羊超数排卵影响因素的分析

超数排卵(简称超排)是以各种外源性促性腺激素诱发动物卵巢的多个卵泡发育并排出多个具有受精能力卵的过程。超排是胚胎移植最重要的技术环节,对于提高优良母畜的繁殖能力和品种改良具有重要意义,同时也为动物克隆和转基因动物生产等提供卵子和胚胎来源。目前,尽管超数排卵的方法已广泛应用,但超排的胚胎回收率和可用胚胎数还不稳定,影响了胚胎移植的进一步推广和应用。本文通过对超排影响的动物品种、个体差异、激素、超排处理方案、采胚方法、重复超排、年龄、营养状况、季节等诸多因素的分析,旨在为提高动物的超排效率提供借鉴。1影响超…     

羊超数排卵的方法及影响其效果的因素

应用外源促性腺激素诱发母畜卵巢多个卵泡发育并排出具有受精能力的卵子的方法称为超数排卵(superovulation),简称"超排".超排是胚胎移植的重要的技术环节,对于提高优良母畜的繁殖力和品种改良具有重要意义,同时也为动物克隆和转基因动物生产提供卵子和胚胎来源.目前,尽管超排的方法已广泛应用,但超排的效果还不稳定,影响了胚胎移植的进一步推广和应用.     

牛超数排卵的常用方法及超排措施

超数排卵（superovulation）简称超排，是指在母牛发情周期中适时为其注射促性腺激素，而促使母牛卵巢比自然状态下有更多的卵泡发育并排出成卵的技术。使用激素类药物对动物进行超数排卵是进行胚胎移植、转基因等研究的方法之一，通过超数排卵可以获得大量成熟的卵子。尽管目前超排的方法已被广泛应用，但超排产生的胚胎依然有20％左右而不能用于移植。究其原因是现有的超排方法获卵率和可用的胚胎质量还不十分稳定，这严重阻碍了该项技术的推广应用。本文意在探讨超数排卵的方法和提高超排效果的技术措施，以为畜牧业生产提供技术指导。     

激素剂量、超排间隔及重复超排次数对和牛重复超排效果的影响

试验旨在探讨激素剂量、超排间隔及重复超排次数对和牛重复超排效果的影响，为建立稳定、高效的和牛供体重复超排方案提供依据。本试验共选取63头15~18月龄的和牛供体母牛进行超排处理，其中17头和牛供体随机分成2组，分别以200、200、200 mg的FSH注射总剂量和200、220、240 mg的FSH注射总剂量进行3次重复超排，每次超排间隔30 d，研究激素剂量对和牛重复超排的影响；24头和牛供体随机分成3组，每组分别以60、45、30 d的超排间隔，每次200 mg的FSH注射总剂量进行3次重复超排，研究超排间隔对和牛重复超排的影响；22头和牛供体采用每次200 mg的FSH注射总剂量进行连续7次重复超排，每次超排间隔30 d，研究重复超排次数对和牛重复超排的影响。结果显示，采用FSH注射总剂量为200、220、240 mg获得的头均胚胎总数和头均可用胚胎数显著高于每次均为200 mg的FSH注射总剂量（P<0.05）；与超排间隔60 d组相比，超排间隔45 d组获得的头均可用胚胎数显著降低（P<0.05），而超排间隔30 d组获得的头均可用胚胎数也降低，但差异不显著（P>0.05）；重复超排在6次以内，获得的头均可用胚胎数无显著差异（P>0.05）。结果表明，注射FSH总剂量为200、220、240 mg连续超排3次的超排效果优于注射FSH总剂量为200、200、200 mg组；超排间隔越长，越有利于母牛生殖道的恢复，获得的可用胚胎数越多，但超排间隔30 d，也可获得良好的超排效果；高强度重复超排以30 d为超排间隔，超排5~6次为宜。     

西门塔尔牛短期重复超排效果与分析

为研究西门塔尔牛短期重复超排效果,对6头优秀西门塔尔母牛进行重复超数排卵试验。第1次超排获得胚胎73枚,其中可用胚胎49枚;间隔30 d后,第2次超排,获得胚胎69枚,其中可用胚胎45枚。结果表明,对西门塔尔母牛进行重复超排对母牛的繁殖性能没有造成明显影响,两次超排结果差异不显著(P>0.05)。说明母牛经过1个情期的生殖与体况的恢复,其卵巢机能基本恢复到超排前的状态,重复超排是可行的。     

长白猪和哈白猪超数排卵的研究

近几十年来，对单胎家畜的超排研究较为深入。但对猪超排研究相对较少，其超数排卵的意义也远不如单胎动物大，但猪却能给生物技术研究提供大量的胚胎。近年来，随着细胞核移植技术在畜牧科研和生产上的应用，猪的超数排卵技术开始受到应有的重视。此次试验对长白猪和哈白猪进行了超数排卵研究，其目的是建立有效的猪超数排卵技术，为进一步做好猪胚胎生物工程研究提供必要的方法和数据；为猪的细胞核移植研究，提供尽可能多的卵母细胞和胚胎。     

猪胚胎移植

近二十年来,猪的胚胎移植作为试验手段被成功地应用于猪的繁殖生理和早期妊娠的各项研究中。由于猪排卵率高,在家畜中,猪是为体外试验提供卵子和胚胎的良好供体。现在的胚胎采集和移植技术简便而有效,因此在猪的育种中对这项技术也很感兴趣,应用胚胎移植技术可把新的遗传物质引入以控制疫病为目的的封闭猪群中,可用来提高优良种猪的繁殖效率和进行国际间的胚胎交换。超数排卵当供体需要超排时,最好在卵泡期早期(即发情开始后15或16天)以促性腺激素,像孕马血清促性腺激素(PMSG)处     

奶牛超数排卵的研究（第二报）

奶牛超数排卵是胚胎移植最重要的基础环节。只有稳定的超排方法才能提供充足的卵源,从而加速胚胎移植技术在生产中的应用。长期以来,许多人对牛的超排方法和影响超排效果的若干因素进行过大量研究,但超排效果仍不稳定,个体间存在明显的差异性。就一局部地区而言,寻找一种适合于当地条件、超排效果相对稳定的处理程序和方法,已是人们极为关注的研究课题。本试验目的是研究不同激素制剂处理方法,不同年龄和重复处理等因素对奶牛超排效果的影响,在1988年采卵供体平均获可用胚胎5.0枚的基础上,1989年采用较合理的超排处理方案,使每头采卵供体得可用胚胎提高到6.10枚,为探讨效果稳定的超排方法提供了依据。     

牛胚胎移植产业化超数排卵的系统研究

为了提高供体牛的利用率,加速胚胎移植技术的产业化,试验系统地研究了超排方案、青年奶牛的月龄及发情周期不同阶段、重复超排次数、超排间隔时间、卵巢状态、胎次与产后间隔时间对超排效果的影响,共超排供体奶牛1 127头次,回收胚胎共10 900枚,可用胚胎数量为6 942枚,平均每头次获得胚胎数量为6.73枚.结果表明:①应用PSO1、PSO2和 PSO3三种方案进行超排处理,PSO3方案的超排成功率和平均回收可用胚胎数均高于其他两个方案;②利用发情周期9～11 d的自然发情奶牛直接超排效果最好;③对青年奶牛进行超排处理,应限制超排起始时间,15月龄以上的青年奶牛超排效果较好;④供体牛连续重复超排控制在3次以内,连续4次超排处理后极大降低胚胎可用率;⑤超排处理的间隔最短时间应该选择46～60 d;⑥经产牛1～3胎次超排效果较好,7胎次以上较差;⑦产后间隔时间选取80～90 d.     

牛超数排卵技术的研究

对试验牛采用不同的超数排卵方法,结果显示,FSH+PG法所获得的A级胚胎高于PMSG+PG+ANTI-PMSG和PMSG+PG法(P>0.05);而且前者残留的卵泡数也明显低于后两者(P<0.01)。试验中,超排方法采用了低剂量FSH(4mg,5d10次)也能获得较好的超排效果。在超短期重复超排次数和重复超排间隔对受体牛超排效果的影响,是连续重复超排次数控制在3次以内,第4次超排处理效果显著降低,不适宜对供体超排。对不同超排处理的间隔时间进行比较,间隔时间适当延长为46～60d后,平均可用胚胎数显著提高,而回收胚胎总数没有显著差异。     

影响山羊超数排卵的因素

超数排卵是山羊胚胎移植技术中的关键环节,是胚胎移植所需胚胎的主要来源。山羊多采用以孕酮类阴道栓同期发情为基础的超数排卵方案,山羊超数排卵和胚胎移植的成功依赖于一套完善、成熟的技术体系,是一项严密的系统工程。掌握影响山羊超数排卵的因素非常重要,论文就不同激素、季节、年龄和重复超排等因素对山羊超排效果的影响做一综述。     

Anti-Muellerian hormone levels in plasma of Holstein-Friesian heifers as a predictive parameter for ovum pick-up and embryo production outcomes

The aim of this study was to investigate whether plasma anti-Muellerian hormone (AMH) levels of Holstein-Friesian heifers could be used to predict ovum pick-up (OPU) and embryo production outcomes. Plasma samples and data were collected from 64 heifers, which underwent repeated OPU with subsequent in vitro embryo production followed by embryo flushing after superovulation. AMH levels were significantly positively correlated with the number of follicles aspirated per OPU session (r = 0.45), recovered oocytes per OPU (r =0.43) and in vitro produced embryos per OPU (r = 0.28). No significant correlations between AMH and in vivo produced embryos were ascertained. Our results suggest that correlations between AMH and outcomes of an OPU-IVF program are too low to use AMH as a precise predictive parameter for the success of a particular OPU procedure in Holstein-Friesian heifers. However, AMH can help to identify groups of very good or very poor oocyte donors.     

连续重复超数排卵、冲胚对引进品种肉羊快速扩繁的效果研究

[目的] 评价引进品种肉羊的连续重复超数排卵（超排）、冲胚、胚胎移植等繁育技术集成模式的应用效果。[方法] 于2016—2018年,对选取的1 575只澳洲白（n=230）、白头杜泊（n=228）、黑头杜泊（n=541）、白头萨福克（n=200）、黑头萨福克（n=376）5个品种母羊,进行间隔30 d以上的连续同期发情（孕酮海绵栓）与超排（330~450 IU FSH+200~300 IU PMSG+0.1 mg PG）处理;经过腹腔内窥镜输精后进行子宫角冲胚,回收胚胎后计数并评估质量,挑取部分胚胎进行移植;对比分析品种、季节、重复超排次数等对胚胎生产指标的影响。[结果] 共获得18 496枚胚胎,有14 971枚可用胚;胚胎移植后的受胎率为69.8%,产羔率为93.2%;只均总胚数和只均可用胚数2项指标显示,胚胎生产特性以白头萨福克、黑头萨福克、黑头杜泊较好,澳洲白次之,白头杜泊最差;不同品种母羊连续重复超排冲胚后回收的只均总胚数和只均可用胚数持续增长,直到第4或第5次;澳洲白的超排冲胚效果在春季较好,而其他品种在冬季较好。[结论] 连续重复超数排卵、冲胚技术对于扩繁引进肉羊品种群体是可行的,应根据不同品种及其表现出的季节特性科学、适时应用。     

重复超排对育成牛繁殖力影响的研究

实验探讨了重复超排对育成牛繁殖力的影响。结果表明:(1)经1～3次重复超排后14～16月龄育成荷斯坦牛自然发情后人工授精(3次以内),超排1次组、超排2次组和超排3次组妊娠率分别为96.25%、91.67%和95.29%,与对照组(未超排组)妊娠率为94.74%均无显著差异(P>0.05)(;2)超排处理后恢复期为5～10d组的妊娠率为50.0%,低于恢复期为30～40d组66.67%和恢复60～80d组60.47%的移植妊娠率,但差异不显著(P>0.05);(3)不同超排次数胚胎移植妊娠率分别为超排1～2次组63.27%、3～4次组61.11%、5～6次组57.14%,差异不显著(P>0.05)。重复超排后奶牛胚胎移植妊娠率随超排次数的增加有下降趋势,但与对照组(未超排组)62.50%的妊娠率无显著差异。     

和牛杂交牛高强度重复超排效果的研究

为研究和牛杂交牛短期内重复超排效果,自2011年6月至2011年8月对100头和牛杂交牛连续进行了3次重复超排。结果发现,3次超排获得回收胚平均数分别为11.65±8.96、13.28±7.69、13.24±8.39枚;可用胚平均数分别为7.52±7.16、8.51±6.94和8.92±6.59枚。试验结果表明,对和牛杂交牛进行间隔为33 d的连续3次超排,能够获得较好的超排效果,且个体差异是影响超排效果的主要因素;育成牛超排有效率稍高于经产牛(P>0.05),但可用胚平均数显著低于经产牛(P<0.05)。     

FSH injections and intrauterine insemination in protocols for superovulation of ewes

In Exp. 1, five injections of crude FSH (20 mg total), starting 36 h before removal of progestin pessaries or injection of prostaglandin F2 alpha (PGF2 alpha), were found to be as effective for superovulation of ewes as seven injections starting 72 h before removal of pessaries. Seven injections caused superovulation (more than three ovulations) in 13 of 15 ewes with an average (all ewes) of 12 +/- 2.3 ovulations. Five injections caused superovulation in 17 of 19 ewes with an average of 11.5 +/- 1.6 ovulations after pessary-regulated estrus in 12 of 16 ewes with an average of 12.4 +/- 2.2 ovulations after PGF2 alpha injection. In Exp. 2, intrauterine artificial insemination (IUAI) of naturally mated ewes provided ovum fertilization rates of 75.3% with an embryo recovery rate of 39.4%, whereas mating alone (MATED) provided fertilization rates of 64.2% with an embryo recovery rate of 72.1%. However, subsequent replications of the MATED protocol (MATED2) resulted in a low fertilization rate (34.2%). In Exp. 3, surgical IUAI at 22 h after removal of pessaries resulted in a low rate of superovulation (5 of 12 ewes), presumably as the result of pentobarbital anesthesia. Conducting IUAI at 46 h after removal of pessaries resulted in a high rate of superovulation (14 of 16 ewes) but a low embryo recovery rate (30.7%). In two subsequent trials, IUAI at 40 h after removal of pessaries resulted in most ewes superovulating (33 of 35 in April/May and 16 of 17 in September) with acceptable embryo recovery (65.2% and 71.3%) and high fertilization rates (82.8% and 96.4%).(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)     

Nutrition and Early Embryonic Development

The -purpose of this paper is to examine mainly the role of energy intake on early embryo development. It has been shown that reduced energy intake can alter follicle growth patterns whereby follicle size is reduced and animals will have more waves of follicle growth throughout the cycle. In addition several studies have shown that high concentrate intake prior to or during superovulation will lead to reduced follicular growth and poorer embryo quality in beef heifers. In addition embryos recovered from animals on lower intakes have a better capacity to develop in short term culture in vitro. With a model using ovum pickup and in vitro maturation, fertilization and culture, it has not been possible to demonstrate clearly if the nutritional damage occurs prior to or after fertilization.     

比利时蓝白花肉牛重复超排试验

为探讨多次重复超排的效果,自2002年10月至2004年10月对9头比利时蓝白花供体肉牛共进行8次重复超排。结果累计生产可用胚胎349枚,平均每头次5.5枚。每批获可用胚胎数依次为38、45、37、42、55、50、43、39枚,可用胚数并未随超排次数的增加而呈现逐渐下降趋势,说明比利时蓝白花肉牛以3个月的间隔连续8次重复超排是可行的。     

娟姗青年母牛超数排卵及冻胚移植效果试验报告

2005年3月至7月,在广西地区选择25头娟姗母牛作为供体,用不同厂家、不同剂量的促排卵激素进行超排和重复超排,观察了超排及重复超排效果.结果25头供体共采卵46头次,排卵数502枚,回收到278枚胚胎,采卵率为55.4%,获得207枚可用胚胎,平均4.5枚/头次,可用胚率为74.5%;与此同时在2005年4月至2006年1月,开展了娟姗牛冷冻胚胎的移植工作,对185头本地黄母牛和杂交母牛进行了同期发情处理,结果共有166头发情,其中113头可移植,同期发情率为89.7%,可移植率为61.1%.113头可移植牛移植2个月后,经妊娠检查共有47头怀孕,移植妊娠率为41.6%.     

Manipulation of follicle development to ensure optimal oocyte quality and conception rates in cattle

Over the last several decades, a number of therapies have been developed that manipulate ovarian follicle growth to improve oocyte quality and conception rates in cattle. Various strategies have been proposed to improve the responses to reproductive biotechnologies following timed artificial insemination (TAI), superovulation (SOV) or ovum pickup (OPU) programmes. During TAI protocols, final follicular growth and size of the ovulatory follicle are key factors that may significantly influence oocyte quality, ovulation, the uterine environment and consequently pregnancy outcomes. Progesterone concentrations during SOV protocols influence follicular growth, oocyte quality and embryo quality; therefore, several adjustments to SOV protocols have been proposed depending on the animal category and breed. In addition, the success of in vitro embryo production is directly related to the number and quality of cumulus oocyte complexes harvested by OPU. Control of follicle development has a significant impact on the OPU outcome. This article discusses a number of key points related to the manipulation of ovarian follicular growth to maximize oocyte quality and improve conception rates following TAI and embryo transfer of in vivo- and in vitro-derived embryos in cattle.