analysed the chB1 gene expression, which indicates active bursal B-lymphocytes, and also the surface expression of a carbohydrate structure Lewis(x), a marker which identifies those bursal B-lymphocytes that are undergoing gene hyperconversion. In ovo vaccination with an immune complex vaccine (IBDV-BDA) caused transient bursal destruction in both the SPF and the maternally protected broiler groups with differences evident in the starting time, the severity and the duration of the effect. After the depletion phase, signs of histological regeneration appeared together with chB1- and Lewis(x) expression indicating that B-lymphocytes were functionally active and the bursa of Fabricius was serving again as an efficient primary lymphoid organ providing an appropriate microenvironment for B-cell development.     

松针粉-麦饭石复合添加剂对肉鸡法氏囊生长发育的影响

试验取144只1日龄健康AA肉仔鸡,随机分为2组,每组72只,组内设2个重复,每个重复36只。对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂添加1%松针粉、1%麦饭石的基础日粮,饲养期42d。分别于7、14、21、28、35、42日龄随机取鸡12只,每组6只,各重复3只。颈静脉放血致死,解剖取法氏囊称重,取材制作石蜡切片,光镜观察,显微摄影。结果表明:试验组与对照组鸡法氏囊指数在7、35日龄差异极显著(P<0.01),14、42日龄差异显著(P<0.05);法氏囊小结皮质均显著厚于对照组。本试验从组织学角度证明,在基础日粮中添加松针粉和麦饭石可显著促进肉鸡法氏囊的早期发育,延缓退化的时间。     

Effects of estrogen on estrogen receptor expression in the bursal cells of chick embryos and steroidogenic enzymes gene expression in the bursa: Relevance of estrogen receptor and estrogen synthesis in the bursa of chick embryos

Estrogen has been reported to act on B cell genesis in the bursa of Fabricius of chick embryos. In this study, we attempted to demonstrate the hypothesis that B cell genesis is controlled by estrogen receptor (ER) in the bursal cells and steroidogenic enzymes synthesized in the bursa. We previously reported the presence of estrogen receptor α (ERα) in the bursa during the late stage of embryogenesis and an increase in the expression of ERα messenger RNA (mRNA) between the 13th day and 16th day. The number of ER-positive cells was maximal on the 16th day. In the present study, ER-positive cells in the bursa during the late stage of embryogenesis increased 4 h after β-estradiol treatment on the 14th to 18th day. The concentration of β-estradiol in the embryonic bursa increased. These results suggest that this stage of embryogenesis is critical in B cell development in the bursa in connection with the effect of estrogen treatment. Our findings also showed that the mRNA expression of five steroidogenic enzymes occurred in the bursa of chick embryos. These results suggest that estrogen is synthesized in the embryonic bursa and estrogen acts on the bursal cells in a paracrine fashion.     

Histological evaluation of immune organs in chicken embryos inoculated with Marek's disease virus and lymphokines

The aim of the present study was to evaluate the presence of lymphocytes and granulocytes in different stages of embryonic development and on the first posthatching day. The lymphocytes present in the bursa of Fabricius and thymus were evaluated by histological analysis of the yolk sac, bursa of Fabricius, thymus, liver and bone marrow of 100 chicken embryos divided into groups and treated with: (I) Marek's disease vaccine as viral antigen, (II) Marek's disease vaccine plus lymphokines, (III) lymphokines, and (IV) vaccine diluent. Group V was not treated. Samples were taken on days 14, 17 and 20 of incubation and on the first posthatching day. An increase in the number of epithelial matrix as precursors of lymphoid follicles was observed in the bursa of Fabricius of embryos inoculated with lymphokines compared to embryos in all the other groups (p < 0.05). In addition, a higher amount of granulocytes was found in the yolk sac and liver of embryos inoculated with lymphokines than in the embryos of all other groups (p < 0.05). In the bone marrow, no significant difference was observed among the treated groups concerning the amount of granulocytes. The results suggest that administration of antigens or protein molecules at an early stage of embryonic development increases the presence of granulocytes in the liver and granulopoiesis in the yolk sac, and also increases the number of epithelial matrixs in the bursa of Fabricius.     

禽网状内皮组织增生病病毒感染对SPF雏鸡法氏囊细胞Bcl-2和C-myc基因表达及凋亡的影响

【目的】 探究禽网状内皮组织增生病病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)感染禽类后导致免疫器官发生细胞凋亡的机理。【方法】 以1日龄SPF雏鸡为试验对象,将100只SPF雏鸡随机均分为REV感染组和未感染病毒的对照组,REV感染组雏鸡经腹腔感染500 μL REV稀释液,对照组雏鸡经相同途径注射等量灭菌生理盐水,于病毒感染后第1、7、14、21、28和42天,2组雏鸡随机各抽取5只,心脏采血处死雏鸡后快速摘取法氏囊。分别应用HE染色和病理切片成像系统测定分析法氏囊细胞核浆比,TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒测定凋亡细胞数,免疫组化法测定Bcl-2和C-myc阳性细胞数量,实时荧光定量PCR和ELISA法分别检测法氏囊Bcl-2和C-myc 基因mRNA表达和蛋白含量。【结果】 ①REV感染1日龄SPF雏鸡后21~42 d,其法氏囊淋巴细胞凋亡百分比显著或极显著高于对照组雏鸡(P<0.05;P<0.01);②SPF雏鸡感染REV后21和28 d,其法氏囊细胞核浆比显著低于对照组雏鸡(P<0.05);③REV感染SPF雏鸡法氏囊中Bcl-2和C-myc阳性细胞数在病毒感染后21和28 d显著高于对照组雏鸡(P<0.05);④REV感染SPF雏鸡后21 d,其法氏囊Bcl-2和C-myc 基因mRNA表达极显著高于对照组雏鸡(P<0.01)。⑤SPF雏鸡感染REV后,其法氏囊中Bcl-2蛋白含量较对照组雏鸡有不同程度的增加,其中21和28 d分别差异极显著(P<0.01)和显著(P<0.05),病毒感染组雏鸡的C-myc蛋白含量也始终高于对照组雏鸡,且21和28 d极显著增高(P<0.01)。【结论】 REV感染所致SPF雏鸡法氏囊细胞Bcl-2和C-myc的mRNA表达以及蛋白含量异常均与病毒感染导致的法氏囊细胞凋亡密切相关,而法氏囊细胞凋亡数量增加与REV感染引发的机体免疫机能抑制密切相关。     

禽类腔上囊增龄性退化的研究进展

腔上囊是禽类的中枢免疫器官,也是B淋巴细胞发育、分化、成熟的场所。性成熟时,禽类的腔上囊结构退化并覆以富含血管和脂肪的结缔组织。对禽类腔上囊的组织结构特征、增龄性退化及退化的神经内分泌调节方面的研究进展进行了综述,以期为进一步阐明禽类腔上囊的增龄性退化机制提供理论依据。