患白点病条石鲷继发感染出血病病原的分离与鉴定

从患刺激隐核虫继发感染出血病的条石鲷上分离到2株细菌L1和L2,人工感染实验证实L1和L2均对条石鲷具有高致病性。对菌株L1和L2进行了形态和生理生化鉴定,结果表明L1和L2为同一种细菌,为革兰氏阴性菌,发酵葡萄糖,氧化酶阳性,在无盐NaCl胨水中不生长,赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶阳性,精氨酸双水解酶、精氨酸脱羧酶阴性;发酵葡萄糖产酸不产气;硝酸盐还原、明胶酶为阳性;利用葡萄糖、甘露醇、甘露糖、蔗糖,不利用阿拉伯糖、乳糖、纤维二糖、肌醇、枸橼酸盐、水杨素等;七叶苷、MR为阴性,VP阳性,产生吲哚,不产生H2S,可鉴定为溶藻弧菌(V.alginolyticus)。     

蟹源温和气单胞菌的分离及鉴定

从中华绒螯蟹中分离到一株温和气单胞菌，定名为CAS—l菌株，经常规菌种鉴定和SWF(A)菌鉴系统鉴定，主要特性为革兰氏阴性，具动力短杆菌，氧化酶、触酶阳性，发酵葡萄糖产酸产气，鸟氨酸脱羧酶、赖氨酸脱羧酶、精氨酸双水解酶、苯丙氨酸脱氨酶阴性，蔗糖、甘露酵、β—半乳糖苷酶反应阳性，肌醇、山梨醇、昆李糖、七叶苷反应阴性，菌株培养物县溶血性毒素。     

一株斑点叉尾致病菌的分离鉴定

从斑点叉尾(Ictalurus punctatus)肝脏分离到的一株细菌GD091027,对该菌进行人工感染试验、生理生化特性测定和16S rRNA序列测定并构建系统发育树,同时进行了抗菌药物敏感性试验。结果显示:当人工感染剂量大于1.0×107 CFU/尾时,能引起斑点叉尾100%发病死亡,对斑点叉尾的LD50为6.2×104 CFU/g。分离株GD091027为革兰氏阴性短杆菌,氧化酶阴性,在25℃、35℃均有运动性,能耐3%的NaCl,不发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、D-甘露醇及L-阿拉伯糖,不利用西蒙氏柠檬酸盐,不利用丙二酸,赖氨酸脱羧酶和鸟氨酸脱羧酶阳性,产生硫化氢和吲哚,甲基红(MR)试验阴性。在16S rRNA系统发育树中,该菌与迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)聚为一分支。分离株GD091027对氨苄西林、庆大霉素、妥布霉素等16种抗菌药物敏感,利福平、青霉素等3种抗菌药物不敏感。除不产生溶血、不发酵葡萄糖和麦芽糖、甲基红(MR)试验阴性外,病原菌形态及生理生化特征符合迟缓爱德华氏菌,结合16S rRNA序列分析结果将其鉴定为迟缓爱德华氏菌。     

恶臭假单胞菌引起的欧洲鳗鲡烂鳃病

从患烂鳃病的病鳗分离到多株细菌,其中三株经人工感染证实为病原菌、经重理、生化等测试鉴定为恶臭假单胞菌。其主要特征为革兰氏阴性、具动力的短杆菌;氧化酶、过氧化氢酶、枸橼酸盐利用、精氨酸双水解酶阳性;硝酸盐还原,鸟氨酸脱羧酶、赖氨酸脱羧酶、明胶酶、尿素酶、V－P反应、吲哚反应阴性。对氟哌酸、妥布霉素、卡那霉素、庆大霉素敏感。     

大西洋鲑杀鲑气单胞菌的分离鉴定

从皮肤溃烂的大西洋鲑(Salmon salar)肌肉、肝、肾分离到一致病性的菌株(AB080226),经人工感染实验证实其为该病的病原菌,研究了该菌的形态、生理生化特征并对其16SrDNA序列进行了在线Classifer和Blast分析。结果显示:该菌为革兰氏阴性杆菌,葡萄糖氧化发酵阳性,氧化酶检测阳性,0%NaCl生长;能利用甘露醇,不具运动性,能发酵麦芽糖,葡萄糖产酸阳性,精氨酸双水解酶阳性,苯丙氨酸脱氨酶阴性;该菌属于气单胞菌属的细菌,在系统发育树上与杀鲑气单胞菌形成一个簇群,同源性高达99.9%以上。综合形态学、生理生化特征及16SrDNA序列鉴定其为杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)。     

锯缘青蟹细菌性传染病的病原菌研究

从宁波市锯缘青蟹（Scylla serrata)主要养殖海区5－9月间不同症状的病蟹体内分离到6株细菌，S9901、S9902、S9903、S9905和S9906，经感染试验确定S9902、S9903、S9905和S9906均为病原菌；此4株菌革兰氏染色阴性，具1根极生鞭毛，氧化酶反应阳性，发酵葡萄糖，不产气，不发酵肌醇，对0／129试剂敏感，为弧菌属种类；经赖氨酸、精氨酸、鸟氨酸脱羧酶、蔗糖、甘露醇发酵、6％氯化钠胨水生长、水杨素、枸橼酸盐利用等试验，根据第二代YGZ－9V系统，分别将其归为辛辛那提弧菌、溶藻弧菌和副溶血弧菌。4株菌对氯霉素、环丙沙星和硫酸庆大霉素等抗菌素表现出强敏感性，诺氟沙星、磺胺甲异恶唑等中度敏感，而对头孢唑啉钠、呋喃唑酮不敏感；中草药五倍子和五味子煎出液对4株菌均表现出较强的抑菌性能。     

条石鲷(Oplegnathus fasciatus)源美人鱼发光杆菌杀鱼亚种(Photobacterium damselae subsp. piscicida)的分离鉴定

2013年浙江省舟山市某网箱养殖条石鲷(Oplegnathus fasciatus)暴发了一种严重的疾病,病鱼主要症状为脾、肾出现1-2 mm的白色类结节.从患病鱼内脏处分离得到1株优势菌OF-1,经人工感染实验证实为此次引起条石鲷死亡的致病菌,半数致死量为5.93×104 CFU/g.形态学观察结果显示,菌株OF-1为革兰氏阴性、短杆状,在TCBS培养基上不生长.API 20E细菌鉴定系统、16S rRNA系统发育树分析结果证实,该菌株为美人鱼发光杆菌杀鱼亚种(Photobacterium damselae subsp.piscicida).该菌对庆大霉素、青霉素、氟哌酸、氧氟沙星、氨苄青霉素等药物高度敏感,对红霉素、链霉素、卡那霉素、苯唑青霉素等药物具有抗性.     

异育银鲫类志贺邻单胞菌的鉴定

采用API 20E系列生化鉴定、生理生化特征、电镜观察和16S rDNA序列构建系统发育树分析方法,对从濒死的异育银鲫(Carassius auratus gibelio♀×Cyprinus carpio♂)肝脏中分离到的1株致病菌(革兰氏阴性杆菌,YCS07-01株)进行了鉴定。结果显示:菌株主要生化特性为氧化酶阳性,发酵葡萄糖产酸不产气,分解肌醇;不发酵蔗糖、甘露醇、鼠李糖等;β-半乳糖苷酶、精氨酸双水解酶、赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶阳性。负染电镜观察,菌株为两端钝圆直杆状,无芽胞,无荚膜,有4根鞭毛,大小为0.8~1.0μm×3.0μm。在以该菌16SrDNA序列(GenBank登录号FJ375179)和GenBank数据库内同源性较高的细菌16S rDNA序列构建的系统发育树中,分离菌YCS07-01与类志贺邻单胞菌ATCC14029T(登录号X74688)的同源性为99%,并聚为一个分支。综合培养特征、形态和生理生化特性、系统发育分析等将该菌鉴定为类志贺邻单胞菌(Plesiomus shigelloides)。药敏试验结果表明菌株对羧苄青霉素和万古霉素耐药;对头孢唑啉、四环素和氨曲南中度敏感;对丁胺卡那霉素、左氟沙星、头孢他啶、复方新诺明等高度敏感。     

条石鲷(Oplegnathus fasciatus)源美人鱼发光杆菌杀鱼亚种(Photobacterium damselae subsp.piscicida)的分离鉴定

2013年浙江省舟山市某网箱养殖条石鲷(Oplegnathus fasciatus)暴发了一种严重的疾病,病鱼主要症状为脾、肾出现1–2 mm的白色类结节。从患病鱼内脏处分离得到1株优势菌OF-1,经人工感染实验证实为此次引起条石鲷死亡的致病菌,半数致死量为5.93×10~4 CFU/g。形态学观察结果显示,菌株OF-1为革兰氏阴性、短杆状,在TCBS培养基上不生长。API 20E细菌鉴定系统、16S r RNA系统发育树分析结果证实,该菌株为美人鱼发光杆菌杀鱼亚种(Photobacterium damselaesubsp.piscicida)。该菌对庆大霉素、青霉素、氟哌酸、氧氟沙星、氨苄青霉素等药物高度敏感,对红霉素、链霉素、卡那霉素、苯唑青霉素等药物具有抗性。     

湖北省副猪嗜血杆菌分离与鉴定

采集疑似副猪嗜血杆菌感染的病料进行培养、纯化、生化鉴定及致病性观察,实验结果显示:所分离细菌为革兰氏阴性小杆菌,呈细杆状,两端着色,与葡萄球菌同时培养时,有良好的"卫星现象",在TSA培养基上生长时有NAD依赖性,生化鉴定显示:菌株能发酵麦芽糖、木糖、葡萄糖,对阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖、靛基质、氧化酶、精氨酸脱羧酶生化反应均为阴性,共分离菌株9株,经对豚鼠攻毒实验,确认为副猪嗜血杆菌。     

条石鲷养殖群体线粒体控制区序列遗传变异分析

利用线粒体控制区序列研究了条石鲷养殖群体的遗传多样性水平和遗传结构.通过PCR扩增与序列测定获得了长度为469 bp的线粒体控制区基因片段,在30个个体中共发现27处碱基变异,A、T、G、C碱基的平均含量分别为36.5%、30.2%、12.5%和20.8%,A+T含量明显高于G+C含量.30条线粒体控制区序列共定义了1...     

条石鲷消化道的形态学和组织学

采用解剖和光镜技术研究条石鲷消化道的形态学和组织学。条石鲷消化道包括具有发达颌齿的口咽腔，食道，胃，小肠和直肠。食道上皮组织可分为两个区域－头部和尾部，头部区域由扁平上皮层构成，尾部区域的上皮组织由单层柱状上皮细胞所构成，上皮含有大量 杯状细胞和黏液分泌细胞.胃呈V形，其粘膜上皮由单层柱状上皮组成，贲门部和胃体部上皮下有发达的胃腺组织。小肠上皮为具微绒毛的单层柱状上皮，肠道粘膜固有层中有管状肠腺存在；直肠上皮为单层柱状上皮，缺乏粘膜肌。小肠和直肠上皮中均分布有较多的杯状细胞，肠道系数约为0.78。在整个消化道中发现有四种杯状细胞。本文研究了条石鲷消化道的显微结构，并探讨了其消化道的组织学和解剖学特征与其杂食性的适应。     

条石鲷头肾和脾脏的显微结构观察

采用光镜技术对条石鲷（Oplegnathus fasciatus）头肾和脾脏的显微结构进行了观察研究。结果发现头肾表面覆盖着一层极薄的纤维结缔组织性被膜,未见明显小梁,实质主要由淋巴组织、血管和血窦组成,其间可见黑色素巨噬细胞中心。脾脏表面也覆盖着一层极薄的纤维结缔组织性被膜,其实质主要组成有脾髓（红髓和白髓混合排列）、椭圆体和黑色素巨噬细胞中心,小梁不明显,进入脾脏的中央动脉和静脉往往紧靠在一起互相结伴而行。     

盐度对条石鲷幼鱼肝脏抗氧化酶活力的影响

测定了不同盐度(8、18、28、38、48)处理后条石鲷幼鱼肝脏中SOD、CAT、GPX和GST 4种酶活力,探讨了盐度变化对条石鲷幼鱼肝脏抗氧化酶活力的影响。当用低盐度8和18处理时,幼鱼肝脏SOD活力无显著变化(P0.05);当处理盐度升至38时,SOD活力增加并在24 h时达到最大,其水平显著高于对照组(P0.05),之后逐渐降低并趋于稳定;而经过盐度48处理时,SOD活力则在24 h时达到最低,之后逐渐升高并趋于稳定。CAT活力在盐度为8和18的处理组中均在处理120 h时达到最高值;在经高盐度处理时与SOD活力具有相似的变化趋势。各盐度处理组中的GPX活力均在处理12~24 h左右出现最低值,然后又逐渐上升并趋于稳定。而GST活力在处理盐度为8、18和38时基本呈增高的变化趋势,当盐度增至48时,GST活力迅速增高并在6 h时达到最高,其水平显著高于对照组(P0.05),之后逐渐趋于平衡。结果表明,条石鲷幼鱼对低盐环境有较强耐受力,在盐度变化时能通过改变抗氧化酶活力来消除氧化压力下产生的多余自由基以维持机体的正常功能。     

Viral nervous necrosis in hatchery-reared larvae and juveniles of Japanese parrotfish, Oplegnathus fasciatus (Temminck & Schlegel)

Abstract. Mass mortalities of hatchery-reared Japanese parrotfish larvae and juveniles, Oplegnathus fasciatus (Temminck & Schlegel), have occurred in Nagasaki Prefecture. Light and electron microscopic examinations showed that the only consistent histopathological feature was extensive nervous necrosis in the spinal cord, spinal ganglia and brain. Numerous non-enveloped virus particles, icosahedral in morphology and measuring about 34 nm in diameter, were found in the cytoplasm of affected neurones and glial cells. Such nervous necrosis is believed to be the major cause of the mass mortalities of hatchery-reared Japanese parrotfish larvae and juveniles.     

Susceptibility of marine fish species to a megalocytivirus, turbot iridovirus, isolated from turbot, Psetta maximus (L.)

Turbot iridovirus (TBIV), a member of the genus Megalocytivirus in the family Iridoviridae, was isolated from diseased turbot, Psetta maximus (L.), in Korea in 2003. In this study, experimental infection of turbot, Japanese flounder, Paralichthys olivaceus (Temminck & Schlegel), and rock bream, Oplegnathus fasciatus (Temminck & Schlegel), with TBIV was performed to evaluate the viral susceptibility of these fish species. After virus exposure, the mortalities of turbot reared at 22 and 25 degrees C were 60% and 100%, respectively, suggesting that TBIV is the causative agent of the mass mortality of turbot that occurred in Korea in 2003. Moreover, TBIV was detected in Japanese flounder and rock bream by polymerase chain reaction after experimental infection (26 days post-inoculation) despite no viral pathogenicity in these fish, suggesting that these two fish species are also susceptible to the virus. It is possible that horizontal transmission of TBIV occurs among these three fish species because turbot is routinely cultured with Japanese flounder and rock bream in Korea.     

条石鲷的耗氧率与窒息点研究

2008年4～8月,采用Winkler法研究了70日龄（平均全长37.68mm,平均体重1.07g）和105日龄（平均全长65.71mm,平均体重5.58g）的条石鲷在不同温度（15、20和25℃）、不同盐度（20、25和30）下的耗氧率、窒息点及耗氧率昼夜变化。结果表明,105日龄组的相对耗氧率明显低于70日龄组,但个体耗氧量明显高于70日龄组;耗氧率随幼鱼体重的增加而相对减少。盐度一定时,温度升高,相对耗氧率和个体耗氧量都随之增大。盐度对70日龄幼鱼组的耗氧率影响显著（P〈0.05）,对105日龄幼鱼组影响不显著（P〉0.05）。盐度25左右、温度20～25℃时是条石鲷苗种培育和生长的最适盐度和最适温度。条石鲷在温度15～25℃、盐度20～30下的窒息点为1.6021～2.9538mgO2/L,窒息点随着个体的增大而降低;温度、盐度对条石鲷窒息点的影响均不显著（P〉0.05）。条石鲷耗氧率的昼夜变化明显,白天的耗氧率平均为0.9459mgO2/g.h,夜间平均为0.2727mgO2/g.h,白天的耗氧率是夜间的3～5倍,条石鲷白天代谢旺盛并持续到夜间22∶00左右。     

Ontogenetic changes of learning capability under reward conditioning in striped knifejaw Oplegnathus fasciatus juveniles

ABSTRACT:   To elucidate the ontogenetic changes in learning capability of the striped knifejaw Oplegnathus fasciatus , which is a common rocky-shore member in Japan, 28 individuals (2–10 cm standard length [SL]) of laboratory-reared fish under reward conditioning were trained. A single fish was first conditioned to go to one end of two arms of a Y-maze by being given a reward (food pellets), and once the fish has cleared the original problem, the rewarded side was reversed. All fish cleared at least the original problem, although fish at 2–4 cm SL showed lower scores because they learned more slowly or did not clear the reversal problem. Fish showed better learning capability as they grew. Fish of ca. 7 cm SL showed the highest score with quick learning of both the original and reversal problems. Their learning curve (relationship between SL and individual score) was approximated by a quadratic curve with the maximum score at approximately 7 cm SL. It was speculated that fish at its recruitment stage requires a high learning capability to adapt to the new environment of the rocky shore, which is composed of more complex microhabitats compared to their previous pelagic habitat.