链霉菌-XY52代谢产物对小瓜虫的体外杀灭活性研究

[目的]研究链霉菌发酵代谢产物对小瓜虫幼虫和包囊的杀灭活性.[方法]通过不同极性溶剂回流提取链霉菌发酵液,制备粗提物,进行杀灭小瓜虫幼虫和包囊的药效活性试验,并对活性部位进行安全性评价.[结果]链霉菌发酵液的乙酸乙酯和正丁醇提取物体外杀幼虫效果明显高于其他组别,其对小瓜虫幼虫的半数致死浓度分别为48.2和15.5 mg/L,正丁醇提取物浓度为30.0 mg/L时对小瓜虫包囊杀灭率为100％.急性毒性试验结果表明,正丁醇提取物对草鱼的48h半致死浓度为(LC50)为195.0 mg/L,其安全浓度为48.7 mg/L.[结论]链霉菌-XY52代谢产物有望开发为一种比较安全的杀虫候选药物.     

鱼类指环虫植物源杀虫剂的筛选

为了探讨植物源杀虫剂(植物提取物)对鱼类指环虫的杀虫活性,以鱼鳃中型指环虫为供试虫,选择具有杀虫抑菌作用的52种药用植物的丙酮提取物进行了离体、活体杀虫活性测定,同时对杀虫效果较好的植物进行不同溶剂提取物杀虫试验,并对杀虫效果好的提取物进行理化检测。结果表明:在提取物供试药材(生药)质量浓度为10 mg/mL条件下离体初筛,得到18种具有较强杀虫效果的植物品种,其中经川楝、博落回、油茶饼、大黄、黄连、牵牛子、苦楝、藜芦、烟草等植物的提取物处理后指环虫能在10 h内死亡,且最低杀虫浓度均低于10 mg/mL(植物质量浓度)。其中博落回、川楝活体杀虫率达85%以上,其余植物提取物达75%以上。川楝乙醇提取物处理杀虫效果最好,浓度在700 mg/L(提取物质量浓度)时,指环虫已全部死亡,此时鱼死亡率仅为4%。同时分析得出乙醇提取物的主要成分是黄酮类、生物碱和萜类,这些物质对指环虫的灭杀起到了关键性作用。     

8种植物杀灭鱼类指环虫的活性部位研究

【目的】确定曼陀罗、博落回、小果博落回、银杏、蛇床子、鸦胆子、木通和槟榔等8种植物杀灭鱼类指环虫的活性部位。【方法】制备感染指环虫的金鱼模型。分别用石油醚、氯仿、丙酮、乙酸乙酯、乙醇、正丁醇和水提取曼陀罗等8种植物的有效成分,并检测其杀灭指环虫的生物活性,根据其杀虫效果来确定8种植物各自的活性部位。【结果】曼陀罗、博落回、蛇床子和银杏外种皮的氯仿提取物,鸦胆子和小果博落回的石油醚提取物及木通和槟榔的正丁醇提取物对金鱼指环虫的杀灭活性较强。【结论】曼陀罗、博落回、蛇床子和银杏外种皮杀灭指环虫的活性部位为氯仿提取物;鸦胆子和小果博落回的活性部位为石油醚提取物;木通和槟榔的活性部位为正丁醇提取物。     

40 种中草药杀灭离体多子小瓜虫效果研究

研究了40种中草药不同浓度水提物对多子小瓜虫(Ichthyophthirius multifiliis)的离体杀灭效果,结果表明:夏枯草、仙鹤草和三七等18种中草药在浓度为50g/L时才能在4h内杀灭多子小瓜虫滋养体;药物浓度为10g/L时,槐花、皂角刺和毛冬青等13种中草药可杀灭滋养体;药物浓度为1g/L时,紫荆和鹅不食草即可杀灭滋养体;药物浓度为0.1g/L时,只有生姜能杀灭多子小瓜虫滋养体。生姜水提物对滋养体和幼虫的最低致死浓度分别为100、50mg/L,半数有效浓度分别为30.3、15.7mg/L,100mg/L可完全抑制包囊孵化。由此可见生姜是一种可有效杀灭多子小瓜虫的中草药。     

八种渔药对半刺厚唇鱼小瓜虫病的治疗效果

为筛选治疗半刺厚唇鱼(Acrossocheilius hemispinus)小瓜虫病的有效药物,选用8种渔药,对人工感染小瓜虫(Ichthyopthirius multifillis)的半刺厚唇鱼进行治疗。结果表明,硫酸铜可以加速小瓜虫的分裂增殖;百草解毒剂(天然植物炭)对小瓜虫营养体无杀灭作用;单独使用甲醛溶液时对小瓜虫营养体有一定的杀灭作用,但治疗周期长,患病鱼成活率低;本稳精(干姜、花椒、杏叶)对小瓜虫营养体无杀灭作用,但可以提高患病鱼抵抗力,降低死亡率,宜与其他杀虫药物配合使用;当工业盐(NaCl)浓度在3 000～5 000 mg/L时,能有效去除患病鱼体表小瓜虫营养体,对患病鱼治愈率可达(86.7±9.4)%。小瓜绝杀(苦参碱、辣椒碱)使用前期能够加速小瓜虫的分裂增殖,但后期能有效杀灭小瓜虫幼虫,宜在患病鱼虫体数量不多时使用;鱼康乐(活性碳酸钙)治疗浓度为4～6 mg/L时,杀虫效果明显,患病鱼治愈率达(46.7±9.4)%～(60.0±0.0)%;百灵小瓜净(植物提取剂)治疗浓度为1.6～2.0 mg/L,杀虫效果明显,患病鱼治愈率达(80.0±0.0)%。     

过氧乙酸对小瓜虫幼虫和包囊的杀灭效果

采用过氧乙酸对4种主要养殖鱼类进行急性毒性试验,测试了过氧乙酸对小瓜虫幼虫和不同发育阶段包囊的杀灭效果。结果显示:过氧乙酸对斑点叉尾鲴、草鱼、奥尼罗非鱼,鲫鱼的安全浓度依次为1.73、3.00、3.57、5.20 mg/L。过氧乙酸在浓度为6.250 mg/L时,0.5 h即能杀死全部小瓜虫幼虫;在1.562 mg/L时,1 h即能杀死全部幼虫。过氧乙酸对不同发育阶段的包囊都具有一定的杀灭效果,当过氧乙酸的浓度为6.250、3.125、1.562 mg/L时,刚脱落的包囊的死亡率依次为75.63%、45.60%、25.60%,脱落2h的包囊的死亡率分别为64.23%、46.32%、20.20%,脱落10 h的包囊的死亡率分别为65.86%、35.07%、10.20%。因此,过氧乙酸在较低的浓度范围内对小瓜虫的幼虫和包囊具有一定的杀灭效果。     

洋虫内产β-葡萄糖苷酶内生菌发酵液转化人参皂苷产物分析及其抗肿瘤活性研究

为提高人参皂苷生物利用度，明确人参皂苷药用洋虫体内生物转化规律及其代谢产物抗肿瘤活性，通过MRS（含七叶苷和柠檬酸铁）培养基筛选洋虫内生菌中高产β-葡萄糖苷酶的菌株，制备复合菌发酵剂液体转化人参皂苷提取物，利用高效液相色谱-串联质谱法分析发酵产物中人参皂苷的化学组成及其动态变化规律，采用四甲基噻唑蓝（methylthiazoletrazolium，MTT）染色法阐明发酵产物低（0.5 mg·L^-1）、中（2 mg·L^-1）、高（5 mg·L^-1）剂量对A549细胞抗肿瘤活性的影响。人参提取物中共检测出Re、Rg1、Rf、Rb1、Rc、Rb2、Rd 7种皂苷，代谢产物中有去糖基化人参皂苷Rh1、Rg3和compoud K产生，发酵产物MTT试验显示高剂量组（5 mg·L^-1）反应72 h抑制肿瘤细胞率可达85%。由此表明，利用洋虫内生菌复合菌液转化人参皂苷提取物可提高中药人参和洋虫的药用价值，为中草药的发酵改性提供了新思路。     

7种植物源活性成分对百香果蓟马的毒力和驱避行为测定

为了研究7种植物源活性成分对百香果蓟马毒力和诱驱行为，采用室内毒力测定方法测定植物源活性成分对百香果蓟马的毒力，应用嗅觉仪检测植物源活性成分对百香果蓟马的驱避性。结果表明，7种植物源成分对百香果蓟马毒力为：马鞭草烯酮(LC₅₀=157.359 mg·L^-1)>丁香酚(LC₅₀=312.678 mg·L^-1)>D-柠檬烯(LC₅₀=370.241 mg·L^-1)>臭椿酮(LC₅₀=421.410 mg·L^-1)>茉莉酸甲酯(LC₅₀=2 704.755 mg·L^-1)>香茅醛>(LC₅₀=5 105.572 mg·L^-1)>槟榔碱(LC₅₀=5 554.923 mg·L^-1);7种植物源成分对百香果蓟马诱驱行为表现为，D-柠檬烯对蓟马有显著的吸...     

优异党参种质“凤党”离体繁殖技术

以“凤党”优株种子离体培养的无菌苗茎段为外植体，研究植物生长调节剂对其愈伤组织诱导及再分化的影响。结果表明，愈伤组织诱导的最适培养基为MS+0.5 mg·L^-1 NAA+1.0 mg·L^-1 6-BA，芽分化的最适培养基为MS+0.1 mg·L^-1 NAA+0.5 mg·L^-16-BA，生根的最适培养基为1/2 MS+0.2 mg·L^-1 NAA+0.2 mg·L^-1 IBA，愈伤组织诱导率、芽分化率及生根率分别可达91%、100%和97%。建立的离体再生植株快速繁殖体系，为“凤党”优异种质推广利用和工厂化育苗奠定了基础。     

白花油茶胚性愈伤诱导及植株再生

本研究以白花油茶未成熟胚为外植体，对其消毒方式及胚性愈伤组织培养进行研究。结果表明，未剥果皮的外植体先用75%乙醇浸泡60 s后转入0.1%HgCl₂浸泡8 min,再转入2%NaClO中浸泡8 min,成活率最高，达86.67%。未成熟胚切块接种于MS+0.5 mg·L^-1 2,4-D+2.0 mg·L^-1 6-BA中，胚性愈伤组织诱导最好，诱导率最高，达89.63%;将绿色愈伤组织转接至MS+0.2 mg·L^-1 NAA+1.0 mg·L^-1 6-BA时，愈伤组织表面及其周围产生大量体细胞胚，呈球形、心形、鱼雷状和子叶状等多种形状，且多种相互重叠生长，胚状体诱导率最高，达68.89%;不同配比的6-BA和NAA诱导体细胞胚产生不定芽的效率差异明显，其中2.25 mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1 NAA和3.0 mg·L^-1 6-BA+1.0 mg·L^-1 IBA不定芽分化效果...     

山桐子离体培养植株再生

以种子和叶片为外植体,研究了离体条件下外植体类型及植物生长调节剂对山桐子器官发生和植株再生的影响。结果表明:种子为诱导愈伤组织的适宜外植体; 在MS+1.0 mg·L^-16-BA +1.0 mg·L^-1 NAA +3%蔗糖+0.6%琼脂的培养基上,愈伤诱导率达96.8%; 继代培养在MS+0.08 mg·L^-1 TDZ + 1.5 mg·L^-16-BA +0.05 mg·L^-1 NAA 培养基上能成功的诱导芽的分化,诱导率达48.3%以上; 芽增殖的适宜培养基为1/2MS +0.03 mg·L^-1 TDZ +2.0 mg·L^-16-BA +0.1 mg·L^-1 NAA +3%蔗糖+0.6%琼脂,增殖系数为4.83; 在1/2MS+ 0.5 mg·L^-1 IBA +2%蔗糖+0.6%琼脂培养基上,无根苗生根率达88%。     

手参愈伤组织培养及植株再生

以手参为对象,研究了外植体和植物生长调节剂对愈伤组织诱导,以及植物生长调节剂对不定芽分化及生根的影响,初步建立了其组织培养再生体系。结果表明,以茎尖外植体愈伤组织诱导率最高,在MS附加0.5 mg·L^-1 NAA的培养基上,诱导率可达60%;愈伤组织在MS附加0.1 mg·L^-1 NAA培养基上增殖效果较好;不定芽分化诱导以MS附加0.1 mg·L^-1 TDZ最高,可达53.3%,在MS附加0.1 mg·L^-1 TDZ和0.1 mg·L^-1 NAA的培养基更适合芽的增殖和生长;生根诱导以1/2MS培养基附加0.5 mg·L^-1的NAA的诱导率最高,可达30.6%。     

盾叶薯蓣提取物对鱼类指环虫的杀灭效果

以寄生在金鱼Carassius auratus鳃部的中型指环虫Dactylogyrus intermedius为指示寄生虫,采用活体感染、活体杀虫的方法,研究了用不同溶剂（石油醚（沸程60-90℃）、氯仿、乙酸乙酯、乙醇和水）分别对盾叶薯蓣Dioscorea zingiberensis进行提取,其5种提取物的杀虫活性。结果表明,盾叶薯蓣的杀虫活性部位是乙醇提取物。将乙醇提取物与甲苯咪唑、伊维菌素、阿维菌素和吡喹酮4种原料药的杀虫效果进行比较,结果表明：盾叶薯蓣乙醇提取物的最高杀虫浓度为17.0 mg/L,平均最高杀虫率为99.37%;其次是甲苯咪唑和吡喹酮,最高杀虫浓度分别为3.4、6.2 mg/L时,平均最高杀虫率分别为99.01%和95.39%;而伊维菌素、阿维菌素对中型指环虫无明显的杀灭作用。盾叶薯蓣乙醇提取物对斑马鱼Brachydanio rerio的24、48、96 h的半致死浓度（LC50）分别为53.47、34.05、19.34 mg/L。     

‘凤丹’牡丹组织培养研究

以‘凤丹’牡丹芽为材料,对其外植体消毒、褐化防治、组培苗扩繁和生根技术进行研究。结果表明:用75% 酒精消毒30 s,0.1% 升汞消毒8 min消毒效果最佳,外植体的污染率和成活率分别为32.31%和64.32%;其最适初代诱导和继代增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1和MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1+PIC (毒莠定,Picloram) 1.0 mg·L^-1,增殖系数为4.84;生根培养基为1/2MS+CaCl₂ 220 mg·L^-1+IBA 3.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1,生根率为74.30%;低温结合3 mg·L^-1硝酸银培养可使褐化率降至29.15%。     

白花悬钩子的叶片组培快繁与植株再生研究

为获得一套完整高效的白花悬钩子(Rubus leucanthus Hance)组培快繁技术体系,以叶片为外植体,系统研究了外植体不同灭菌时间、不同植物激素配比及浓度对愈伤组织诱导及丛生芽分化、增殖和生根的影响,并进行了组培苗移栽。结果表明：最佳的外植体灭菌方式为2%NaClO溶液2 min+0.1%HgCl₂溶液5 min,实现了污染率最低(23.33%)、存活率最高(73.33%);最佳的丛生芽分化诱导培养基为MS+3.0 mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1 KT+0.5 mg·L^-1 NAA,愈伤组织诱导率为100%,芽诱导率为93.33%;6-BA与KT对增殖系数有显著影响,最佳的继代增殖培养基为MS+2.5 mg·L^-1 6-BA+1.5 mg·L^-1 KT+0.4 mg·L^-1 NAA,培养20 d的增殖系数达7.84;最适的生根培养基为1/2MS+1.0 mg·L^-1 IBA,生根率为10...     

烟草秸秆绿原酸提取工艺优化及其抑菌效果研究

为扩展烟草秸秆的利用途径，探究烟草秸秆绿原酸对烟草疫霉的抑菌效果，采用单因素试验和响应面分析法优化烟草秸秆绿原酸微波辅助提取工艺，并通过离体培养探讨烟草秸秆绿原酸对烟草疫霉菌的抑制作用。单因素及响应面结果表明，烟草秸秆绿原酸最佳提取工艺为料液比1∶15(g·mL^-1)，提取温度50.03℃，乙醇体积分数50%，此时粗提物中绿原酸含量为3.48 mg·g^-1；离体条件下，烟草秸秆绿原酸的添加均抑制了疫霉菌的生长，其中175 mg·L^-1烟草秸秆绿原酸对菌落直径的抑制效果最为显著，抑菌率高达32%。此外，碘化丙啶(PI)染色结果表明，175 mg·L^-1的烟草秸秆绿原酸可通过破坏烟草疫霉菌细胞膜的完整性抑制菌丝生长。研究结果为烟草秸秆有效利用和新型天然植物源杀菌剂开发奠定了基础。     

大口黑鲈CO2麻醉保活运输工艺研究

试验对大口黑鲈进行CO₂麻醉保活研究,探究了不同CO₂浓度、水温、包装运输方式对大口黑鲈麻醉效果和存活率的影响。结果表明,CO₂浓度为100 mg·L^-1时不能达到完全麻醉的效果,200、300、400和500 mg·L^-1CO₂浓度均能对大口黑鲈进行完全麻醉,其中CO₂浓度为200 mg·L^-1保活时间24 h以上,保活率为100%。水温控制在15~20 ℃时能保证大口黑鲈的麻醉保活运输24 h后的存活率达100%。在3种包装方式中,保温箱充液氧运输方式比打包袋和保温箱增氧泵曝气的保活效果好。综上,在200 mg·L^-1的CO₂浓度、(10±1)mg·L^-1氧气浓度、15~20 ℃水温条件下,对大口黑鲈麻醉30 min后,采用保温箱充液氧运输方式,大口黑鲈保活运输24 h,存活率达100%。     

匍茎百合再生体系的建立及多倍体诱导

为了保护匍茎百合(Lilium lankongense)的野生种质资源并提供简单有效的快繁方法,以匍茎百合为植物材料,建立以鳞茎为外植体的高效再生体系,并利用秋水仙素处理种子,诱导出多倍体植株。通过调节培养基中的植物生长激素和蔗糖的质量浓度,确定了匍茎百合不定芽诱导、小鳞茎膨大和生根的最佳培养基。结果表明：最佳不定芽诱导培养基为MS培养基+6-苄氨基嘌呤(6-BA)1.0 mg·L^-1+萘乙酸(NAA)0.7 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1,不定芽诱导系数为2.33,显著高于其他处理组合;最佳小鳞茎膨大培养基为MS培养基+蔗糖60 g·L^-1,可显著提高小鳞茎的直径和鲜质量;最佳生根培养基为0.5倍浓度的MS培养基+萘乙酸(NAA)0.4 mg·L^-1+吲哚丁酸(IBA)0.1 mg·L^-1,可显著增加根长和根数。用质量分数为0.03%的秋水仙素浸泡18 h,种子的成活率最高,为93.15%,再通过形态学、生理学和流式细胞仪鉴定,最终鉴定出4个四倍体植...     

板栗成熟胚再生体系的建立与优化

研究了外植体消毒方法、植物生长调节剂组合对胚萌发和生长的影响。以迁西板栗主栽品种‘燕山早丰’成熟胚为试验材料,采用L₉(3⁴)试验设计对增殖培养基进行筛选。结果表明,二次消毒处理可以有效抑制污染,污染率最低为16.67%。胚萌发和生长最佳基本培养基为WPM+6-BA 1.0 mg·L^-1,萌发率最高达到95.00%,胚萌发苗最高为59.65 mm。不定芽诱导的最适培养基为:MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+IBA 0.1 mg·L^-1。芽诱导率最高为92.50%。最适增殖培养基为GD+ZT 2.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1,增殖系数最大为3.91。     

火焰南天竹组培快繁体系的探讨

以观赏灌木火焰南天竹幼嫩茎尖为研究对象,研究不同灭菌时间对成活率及污染率的影响,以及不同培养基和激素浓度对不定芽诱导、增殖和生根的影响。试验表明,在无菌环境下,用70%酒精消毒5 s,再用10%NaClO灭菌12 min的灭菌效果最佳;最佳诱导培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+IBA 0.1 mg·L^-1+AC 1.0 g·L^-1,最高诱导率为87%;最佳增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+IAA 0.1 mg·L^-1L +AC 1.0 g·L^-1,增殖系数最高可达5.29;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg·L^-1 +AC 4.0 mg·L^-1,生根率最高可达98%。将火焰南天竹组培苗移入泥炭土∶蛭石∶珍珠岩为8∶1∶1的混合基质中成活率较高,最高可达94%,且组培苗长势良好。