陇东海棠初代离体培养中外植体褐化影响因素研究

为了降低陇东海棠离体初代培养中的褐化现象、提高培养成功率,研究了外植体类型、酒精消毒、低温处理、防褐化剂、暗培养时间和6-BA浓度对陇东海棠在组织培养中外植体褐化的影响。结果表明:以带芽茎段为外植体,用0.1%HgCl2灭菌处理12min,接种在MS+6-BA 0.5~1.0mg/L+IBA 0.2mg/L(pH值5.8)添加PVP 0.5~2g/L的培养基中,低温暗处理5d,对防止外植体褐化效果最佳。     

甘蓝组织培养中防止外植体褐化的研究

以中甘11号为试验材料,探讨基本培养基(MS、1/2MS)、PVP(聚乙烯吡咯烷酮)、Vc(抗坏血酸)、硝酸银、母株预处理对褐化防止的有效性.结果表明:基本培养基为以1/2MS时,外植体褐化减轻,与MS培养基比差异显著.抗氧化试剂抑制褐化的作用明显,PVP对褐化的抑制作用与对照比差异显著.外植体采取前对母株进行遮光处理有利于抑制褐化,且效果明显.     

豆瓣绿愈伤组织诱导及再生体系的建立

以豆瓣绿的叶片、叶柄及带芽茎段为试材,筛选最佳外植体类型;使用激素6-BA与IBA,选出适宜诱导愈伤组织与芽增殖的培养基;研究活性炭对瓶苗生根的影响,选出适合的生根培养基。结果表明:带芽茎段是诱导愈伤组织的最佳外植体,褐化率仅为6.7%,而叶片和叶柄褐化严重,二者褐化率均超过60%;最佳诱导愈伤组织培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+IBA 0.1mg/L,出愈率100.00%;最佳不定芽增殖培养基为MS+6-BA 0.5mg/L+IBA 0.1mg/L,增殖系数为13.8;最佳生根培养基为1/2MS+IBA 0.2mg/L+活性炭1.00g/L。     

贝克桉组织培养的初步研究

以贝克桉(Eucalyptusbaker)无菌苗的半木质化带未萌发腋芽的茎段为试验材料,用不同消毒处理对贝克桉外植体进行灭菌,并进行愈伤组织及丛生芽产生的初步研究。结果表明:贝克桉茎段外植体洗刷干净后使用75%乙醇溶液灭菌30 s,无菌水冲洗3次,每次3 min;后再用0.1%HgCl2分二步消毒,每次处理2 min,每次消毒后用无菌水冲洗3次,每次3 min。这种处理方法污染率相对较低,褐变程度最小。在改良MS+6-BA 0.2 mg/L+IBA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+卡拉胶6 g/L+AC 2 g/L的培养基上培养1个月后可诱导贝克桉茎段愈伤组织的生成。     

番荔枝组培中的褐化及防止措施研究

对番荔枝组织培养中褐化问题的研究结果表明,选取幼嫩茎段去皮后做外植体,不用20%次氯酸钠而用0.1%升汞消毒,接种前用Na2S2O3浸泡处理,使用1/2 MS培养基,添加聚乙烯吡咯烷酮(PVP)2 g/L,接种后先低温暗培养,培养初期及时转盘(1天一次)可减轻褐化反应.     

金银花的启动培养技术研究

利用忍冬科植物金银花的茎段和茎尖为外植体,进行离体培养,研究其在MS+BA 0.5mg/L+NAA O.1mg/L+琼脂5g/L+糖30g/L的启动培养基中材料的分化、污染、褐化的情况。结果表明,MS为基本培养基在培养中还是可行的,分化效果比较明显。本文从金银花的取材外植体的选择、处理、灭菌、切割和接种、培养等方面阐述金银花启动培养的相关内容,并对遇到的一些褐化、污染、黄叶、死亡问题进行分析介绍,提出相关的解决措施,从而能更好地完成金银花的启动培养,进而实现金银花的苗木快繁。     

苦豆子愈伤组织的诱导及去褐化处理

以苦豆子为试材,采用组织培养的方法,研究了外植体种类、激素水平、水解酪蛋白浓度等不同因子对愈伤组织生长状态的影响,同时对愈伤组织进行了去褐化处理。结果表明:苦豆子子叶为诱导愈伤组织的最佳外植体;最佳诱导培养基为MS+2,4-D 0.5mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA 1.0mg/L;最佳继代培养基为MS+2,4-D 1.0mg/L+6-BA 4.0mg/L+NAA1.0mg/L+CH 1 000mg/L;添加3%蔗糖的条件下快速继代是较好的去褐化措施。     

牡丹‘乌龙捧盛’鳞芽组织培养技术研究

以牡丹鳞芽为试材,分别研究了不同暗处理时间和植物生长调节剂组合对鳞芽褐化与生根的影响。结果表明:在鳞芽初代培养过程中,先暗培养7d,而后转入正常光照培养,可明显减轻鳞芽褐化;诱导根原基形成的最适培养基为:1/2MS+NAA 2.0mg/L+IAA 2.0mg/L+6-BA 0.1mg/L或1/2MS+NAA 1.0mg/L+IBA 1.0mg/L+AC 0.2g/L。     

春兰离体再生体系的研究

以春兰种子为外植体进行再生体系建立试验,采用正交试验方法研究基础培养基、激素浓度、天然添加物对原球茎诱导、增殖、分化的影响,筛选出适合快繁各阶段的培养体系。研究结果表明,种子诱导原球茎的最适培养基为1/2MS+2.0mg/LNAA+0.5mg/L6-BA+蔗糖30g/L+琼脂7.5g/L+活性炭2.0g/L;原球茎增殖培养基为1/2MS+0.5mg/LNAA+2.0mg/L6-BA+100ml/L椰乳+蔗糖30g/L+琼脂7.5g/L+活性炭2.0g/L;原球茎分化培养基为1/2MS+0.5mg/LNAA+1.0mg/L6-BA+0.1mg/LKT+150ml/L椰乳+蔗糖30g/L+琼脂7.5g/L+活性炭2.0g/L。     

山杏愈伤组织诱导及植株再生

以山杏成熟胚和胚乳为外植体,以MS为基本培养基进行组织培养,研究了基于山杏经愈伤组织途径建立的再生植株技术。结果表明:以胚乳为外植体诱导愈伤组织的适宜培养基为MS+6-苄基腺嘌呤(6-BA)1.0mg/L+2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂3g/L;愈伤组织的继代及分化培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+萘乙酸(NAA)0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂3g/L;以成熟胚诱导愈伤组织和丛生芽增殖分化培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂3g/L;生根培养基为1/2MS+NAA 0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂3g/L。     

红掌组织培养过程中外植体褐变的研究

在红掌组织培养过程中,外植体易发生褐变,严重阻碍了红掌组织培养的正常进行。现以红掌‘红粉佳人’(Anthuriumandraeanum cv.Sonate)品种为试材,取健康植株幼嫩叶片为外植体,对其愈伤组织培养过程中褐变现象进行研究。研究不同抗氧化剂、吸附剂(柠檬酸、抗坏血酸VC、叶酸、聚乙烯吡咯烷酮PVP、活性碳AC)以及不同培养基硬度的防褐化效果。结果表明:使用硬度为5 g/L琼脂的MS培养基,并添加6-BA1.0 mg/L+2,4-D0.2 mg/L+聚乙烯吡咯烷酮(PVP)0.2%可有效控制褐变并获得较高的愈伤诱导率。     

仙客来愈伤诱导抗褐化研究

以仙客来（Cyclamen persicum Mill）法国莫莱尓F2代植株为材料,选取同一植株的叶片,叶柄和块茎做为外植体进行愈伤诱导,选取最佳愈伤诱导培养基,针对愈伤诱导过程中出现的褐化问题,从不同方面入手,寻求最佳的褐化控制培养基和培养条件,解决组织培养中褐化问题。结果表明：最佳愈伤诱导培养基是MS＋6-BA（0.5 mg/L）＋2,4-D（2 mg/L）＋KT（0.2mg/L）＋琼脂（9 g/L）＋蔗糖（30 g/L）;最佳褐化控制培养基是在愈伤诱导培养基中添加Vc（2mg/L）或PVP（0.5 mg/L）;暗培养能一定程度上抑制褐化的发生;活性炭虽能抑制褐化但同时也抑制仙客来愈伤组织的生长。     

魔芋浅层液体组织培养体系研究

采用不同激素配比的液体和固体培养基对花魔芋进行了组织培养研究。结果表明：浅层液体培养基在花魔芋组织培养时较固体培养基具有褐变率低、愈伤组织生长速度快、平均出芽数高、根粗壮、成本低等优势;初代培养基应选择MS+6-BA 0.5 mg?L-1+NAA 0.5 mg?L-1+蔗糖3.0 %+0.1 % PVP（pH 5.8）,出芽培养基应选择MS+6-BA 2.0 mg?L-1+NAA 0.5 mg?L-1+蔗糖3.0 %+0.1 % PVP（pH 5.8）,待出芽后转入MS+6-BA 1.0 mg?L-1+NAA 0.5 mg?L-1+蔗糖3.0 %+0.1 % PVP（pH 5.8）,二者交替培养可连续批量获取组培苗,生根培养基应选择1/2MS+IAA 0.5 mg?L-1+蔗糖1.5 %+0.1 % PVP（pH 5.8）。花魔芋愈伤组织继代3次后发现了A型、B型、C型3种愈伤组织,三者在外观、组织结构和分化能力上存在差异,试验和生产上选择A型和B型愈伤组织进行分化培养可得到高效稳定的分化体系。     

罗田甜柿幼胚培养条件的研究

利用 5因素 4水平的正交试验对‘罗田甜柿’幼胚培养条件进行了探讨 ,结果表明 :(1)培养基以MS(1/ 2N)最适 ;(2 )蔗糖浓度以 7%为宜 ;(3)抗褐化剂以活性炭效果最好 ;(4 )最佳激素配比是IBA 0 .3mg/L +Zeatin0 .44mg/L ;(5 )激素种类生长素类以IAA为好 ,细胞分裂素类以Zeatin效果较好 ;(6 )MS(1/ 2N) +IAA 1mg/L +暗处理 4d生根率最高     

黄皮胚培养研究

对黄皮[Clausenalansium(Lour.)Skeels.]3个品种(郁南无核黄皮、鸡心黄皮和甜黄皮)开花后10～60d的幼胚进行了离体培养。结果表明,在WPM+CH0.50g/L+PVP1g/L(或AC0.3%)+AgNO310mg/L+GA30.25mg/L+BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L上,花后10～23d的幼胚只形成愈伤组织,但以花后20d的幼胚愈伤组织形成率最高、褐化率低、生长较旺盛;花后30d的幼胚有11%～26%已能发育成苗,此后幼胚的成苗率随胚龄增加而升高,花后60d幼胚的成苗率在50%～73%。鸡心黄皮的愈伤组织诱导率最高,其次是甜黄皮,无核黄皮最低;无核黄皮愈伤组织褐化率最高,其次是鸡心黄皮,而甜黄皮的最低。在适宜的培养基(WPM+CH0.50g/L+AC0.3%+AgNO310mg/L+GA30.25mg/L+BA1.5mg/L+NAA或IBA1mg/L)上,黄皮愈伤组织能正常继代和增殖,生长调节剂是促进增殖的主要因素,但褐化、生长缓慢、很难分化仍是黄皮组织培养的主要难题。     

绿凤藤茶愈伤组织诱导的初步研究

以藤茶初春萌发的幼嫩枝条为外植体,以MS培养基为基本培养基,研究不同植物生长调节物质、不同碳源和不同碳源浓度对藤茶愈伤组织的诱导效应.结果表明:茎和藤须为外植体,其愈伤组织诱导率较高,且诱导愈伤组织的最适培养基为:MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+PVP 2 g/L.     

Callus induction and culture of Rosa

Leaf and stem explants of Rosa manetti Hort. and R. hybrida L. ‘Tropicana’ were placed on Murashige and Skoog (MS), Schenk and Hildebrandt (SH) and Gamborg and Wetter (1-B5C) media, containing growth regulators, casein hydrolysate (CH) or coconut milk (CM), to determine the optimum conditions for callus initiation and maintenance. The explants were cultured either in dark or in light (2 Klux 16 h/day) at 26±2°C. Friable, fast growing callus was evident after 3 weeks for both rose species on MS + 2.0 mg/l 2,4-D, 0.25 mg/l kinetin (K) and 2.0 g/l CH as well as on SH + 0.5 mg/l 2,4-D, 2.0 mg/l p-CPA and 0.1 mg/l K. Callus initiation occurred sooner on SH than on MS. However, during sub-culture of callus arising on SH, rapid oxidation often occurred, resulting in severe browning of the callus, which made it unsatisfactory for further experimental use. Callus initiation occurred faster in dark than in light, but deteriorated when continuously sub-cultured in the dark regardless of media. Although ‘Tropicana’ initiated callus sooner than R. manetti, very fast growing callus of the latter was obtained when leaf callus was transferred to MS + 2.0 mg/l NAA and 0.5 mg/l BA. Unsuccessful attempts to regenerate callus and induce adventitious shoots on the 2 explants are discussed.     

梨外植体组培褐变的影响因子及预防措施

以鸭梨、黄金梨、阿巴特梨和杜梨为试材,对梨组培过程中影响外植体褐化的因素及防褐措施进行了研究。结果表明,品种、采样时期以及外植体内酚类物质含量等因素都显著地影响材料褐化率。抗褐剂试验表明,培养基中添加0.2g/L的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)或100mg/L抗坏血酸(Vc),或将外植体在200mg/L抗坏血酸水溶液中浸泡30min后接入添加2g/L活性炭的培养基,均能显著抑制鸭梨褐化的发生。低温试验表明,鸭梨外植体经4℃低温处理6h后接种,或接入初期在4℃低温中培养12～24h,褐化程度明显减轻。     

抗褐变剂对阿月浑子外植体褐变以及几种酶活性的影响

为了探明阿月浑子组织培养过程中的褐变机制,以阿月浑子组培丛生芽为外植体,在其继代培养基(1/2DKW)中分别添加抗褐变剂PVP和Cys,分析组培苗叶片、茎段和愈伤组织的总酚含量以及PPO、POD、PAL、C4H酶活性的变化,研究其与褐变的关系。结果表明,在一个继代培养周期内,愈伤组织中PPO活性呈增加趋势,而叶片和茎中PPO活性呈"V"字形变化。POD活性随继代时间增长而逐渐升高,继代28 d后开始下降,愈伤组织中POD活性变化范围较叶片和茎段中要高一个数量级。PAL活性总体呈下降趋势,而C4H酶活性在继代前期上升,继代14 d或21 d后下降。结合相关性分析可知,阿月浑子各组织的总酚含量与褐变率呈显著正相关,并且POD酶在促褐变反应中发挥主要作用。在实验中发现,PVP与Cys虽然对POD、PPO、CH4酶活性也有一定影响,但其主要是通过抑制PAL的酶活性,显著减少了组培苗和愈伤组织的酚类物质含量,从而降低褐变率。     

TDZ诱导中间锦鸡儿植株再生

以中间锦鸡儿种子无菌萌发得茎段为外植体,不同激素组合诱导丛生芽,得出最佳丛生芽诱导培养基为MS+TDZ 0.1 mg/L+NAA 0.02 mg/L+糖30.0 g/L+琼脂9 g/L,芽诱导率达220%。诱导得到的丛生芽直接生根困难,需过渡培养。在培养基MS+BA 0.2 mg/L+NAA 0.4 mg/L+糖30.0 g/L+琼脂9 g/L上过渡培养三代以上后转入生根培养基1/2MS+IAA 0.5 mg/L+糖30.0 g/L+琼脂9 g/L生根,长出的根粗壮,且须根数多,生根率在85%以上。生根培养后在草炭土∶珍珠岩=4∶1的基质上移栽成活率达到80%。