鹿布鲁菌病免疫胶体金检测试纸条的研制

利用SUMO-BCSP31重组大肠杆菌表达并纯化了布鲁菌BCSP31重组蛋白,并利用该蛋白研制了布鲁菌免疫胶体金检测试纸条。以BCSP31蛋白作为检测抗原,通过间接法研制胶体金试纸条检测鹿血清抗体。该试纸条与大肠杆菌、沙门菌、小肠结肠炎耶尔森菌和绿脓杆菌无交叉反应;检测阳性血清最大稀释倍数为1∶640,证明试纸条具有良好的特异性和敏感性。临床上对420只鹿进行检测,比对试纸条与虎红平板凝集试验(RBT)检测结果:阳性符合率为100%,阴性符合率为96%,Kappa值为0.73,两种方法符合率较高;比对试纸条与cELISA检测结果:阳性符合率为81%,阴性符合率为100%,Kappa值为0.88,两种方法符合率高。该试纸条简便快捷,具有较高准确性,可用于鹿布鲁菌病的现场初筛检测。     

布鲁氏菌抗体检测试纸条的研制和初步比较

本试验利用胶体金免疫层析技术原理,研制了布鲁氏菌抗体检测试纸条,并以布鲁氏菌阳性血清国家标准品进行了敏感性试验,确定了最低检出量,同时与有可能存在交叉反应的血清和阴性血清进行了特异性试验;然后将保存不同时间的试纸条在进行了敏感性和特异性试验,证明其稳定期可以达到15个月。选择临床牛羊血清30份,利用该试纸条与布鲁氏菌病虎红平板试验抗原进行同步检测,发现两种试剂的检测符合率为98%。试验证明,所研制的布鲁氏菌抗体检测试纸条敏感性高、特异性强、稳定期长。     

牛布鲁氏菌四种血清学检测方法的比较

[目的 ]为在布鲁氏菌病临床检疫中选择可靠的血清学检测方法提供参考。[方法 ]对采集的294份牛血清样品用虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和补体结合试验(CFT)进行布鲁氏菌病抗体检测,比较RBT与ELISA,SAT与CFT的符合率及Kappa值,以CFT作为判定标准,比较四种检测方法的敏感性和特异性。[结果 ]RBT与ELISA、SAT与CFT检测方法的符合率高达到95%以上,且Kappa值均大于0.75。以CFT作为判定标准,RBT和ELISA的敏感性较好,但有假阳性;SAT的特异性较好,但有假阴性。综合比较认为ELISA的敏感性和特异性都比较理想。[结论 ]临床工作中使用RBT或ELISA对布鲁氏菌病进行初筛,用CFT进行复核确诊,通过两种或两种以上的血清学检测方法联合诊断,结果较为理想。     

布鲁氏菌病三种检测方法的敏感性研究

本试验采用三种布鲁氏菌病检测方法对3种阳性血清进行检测,研究三种方法的敏感性,结果表明:3种方法的敏感性均较高,敏感性从高到低依次为布鲁氏杆菌抗体快速检测卡布氏菌抗体检测试纸条布氏菌病虎红平板凝集试验。     

川西北牦牛布鲁氏菌病血清流行病学调查

同时采用间接ELISA、虎红平板凝集试验和试管凝集试验三种血清学方法调查川西北牦牛布鲁氏菌病血清流行情况。对1070份采自川西北阿坝州8个草地县的牦牛血清样品经三种血清学方法检测,间接ELISA检测阳性率为25.4%（272/1070）,虎红平板凝集试验检测阳性率为12.7%（136/1070）,而试管凝集试验检测阳性率为9.1%（97/1070）。8个县均发现阳性布鲁氏菌病血清。与间接ELISA相比,虎红平板凝集试验的相对敏感性和特异性分别为50%和100%,而试管凝集试验的相对敏感性和特异性分别为35.7%和100%。布鲁氏菌病在川西北地区广泛存在,血清学方法是检测和监测布鲁氏菌病最常用和最简便的方法,其中间接ELISA方法最为敏感。     

山羊布鲁氏菌病不同血清学检测方法的比较

为比较山羊布鲁氏菌病不同血清学检测方法,继而为山羊布鲁氏菌病的临床检测提供参考,对采集到的423份血清样品分别用虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)和竞争酶联免疫吸附试验(c ELISA)3种方法进行检测,比较3种方法的一致性、敏感性和特异性。结果表明:RBT和SAT、cELISA和RBT、c ELISA和SAT的Kappa值均大于0.75,一致性较好;RBT和SAT符合率最高,RBT敏感性最好,cELISA特异性最好。因而建议在开展山羊布鲁氏菌病检测时,可先用RBT初筛,再用SAT或c ELISA复检。     

兰州市城关区犬布鲁氏菌病血清学调查与分析

为了解甘肃省兰州市城关区犬布鲁氏菌病的流行情况，从兰州市城关区动物医疗机构和兰州市流浪动物救助站共采集犬血清343份，采用光滑型虎红平板凝集试验、粗糙型虎红平板凝集试验、通用型胶体金检测法和光滑型胶体金检测法进行检测，对4种方法检测出的阳性血清进行通用型快速PCR复检；对光滑型虎红平板和粗糙型虎红平板凝集试验检测出的阳性血清再分别进行光滑型试管凝集试验和粗糙型试管凝集试验复检。结果表明，4种方法共检出34份阳性血清，其中抗体检测法虎红平板凝集试验、试管凝集试验及布鲁氏菌通用型抗体检测试纸条分别检测出阳性血清22份、18份和12份，抗体阳性率分别为6.4%、5.2%和3.5%;抗原检测法通用型快速PCR检出阳性血清25份，抗原阳性率为7.2%。22份虎红平板凝集阳性样本经光滑型试管凝集试验和粗糙型试管凝集试验复检，共检出阳性血清18份，且均为粗糙型；布鲁氏菌光滑性抗体金标快速检测卡检测均为阴性。说明兰州市城关区犬感染的主要是粗糙型布鲁氏菌，快速通用型荧光PCR的阳性检出率最高。     

几种牛羊布鲁氏菌病抗体检测方法的比较

应用虎红平板凝集试验、试管凝集试验、间接ELISA、竞争ELISA和胶体金法对牛羊血清样品进行布鲁氏菌病抗体检测,对不同的检测方法进行比较,以建立和优化动物布病简便快速的检疫诊断方法。结果显示:针对牛血清,胶体金法结果阳性率最高,虎红平板凝集试验与间接ELISA结果阳性率相似,试管凝集试验与竞争ELISA结果阳性率一致,表明胶体金法和虎红平板凝集试验的敏感性较好,而试管凝集试验与竞争ELISA特异性较好。针对羊血清,试管凝集试验、竞争ELISA和胶体金法的敏感性和特异性好于虎红平板凝集试验和间接ELISA。     

市县级兽医实验室布鲁氏菌病诊断方法的比较

布鲁氏菌病,是由布鲁氏菌引起的人畜共患病,属于二类动物疫病,对人类健康和畜牧业发展具有很大危害。针对市县级兽医实验室常用的虎红平板凝集试验、试管凝集试验与世界动物卫生组织(OIE)推荐使用的ELISA试验进行比较,文章分析三者在市县级兽医实验室的诊断意义。结果显示,CELISA在敏感性和特异性均优于试管凝集试验、虎红平板凝集试验。笔者认为虎红平板凝集试验适合大量样本的初筛,ELISA比试管凝集试验更适合在我国市县级兽医实验室布鲁氏菌病大量样本监测、诊断中推广应用。     

不同品牌胶体金免疫层析试纸条/卡检测牛羊布鲁氏菌病的效果分析

为比较不同品牌胶体金免疫层析试纸条/卡（简称试纸条/卡）检测牛羊布鲁氏菌病的效果,利用抗体布鲁氏菌阴阳性血清,对6种品牌试纸条/卡的准确性及灵敏度进行观察比较;同时按不同试纸条/卡操作方法对经虎红平板凝集试验（RBPT）初筛和竞争酶联免疫吸附试验（cELISA）复核的临床牛羊血清样品进行检测比较。结果显示：不同试纸条/卡对布鲁氏菌企业标准阴阳性血清检出率均为100%,其中2种试纸条/卡敏感性高,对不同稀释倍数阳性血清均可检出;试纸条/卡对临床阴性血清均100%检出,但对临床阳性血清样品的检测结果差异较大,其中对羊阳性血清样品的检出率为5.88%～70.59%,对牛阳性血清样品为50.0%～100.0%。结果表明,不同品牌试纸条/卡在布病检测时存在一定差异。建议使用试纸条/卡进行布鲁氏菌病初筛后,应结合国家相关布病诊断技术进行复检,以确保检测结果的准确性。