影响琼脂扩散检测禽流感的若干因素

在诊断禽流感的工作中，一些技术条件对免疫扩散反应有一定的影响。首先遇到的问题，就是抗原和阳性对照血清反应结果不发生肉眼可见的致密沉淀线。我们知道，沉淀是蛋白质性沉淀原在含有抗体（沉淀素）的免疫血清影响下自溶液中发生沉淀的现象，沉淀作用的条件之一要有特异性的沉淀血清。当遇到抗原与抗体不发生作用或者是模糊不清的沉淀线，除抗原和阳性血清自身问题外，另一方面是技术条件的影响。如琼脂深度、酸碱度、抗原与抗体的比例、反应孔的排列和距离、琼脂板孔内表面干燥及琼脂板与平皿底部部分脱离等，使特异性的抗原和抗体（阳…     

马传染性贫血琼脂凝胶免疫扩散试验的影响因素

在马传染性贫血防治(简称马传贫)工作中,仍以琼脂凝胶免疫扩散试验为主要检测手段。该方法简便特异、快速。但是,该试验容易受到多种因素的影响,使试验特异性、敏感性、精确性不理想,结果判断的不准确。本文就抗原、抗体性质、琼脂板以及反应条件等各种影响因素及试验中的注意事项对马传染性贫血病琼脂凝胶免疫扩散试验的影响进行了逐一分析。     

琼扩试验的应用及注意事项

琼脂扩散试验(Agar diffusion Tost;AD)也称免疫扩散试验,实际上是抗原-抗体在琼脂中的沉淀反应。它的基本原理是抗原-抗体分子在含有电解质的琼脂中向四周自由扩散,通常是从高浓度向低浓度游动,当抗原-抗体分子相遇时,如出现沉淀线(抗原-抗体的特异性结合物)可说明两者对应。因此,本法可以鉴定抗原,也可以鉴定抗体,在实际应用中以后者居多。在试验中,     

兔粘液瘤病的血清学诊断

<正>1琼脂(糖)免疫扩散试验该方法既能检测抗原又能检测抗体。由于粘液瘤病毒的抗原成分比较复杂,与相应抗血清进行琼脂扩散试验时可形成多条沉淀线,所以试验应出现三条沉淀线。如果试验血清中含有抗体,三条线中至少有一条弯曲向抗原滤纸条,否则成直线。如果试验血清中含有抗原,则至少有一条弯向标准血清滤纸条。样品采集。被检兔的全血或血清,并制备琼脂板。试验方法。将含标准血清和抗原的滤纸条放置于琼脂表面,含被检血清或全血的滤纸条放置于标     

兔粘液瘤病的血清学诊断

1琼脂（糖）免疫扩散试验 该方法既能检测抗原又能检测抗体。由于粘液瘤病毒的抗原成分比较复杂,与相应抗血清进行琼脂扩散试验时可形成多条沉淀线,所以试验应出现三条沉淀线。如果试验血清中含有抗体,三条线中至少有一条弯曲向抗原滤纸条,否则成直线。如果试验血清中含有抗原,则至少有一条弯向标准血清滤纸条。     

琼脂扩散试验操作方法及注意事项

琼脂扩散试验（简称“琼扩”）是临床中病原诊断和抗体效价测定的主要方法之一。该方法简洁、快速,在临床中应用广泛,特别适用于大量血清样品的检测和流行病学群体的定性诊断。缺点是需要时间过长,灵敏度不高。琼脂扩散试验是根据沉淀试验的原理,利用可溶性抗原和抗体在半固体凝胶中进行的相向扩散反应,当抗原、抗体的分子相遇并达到适当的比例时,就会相互结合,凝集,形成抗原-抗体的结合物,在抗原、抗体比例较适合并有电解质的存在及一定温度的条件下,形成白色可见的沉淀线,此种沉淀反应,称为琼脂免疫扩散试验,本法可用已知抗原测定未知抗体,也可以用已知抗体测定未知抗原。在传染病的实验室诊断中,常用于鸡马立克氏病抗体检测。也曾有用此法检查鸡法氏囊病、小鹅瘟、猪瘟病和炭疽等疾病的报道。现以检测鸡马立克氏病的抗体为例,将其操作方法介绍如下。     

琼脂扩散试验结果影响因素的分析

琼脂扩散试验是临床中病原诊断和抗体效价测定的主要方法之一,该方法简洁、快速,在临床中应用广泛。但是该试验容易受到多种因素的影响而导致试验特异性、敏感性、精确性以及结果判断的不准确。本文就抗原、抗体性质、琼脂板以及反应条件等影响因素对琼脂扩散试验的影响进行了逐一分析。     

利用琼脂免疫扩散试验检测小鹅瘟病毒抗原及抗体的研究

<正> 小鹅瘟自方定一(1956)在扬州发现以来,国内外已有大量报道。对小鹅瘟的研究也日益深入,但有关小鹅瘟病毒及抗体的实用、快速、有效的检测技术则尚少系统报道。一般都是应用鸭胚,鹅胚或鹅胚成纤维细胞进行中和试验,费时费事。Malkinson(1974)首先以琼扩试验检测小鹅瘟抗体,但敏感性不高。继后Бондарцнко(1982),R.H.Gough(1984),郑玉美(1986)也都先后报道了小鹅瘟的琼脂免疫扩散试验。我们在上述工作基础上,制备了小鹅瘟鸭胚组织尿囊液抗原与雏鹅组织抗原,并筛选出了配制凝胶板最适缓冲液及pH。成功地应用琼脂免疫扩散试验检测小鹅瘟抗体,并初步对四川省部份市县小鹅瘟疫情进行调查。现将实验方法及结果报道于后。     

琼扩试验的应用及注意事项

<正> 琼脂扩散试验(Agar diffusion Test,简称AD)。也称免疫扩散试验。它的基本原理是抗原——抗体分子在含有电解质的琼脂中向四周自由扩散,通常是从高浓度向低浓度游动,当抗原——抗体分子相遇时,如出现沉淀线(抗原——抗体的特异结合物)可说明两者对应。因此,本法可以鉴定抗原,也可以鉴     

诊断种用母鸡白痢病的新方法—蛋黄琼脂沉淀反应

目前,鸡白痢病的诊断方法,各国多数是采用全血玻板凝集反应,必须抓鸡采血,势必惊动鸡群,影响产蛋,同时也受气候条件的限制。为了寻求简单易行、准确可靠而又不惊动鸡群的诊断方法,我们试用蛋黄琼脂沉淀反应,通过对808只母鸡的827枚蛋的试验结果:在琼脂板上,阳性鸡的蛋黄与抗原之间出现清晰的沉淀线,阴性鸡则无沉淀线产生,并且不存在可疑反应,便于判断。为了进一步验证其准确性,我们又进行了全血玻板凝集反应、全血琼脂沉淀反应、蛋黄琼脂沉淀反应的对比试验,其结果完全一致;通过17只母鸡的剖检,进行细菌分离,证实了我们试验结果准确无误。     

用对流免疫电泳试验检测鸡传染性法氏囊病血清抗体

利用自制传染性法氏囊病抗原,采用对流免疫电泳试验检测鸡ＩＢＤＶ抗体。结果表明,该方法能在３０－６０ｍｉｎ内使阳性血清和抗原之间出现明显的沉淀反应,且能被特异性抗原阻断;用ＮＤＶ,ＩＢＶ和ＥＤＳ７６Ｖ等血清代替ＩＢＤＶ血清无交叉反应,对同一批样品进行两次检测,结果具有良好的重复性,同琼脂免疫扩散方法比较,ＣＩＥ法需时短,敏感性高。     

猪胰高血糖素的检测方法研究——免疫火箭电泳测定法

采用免疫火箭电泳即免疫扩散电泳法可以测定胰高血糖素的含量，其原理是通过抗原抗体的免疫沉淀反应，利用抗原含量与反应后所形成的沉淀峰的高度呈正比的关系，从而精确地计算出抗原的含量。由于免疫反应具有很强的特异性，所以不受其它蛋白质（抗原）的影响     

影响琼脂扩散试验的因素

目前 ,我国大多数的生物制品厂没有建ＳＰＦ鸡场。因此 ,生产疫苗时 ,多数厂家还是使用不免疫鸡蛋。在使用不免疫鸡蛋生产疫苗以前 ,一定要对该蛋进行监测 ,以免影响所生产疫苗的效价。在监测时 ,我们将卵黄中的抗价提取出来后 ,再根据适当的免疫技术进行监测 ,例如 :ＮＤ采用血凝抑制实验 ;而法氏囊病、禽流感、传染性支气管炎、传染性喉气管炎、鸡痘等都采用琼脂扩散试验 ,琼脂扩散因其快速、简便易行已被生产单位普遍采用 ,用于监测种鸡血清抗体和种蛋卵黄抗体。但是 ,一些技术条件对免疫扩散反应有一定的影响。首先遇到的问题 ,就是抗原…     

马传染性贫血病琼脂凝胶免疫扩散试验常见问题浅解

正兽医实验室中,常利用琼脂凝胶免疫扩散试验对马传染性贫血病进行诊断和检疫。1定义与原理将可溶性抗原与相应的抗体混合,当两者的比例合适,并有盐类存在时,即有沉淀物出现,这种现象叫做沉淀反应。沉淀反应中的抗原叫沉淀原,与沉淀原起反应的抗体叫沉淀素。主要是采用双向双扩散试验,即用已知抗原、阳性血清、待检血清在琼脂凝胶中进行免疫双扩散,室温下作用24小时,当已知抗原和阳性血清间出现明显沉淀线,抗原和待检     

纸膜免疫金银染色诊断马立克氏病扩大试验报告

在5个养鸡场进行了扩大试验.结果,马立克氏病流行鸡场的羽髓抗原和血清抗体检出率均显著高于非流行鸡场(P<0.01);本法对羽髓抗原和血清抗体检出率均高于琼脂免疫扩散试验(P<0.05);快诊膜保存期6个月以上,使用快诊膜检测只需2小时即可出结果。     

琼脂扩散法检测卵黄抗体效价影响因素的分析

抗体琼脂扩散试验是当前卵黄抗体效价测定的主要方法之一,该方法简洁、快速非常适合于临床中应用,但是该方法容易受到多种因素的影响而导致试验结果判断的不准确。本文就琼脂扩散试验中抗原抗体本身性质、反应特点、最适比例、可逆性、总量以及琼脂、水     

肠结肠炎耶尔辛氏菌血清型0:9与布氏杆菌免疫学交叉反应的研究进展(续)

<正> 三、与交叉反应有关的抗原抗体性质如上所述,Y·e·o:9与布氏杆菌交叉抗原决定簇均存在于脂多糖的多糖侧链中,但因W—LPS与ph—LPS的化学组成及结构有所不同。故其生物学特性及免疫学特性等也就不完全相同。在琼脂扩散及其抑制试验中,y·e·o:9 W—LPS与ph—LPS具有共同抗原因子,能形成一条     

酶标抗体反应诊断旋毛虫病

酶标抗体反应广泛用于医学、工业和农业的许多部门。该反应的原则系统如下:在聚乙烯制的免疫试验反应板的圆孔或小试管中(它们起抗原和抗体的载体作用),先后加入液体抗原、假定存在抗体的被检血清、结合物和底物。结合物乃是酶(辣根过氧化氢酶)标记的抗猪球蛋白抗体,而底物则是0.08%5-氨基水杨酸与0.05%过氧化氢的9:1混合物。构成的抗原抗体结合过程,根据底物被结合物的分解而查明,特征是被染成暗褐色,或通过被检血清的滴度和测定底物的光密度(用光比色计、分光光度计)来确定。     

生物素——亲和素双抗原夹心斑点酶联免疫吸附试验检测动物蓝舌病抗体的研究

测定蓝舌病(BT)群特异性抗体最常用的血清学方法是琼脂凝胶免疫扩散试验(AGID),为了提高反应的灵敏度和特异性,1980年以来国内外学者们又发展了ELISA间接法和阻断法。因聚苯乙烯板对蓝舌病抗原的吸附较差,板间差异较大,而且结果判断需要专用仪器等,所以1987年加拿大学者Afsher等用硝酸纤维素膜做为载体     

家兔葡萄球菌病血清学诊断的研究 Ⅰ.琼脂糖免疫扩散试验

以琼脂糖免疫扩散法检测实验感染葡萄球菌的免,其血清沉淀抗体在感染后13～41天阳转;自然流行群中的兔血清,阳性率为41.5％,群养兔为17.40％,散养兔为10.20％。兔巴氏菌抗原、波氏菌抗原、链球菌抗原对葡萄球菌感染兔血清沉淀抗体不发生交叉夏应。葡萄球菌抗原对巴氏菌高免兔血清、巴氏菌抗体阳性兔血清、波氏菌阳性兔血清及健康兔血清不发生反应。