植物生长调节物质对成熟红松合子胚愈伤组织诱导的影响

诱导成熟红松合子胚愈伤组织的关键,是选择正确的诱导培养基以及适宜浓度及配比的生长调节物质。结合松柏类针叶树种体胚发生文献,从7种基本培养基中筛选出LM培养基为最佳诱导培养基;在植物生长调节物质的筛选中,2,4-D优于NAA;LM+2mg/L 2.4-D+(0~0.5)mg/L 6-BA可以诱导出更多的Ⅱ型有效愈伤组织;LM+2mg/L 2,4-D+0.5mg/L 6-BA的诱导培养基中加入0.5mg/L KT或0.5mg/L TDZ,可显著提高有效愈伤组织的诱导率(75.7%)。     

杉木愈伤组织诱导及植株再生

以杉木成熟合子胚为起始外植体,研究了基本培养基、植物激素、凝固剂种类、有机附加物等因素对杉木愈伤组织的诱导、愈伤组织的继代培养及不定芽分化的影响。结果表明:1/2MS+2,4D2mg/L+6-BA1mg/L+KT1mg/L+糖30g/L是成熟合子胚诱导愈伤组织的最佳培养基;1/2MS+2,4-D1mg/L+6-BA0.5mg/L+KT0.5mg/L+糖30g/L适于杉木愈伤组织继代增殖;改良MS+6-BA0.5mg/L+KT1.5mg/L+蔗糖30g/L是诱导不定芽发生的最佳培养基。     

激素对诱导湿地松成熟胚胚性愈伤组织影响的初步研究

本实验以湿地松(Pinus elliottii Engelm.)成熟合子胚为外植体在LP培养基上诱导胚性愈伤组织。研究2,4-D和6-BA对诱导胚性愈伤组织的影响。结果表明高2,4-D浓度对诱导形成胚性愈伤组织非常必要。不同激素配比对实验的结果影响较大,其中培养基组合为LP 2,4-D 12 mg.L-1 6-BA 4 mg.L-1可产生少量类似胚性愈伤组织的培养物。     

云南松成熟合子胚的胚性愈伤组织诱导条件探究

利用DCR培养基,采用正交设计,诱导云南松(Pinus yunnanensis)成熟合子胚的愈伤组织,并根据实验进展,进一步精确激素浓度配比.结果表明,用5%的次氯酸钠溶液消毒,在DCR培养基中添加10 mg/L 2,4-D与1.5 mgrL6-BA为最佳诱导激素浓度配比,用此方法较可以高效地诱导出云南松成熟合子胚的胚性愈伤组织.     

红松成熟合子胚愈伤组织诱导的研究

以红松(Pinus koraiensis Sieb.et Zucc.)成熟合子胚为基准试验材料,对红松愈伤组织诱导的影响因素进行了初步研究。结果表明,不同的培养基对有效愈伤组织的诱导效果不同,初始诱导应选用LM培养基使外植体完全脱分化,反复继代后可以产生有效愈伤组织,供试的其他培养基继代后则极少产生有效愈伤组织;不同的激素组合和浓度配比对有效愈伤组织的诱导率影响不同,2,4-D是愈伤组织启动的不可或缺的植物生长调节剂,其作用远远大于NAA。在LM+2mg.L-1 2,4-D+0.5mg.L-16-BA的诱导培养基中加入0.5mg.L-1 KT或0.5mg.L-1 TDZ,可明显提高有效愈伤组织的诱导率(可达75.7%)。     

红松愈伤组织诱导的初步研究

以未成熟和成熟合子胚为外植体进行了红松愈伤组织的诱导,其结果表明,成熟胚的诱导效果明显好于幼胚;鉴于诱导产生褐化的主要部位来自胚根,所以外植体应选用子叶、胚轴或去除胚根的胚;诱导培养基采用LM＋2,4-D2．0mg／L＋6-BA0．5mg／L可诱导出较大量Ⅱ型有效愈伤组织,经组织学观察,可见早期原胚团,疑似胚性愈伤组织;继代增殖培养基可采用LM＋2．4-D0．5mg／L＋6-BA0．2mg,／L。     

珍稀濒危植物异形玉叶金花组织培养初步研究

以异形玉叶金花幼嫩茎段为外植体,研究不同组合的激素组合及外源物对异形玉叶金花愈伤组织诱导及分化的影响。结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基组合为MS+6-BA 0.2 mg/L+2,4-D 1.5 mg/L;愈伤组织分化的最佳培养基组合为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+5 g/L椰乳,诱导生根的最佳培养基组合为1/4 MS+0.5mg/L NAA+0.2 mg/L IBA。     

马尾松成熟胚愈伤组织的增长研究

基本培养基和生长调节剂对马尾松成熟胚愈伤组织增长的影响表明:马尾松成熟胚愈伤组织的增长适应范围较广,对DCR,LV,WV5三种基本培养基以及2,4-D和BA试验3种浓度要求不严格,9种试验组合愈伤组织均能保持旺盛增长.采用DCR+2,4-D0.5 mg/L+BA0.5 mg/L培养基,马尾松成熟胚愈伤组织经多次继代均能保持旺盛增长.     

短柄五加愈伤组织诱导及再生体系的建立

以短柄五加(Acanthopanax brachypus Harms)当年生嫩枝为材料,选择叶片、叶柄为外植体,使用6-BA、NAA、IBA、2,4-D等激素,配制成不同质量浓度的培养基,进行短柄五加愈伤组织诱导,同时分析愈伤组织诱导丛生芽和丛生芽增殖培养基的最佳配方,建立短柄五加植株的再生体系。结果表明,短柄五加叶片是较适宜诱导愈伤组织的外植体,愈伤组织诱导的培养基是MS+0.3mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA,诱导率为75.0%;愈伤组织诱导不定芽形成的适宜培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L,不定芽诱导率为100%;适宜不定芽增殖的培养基为MS+6-BA3.0mg/L+NAA 0.2mg/L,增殖系数为5.80;同时活性炭能够有效防止愈伤组织诱导过程中的褐化问题。     

北乌头组培快繁技术体系初步研究

本文对北乌头组培快繁技术体系进行了初步研究,同时比较了不同外源激素组合对北乌头外植体诱导的影响,其结果表明:北乌头愈伤组织诱导最佳外植体为叶片,丛生芽诱导最佳外植体为带芽茎段及茎尖,愈伤组织诱导最佳培养基为MS+1.0mg/L6-BA+1.0mg/L2,4-D,丛生芽诱导最适合培养基为MS+1.0mg/L2,4-D+0.2mg/LNAA,继代培养以WPM+1.0mg/L6-BA+0.5mg/LIBA效果最为显著,增殖率在4倍以上;北乌头生根最佳培养基为1/2MS+0.1mg/LNAA,生根率可到90%。     

水曲柳不同外植体胚性愈伤组织诱导及植株再生

本研究以水曲柳不同外植体(无菌苗叶片和下胚轴、未成熟合子胚、成熟和未成熟合子胚子叶)为材料，在胚性愈伤组织诱导、胚性愈伤组织增殖、体胚形成、体胚萌发生根培养基上诱导分化。结果表明，附加了5.0 mg·L^-1 NAA和2.0 mg·L^-1 6-BA的激素配比的MS培养基，为诱导水曲柳胚性愈伤组织最适培养基；在5种不同的外植体中，成熟和未成熟合子胚子叶更适合作为诱导胚性愈伤组织的外植体；在诱导胚性愈伤组织中，成熟合子胚子叶诱导率为11.7%,未成熟合子胚子叶诱导率为9.7%;胚性愈伤组织在继代培养过程中，WPM为最佳基础培养基，附加0.1 mg·L^-1 6-BA和0.15 mg·L^-1 2,4-D的激素配比，胚性愈伤组织的增殖系数可达到1.54。在体胚成熟过程中，MS培养基内添加1.0 mg·L^-1 ABA时，体胚的诱导率最高，达到55%。在生根萌发的WPM基础培养基中附加1.0 mg·L^-1 IBA和1.0 mg·L^-1 IAA的激素配...     

白鹃梅叶片芽再生体系的构建

对白鹃梅叶片芽再生的适宜培养基和适宜条件进行研究的结果表明,2,4-D、NAA、IBA与6-BA组合均可诱导叶片愈伤,但以MS+1 mg/L 2,4-D +0.5mg/L6-BA为愈伤诱导培养基,MS+0.3 mg/L IBA+2mg/L 6-BA+0.1 mg/L TDZ为芽分化培养基,1/2MS+0.3 mg/L IBA为生根培养基最佳.     

青钱柳组织培养研究

以青钱柳幼嫩叶片为外植体进行组织培养,观察青钱柳愈伤组织形成及再分化形成不定芽的过程,研究不同培养基和不同生长调节物质组合对青钱柳愈伤组织诱导及植株再生的影响。结果表明:(1)MS、WPM和B5培养基均能诱导出愈伤组织,激素及其浓度对愈伤组织诱导有显著影响。愈伤组织在WPM+2.0 mg/L2,4-D+1.0 mg/L 6-BA培养基组合上诱导率最高,达97.6%;(2)青钱柳愈伤组织能分化形成不定芽,激素不同浓度组合及外源物对愈伤组织分化有显著影响。青钱柳叶片愈伤组织在WPM+1.0 mg/L 6-BA+2.0 mg/LZT+0.5 mg/L2,4-D+10%椰乳的培养基上分化不定芽的频率最高,达66.33%;(3)青钱柳诱导生根的最佳培养基组合为1/2 MS+1.5 mg/L IBA。     

黑荆树愈伤组织诱导、增殖与分化

以黑荆树叶片为外植体,MS培养基为基本培养基,研究了外源激素对愈伤组织诱导、增殖及分化的影响。结果表明:外源激素6-BA与IBA组合、6-BA与2,4-D组合、TDZ与IBA组合均可诱导愈伤组织,但诱导率差异达极显著水平;不同外源激素组合上诱导的愈伤组织,其增长率为165.21%~208.53%,其中以6-BA与IBA组合的增长率最大;在添加TDZ与IBA的培养基上易分化出不定芽,但不同培养基上诱导的愈伤组织对不定芽的分化率和芽的生长影响达极显著差异。综合考虑,筛选适宜愈伤组织诱导、增殖培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.5mg/L IBA,诱导率为43.36%,平均增量和增长率分别为1.04 g和208.53%;最适宜继代时间为18~21 d;最适宜愈伤组织分化培养基为MS+0.05 mg/L TDZ+0.2 mg/L IBA,分化率为51.85%,每块愈伤组织上分化5~8个芽点。     

火炬松体细胞胚胎发生体系的优化

[目的]建立和优化火炬松体胚发生技术体系，为火炬松优良基因型体胚繁育及遗传转化体系建立提供技术支撑。[方法]以火炬松优良基因型的未成熟合子胚为材料，从基因型、球果采集期、基本培养基、植物外源激素组合及浓度等方面对胚性愈伤组织诱导条件进行优化；选取增殖效果好、具有胚性胚柄细胞团（ESM）的胚性愈伤组织开展体胚成熟的正交试验，选择发育正常的子叶胚进行萌发，8周后移栽。[结果]基因型、球果采集期、基本培养基和外源激素（PGR）组合及浓度等因子均对胚性愈伤组织诱导有不同程度的影响。火炬松6种基因型中荣山52胚性愈伤组织诱导率最高，达63.33%；处于裂生多胚期的合子胚为外植体的最佳采样期（7月20日左右）；6种基本培养基中，在DCR基本培养基上胚性愈伤组织诱导率最高，达40.00%；不同PGR组合及浓度中，以0.5 mg·L^-1 6-BA+1.0 mg·L^-1 2,4-D+2.0 mg·L^-1 NAA+5.0 mg·L^-1ABA的胚性愈伤组织诱导率最高，达50.00%。胚性愈伤组织在基本培养基MLP上培养1...     

陈山红心杉胚性愈伤组织的培养

以未成熟陈山红心杉胚胎为外植体,MS为基本培养基,通过添加不同浓度的6-BA和2,4-D,研究胚性愈伤组织的培养条件.结果表明:2,4-D是胚性愈伤细胞分化和生长的关键因子,最佳培养条件是:MS+6-BA 0.5mg/L+2,4-D 1.0mg/L,继代周期40天左右.     

朱顶红愈伤组织诱导及增殖发育体系的建立及优化

以朱顶红带有小鳞茎的试管苗作为外植体,进行愈伤组织的诱导、增殖及不定芽分化研究,结果表明:诱导愈伤组织形成的最佳培养基为MS+2,4-D 2.0mg/L+6-BA1.0mg/L+KT2.0mg/L。愈伤组织增殖需要的最佳2,4-D 2.0mg/L浓度为1.0mg/L,促进不定芽分化及植株再生的6-BA浓度为0.5mg/L。     

蒙古栎体细胞胚胎发生技术研究

为建立蒙古栎体细胞胚胎发生体系,以蒙古栎未成熟合子胚为外植体,通过不同种源、外植体的取材时间、诱导培养基配比、培养条件等筛选得到胚性愈伤组织,进而进行体胚增殖。结果表明:7月上旬是最佳的取材时期(合子胚大小约10 mm),蒙古栎合子胚在培养基MS+2,4-D1 mg·L~(-1)+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+水解酪蛋白0.5 g·L~(-1)中胚性愈伤组织诱导率可达85.7%,光照条件对胚性愈伤组织的诱导率影响不显著。不同种源对胚性愈伤组织的诱导率有显著影响。在培养基MS+NAA 0.5 mg·L~(-1)+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+水解酪蛋白0.5 g·L~(-1)中体胚增殖率最大72.3%,且培养4周时胚性愈伤组织状态最佳。     

不同激素对红豆杉愈伤组织诱导及增殖的影响

以南方红豆杉(T.chinensis varmairei)的嫩茎为外植体,探讨了不同激素对愈伤组织诱导及继代增殖的影响。结果表明:以嫩茎为外植体,愈伤组织诱导的最佳培养基为:B5+2,4-D2.0mg/L+6-BA0.5mg/L+蔗糖20g/L+琼脂8g/L+AC1g/L+酪蛋白1g/L,但高浓度的2,4-D易使愈伤组织褐化。为了减缓愈伤组织褐化和使细胞持续增殖,继代时选用NAA替代2,4-D,继代培养的最佳培养基为:B,5(去掉Cu2+的B5培养基)+NAA 4.0mg/L+KT0.5mg/L+蔗糖20g/L+琼脂8g/L+AC0.5g/L+酪蛋白1g/L。     

丝棉木松散型胚性愈伤组织的诱导与增殖

通过建立丝棉木松散型胚性愈伤组织培养体系,为丝棉木组培快繁、体细胞离体诱变育种及遗传转化等研究奠定基础。本试验以丝棉木幼嫩茎段为外植体,研究植物生长调节剂不同种类和浓度对丝棉木松散型胚性愈伤组织诱导与增殖的影响。结果显示,丝棉木茎段在MS+1.0 mg/L 2,4-D培养基上可诱导出松散型愈伤组织,愈伤组织诱导率达100%;将松散型愈伤组织转接到MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L 2,4-D的培养基上可获得胚性愈伤组织;将胚性愈伤组织转接到MS+0.25 mg/L BA+0.5 mg/L 2,4-D的培养基上,每15 d继代培养一次,继代时选择结构松散、质地硬脆的愈伤组织,继代培养2～3次后可获得均质的丝棉木松散型胚性愈伤组织。本研究表明,丝棉木茎段理想的松散型愈伤组织诱导培养基为MS+1.0 mg/L 2,4-D;最适松散型愈伤组织诱导培养基为MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L 2,4-D;最适胚性愈伤组织增殖培养基为MS+0.25 mg/L BA+0.5 mg/L 2,4-D。