细菌内毒素的检测方法及其研究进展

本文就内毒素的检测方法及其研究进展进行了综述,认为鲎试验法灵敏度高、假阳性少、试验时间短、设备简单、经济实用,是目前检测细菌内毒素最好的方法。     

关于鲎及其制剂

自从1968年Levin等正式报道了鲎变形细胞溶解物(limulue Amelocytes lysate,简称LAL)在极微量的革兰氏阴性杆菌内毒素的参予下即发生凝胶化反应,并经Coo-per等把这一试验与家兔热原试验作了比较,认为鲎试验用于检测热原质或内毒素比兔法简单、快速、经济之后,鲨试验(limulus test)就被广泛地应用于医学临床、药品检验、制药工业、食品和环境污染情况的调查等。但鲎试验在兽医临床上的应用国内外     

兽药细菌内毒素凝胶检查法应注意的几个关键环节

<正>细菌内毒素检查法又称鲎试验法(Bacterial Endotoxin Test or LAL Test),是1964年由美国Lev-in和Bang发现,并在1968年建立的一种定性或定量检测微量细菌内毒素的体外分析方法。细菌内毒素检查包括两种方法,即凝胶法和光度测定法,     

细菌内毒素检测法与家兔法检测葡萄糖酸钙注射液热原的比较探讨

目的：考察细菌内毒素检查法对葡萄糖酸钙注射液进行检查的可行性。方法：用细菌内毒素检测法对家兔热原试验的葡萄糖酸钙注射液进行比较试验。结果：供试品对鲎试剂与内毒素的反应无干扰作用。家兔热原检查法结果与细菌内毒素检查法结果相吻合。结论：用细菌内毒素检查法检测葡萄糖酸钙注射液热原是可行的。     

鲎试验检测脂肪乳注射液中细菌内毒素的研究

目的:验证鲎试验检查脂肪乳注射液中细菌内毒素的可行性。方法:按照2010年版《中国药典》细菌内毒素检查方法,用2个厂家的鲎试剂对脂肪乳注射液进行研究。结果:用λ为0.5EU/ml的鲎试剂检测细菌内毒素可行、有效。结论:细菌内毒素检查法(凝胶法)可代替兔热原法控制脂肪乳注射液的产品质量。     

应用鲎试验检测腹痛病马血浆和腹水中内毒素

近十年来,国内外在医学临床上已将鲎试验用于检测血液或其它体液中的微量内毒素,作为对革兰氏阴性菌感染辅助诊断以及对某些疾病病情估计和预后判定的一种手段。我们研究证明,马骡在患肠便秘、肠炎等疾病过程中,往往继发中毒性休克,其主要原因可能是肠道菌,特别是大肠杆菌内毒素被大量吸收所致。为阐明细菌内毒素在便秘病马经过中的产生及其消长情况,我们应用鲎试验对10例健康马、18例肠便秘马和4例其它腹痛病马进行了检测,现报道如下。     

细菌内毒素检查法在我国兽用注射药品质量控制中的应用

细菌内毒素检查法是利用鲎试剂与细菌内毒素产生凝集反应,以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种体外检测方法.与传统家兔热原检查法相比,该法具有简便、快速、灵敏、准确、重现性好、经济等优点.细菌内毒素检查法在国内外人用注射药品及兽用注射药品质量控制中的应用越来越广泛.目前,我国只有部分兽用注射药品采用该法进行细菌内毒素检测.随着研究的进一步深入,该方法必将成为我国兽用注射药品中检测细菌内毒素的主要方法,在兽用注射药品质量控制中具有广阔的应用前景.     

快速检测肉品细菌污染程度和鲜度的鲎试验法

鲎血液中因含有铜离子而成蓝色,鲎试剂是从蓝色血液中分离出的变形细胞,再提取细胞溶解物经低温冷冻干燥而成的生物试剂,专用于细菌内毒素检测.鲎试验法可准确、快速地检测人体内部组织是否因细菌感染而致病.     

细菌内毒素检查法测定硫酸卡那霉素注射液的热原

参照《中国兽药典》2000版收载的细菌内毒素检查法，验证了硫酸卡那霉素注射液的细菌内毒素检查法。通过干扰试验证明，硫酸卡那霉素注射液对鲎试剂的凝集反应无干扰作用，用灵敏度为0．25EU／mL的鲎试剂检查细菌内毒素的方法可行、有效。可以用细菌内毒素检查法替代家兔热原检查法来检测硫酸卡那霉素注射液的热原。     

热原检测方法介绍

简单介绍了两种常用热原检测——家兔法和细菌内毒素法的特性。随着临床要求越来越高,细胞法检测热原将随着技术的发展逐步应用到实践中。     

应用鲎试验检测黄牛过食精料病内毒素血症的实验研究

鲎试验(Limulus Test)以下为(LT)是检验医学近十几年来才发展起来的一种检测微量内毒素的新技术。1970年Levin首先用于检测病人的内毒素血症,我国自1977年以来不少医疗单位相继应用此项检测技术。此次我们利用这一方法对黄牛     

猪瘟脾淋毒耐热保护剂活疫苗内毒素检测方法的建立与应用

依据《中华人民共和国兽药典》2005年版(一部)附录112-115和《中华人民共和国药典》2005年版(三部)ⅫE收载的细菌内毒素检测方法及指导原则进行实验。研究猪瘟脾淋毒(耐热保护剂)活疫苗对细菌内毒素检查试验的干扰情况,并建立其内毒素检测方法。结果猪瘟耐热保护剂活疫苗在10倍稀释后对灵敏度为0.25EU/ml的鲎试剂无干扰,细菌内毒素检测方法可用于猪瘟耐热保护剂活疫苗内毒素的检测。     

中药复方对家兔温病热入营血模型保护作用实验研究

目的：前期对中医温病学中使用频率较高的91味中药及复方进行体外抗内毒素试验研究,筛选到以丹皮、贯众等为主的高效体外抗内毒素作用中药复方3帖,并进行了体内抗内毒素实验研究,筛选到以丹皮、贯众等为主的高效体内抗内毒素作用中药复方。方法：本实验进一步研究筛选出的2个复方对家兔内毒素攻毒热入营血分的保护作用。结果：以丹皮、贯众等为主的方二对内毒素热入营血分证具有极强的保护作用。结论：通过试验研究,以丹皮、贯众等为主,具清热解毒、活血散瘀、凉血止血功能的复方中药对内毒素热入营血分证有明显的保护作用,有望为猪高热综合征的预防和治疗提供新的途经。     

变性蛋白对实验兔体温的影响

生物制品的热源检查是保证药品安全的重要检验项目之一。在采用实验兔作热源检测中 ,引起兔体温升高的热源质有多种。为探讨变性蛋白对实验兔体温的影响 ,特进行了本试验。1　材料和方法1 .1　试验动物实验兔系从南京军区总医院购进 ,品种为新西兰白兔 ,在南大药业公司普通级动物房内饲养 ,从中挑选2 4只 ,公母各半 ,体重在 2 .0 kg左右 ,体温 38.5～39.5℃。实验兔所用饲料为协同饲料厂的全价颗粒料。1 .2　变性蛋白白蛋白从成都蜀阳制药厂购买 ,批号为 991 2 51 ,经鲎试剂检测为阴性的无内毒素白蛋白 ,在无菌室试验兔号试　验　组基础体温…     

禽波氏杆菌内毒素致病性的研究

本研究利用热酚水法从营养琼脂培养基上生长的禽波氏杆菌菌苔提取其内毒素精品，用此提取物通过家兔 Ｓｈｗ ａｒｔｚｍ ａｎ 试验及鸡胚、雏鸡和小白鼠接种试验，对禽波氏杆菌内毒素的致病性进行研究探讨。试验结果表明：该内毒素对鸡胚、小白 鼠的致病性较强，而雏鸡、家兔具有较强的抵抗力，但各种发病死亡动物的病变特征、病变性质、致死原因基本一致，均表现为急性败血症性病变，心、肝、肾、肺等多器官功能急性衰竭是致死动物的主要原因。本文还就禽波氏杆菌内毒素的致病机理进行了探讨。     

黄牛过食精料病理学与治疗同步研究

本试验将受试牛分别过食玉米和大豆进行病理学与治疗同步研究。结果表明两组牛瘤胃液和血液ｐＨ值发病前后有明显差异（Ｐ＜０．０５和Ｐ＜０．０１）;两组过食后的变化指标都是酸中毒的典型指征而非碱中毒。鲎试验检测胃液和血液细菌内毒素含量为１．２～４．８ｎｇ／ｍｌ,证实酸中毒中的同时两组都并存革兰氏阴性细菌内毒素血症。在与病理学变化同步治疗时,采取抗酸中毒、抗内毒素血症及解除脱水为主的综合治疗,对危笃病例取得了满意疗效     

医学实验中家兔腹泻病的综合防治

在医学实验中,家兔作为一种主要的实验动物被广泛应用于教学和科研实验中,如免疫学、生理学、病理学、胚胎学、传染病、遗传病、眼科学的研究,皮肤反应试验和发热研究及热源试验等等.在上述各类实验中,教学、科研人员不可避免地会遇到,诸如家兔食欲减退甚至废绝、体重降低、机体抵抗力降低、感染各种疾病甚至死亡等现象.这些现象或多或少地影响了实验的顺利进行,常常造成实验数据不准、实验样本缺失甚至实验失败.     

禽波氏杆菌内毒素致病性的研究

本研究利用热酚水法从营养琼脂培养基上生长的禽波氏杆菌菌苔提取其内毒素精品，用此提取物通过家兔Ｓｈｗａｒｔｚｍａｎ试验及鸡胚、雏鸡和小白鼠接种试验，对禽波氏杆菌内毒素的致病性进行研究探讨。试验结果表明：该内毒素对鸡胚、小白鼠的致病性较强，而雏鸡、家兔具有较强的抵抗力，但各种发病死亡动物的病变特征、病变性质、致死原因基本一致，均表现为急性败血症性病变，心、肝、肾、肺等多器官功能急性衰竭是致死动物的主要     

黄芩水煎液中黄芩苷的HPLC测定及其抗内毒素作用

通过HPLC法分析黄芩水煎液中黄芩苷含量,采用显色基质法鲎试验进行相关单体成分的抗内毒素定量测定。结果表明,黄芩水煎液中含量最多的单体成分为黄芩苷,显色基质法鲎试验结果表明,不同浓度(50、25、12.5、6.25、3.125μg/mL)的黄芩苷溶液对内毒素的破坏率分别为45.08%、54.39%、57.45%、61.78%和82.80%,其破坏率呈浓度依赖性,可知黄芩水煎液中含量最多的成分黄芩苷具有灭活内毒素的作用。     

鲎试剂检查大液体热原试验应注意的问题

鲎试剂检查大液体热原试验代替了家兔热原检测试验，作为鲎试剂检查大液体热原的试验要求是非常严格、认真的，稍不注意，结果便会出现假阳性。笔者结合几年来的工作实践，谈谈在新法鲎试剂检查大液体热原试验中应注意的问题。被检品ｐＨ值的校正若被检查的大液体ｐＨ值在６０～７５之间，则可直接进行鲎试剂试验，否则，需调节ｐＨ值。鲎试验的最佳ｐＨ值是６２５～７２５之间。ｐＨ值的校正用不含细菌内毒素的０１Ｎ的ＮａＯＨ或ＨＣｌ进行。所用器械的无热原处理玻璃器皿：一切玻璃器皿用自来水洗净，浸入０２Ｎ的ＮａＯＨ溶…