天山马鹿细管冻精的制备和应用

选择16头天山马鹿种公鹿电刺激采精,通过探讨不同稀释液和甘油浓度等条件对精液冷冻处理的影响,拟建立一种天山马鹿精液冷冻的方法,并对冷冻精液品质和人工授精效果进行评定。结果表明:天山马鹿对电刺激采精有耐受性,麻醉保定的采精频率每周2次最佳,10月中旬精液品质最好;6%甘油的稀释液冷冻效果最优;细管冻精活率(48.14±13.15)%,顶体完整率(56.34±14.84)%;诱导同期发情和自然发情人工授精情期产羔率分别达到50.80%和78.50%。     

新疆驴冷冻精液的研究

试验旨在探究新疆驴冷冻精液的最佳稀释保护液与处理方法。以假阴道采集新疆驴精液,并用5种不同稀释保护液稀释冷冻后,选取其中较为理想的稀释液作为对照组,再通过分别添加4%、5%、6%、8%甘油处理试验,最后再选用添加甘油后冷冻效果最优的稀释液为对照来进行离心浓缩试验。结果表明：①5号稀释液冷冻—解冻精液后,其活力、顶体完整率要显著高于其他4种稀释液（P<0.05）;②以5号稀释液为对照组,添加6%甘油(7号稀释液)冷冻后,精子的活力、顶体完整率要显著高于添加4%、5%、8%甘油组（P<0.05）;③以7号稀释液为对照组,通过离心浓缩,精液在冷冻后其活力和精子顶体完整率都显著提高（P<0.05）。结果提示,将驴精液用6%葡萄糖、2%乳糖、6%甘油为主的稀释液稀释,并经500 r/min离心浓缩10 min处理后,其冷冻效果最好。     

不同浓度大豆卵磷脂替代蛋黄对东佛里生奶绵羊精液冷冻保存效果的影响

本试验皆在研究添加不同浓度大豆卵磷脂（SL）冷冻保存东佛里生奶绵羊精液的效果。我们在Tris基础稀释液中,添加18%蛋黄为对照组,添加0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%SL设为试验组,检测冷冻精液解冻后的精子活率和顶体完整率。结果显示,添加0.5%、2.5% SL冷冻稀释液稀释的精液,解冻后精子活率和顶体完整率与其他组之间存在显著差异（P<0.05）;添加18%蛋黄和1%～2% SL冷冻稀释液稀释的精液,冷冻解冻后精子活率和顶体完整率之间无显著差异（P>0.05）;添加18%蛋黄和1.0%～1.5% SL冷冻稀释液稀释后的精液,进行人工授精后母羊的妊娠率与对照组无显著差异（P>0.05）。因此,大豆卵磷脂可以作为冷冻保护剂用于东佛里生奶绵羊精液的冷冻保存,其最佳添加浓度为1～2%（g／L）。     

不同染色与冷冻方法对关中奶山羊X、Y精子的分离及应用效果研究

为探究不同Hoechst 33342的染色浓度与冷冻方法对关中奶山羊X、Y精子进行分离及应用效果的影响，本实验采集6只关中奶山羊精液，使用浓度分别为10、11、12、13μL/m L的Hoechst 33342(5 mg/m L)染色液对精液样本进行染色，以流式细胞仪分离X精子和Y精子，应用3种不同冷冻程序冷冻精液，应用体外受精与胚胎发育技术评估关中奶山羊X、Y精液的分离准确性。结果表明：12μL/m L Hoechst 33342染色条件下，奶山羊X、Y精子分离效率达到91.02%，高于10μL/m L和13μL/m L(P<0.01)，最高分选速度为4 134个/s(P<0.05)；公羊个体的精液品质越好，其精子的分离速度越快，但对分离准确率的差异不显著；使用冷冻程序2进行关中奶山羊的X、Y精子冷冻的效果较好（P<0.05）；体外受精48 h后，使用Y精子进行受精的卵细胞的卵裂率高于使用X精子（P<0.05），在胚胎培养第9天，使用Y精子进行受精的卵细胞的囊胚发育率高于使用X精子（P<0.05）。总之，当Hoechst 33342浓度为12μL/m L...     

牛冷冻精液人工授精技术操作规程（输精部分）

1范围适用于人工授精员对牛进行细管冷冻精液的人工授精技术操作。2人工授精用特定的输精器材,将冷冻精液正确解冻后人工输入发情母牛生殖道内,     

2种稀释液对公猪精液冷冻保存效果的影响

试验为探究2种不同冷冻稀释液对公猪精液稀释冷冻效果的影响。试验采用手握法采集同一头公猪精液,将采集的精液分为2组,进行液氮熏蒸制作细管冻精,分别使用Ⅰ号冷冻稀释液和Ⅱ号冷冻稀释液对猪精液进行冷冻保存,24 h后检测2种冷冻稀释液细管冻精的活力。结果显示,Ⅰ号冷冻稀释液冷冻解冻后的精子活力显著高于Ⅱ号冷冻稀释液(P0.05),同一种稀释液距液氮面5 cm进行熏蒸冷冻的效果较距液氮面4 cm冷冻效果好,但差异不显著(P0.05)。研究表明,利用Ⅰ号冷冻稀释液在距液氮面5 cm处进行液氮熏蒸冷冻可获得较好的公猪冷冻精液。     

应用半支细管冻精对娟姗牛输精的效果试验

自从细管冷冻精液问世以来,牛的人工授精都使用细管冻精进行配种。每支冻精的直线运动精子数也由过去的一千多万个逐渐减少,现行执行的国家标准为每支黄牛细管冷冻精液直线运动精子数不低于800万个。一般每头发情母牛每次使用一支细管冻精输精,有的母牛一个情期内还输精2次。本试验在现行执行的标准细管冷冻精液基础上,探索在牛人工授精中能否再适当降低每支细管冻精的     

奶山羊精液冷冻稀释液配方筛选

为了筛选适合我区生产上使用的奶山羊冷冻精液稀释液配方,设计5个奶山羊冷冻精液稀释液配方,渗透压1 070～1 720 mmol/kg,pH值5.97～6.99,挑选5只健康成年种公羊,调教采精、制冻。结果显示:1号配方与对照组(5号配方)的保护效果存在一定差异,但差异不显著(P>0.05);2号配方和4号配方与对照组存在显著差异(P<0.05);3号配方与对照组存在极显著差异(P<0.01)。2号、3号和4号3种配方的稀释液对奶山羊精液冷冻后的保护效果都较好,可以在生产上推广使用。     

不同冷冻程序对萨能奶山羊精液质量的影响

为了探究萨能奶山羊细管冻精最适冷冻程序,本试验设置5个不同的冷冻程序[在5～-10℃温区内,各组降温速率相同（6℃/min）,在-10～-140℃危险温区内设置5个不同梯度的降温速率（25℃/min,35℃/min,40℃/min,55℃/min,65℃/min）]用于程序化冷冻中。试验利用全自动细管精液程控冷冻仪编制冷冻程序,通过casa系统测定精液在不同冷冻程序下精子活力变化,同时利用特异性荧光探针（异硫氰酸镧-花生凝集素,FITC-PNA)检测解冻后精子顶体完整率,用低渗精子肿胀法（HOST)检测解冻后精子质膜完整率。结果表明,冷冻程序C组（5～-10℃,降温速率6℃/min;-10～-140℃,降温速率40℃/min）解冻后精子活力、质膜完整率和顶体完整率最高,分别达到60.75%、38.10%和71.01%,均显著高于其他组（P<0.05）。在危险温区内,降温速率为40℃/min可以较好地保证冷冻萨能奶山羊精子的活力和质膜功能,同时利用程序化冷冻程序C组可显著提高精子的受精能力,C组的降温速率可以提高冷冻萨能奶山羊解冻后精液质量。     

咖啡因对猪精液冷冻的影响及冷冻－解冻方法的优化

本试验对猪精液冷冻保护液中添加咖啡因的作用进行了研究,并优化冷冻－解冻程序,提高0.5 mL细管猪精液冷冻解冻后的质量。在预先设计稀释液配方的基础上,使咖啡因终浓度为0、0.2、0.4、0.6 mg/mL,选择最佳咖啡因浓度,选出最优组合与传统的TCG稀释液和商业用Androhep〖XC1.TIF〗CryoGuardTM冷冻稀释液进行比较,比较3种不同的冷冻曲线对猪冷冻精液解冻后精子品质的影响,最后对38 ℃下30 s、50 ℃下13 s 2种解冻方法进行比较。结果表明,咖啡因浓度为0.2、0.4 mg/mL的精子冷冻后活力、质膜完整率、顶体完整率显著高于0、0.6 mg/mL（P＜0.05）,最佳添加浓度为0.2 mg/mL;预设计的稀释液配方及冷冻方案优于传统的TCG法（P＜0.05）,但与Androhep〖XC1.TIF〗CryoGuardTM稀释液(美国商业用)有一定差距（P＜0.05）;A曲线在猪精液冷冻－解冻后活力、质膜完整率和顶体完整率方面均显著优于B和C冷冻曲线（P＜0.05）;50 ℃水浴解冻13 s显著优于38 ℃解冻30 s（P＜0.05）。     

冷冻家猫附睾精液效果初探

为了筛选出适宜冷冻家猫精液的稀释液、冷冻保护剂和解冻温度,本试验采用家猫附睾精液,分别用2种不同的稀释液,3种不同的冷冻保护剂进行稀释、冷冻和解冻。结果显示,Ⅱ号稀释液冷冻效果优于Ⅰ号稀释液。用乙二醇作为冷冻保护剂,解冻后家猫精子活率达到52.7%±4.9%,畸形率为37.3%±4.2%,顶体完整率为52.4%±4.1%,各项指标均显著高于甘油组和二甲基亚砜组（P<0.05）;其中甘油组解冻后活率为35.5%±7.6%,顶体完整率为39.8%±4.4%,高于二甲基亚砜组的33.6%±7.3%和39.1%±4.1%,但两者之间差异不显著（P>0.05）。37 ℃水浴解冻后顶体完整率为36.4%±8.7%,显著高于30 ℃水浴解冻后的25.3%±6.7%（P<0.05）,但它们之间的活力,畸形率差异不显著,总体上37 ℃的解冻效果优于30 ℃。因此,乙二醇和稀释液Ⅱ配合使用冷冻家猫附睾精液效果较好,37 ℃为较优解冻温度。     

鸵鸟卵黄低密度脂蛋白对猪精子冻后品质的影响

在家畜精液冷冻中,卵黄被广泛应用,且其中的低密度脂蛋白(LDL)对精子起主要保护作用。本研究利用含6%、7%、8%和9%鸵鸟卵黄LDL配制的稀释液制作猪细管冷冻精液,分析鸵鸟卵黄LDL对冷冻-解冻后猪精子质量参数的影响。结果表明:在含不同浓度鸵鸟卵黄LDL的稀释液中,8%LDL的稀释液冷冻效果最好,冻后精子活率平均可达52.13%,显著高于其他组(P<0.05);精子顶体完整率平均为58.33%,质膜完整率为72.38%,与其他处理组相比差异显著(P<0.05)。但与鸡蛋卵黄LDL和鸽子蛋卵黄LDL处理组相比,鸵鸟卵黄LDL处理组冷冻-解冻后猪精子质量参数相对较低。本研究表明,虽然鸵鸟卵黄LDL在冷冻过程中对猪精子具有一定的保护作用,但相对于鸽子蛋和鸡蛋卵黄LDL效果并不理想。     

精液超低温冷冻对羊繁殖率的影响

冷冻造成精子的结构和功能变化是导致繁殖率低的根本原因。笔者通过对比试验,检测精液冷冻后对羊繁殖率的影响。用假阴道法采集3只~4只公羊精液,用Tris稀释液作为冷冻保存液,用TALP作为解冻液,比较精液冷冻前后活力;对同期发情处理的羊只进行鲜精和冻精人工授精,比较两者在受胎率上的变化。结果表明,冷冻前后精子活力分别为74.43%和46.25%,受胎率分别为83.33%和47.06%,说明超低温冷冻通过影响精子内部结构,显著降低了精子活力和受胎率。     

循化县应用颗粒冷冻精液技术和细管冷冻精液技术的回顾性研究

对1994-2003年间采用颗粒冷冻精液技术和细管冷冻精液技术对10037头(次)当地母牛进行了人工授精的情况进行回顾性研究,结果发现：细管冷冻精液技术的授胎率比颗粒冷冻精液的高13．64％;与颗粒冷冻精液技术相比较,细管冷冻精液技术有省时、省力、操作简便,所用设施投入少等优点,更适合农区基层的黄牛改良工作。     

不同稀释液配方对奶牛冷冻精液的影响

采用假阴道法采集成年种公牛精液,经精液品质检查后,合格精液用四种不同冷冻稀释液进行稀释、冷冻、以筛选出适宜的冷冻稀释液和最佳冷冻保护剂.结果表明:Ⅱ号稀释液优于其它3种稀释液(P＜0.05);甘油为最佳冷冻保护剂.优于乙二醇和DMSO冷冻效果(P＜0.05),其最佳浓度为7%,精子冷冻后活率平均可达0.45±0.575,畸形率15.44%,项体完整率57.82%;奶牛细管冻精的解冻效果以75℃水浴,2 S到6 S的解冻时间最佳.     

辽宁绒山羊细管冷冻精液研究

本实验研究了辽宁绒山羊细管冷冻精液的稀释液及制作工艺。结果表明:离心洗涤去精清可以提高冷冻-解冻后的精子活率,与不去精清的对照组相比差异显著(P<0.05);以等体积乙二醇替代甘油作防冻剂制作的细管冷冻精液,解冻后的精子活率和顶体完整率显著(P<0.05)高于甘油作防冻剂的对照组。实验还证明,含Tris的柠檬酸盐缓冲液对提高冷冻后精子活率与顶体完整率具有良好的作用。     

牛血清白蛋白对山羊精液冷冻效果的影响

用冷冻稀释液添加牛血清白蛋白(BSA)进行影响海门山羊冷冻精液品质的研究。选用3个处理组进行比较试验,结果表明:以添加6%BSA处理组效果最好,其冷冻解冻后精子活力高于对照组,但差异不显著(P>0.05),而SPA试验表明精子穿卵活力极显著高于对照组(P<0.01)。研究表明在冷冻稀释液中添加BSA进行海门山羊精液冷冻具有良好的效果。     

北极狐、乌苏里貉精液细管冷冻技术研究

为了对濒危珍稀动物种质资源的进行保护,完善精液冷冻技术方案,对北极狐37只次、乌苏里貉32只次的精液进行细管冷冻技术研究,结果表明,北极狐精液用3%柠檬酸三钠—卵黄—甘油作冷冻稀释液,乌苏里貉精液用11%蔗糖—卵黄—甘油作冷冻稀释液,在5℃冰箱内平衡1 h后,进行细管冷冻(液氮-196℃),冻溶粒子活力达4~5级。速冻法优于缓冻法。细管冻精在50℃温水中快速溶化,北极狐精液用3%柠檬酸三钠作解冻液,乌苏里貉精液用7%葡萄糖液作解冻液效果较佳。     

如何选择和使用牛细管冷冻精液

冷冻精液作为一项人工授精技术,经过多年的推广和应用,目前已普遍使用于黄牛育种改良、新品种培育等畜牧业生产当中。在此就牛细管冷冻精液的选择和使用方法介绍如下: 一、牛细管冷冻精液的选择 我区目前使用的有0.5毫升的中型细管和0.25毫升的微型细管两种。 1.微型细管的选择 微型细管冷冻精液目前已逐步取代中型细管,因为微型细管容量小、装精液少,可作更多输精剂量;体积小,更能充分利用冷冻贮存设备;细管直径小、管壁薄,在冷冻制做过程中     

冷冻稀释液中添加大豆卵磷脂对梅花鹿冻融精子质量的影响

【目的】 探究在冷冻稀释液中添加大豆卵磷脂代替10%卵黄对梅花鹿精液冷冻保存效果的影响,为梅花鹿人工授精体系的完善提供参考。【方法】 采用电刺激法采集梅花鹿精液,以精液冷冻稀释液中分别添加1%、2%、3%、4%和5%大豆卵磷脂代替10%卵黄作为试验组,添加20%卵黄作为对照组,分别进行各组精液冷冻保存。5 d后,进行精液解冻,检测解冻后各组精子的活力、质膜完整率、顶体完整率、线粒体活性、存活时间,筛选合适浓度的大豆卵磷脂。选取4~5岁健康雌性梅花鹿,肌肉注射300 IU孕马血清促性腺激素（PMSG）和0.4 mg氯前列醇钠进行同期发情处理,发情后第20 h用20%卵黄组与筛选出的大豆卵磷脂组冻精进行人工输精,输精后30 d使用B超检测仪检测妊娠情况,统计妊娠率。【结果】 与对照组相比,1%大豆卵磷脂组冻融后的精子活力、向前活动力、快速前进活力、活率、质膜完整率、顶体完整率及线粒体活性均显著提高（P<0.05）;随着稀释液中大豆卵磷脂浓度的增加,其冻融后精子活力、向前活动力、快速前进活力、活率、质膜完整率、顶体完整率以及线粒体活性呈下降趋势,精子存活时间也随浓度的增加而减少。1%大豆卵磷脂组冻融精子人工授精梅花鹿的妊娠率为61.11%,高于对照组、2%和3%大豆卵磷脂组,但差异均不显著（P>0.05）。【结论】 在梅花鹿精子冷冻稀释液中添加1%大豆卵磷脂替代10%卵黄,能有效提高梅花鹿冻融精子的质量,为进一步筛选新型梅花鹿精液冷冻稀释液提供理论基础。