苏丹的花生斑驳病毒病

由花生斑驳病毒(PMV)一个强株系引起的花生斑驳病毒病在苏丹首次报导。病害在花生产区广泛蔓延。田间主要症状表现为黄绿色斑驳,此外受感染的植株叶片严重畸形、植株矮化。病毒的寄主范围包括7个科20种植物。接种后的反应,在菜豆(Phaseolus Vul-     

京鲁闽三省市花生病毒病考察报告

通过对京鲁闽三省市花生病毒病的考察,结合电镜和抗血清检测,初步肯定以上省市花生病毒病发生的主要种类,分布及发病程度。广泛流行的病毒病共5种,北京地区最严重的是花生黄花叶病毒病,发病率52.0％;山东是花生条纹病毒病,发病率66％;福建仅发现零星花生条纹病毒病,为28.1％。     

UV-B辐射增强对3种湿地植物叶片紫外吸收物质含量的影响

以香蒲、芦苇、鸢尾3种湿地植物为材料,采用模拟人工湿地的方法,研究植物叶片紫外吸收物质含量对3个UV-B辐射强度的响应。结果表明:3种植物叶片类黄酮含量变化趋势为高辐射处理下先增加后降低,低辐射处理条件下持续增加,高辐射处理显著大于低辐射处理、低辐射处理显著大于对照,增强UV-B处理下叶片类黄酮含量平均增幅为鸢尾(21.88%)>芦苇(14.23%)>香蒲(6.16%)。增强UV-B辐射条件下,香蒲和鸢尾叶片类胡萝卜素(Car)含量显著(p<0.05)低于对照,且高辐射处理低于低辐射处理;芦苇叶片Car含量则表现为低辐射处理大于对照、对照大于高辐射处理,两个辐射剂量之间差异显著(p<0.05)。增强UV-B处理下叶片Car含量平均降幅为香蒲(51.00%)>芦苇(26.63%)>鸢尾(17.95%)。说明3种湿地植物对增强UV-B辐射的防御能力为:鸢尾>芦苇>香蒲。     

马铃薯初侵染植株叶片PVY~N含量与品种抗性的关系

本试验介绍了将28个马铃薯品种(Solanum tuberosum),于播后6或8周用马铃薯Y病毒(PVY~N)汁液接种,用酶联免疫吸附法(ELISA)分期测定不同叶位叶片的病毒含量。结果表明:不同抗性品种叶片内病毒含量有明显差异。抗性越强,叶片内的病毒含量越低。     

中华微刺盲蝽的食性及植物寄主分析

中华微刺盲蝽是一种动植物食性盲蝽,可取食多种小型柔软的节肢动物,同时也吸食少量的植物汁液。通过2000-2003年在广东省的田间、果园、公园和弃置地的调查,发现12科36种植物为该盲蝽的植物寄主,其中有30种约占总数的83%为新记录的植物寄主。同时讨论了中华微刺盲蝽植物寄主的特点以及植物寄主的多样性对保护和利用该盲蝽的意义。      

茉莉的主要病虫害及其防治方法(八)茉莉烟粉虱

烟粉虱Bemisia tabaci Gennadius,属同翅目粉虱科小粉虱属,是热带和亚热带地区主要害虫之一。烟粉虱属多食性害虫,寄主范围广,据报道已超过500种,是一种世界性的害虫。该虫在茉莉花上已成为重要害虫,在茉莉花种植区普遍发生,以成虫、若虫刺吸植物汁液,造成叶片退绿、     

芝麻黄化花叶病毒病——一种Potyvirus引起的病害

芝麻黄化花叶病毒病,又称芝麻黄化卷叶病,是芝麻一种常见病害,在流行年份,给芝麻生产带来严重损失。感染病害的芝麻植株叶片出现黄色与绿色相间的黄化花叶症状,有的叶片向内卷曲或扭曲,畸形。病株表现矮化,感染早的病株严重矮化,常收不到产量。 1984年我们从油料所试验地芝麻黄化花叶病株中分离的每株进行初步鉴定。 一、病毒寄主范围测定 采用常规的人工汁液磨擦接种方法,在苗期,每种供试植物接种6—10株,观察症状表现。在测定的25种植物中,该病毒侵染10种植物,其中系统侵染6     

NCM-ELISA检测马铃薯Y病毒(PVY)技术的研究及应用

血清学方法是病毒检测的主要手段。本试验通过对马铃薯Y病毒(PVY)的提纯,免疫家兔制备PVY抗血清,并提取PYV免疫球蛋白IgG作为NCM-ELISA反应为一抗,以市售羊抗兔抗血清为二抗,在硝酸纤维素膜(NCM)上进行NCM-ELISA反应检测PVY,建立PVY NCM-ELISA检测反应体系。试验结果显示,NCM-ELISA具有反应特异性强,灵敏度高的优点,检测植物叶片样品的最高稀释度可达到1:250。通过对田间40份样品的NCM-ELISA和DAS-ELISA检测比较,其检测结果吻合率达到100%。由于NCM-ELISA方法可以将样品点在硝酸纤维素膜上,并且可贮存几个星期或将膜送到其他实验室进行检测,因此具有操作简单,使用方便,检测成本低等优点。     

花生矮化病毒一个新株系——轻型株系的研究

1983年考察花生病毒病发现河南、山东大多数调查田块均有普通花叶病毒病发生。病害症状和黄瓜花叶病毒CA株系(CMV—CA)引起的病害不同,前者病株叶片褪绿程度轻,后者病株上部叶片表现黄化花叶。血清鉴定病叶样品,多数均与花生矮化病毒E株系(PSV—E)抗血清有强反应。1984年,对河南郑州花生普通花叶病株上分离的毒株进行了鉴定。根据该病毒在花生上的症状特征、寄主范围、传播特性、病毒颗粒形态和血清学性质,     

MeJA对低温胁迫下冬小麦抗寒生理及关键基因表达量的影响

植物激素作为一种信号分子,在植物响应低温胁迫中起重要作用。本研究以东农冬麦1号为材料,在田间三叶期用0.5、1.0和2.0 mmol·L~(-1) MeJA喷施小麦叶片,在大田自然降温条件下,探讨外源MeJA对其抗寒生理及 TaPDF1.2、 TaCOI1、 TaMYC2基因表达量的影响。结果表明,MeJA处理降低了低温胁迫下东农冬麦1号叶片及分蘖节的相对电导率和MDA含量,提高了脯氨酸、可溶性糖和可溶性蛋白的积累,提高了抗氧化酶SOD、POD和CAT活性;在不同处理浓度中,1.0 mmol·L~(-1) MeJA效果最好,处理后小麦返青率达91.5%;-10℃时,叶片和分蘖节内积累的保护性物质最多,保护性酶活性最强。东农冬麦1号分蘖节比叶片具有更强的抗寒性。此外,1.0 mmol·L~(-1)外源MeJA处理显著提高了东农冬麦1号叶片及分蘖节中 TaPDF1.2、 TaCOI1、 TaMYC2基因的表达量。     

香蕉束顶病毒海口分离物Rb蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗血清制备

应用PCR方法从感染香蕉束顶病毒的香蕉植株幼嫩假茎和叶片总DNA中克隆了Rb(Rb-binding-like protein)基因的编码区,将其插入原核表达载体pET-28b中构建重组质粒pET28b-Rb。转化重组质粒的E.coli BL21(DE3)进行IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析结果表明,表达产物大小为22.6ku,且主要以包涵体形式稳定表达。目的蛋白经Ni2+-NTA琼脂糖亲和层析纯化后免疫家兔并获得抗血清。Western blot检测结果表明,抗血清与诱导表达的BBTV编码Rb蛋白发生特异性反应。间接ELISA法测定的抗血清效价大于1:250000。用抗血清对感病香蕉和健康香蕉进行检测,结果表明,抗血清对感病香蕉有很高特异性,最佳工作浓度为1:1500。     

小麦热激蛋白WHSP90基因的原核表达及多克隆抗体制备

为了进一步研究HSP90基因的功能,将WHSP90基因构建到原核表达载体pET-28a(+)中,得到His-WHSP90融合表达载体,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,发现1 mmol/L IPTG诱导4 h蛋白表达量最大;经过蛋白标记亲和层析柱(HisTrapTMHP)纯化得到的纯化蛋白浓度达到0.4 mg/mL.免疫家兔制备抗体,用间接ELISA法检测免疫后家兔抗血清效价大于125 000,满足后续试验要求的效价值,为在蛋白水平上研究WHSP90基因功能提供了基础.     

辣椒环斑病毒提纯及抗血清制备

为获得高效、灵敏的辣椒环斑病毒（Chilli ringspot virus,ChiRSV）多克隆抗体,通过差速离心、密度梯度离心等方法首次对辣椒环斑病毒进行了分离纯化,并将获得的高纯度病毒粒子用于免疫新西兰大白兔,制备了该病毒的多克隆抗血清。获得的抗血清经间接法酶联免疫吸附测定（ID-ELISA）,效价高达1 ∶ 125 000,且特异性高,与黄灯笼辣椒中另一种亲缘关系很近的同属病毒辣椒脉斑驳病毒（Chilli veinal mottle virus,ChiVMV）不发生血清交叉反应、可有效鉴别这2种Potyvirus病毒。获得的抗血清可用于ChiRSV的检测及后续实验,最适工作浓度在1 ∶ 5 000~1 ∶ 25 000之间。     

Antifungal properties of quinoa (Chenopodium quinoa Willd) alkali treated saponins against Botrytis cinerea

Quinoa (Chenopodium quinoa Willd) is a Latin American food staple readily available in large quantities in Peru, Bolivia and Ecuador. The outer husk of the grain is removed prior to consumption to reduce its bitter taste. At present, quinoa husks are considered as a by-product with no commercial value, despite its high content of triterpenoid saponins (20–30%). Due to this, the present work was undertaken to test if quinoa saponins have antifungal properties against Botrytis cinerea and if this activity is enhanced after alkaline treatment, since recent reports indicate that alkaline treatment of quinoa saponins increase their biological activity. Six products were tested against B. cinerea: (1) non-purified quinoa extract, (2) purified quinoa extract, (3) alkali treated non-purified quinoa extract, (4) alkali treated purified quinoa extract, (5) non-purified quinoa extract treated with alkali but without thermal incubation and (6) purified quinoa extract treated with alkali but without thermal incubation.

Untreated quinoa extracts showed minimum activity against mycelial growth of B. cinerea. Also, no effects were observed against conidial germination, even at 7 mg saponins/ml. However, when the saponin extracts were treated with alkali, mycelial growth and conidial germination were significantly inhibited. At doses of 5 mg saponins/ml, 100% of conidial germination inhibition was observed, even after 96 h of incubation. Fungal membrane integrity experiments based on the uptake of the fluorogenic dye SYTOX green showed that alkali treated saponins generate membrane disruption, while non-treated saponins had no effects.

The higher antifungal activity of alkaline treated saponins is probably due to the formation of more hydrophobic saponin derivatives that may have a higher affinity with the sterols present in cell membranes.     

Purification of potato leaf roll virus and an evaluation of methods for its diagnosis

To evaluate four diagnostic methods for potato leaf roll virus (PLRV), an antiserum was prepared against a virus preparation purified from infectedDatura stramonium L. by an exudation method. The antiserum had a titer of 1:64 in microprecipitin tests. In a procedure developed subsequently PLRV was purified by a method that involved grinding liquid nitrogen frozen stems, petioles, and veins from different solanaceous hosts. A chloroform and n-butanol clarification was done followed by two cycles of differential centrifugation. On sucrose gradients, these preparations formed one band containing spherical particles 25 nm in diameter. In Ouchterlony double-diffusion plates, the antiserum reacted positively with virus preparations from frozenPhysalis, Datura or potato tissue partially purified by two cycles of differential centrifugation. No visible reaction was obtained between the antiserum and the virus preparation from density gradient centrifugation. Antiserum neutralized infectivity of 40–50% of the virions in a partially purified preparation. No virus peak was detected in the scanning patterns obtained after a mixture of antiserum and virus was centrifuged on a sucrose density gradient. A few virus particles were seen attached to serologically specific grids. Methods to diagnose PLRV in infected potato tubers were then compared. In the first, aphids were used to acquire the virus from tuber sprouts. They transmitted the virus to 100% of thePhysalis test plants. Results of the second method, visual inspection of symptoms on potato plants, were similar to those of the first method. Sarkar’s electron microscopic method and immuno-specific grids were less efficient than aphid transmission to diagnose PLRV in tuber sprouts. The low virus concentration in infected tissue made these last two methods unreliable.     

拮抗香蕉枯萎病菌的解淀粉芽孢杆菌LX1菌株的鉴定及其抗菌蛋白基因的克隆

收集海南不同盐碱地的土样进行拮抗香蕉枯萎病菌的微生物分离,对具有较强抑菌作用的菌株进行形态特征、生理生化和分子鉴定,并克隆其抗菌蛋白基因.结果分离到1株具有较强抑制香蕉枯萎病菌能力的细菌LXl,经鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens).抑菌实验发现LX1菌株的发酵上清液中粗蛋白有一定的抑菌作用,经过Sephacryl S-200HR柱层析、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析分离纯化了其中抑菌作用最强的抗菌蛋白.质谱鉴定结果表明,抗菌蛋白与B.amyloliquefaciens FZB42内切葡聚糖酶同源性最高.根据质谱结果克隆了该抗菌蛋白的编码基因,该基因的核苷酸和氨基酸序列与B.amyloliquefaciens FZB42的内切葡聚糖酶的核苷酸和氨基酸序列同源性分别达99％和100％.拮抗香蕉枯萎病菌的芽孢杆菌LX1可作为潜在的防治香蕉枯萎病的的生防制剂,其抗菌蛋白基因也可通过遗传工程应用于香蕉枯萎病的防治.     

广州香蕉束顶病毒分离和核酸鉴定

经液氮冷冻、差速离心和蔗糖梯度离心，从广州地区香蕉束顶病株中获得大小为25nm的病毒颗粒，该病毒与香蕉束顶病毒单克隆兔抗血清呈阳性反应，该病毒核酸可被Dnase和S1核酸酶降解，但不能被RNase降解，属于ssDNA ；人子量大小约为1165碱基。     

橡胶树胶乳中几种植物激素的提取及其高效液相色谱测定法

对胶乳中玉米素（ZT）、赤霉素（GA）、生长素（IAA）和脱落酸（ABA）等4种植物激素进行分离和纯化,用80％预冷甲醇浸提,离心,离心后的上清液减压蒸发至水相,调节pH后用固相萃取柱进一步纯化,首先洗脱下GA、IAA和ABA,再洗脱下ZT。对ZT采用等度洗脱,流动相为甲醇和0.5％的乙酸（20/80 v/v）,分析时间为10 min, ZT在等度洗脱条件下的出峰时间（min）是5.426,回收率是87％;对GA、IAA和ABA采用梯度洗脱,流动相为甲醇和0.5％的乙酸（20/80 v/v）,分析时间为34 min,GA、IAA和ABA在梯度洗脱条件下的出峰时间（min）分别为：13.377、16.581和18.988,回收率分别为70％、82％和92％。由于对这4种激素分别检测,从而降低了每份样品中杂质的浓度,取得了良好的分离、检测效果。研究结果表明,试验重现性好,整个提取流程简便,适合胶乳中内源激素的分离与测定。     

枯草芽孢杆菌CS16抑菌活性与胞外产物成分分析

通过测定枯草芽孢杆菌CS16菌株的抑菌活性,对其胞外代谢物活性与成分进行分析,以期开发有效的生防菌剂.结果表明:CS16菌株对多株植物病原真菌具有明显的抑制作用,对病原细菌的抑菌作用相对较弱;CS16发酵液中羧甲基纤维素酶、淀粉酶和木聚糖酶活力分别为509.58 U/mL、7 198.71 U/mL和1 853.68 U/mL;其发酵液经酸沉淀所得粗提物可明显抑制香蕉枯萎病菌丝生长,最小抑菌浓度为0.062 5 mg/mL;利用反相硅胶柱、Sephadex LH-20凝胶柱和正相硅胶柱分离纯化获得较纯的抑菌物质,经薄层层析和HPLC定性分析,初步认为其胞外抑菌物质中含有Iturin A.