快速测定果蔬中农药残留量的方法研究

用自行研制的便携式农药残留速测仪,对果、蔬中农药残留毒性进行快速检测,可以直接显示有机磷和氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱酶的抑制率,确定农药残留毒性水平。     

用于检测蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的酶抑制分光光度法研究进展

对利用酶抑制分光光度法检测蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒的原理、最主要影响因子和存在的问题进行了探讨 ,重点分析了酶抑制分光光度法出现假阳性、负抑制率以及该方法不适用于检测韭菜等蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的原因     

酶抑制法快速检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留

概述了酶抑制法快速检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留技术的研究现状、检测原理、应用情况和存在的问题。酶抑制法具有检测时间短、成本低、操作简便等特点,是目前我国农药残留检测的一种有效的初筛方法。     

家蚕乙酰胆碱酯酶基因bmace在毕赤酵母GS115中的表达及其分析

【目的】构建表达家蚕乙酰胆碱酯酶（BmAChE）的毕赤酵母菌株,实现BmAChE在毕赤酵母中分泌表达并对其活性进行分析。【方法】从家蚕头部提取总RNA,经RT-PCR反转录成cDNA,通过PCR扩增出家蚕乙酰胆碱酯酶基因bmace并进行序列测定。采用PCR及重叠延伸PCR去除原bmace中的信号肽和疏水肽,并对序列中存在的2个A+T富含区进行同义密码子替换的改造。将改造后的bmace与表达载体pPIC9K连接,转化毕赤酵母GS115,甲醇诱导表达。SDS-PAGE和Western blotting鉴定重组蛋白,以Ellman法测定酶活力,毒扁豆碱和有机磷及氨基甲酸酯类农药抑制试验分析重组BmAChE（rBmAChE）的生物活性。【结果】改造后的bmace经重组毕赤酵母菌株分泌表达了1个分子量约为70 kD的蛋白,具有AChE活性,酶比活力约为1 187 U•mg-1。抑制试验显示,该rBmAChE能够被毒扁豆碱强烈抑制,并且可被皮蝇磷等10种有机磷农药和克百威等5种氨基甲酸酯类农药抑制,最低抑制浓度IC50值可达2.78×10-10 mol•L-1。【结论】成功构建分泌表达BmAChE的毕赤酵母菌株,其表达了具有良好活性的rBmAChE,可用于进一步制备有机磷及氨基甲酸酯类农药快速检测分析制剂。     

发展“放心菜”生产有关问题探讨

“放心菜”是指经过速测合格的蔬菜。目前主要是利用酶抑制法，采用上海产CL—l残留农药测定仪测定，其基本原理是：当昆虫体内导致神经传递介质乙酰胆碱分解的乙酰胆碱酯酶被有机磷类或氨基甲酸酯类农药抑制其活性后，该酶催化水解乙酰胆碱等物质(俗称底     

常用农药残留快速检测法

一、酶抑制法有机磷与氨基甲酸酯农药共为神经系统乙酰胆碱脂酶抑制物,因此可以利用农药靶标酶-乙酰胆碱酯酶(AChE)受抑制的程度来检测有机磷和氨基甲酸酯类农药。该方法目前已开发出了相应的各种速测卡和速测仪。检测时,蔬菜     

生化法快速测定蔬菜中农药残毒

用自行研制的便携式农药残毒速测仪 ,对蔬菜中残留农药进行生化检测。依据有机磷和氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱酯酶的活性有抑制的原理 ,绘制农药残毒———吸光度标准曲线 ,读出吸光度即得到相应的农药浓度。     

酶抑制-比色法检测聊城市果蔬有机磷和氨基甲酸酯农药残留

参照GB/T5009 199-2003,采用酶抑制-比色法进行检测,分析山东省聊城市水果、蔬菜的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留状况。结果表明,有机磷和氨基甲酸酯农药残留以水果类为最多,其次是根茎类和果菜类,叶菜最少;在蔬菜中农药残留较多的是萝卜、蒜薹,较少的3种是菜花、辣椒、白菜;水果中农药残留较多的为柑橘,较少的为山楂;未检测出农药残留超标样品,证明果蔬安全状况已经大为改善。酶抑制-比色法存在一定的误差,还需提高酶源稳定性和灵敏性,改进样品提取工艺。     

蔬菜中有机磷与氨基甲酸酯类农药残留酶抑制法快速检测技术

概述了酶抑制法快速检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的原理,并从调试仪器、配制试剂、空白对照、样品制备、样品检测、结果判断等方面介绍了其检测技术,以供参考。     

农产品农药残留快速检测技术

<正>农药残留严重影响农产品质量安全。目前,国内外常用的农药残留快速检测技术主要有4种。1.化学快速检测技术化学快速检测技术的研究主要用于有机磷的检测,利用有机磷农药(磷酸酯、二硫代酸酯、磷酰胺)在金属催化剂作用下水解为磷酸与醇,水解产物与检测液反应,使检测液的紫红色褪去变成无色。但该方法局限于检测果蔬中的有机磷,灵敏度低。2.酶抑制技术酶抑制技术是目前比较成熟、应用最广泛、快速的农药残留检测技术,是根据有机磷和氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱     

酶抑制分光光度法检测蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的方法的研究

为了缩短用于蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残留检测的酶抑制分光光度法的检测时间对抑制时间为10min时的最适条件进行了研究。提出了新的最适条件确定标准,即保证酶的活性保持在一定的水平的基础上(0.1333min-1≤k1≤0.2667min-1[1]),选择抑制率(以甲胺磷为抑制剂)最高时的温度和pH值作为最适条件。确定了抑制时间为10分钟时的最适条件为:抑制温度47.0℃,pH值为7.7。进而在此最适条件下确定了新的检测结果判断标准:当酶抑制率≥58%时,蔬菜中含有某种有机磷或氨基甲酸酯类农药残留为阳性。     

AYFS-NC0212农残速测仪对氨基甲酸酯类农药检出限研究

仪器的检出限是衡量速测仪检测灵敏度的重要指标,使用分光光度计型农残速测仪对蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药总量进行快速检测已在基层得到广泛应用。本试验通过提取溶液加标上机测量酶抑制率,进行AYFS-NC0212快速检测仪对氨基甲酸酯类农药检出限的研究。结果表明,该仪器对氨基甲酸酯类农药具有较高的检测灵敏度,符合《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测》(GB/T 5009.199—2003)的相关要求,在氨基甲酸酯类农药残留检测中能发挥有效的监控作用。     

农残检测用木本植物酯酶的筛选研究

基于酶抑制原理,针对木本植物种子,利用总酯酶活力及比活力进行比较,筛选农药残留检测适宜的植物酯酶,扩大了植物用酯酶的选材范围,并测定了对6种有机磷及氨基甲酸酯类农药的最低检测限(LOD).试验显示,刺槐总酯酶活力及比活力高于传统酶源小麦及其他树种,最低检测限低于国际规定的最大残留限量(MRL),因此,该酶可作为新的有机磷残留检测用酶.     

酶抑制率法快速检测蔬菜农药残留

用酶抑制率法检测蔬菜上的农药残留,快速、简单,而且可以检测出大部分有机磷和氨基甲酸酯类农药,是目前较普遍使用的一种快速检测方法.     

乙酰胆碱酯酶酶抑制法快速检测农药残留的研究进展

概述了乙酰胆碱酯酶酶抑制法快速检测农药残留技术的研究现状．指出了酶抑制法在使用中存在的问题和发展趋势。     

采用酶抑制法检测大枣中的农药残留

目的:大枣中可能含有有机磷及氨基甲酸酯类的农药残留成分,使用酶抑制法测其农药残留。方法:大枣样品经乙酰胆碱酯酶水解后,在分光光度计412nm处测定吸光度求得抑制率,判断是否含有农药残留。结果:经检测,五种大枣样品的抑制率均小于70%,为阴性。结论:该方法具有操作简便、快速、测定方法易于掌握的优点。     

基于酶抑制法的农药残留快速比色检测研究

我国是一个农业大国,农业生产规模巨大,对农药的需求量和产量也都十分巨大,在世界上名列前茅。通过使用农药可以降低农作物的病虫害,提高农作物产量。但是农药不能过量使用,否则就会造成农作物农药残留超标,而这些农药残留会对人体产生危害,从而引发安全问题,因此对农药残留的检测尤为重要。目前我国最常使用的农药的主要成分是有机磷与氨基甲酸酯类农药,因为这类农药对乙酰胆碱酯酶有抑制作用,根据吲哚酚乙酸酯为酶促水解反应的显色底物,制造了一种抛弃型农药残留快速检测酶片。本文对基于酶抑制法的农药残留快速比色检测进行研究分析,探讨其应用的可行性,减少我国因农药残留带来的农业安全问题。     

有机磷及氨基甲酸酯类农药残留检测方法研究进展

目前在中国蔬菜中农药残留最为严重的是有机磷类和氨基甲酸酯类农药.该文主要综述了有机磷及氨基甲酸酯类农药检测技术中广泛使用的光谱法及色谱法.     

AYFS-NC0212农残速测仪对氨基甲酸酯类农药检出限试验研究

使用分光光度计型农残速测仪对蔬菜中的有机磷和氨基甲酸酯类农药总量进行快速检测已在基层得到广泛应用，仪器的检出限是衡量速测仪检测灵敏度的重要指标。本试验通过提取溶液加标上机测量酶抑制率，进行AYFS-NC0212快速检测仪对氨基甲酸酯类农药检出限的试验研究。试验结果表明，该仪器对氨基甲酸酯类农药具有较高的检测灵敏度，符合国家标准GB/T 5009.199-2003的相关要求，在氨基甲酸酯类农药残留监测中能发挥有效的监控作用。     

温度对酶抑制法测定蔬菜有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的影响

以抑制率为评价指标,采用酶抑制法快速测定大白菜和韭菜样品加农药标准品后抑制率的变化情况,研究不同培养温度和测定温度对大白菜和韭菜中甲胺磷和克百威残留量的影响。试验结果表明:不同培养温度和测定温度均会影响乙酰胆碱脂酶的活性,25℃和37℃的培养温度和测定温度对酶的活性影响较小,实际分析过程可选用25℃作为蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速培养温度和测定温度。