蜂王浆中的Royalactin具有维持胚胎干细胞多能性和自我更新的作用

蜂王浆是哺育工蜂的咽下腺和上颚腺分泌的、用以饲喂蜂王和小幼虫的浆状物质。蜂王浆的化学组成复杂,生物学活性丰富而显著,通常认为蜂王浆中的脂肪酸和王浆主蛋白是蜂王浆的主要活性成分。1992年,Hanes和Simuth首先发现蜂王浆中一种相对分子量为57kDa的蛋白质,将其命名为“王浆主蛋白”(MRJP)。至今,已经从意蜂王浆蛋白中提取分离出9种王浆主蛋白(MRJP1~MRJP9)。     

蜂王浆的质量如何保证

蜂王浆的质量应分 :(1)蜂王浆的营养质量 ;(2 )蜂王浆的卫生质量。由于蜂王浆成分很特殊 ,内含大量活性蛋白 ,如Ｙ球蛋白、ＳＯＤ、类胰岛素、酶类物质、活性多肽 ,这些活性蛋白是蜂王浆的主要成分 ,起着调节人体生理功能 ,防治人体代谢紊乱而引起的老年常见病等主要作用。但是这些活性蛋白必须在零度以下低温保存 ,如ＳＯＤ在 5℃冰箱中保存 10天则会全部消失 ,所以蜂王浆离开蜂箱后必须在 2小时以内进入低温冰箱 ,才能保证质量。有人说王浆掺假是王浆主要问题 ,如果王浆中掺淀粉 ,掺玉米面 ,用碘酒一试就可鉴别 ,碘酒遇淀粉类物质就会变蓝…     

蜂王浆主蛋白2在昆虫细胞-杆状病毒系统中的表达与鉴定

本研究旨在利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统表达蜂王浆主蛋白2（MRJP2）,为后续MRJP2功能的深入研究提供材料。根据GenBank中意大利蜜蜂（Apis mellifera L.）MRJP2基因序列,经PCR扩增、克隆至真核表达载体pFastBac1,构建重组杆状病毒质粒MRJP2-Bacmid并转染至Sf9昆虫细胞,以P2代杆状病毒感染Sf9细胞进行诱导表达,利用层析柱和离子交换柱对表达产物进行纯化,并通过SDS-PAGE、Western blotting及四极杆静电场轨道阱高分辨质谱仪（Q Exactive）对目的蛋白进行分析验证。结果显示,本试验成功构建杆状病毒质粒MRJP2-Bacmid,转染至Sf9昆虫细胞并获得表达产物。SDS-PAGE和Western blotting验证结果表明,本研究成功利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统表达出大小约为52 ku的MRJP2重组蛋白,且纯度较高;质谱分析结果显示,该重组蛋白匹配到蜜蜂蛋白质数据库中MRJP2的特异性肽段为39个,序列覆盖率为61%,且与MRJP2的匹配得分最高,进一步确认该重组蛋白为MRJP2。本研究利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统成功表达出MRJP2,为后续该蛋白生物学功能的深入研究奠定了基础。     

七十年代以来蜂王浆研究的进展(续)

王浆的药理作用王浆具有广泛的药理作用,它能增强机体对物理性、化学性和生物性致病因素的抵抗力,增强机体的免疫功能,促进组织再生修复,调整内分泌和代谢功能,改善重要脏器的机能,具有抗菌作用,抑制实验性肿瘤生长等。近年,王浆的药理研究又取得了一些新的进展。     

中华蜜蜂王浆蛋白MRJP5的结构分析与功能预测

调用motif数据库、profile数据库和inter—proscan数据库,对中蜂王浆蛋白MRJP5进行了序列同源性分析和功能位点分析。结果表明：MRJP5是分泌蛋白,理论等电点为8．05,分子量为70522。应用多种相关软件对MRJP5的二级结构和特殊结构进行了初步预测,结果显示：MRJP5存在d螺旋、B折叠和无规则卷曲,有3个可形成跨膜结构的片段,有卷曲螺旋和信号肽。MRJP5属于MRJPs大家族成员,与该家族其他成员序列有较高的相似性。MRJP5存在N端糖基化位点、蛋白激酶C磷酸化位点、酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、N端豆蔻酰化位点等。这些为该基因的功能研究提供了重要的依据。     

蚕学外文学术论文摘要选译

<正>1.Zhengying You,Qiujie Qian,Yiran Wang,Jiaqian Che,Lupeng Ye,Lirong Shen,Boxiong Zhong.Transgenic silkworms secrete the recombinant glycosylated MRJP1protein of Chinese honeybee.Apis cerana cerana.Transgenic Res.DOI:10.1007/s11248-017-0034-1(2017).[题目]转基因家蚕分泌中华蜜蜂重组型糖基化蜂王浆蛋白1(MRJP1)[摘要]蜂王浆蛋白1(MRJP1)是蜂王浆(RJ)中最丰富的糖蛋白,它被认为是功能性食品的潜在     

抗菌肽的研究进展

生物体内广泛存在一种具有抗菌作用的活性多肽,被称为抗菌肽(antimicrobial peptides),它是生物非特异性防御系统的免疫应答产物,具有广谱抗菌活性,不仅可以抑制多种细菌或真菌,甚至可以在不伤及正常细胞的情况下抑制动物体内的肿瘤细胞.因此,抗菌肽的研究已成为基因工程、药物开发等领域的研究热点,具有着极为广阔的市场应用前景.     

蜂王浆促细胞生长作用的研究进展

蜂王浆具有丰富的药理活性特性,其重要组分10-HDA和王浆主蛋白都发挥着重要作用。归纳和总结了蜂王浆的各种成分在促进细胞生长方面的研究现状。     

合成绵羊抗菌肽NK-Lysin抗菌活性及其对雏鸡沙门氏菌攻毒的治疗效果研究

为了研究绵羊抗菌肽NK-Lysin主要活性区的生物学功能,试验设计并合成了3对功能区多肽片段,并利用径向扩散试验和最小抑菌浓度对其抗菌活性进行检测,分析了合成多肽对鸡血红细胞的毒性作用,筛选出抗菌效果最好的多肽对沙门氏菌攻毒的雏鸡进行治疗,检测其治疗效果。结果表明,合成多肽对大肠杆菌、沙门氏菌具有抑制活性,多肽片段长度、多肽C-端有无酰胺化及多肽内的二硫键是否成环对多肽的抗菌活性均有影响;筛选出的2个多肽在治疗雏鸡沙门氏菌攻毒的过程中能够明显降低死亡率,对雏鸡心脏、肝脏、肾脏的病理损伤也明显小于对照组。本研究结果为绵羊抗菌肽NK-Lysin作为候选抗菌药物的开发奠定了基础。     

抗菌肽的研究概况

抗菌肽(Antimicrobial Peptides)是具有抗菌活性短肽的总称,是生物体内存在的一种具有抗菌活性的小分子蛋白,是生物体免疫防御系统产生的一类对抗外源性病原体致病作用的防御性多肽活性物质,是生物体先天免疫的重要组成部分.抗菌肽已成为免疫学和分子生物学研究的热点,目前已发现抗菌肽或类似抗菌肽的小分子肽类广泛存在于生物界,包括细菌、动植物和人类.这种内源性的抗菌肽经诱导合成,在机体抵抗病原的入侵力面起着重要作用,被认为是缺乏特异性免疫功能生物的重要防御成分.至今已有880多种抗菌肽被鉴定或核酸序列被预告,包括多种无脊椎动物、植物和哺乳动物的许多组织和细胞,某一细胞因子和化学激活剂,选择性神经肽和肽激素,较大蛋白的碎片产生的抗菌肽[1].     

中蜂蜂蜜和意蜂蜂蜜实时荧光PCR法鉴别及其应用

中国蜂蜜主要分为中蜂蜂蜜和意蜂蜂蜜两种,分别由中蜂和意蜂酿造而成。中蜂蜂蜜营养价值高,保健功能好,但是由于产量低,价格是意蜂蜂蜜的3~5倍。一些不法企业和养蜂人趁机将意蜂蜂蜜假冒中蜂蜂蜜销售,或将意蜂蜂蜜掺入到中蜂蜂蜜中以次充好。因此,如何鉴别中蜂蜂蜜和意蜂蜂蜜是当前蜂产品行业面临的一大难题。本研究以MRJP2(Major Royal Jelly Protein 2)为靶标基因,分别设计了针对中蜂和意蜂的特异性引物和探针,开发了实时荧光PCR-Taqman探针法,并对该方法的特异性和灵敏度进行了分析。结果显示该方法可以特异性的区分中蜂蜂蜜和意蜂蜂蜜;对意蜂蜂蜜DNA的最低检测限达到0.05ng,对中蜂蜂蜜DNA的最低检测限达到0.01ng;对市售中蜂蜂蜜进行真实性摸底调查发现约37%样品为中蜂蜂蜜,其余样品均含有意蜂蜂蜜成分。综上所述,中蜂蜂蜜掺假现象严重,实时荧光PCR方法检测灵敏度高、特异性强、操作简便快速,可为中蜂蜂蜜掺假问题提供技术支持。     

不同蜜粉源植物蜂王浆抗菌作用的初步研究

采用抑菌圈实验方法测定不同蜜粉源植物蜂王浆对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的抑菌作用。试验用蜂王浆分别是产浆型意蜂和产蜜型意蜂所产的油菜蜂王浆和荆条蜂王浆;受试菌株包括革兰氏阳性细菌(金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌)和革兰氏阴性细菌(沙门氏菌和大肠杆菌)。研究结果显示:油菜蜂王浆对革兰氏阳性菌有明显的抗菌作用,且产浆型意蜂所产的油菜蜂王浆对受试细菌的抑菌效果优于产蜜型意蜂品系所产油菜蜂王浆,两种意大利蜂所产的油菜蜂王浆对金黄色葡萄球菌的抗菌作用优于枯草芽孢杆菌;油菜蜂王浆对革兰氏阴性菌的抑菌作用也较强,两种蜂王浆对沙门氏菌的抑菌效果优于大肠杆菌;产浆型意蜂所产的荆条蜂王浆对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑菌效果均高于产蜜型意蜂所产的荆条蜂王浆,然而,二者的抑菌效果弱于油菜蜂王浆。研究表明,不同蜜粉源植物的蜂王浆抗菌效果不同,油菜蜂王浆对受试革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的抗菌效果均比荆条蜂王浆强,产浆型意蜂所产的蜂王浆对受试菌的抗菌效果优于产蜜型意蜂所产的蜂王浆。     

免疫活性肽的研究进展

免疫活性肽是源于蛋白质的多功能化合物,具有促进和调节免疫功能的作用;其以活性高、来源广、稳定性强等优点受到国内外的广泛关注,并进行了大量的探究与试验。作者对不同来源的各种活性肽作一概述。     

蜂王浆中提高小白鼠肝脏谷胱甘肽(GSH)含量活性组分的研究

蜂王浆中特殊功能的活性组分的分离与制备,对于蜂王浆的深加工开发利用具有重要价值。本研究利用膜分离技术从蜂王浆中分离出5种分子量大小不同的组分,通过建立小白鼠酒精肝损伤模型,分别给小鼠饲喂蜂王浆和蜂王浆的不同组分一个月,检测小白鼠肝脏谷胱甘肽(GSH)的含量。结果表明,极显著地提高GSH含量的功能蜂王浆中具有提高肝脏谷胱甘肽(GSH)含量的活性组分。     

不同蜂花粉对西方蜜蜂蜂王浆主蛋白基因表达及蜂王浆产量、质量和组成的影响

本试验旨在研究不同蜂花粉对西方蜜蜂(Apis mellifera)蜂王浆主蛋白基因(mrjps)表达及蜂王浆产量、质量和组成的影响。选取蜂王、群势基本一致的意大利蜜蜂9群,随机分为3个组,每组3群蜜蜂:油菜花粉组,饲喂油菜花粉;土连翘花粉组,饲喂土连翘花粉;对照组,不饲喂花粉,自然采粉(主要为鬼针草花粉)。试验周期为2个月,试验时间为2017年9月中旬至11月中旬。利用凯氏定氮法和水解法分别检测油菜花粉、土连翘花粉和鬼针草花粉粗蛋白质含量和氨基酸组成与含量;每组选3只9日龄工蜂进行mrjp1~mrjp9和黄体基因e3(yellow⁃e3)相对表达量的检测;检测各组蜂王浆产量、质量及水溶性蛋白和氨基酸组成与含量。结果显示:3种蜂花粉粗蛋白质含量、总氨基酸含量均为油菜花粉>土连翘花粉>鬼针草花粉,且组间差异显著(P<0.05),3种蜂花粉单一氨基酸(组氨酸除外)含量也表现为油菜花粉>土连翘花粉>鬼针草花粉,且组间差异显著(P<0.05)。在9日龄工蜂头部,mrjp1、mrjp2、mrjp3、mrjp4、mrjp5和mrjp7相对高表达,mrjp6、mrjp8和mrjp9相对低表达,油菜花粉组、土连翘花粉组和对照组mrjp1、mrjp2、mrjp3、mrjp4、mrjp5和mrjp7的相对表达量之和分别占mrjps总相对表达量的99.94%、99.94%和98.60%。与对照组相比,饲喂油菜花粉和土连翘花粉显著提高了mrjp1、mrjp2、mrjp3、mrjp4、mrjp5、mrjp7和yellow⁃e3的相对表达量(P<0.05),且油菜花粉组上述基因的相对表达量显著高于土连翘花粉组(P<0.05);饲喂油菜花粉和土连翘花粉显著降低了mrjp6、mrjp8、mrjp9的相对表达量(P<0.05)。油菜花粉组蜂王浆产量最高,其次为土连翘花粉组,对照组最低,各组之间差异显著(P<0.05)。油菜花粉组和土连翘花粉组蜂王浆的质量与对照组相比无显著差异(P>0.05)。3组蜜蜂所产蜂王浆水溶性蛋白和氨基酸组成基本一致。综上所述,不同粗蛋白质含量的蜂花粉对西方蜜蜂mrjps基因的表达及蜂王浆产量的影响不同,对蜂王浆质量和组成的影响不大。3组蜂群相比,采食油菜花粉组具有营养功能的mrjps基因的相对表达量和蜂王浆产量最高。由此可见,对于西方蜜蜂繁育或蜂王浆生产,油菜花粉可作为一种优质的营养饲料。     

Antimicrobial Activity of Synthesized Sheep NK-Lysin Peptides and Its Treatment for Chicken Salmonella Challenge

In order to study the biological function of the main active region of sheep antimicrobial peptide NK-Lysin, three pairs of functional domain peptide fragments were designed and synthesized the antibacterial activity was detected by radial diffusion test and minimal inhibitory concentration. We analyzed the toxic effects of chicken red blood cells and screen the best peptides for treatment chicken challenged by Salmonella pullorum in this study. The rusults showed that synthesized peptides were inhibitory to Escherichia coli and Salmonella pullorum. Fragment length of peptides, C-terminal amidation and peptide inner loop were essential to antibacterial activity. Two of synthesized peptides were used to treat chichen challenged by Salmonella pullorum which obviously decreased the mortality of chicken. The pathological damage of heart,liver,kidney were less than that of control group. This study laid a foundation for the development of the sheep NK-Lysin peptides as candidate antimicrobial agents.     

不同品种家蚕滞育蛹抗菌活性物质的抗菌性能研究

对家蚕滞育蛹抗菌活性物质的性质进行研究,并对不同家蚕品种滞育蛹之间的抗菌肽的性能进行比较。结果表明:家蚕滞育蛹血淋巴抗菌活性物质具有较强的热稳定性和较好的耐酸性。诱导雄蛹产生的抗菌活性物质的抗菌活性要高于雌蛹,家蚕滞育蛹对柞蚕链球菌(1212)的抵御性较其他诱导源强,不同品种家蚕滞育蛹诱导后产生的抗菌活性物质的抑菌活性可能与其品种的特有属性有关。