烟草引种资源黑胫病、TMV及PVY抗性分子标记辅助筛选

本研究对54份国外引进烟草种质资源进行了黑胫病、烟草普通花叶病(TMV)及马铃薯Y病毒病(PVY)等主要病害抗性的分子标记辅助筛选,并对上述资源同步开展了TMV及黑胫病人工接种抗病分析。研究结果表明:共筛选到2份资源抗黑胫病、TMV及PVY,5份资源双抗黑胫病及PVY和1份资源双抗TMV及PVY。黑胫病与TMV抗性分子标记鉴定的结果为人工接种抗性鉴定结果证实,即筛选到11份资源含抗TMV的N基因和14份资源含抗黑胫病的Ph基因。本研究结果有助于大批量的开展种质资源的抗性筛选,加快抗病烟草品种选育进程。     

烟草种质资源烟叶化学成分的初步分析

对我所烟草种质资源的烟叶化学成分含量研究表明,烤烟的总糖、还原糖、施木克值、总糖/烟碱和总氮/烟碱极显著高于晒烟,而其总氮、烟碱、蛋白质则极显著低于晒烟.国外引进烤烟种质资源的总糖和还原糖含量极显著高于国内种质资源,而其烟碱含量则显著高于国内种质资源.总糖与还原糖呈极显著正相关,总糖与烟碱、总氮、蛋白质呈极显著负相关.烟碱与总氮、蛋白质呈正相关,并分别达到了极显著和显著水平.     

烟草种质资源烟叶化学成分的研究

对我国烟草种质资源的烟叶化学成分含量研究表明,烤烟的总糖和还原糖极显著高于晒烟,而其尼古丁、总氮和蛋白质则极显著低于晒烟。国外引进烤烟种质资源的糖和尼古丁含量均显著高于国内种质资源。总糖与还原糖呈极显著正相关,总糖与尼古丁、总氮、蛋白质呈显著负相关。尼古丁与总氮、蛋白质呈正相关,并分别达到了极显著和显著水平。     

抗马铃薯Y病毒的烟草种质资源抗性分析

为了解我国烟草种质资源对马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)的抗性状况,为烟草抗病育种的亲本选择提供信息,本研究通过苗期PVY汁液摩擦接种,从500多份烟草种质资源中筛选出假川烟等15份抗PVY资源。与va位点缺失的抗PVY品种NC55杂交F1的PVY抗性鉴定结果表明,假川烟、Havana K-2-24的PVY抗性与NC55的va位点等位。e IF4E-1基因特异分子标记检测表明,假川烟、Havana K-2-24、Yellow speicial和C151的PVY抗性与e IF4E-1基因缺失有关。本研究鉴定的抗PVY烟草种质资源,可为种质资源的育种利用提供参考。     

VA诱导烟草细胞内防御酶系统与TMV抗性的关系

本试验采用天然抗病毒剂VA作诱导因子,抗病品种枯斑三生烟和感病品种三生烟经VA诱导处理后第7 d(清水处理作对照),在其新生长的叶片上接种TMV(不接种的烟草为对照).结果表明,VA可以系统诱导枯斑三生烟对TMV产生抗性,其枯斑数抑制率达64.3%,枯斑大小抑制率为37.3%;超氧化物歧化酶(SOD),过氧化物酶(POD)活性均比对照明显提高,其中接种后48 h变化幅度最大;丙二醛(MDA)含量的变化与酶活性变化呈相反趋势.说明VA和TMV共同作用系统诱导枯斑三生烟对TMV产生抗性.     

烟草对花叶病毒诱导抗性及其遗传传递效应的研究

采用化学诱导的方法进行烟草对花叶病毒的诱导抗性的试验研究。发现用Ｓ３０和Ｌ１两种诱抗剂均能在烤烟，白肋烟和心叶烟上诱导出对ＴＭＶ的抗性。诱抗效应达１９．１％－３５．６％。此外，诱抗后心叶烟，白肋烟还表现出枯斑反应提前和枯斑缩小等抗性增强反应。将诱抗材料子代接种ＴＭＶ，证明有诱抗性传递现象，其传递效应为２５．２％－４２．６％。经连续三代用Ｌ１诱抗剂在同一烤烟品种（Ｇ１４０）的苗期和花期分别诱导，其子     

烟草N基因及其在烤烟遗传育种中的应用

N基因起源于烟草野生种粘毛烟草(Nicotiana glutinosa),属于TIR-NBS-LRR类抗病基因,介导烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus, TMV)的抗性,通过转座子标签法得到克隆,目前,N-TMV互作是研究最早且最多的植物-病原菌互作模型之一。文章从转录产物、表达特征、温度敏感性、对应无毒基因等研究内容回顾了N基因在结构、表达、作用机理等方面的研究进展及现状,归纳了以N基因为TMV抗源在烤烟遗传育种中的应用及取得的成果,并从抗TMV机制研究、抗TMV种质鉴定、种质资源利用等方面对N基因在烤烟抗TMV育种中的高效利用提出了展望。     

烟杈上TMV发病情况与抗病性鉴定结果比较分析

119份烟草种质资源后期的烟杈TMV发病情况调查结果与TMV抗性鉴定结果比较看出,烟杈TMV发病情况与抗病性鉴定结果有一定的规律性。从某种意义上来说,烟杈TMV的病株率和病指可作为某种质对TMV抗性水平的参考值,在没有条件开展TMV人工接种鉴定的情况下,烟杈TMV发病情况基本能正确反映种质对TMV的抗性水平。该法可用于抗TMV烟草种质资源的初步筛选。     

30份云南省地方晒烟品种资源的鉴定评价

为摸清云南省地方晒烟种质资源的特征特性,对编入国家库的30份云南省地方晒烟资源进行田间鉴定,获得各种质的特性资料,筛选出抗TMV的种质提昌川、树麻克等和化学品质较好的种质老厂柳叶、红花密叶、马军烟、片马烟、曼怕村-1、三坝烟、树啃咬、特选晒烟等推荐给育种者选择利用.     

一种TMV抗性离体快速鉴定方法及其在烟草育种上的应用

烟草普通花叶病,由烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)引起,是烟草生产中的常见病害之一,培育和种植抗病品种是解决该病害的主要途径,育种材料的抗性鉴定是抗病育种的关键环节。为提高TMV抗性鉴定效率,本研究根据TMV与N基因作用的原理设计了一种烟草苗期离体接种快速鉴定TMV抗性的方法。该方法为研磨病害严重程度为5级的新鲜病叶(10 g)并过滤,往过滤液中加纯净水(100 m L)稀释为病毒液;摘取6～7叶期烟苗的叶片(从上往下数第3叶)进行离体摩擦接种;3 d后观察坏死斑发生情况。应用此鉴定方法对20份烟草材料的TMV抗性进行鉴定,结果表明13份材料出现免疫斑;同时,对20份烟草材料的N基因进行了检测,结果表明13份材料含有N基因。出现免疫斑的材料与含N基因的材料相一致,证明了苗期离体接种方法鉴定TMV抗性的可行性。将此方法应用于21 524份育种中间材料(7 047株BC₁F₃、10 013株BC₁F₄、4 464株BC₁F₅)的...     

烟叶复烤废弃物烟梗灰在烤烟生产上的应用研究

为探索烟梗灰在烤烟生产上的应用效果,解决烟梗灰的废物利用问题,实现烟草废弃物循环经济的目的,采取烟梗灰为原料配制的基、追肥与常规烟草基、追肥进行大田对比试验,研究烟梗灰不同的配施方式对烤烟农艺性状及产量品质的影响。结果表明：（1）施用烟梗灰可以延长烤烟大田生育期,促进烟叶充分成熟和干物质积累;（2）施用烟梗灰可以提高烤烟农艺性状,圆顶期最大叶面积分别比对照增加了11.3%~20.7%;（3）施用烟梗灰可以有效提升烤烟的产、质量,其中T1处理（基肥：菜饼 378 kg/hm²+烟梗灰252 kg/hm²+磷酸二铵212.55 kg/hm²+硝钙220.65 kg/hm²;追肥：烟梗灰735 kg/hm²+尿素96.45 kg/hm²）效果最佳,产量上增加了75.6 kg/hm²,烟农纯收入增加了5952.9元/hm²,相比对照提高了14.85%。因此,烟梗灰基、追配方处理(T1)是烟梗灰在烤烟生产上利用的最佳方式,适合湖南永州烟区推广应用。     

抗烟草丛顶病转基因烟草的培育

烟草丛顶病由烟草丛顶病毒、烟草脉扭病毒、烟草脉扭病毒伴随RNA和烟草丛顶病卫星RNA复合侵染引起的毁灭性病害,为了构建这四种病毒的干扰载体,培育抗病毒烟苗,本研究首先利用PCR扩增、酶切、克隆、连接转化和胶纯化技术分别得到携带酶切序列约200 bp的四种病毒目的片段;其次,用目的片段与携带有对应酶切序列的pENTR?2B入门载体连接、检测和纯化得到携带有目的片段的入门重组载体pENTR?2B-Vims;最后,用入门重组载体与表达载体PK7GW1GW2进行LR反应,经PCR检测得到正确干扰重组载体后,再用叶盘法将目的基因转入烟草叶片中,进一步用组培技术培育组培苗。本研究为解决目前烟草丛顶病防治难题,提供烟草生产发展技术思路和理论依据。     

通过筛选烟草EMS突变体创造高烟碱材料

烟叶烟碱含量为内在性状,需要通过仪器检测才知道其含量高低,而这增加了针对烟草烟碱含量育种的难度。为了加快获得高烟碱的烟草育种材料,本研究通过在2 000份EMS‘云烟87’突变体中筛选根系发达的突变体植株,获得一份可以稳定遗传的突变体材料KH65。结果显示,该KH65突变体材料的根系面积是‘云烟87’对照材料的3倍;同时KH65的上部、中部、下部叶片的烟碱含量比‘云烟87’对照材料提高30%以上;‘云烟87’对照材料节间距较大,而突变体材料节间距较小,长势较为茁壮。发达的根系不仅能够提高烟草烟碱的含量,同时也将会提高烟草的产量和耐旱性。本研究将为培育高烟碱含量的烟草品种提供有价值的信息。     

几个烤烟品种的栽培技术

1 NC89栽培技术 NC89品种是目前我国累计推广面积较大的品种之一，以其适应性强，易烘烤，品质优良而著称，是我省多年来的主栽品种。 选地：选择地势较高，排水良好的地块，避开土壤有机质过高，地势低洼、排水不良的地块。……     

TMV侵染烟草的早期响应蛋白分析

为了完善烟草花叶病的预警防控体系,分析烟草感染烟草普通花叶病毒后的蛋白质组早期变化,筛选烟草的早期响应蛋白。[方法]采用iTRAQ技术分析了蛋白质组变化,采用qPCR技术检测基因的表达。[结果]蛋白质组分析发现160个差异表达蛋白质,包括有64个上调表达蛋白和96个下调表达蛋白,这些差异表达蛋白质主要与氧化还原平衡调节、RNA降解、叶绿体组成及光合作用、逆境胁迫响应有关;qPCR结果显示这些差异蛋白质的mRNA表达变化趋势与iTRAQ数据基本一致;及时施用抗病毒药剂(氨基寡糖素和吗胍.乙酸铜)和植物诱抗剂(盐酸吗啉胍和氮苷吗啉胍)能够预防和控制烟草花叶病的发生,但同时发现PR10、LHCB、POD、HSP90、14-3-3和AGO1等蛋白的表达也受到了影响。[结论]试验筛选出一些TMV感染相关的烟草早期响应蛋白,不仅有助于阐述烟草花叶病发生的机制,也可用于筛选新的抗病毒药剂和植物诱抗剂。     

浅谈烤烟基本烟田废弃物的综合利用

基本烟田废弃物的利用不仅关系到烟农的经济利益,也关系到烟草行业持续发展和环境污染问题的解决。笔者立足于国家烟草局优化等级结构的政策,介绍了前人综合利用烟草方面废弃物的研究,为烟草田间产生的废弃物合理利用提供理论依据和方法借鉴,以期达到变废为宝和清洁烟草生产的目的。     

转GbNPR1基因提高烟草抗病性

病害是造成烟草减产和品质降低的主要因素,而利用生物技术提高烟草抗病性是解决此问题的有效途径,其中包括利用与植物抗病性密切相关的关键因子如病程相关基因非表达子(non-expressor of pathogenesis-related genes1,NPR1)。本研究利用源于海岛棉的Gb NPR1基因,表皮特异性启动子CUT1和组成型启动子35S构建两个植物表达载体35S-Gb NPR1和CUT1-Gb NPR1,经农杆菌介导法分别转化烟草。T0代及T1代转化植株PCR检测证明,目的基因已整合到核基因组中。T1代植株RT-PCR分析表明,Gb NPR1基因在转录水平得以表达。bar试纸条检测为阳性,证明和Gb NPR1连锁的草甘膦基因能够正常转录和翻译表达。将阳性植株进行烟草病菌赤星病、炭疽病和低头黑病等三种病害的病原菌离体接菌实验,研究结果表明:转CUT1-Gb NPR1载体的转基因烟草虽然较转35S-Gb NPR1载体的烟草对三种病菌的抗性稍低,但较野生型烟草相比具有较高抗性。转Gb NPR1基因的烟草能提高对低头黑病和炭疽病的抗性为首次报道。     

烤烟多功能叶面肥对烟草生长及品质影响

研究了自制的新型烟草多功能叶面肥“烟博1号”（FFF1）和“烟博2号”（FFF2）喷施对烟草生长及品质影响。研究表明：在烟株生育期内喷施2种多功能叶面肥2~3次,均能显著地促进烟苗生长发育,提高了烟叶还原糖和钾的含量,降低了氯离子含量、烟碱含量及总氮含量,使烟叶内在化学成分趋于协调,对改善烟叶品质有良好的作用,以“烟博2号”综合效果最好。     

烟草香气成分分析研究进展

烟草香气成分是卷烟产品风味的重要的组成部分,是评价卷烟品质的重要因素。烟草的香气成分众多、组分复杂、含量较低。烟草中的挥发性、半挥发性致香成分的获取通常采用溶剂萃取、水蒸汽蒸馏、同时蒸馏萃取、超临界流体萃取、固相微萃取、液相微萃取、顶空分析、吹扫-捕集法等方法。笔者主要综述了以上方法以及介绍国内外的应用现状。     

不同药剂对烟草青枯病的防治效果

为了解烟草青枯病药剂的防治效果,在龙岩烟区进行不同药剂对烟草青枯病的防效试验,结果表明：不同处理对烟草青枯病田间防效间差异有统计学意义。72%农用硫酸链霉素可溶性粉剂（华北制药集团制剂有限公司）防效较好,达36.15%;20%青枯灵可湿性粉剂及72%农用硫酸链霉素可溶性粉剂（石家庄曙光制药厂）防效较差,分别为16.11%和14.77%;其余防效居中。此外,各处理对烟株生长发育（农艺性状）、烟叶化学成分等均没有明显影响或药害。因此,在龙岩等南方烟区,在确认产品合格前提下,可推广使用成都普惠生物工程有限公司、华北制药集团制剂有限公司生产的72%农用硫酸链霉素可溶性粉剂,防控烟草青枯病较好,但尽量不要把甲霜灵锰锌可湿性粉剂与农用硫酸链霉素混用,否则易降低防效。