铁皮石斛的种子培养

以铁皮石斛成熟种子为外植体,研究原球茎的诱导、增殖、分化和生根的最佳培养条件。结果表明:1/2 MS基础培养基最适合铁皮石斛的种子培养,45 d时原球茎诱导率达到95%;原球茎增殖的最佳培养基为1/2 MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+20%马铃薯提取液,每代增殖16倍,原球茎形态好、变异少;原球茎团于1/2 MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.25 mg/L+20%马铃薯提取液的培养基上可诱导丛芽分化,于MS+NAA 0.5 mg/L+20%香蕉汁+活性炭5g/L的培养基上易于诱导不定根的形成,60 d后可形成健壮的完整小植株。     

报春石斛组培快繁技术体系的建立

以报春石斛蒴果为外植体,通过对种子无菌萌发和原球茎诱导、原球茎增殖及丛生芽诱导、生根壮苗以及移栽驯化的研究,以期建立报春石斛的组培快繁技术体系。结果表明:培养基MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1)最适报春石斛种子无菌萌发和原球茎的诱导;原球茎增殖及丛生芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+香蕉泥100g·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1),继代培养45d,增殖系数达8.2;最佳生根壮苗培养基为MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+KT 0.5mg·L~(-1)+NAA 0.2mg·L~(-1)+香蕉泥100g·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1)+活性碳1.0g·L~(-1),培养3个月,生根率达100%,根系较长,苗壮;3—4月是桂林地区移栽报春石斛组培苗的最佳季节,生根苗在栽培基质Ⅰ(树皮∶水苔∶珍珠岩∶蛭石=10∶2∶1∶1,体积比)的长势好于栽培基质Ⅱ(树皮∶珍珠岩∶蛭石=10∶1∶1,体积比),成活率为92.3%。     

鹤顶兰四倍体植株的诱导与鉴定

 以鹤顶兰原球茎为材料,使用秋水仙素进行了四倍体的离体诱导。结果表明,采用秋水仙素浸泡法可以诱导鹤顶兰原球茎发生倍性变化,含0.02%秋水仙素的“花宝一号”溶液浸泡处理6 d诱导率最高,达22.5%。细胞学鉴定发现,诱变成活植株中有3株为四倍体,其植株形态、气孔大小、气孔密度与二倍体存在差异,细胞核明显增大。     

药用植物马鞭石斛组织培养与快速繁殖

以马鞭石斛(Dendrobium fimbriatum Hook.var.oculatum.Hook.)的种子为外植体进行了组织培养快速繁殖技术研究,以期筛选出适合各个阶段培养的培养基配方.结果表明:马鞭石斛种子萌发原球茎诱导的最佳培养基为MS+GA 0.1 mg/L+6-BA 1.5mg/L,诱导率达85％;KT 0.5 mg/L+6-BA 2.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L的MS培养基最适宜马鞭石斛原球茎增殖及幼苗分化,分化率为90％;最适宜马鞭石斛生根的培养基为MS+AC 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L,生根率为100％.     

铁皮石斛人工种子包衣技术研究

以铁皮石斛未萌发原球茎、萌发原球茎为繁殖体,利用蔗糖、淀粉、ABA、NAA、活性炭、多菌灵、海藻酸钠设计了36种人工胚乳并研究它们对铁皮石斛人工种子萌发及生长状态的影响,筛选出适宜的繁殖体和胚乳配方,在此基础上进行包衣制作。结果表明:以萌发原球茎为繁殖体的人工种子萌发率和成活率较高。适宜的人工胚乳组合为蔗糖3.0%、ABA 1.0mg/L、活性炭浓度0.5%、多菌灵3.0%、海藻酸钠3.0%。在铁皮石斛人工种子外层制作包衣,自然条件下可获得较高的萌发率和成活率。     

铁皮石斛多倍化诱导与鉴定研究

以铁皮石斛拟原球茎为材料,利用秋水仙素作为诱导剂,研究不同浓度及时间条件下,秋水仙素对铁皮石斛多倍化的诱导效果。结果表明:秋水仙素浓度为0.2%,处理时间为48h,诱导效果最佳,成活率达78%,变异率为32%;处理后的铁皮石斛在形态、气孔直径、染色体数目上都有变化,呈多倍体表型特征,其体细胞染色体数多为2n=68～76条,而对照2n=38～40条。     

芦笋四倍体诱导、倍性鉴定及生物学特性的研究

以南方主栽品种"井岗701"二倍体芦笋的露白种子和幼苗为试材,研究了秋水仙素浓度、处理时间及浸泡时的转速对芦笋四倍体诱导效果的影响,并对四倍体和二倍体芦笋的部分抗性和形态特征进行了比较。结果表明:以0.2%的秋水仙素浸泡露白种子6h效果最好,四倍体诱导率最高,为20%,但浸泡时的不同转速对四倍体诱导影响差异不显著;而用0.3%的秋水仙素连续滴苗4d,四倍体诱导率最高为18%;浸泡露白种子法比滴苗法诱导效果好;四倍体植株较二倍体更加粗壮,在抗热性和抗旱性方面也明显优于二倍体。     

蝴蝶兰种子胚高频率诱导原球茎的研究

以不同成熟度的蝶兰杂交1号种子为外植体进行离体培养,探讨了不同激素配比、种子不同采收期以及在培养基中添加马铃薯汁和活性碳对原球茎形成、发育的影响以及对原球茎诱导效果的影响.结果表明生长了4个半月的未成熟种子胚最适宜离体培养,仅需要20 d就可形成原球茎,有效原球茎的诱导率达到100%.吲哚丁酸对蝴蝶兰未成熟种子胚的进一步发育以及诱导有效原球茎的形成和发育具有明显的促进作用,其适宜的吲哚丁酸浓度为1 mg/L.在加入附加物时,吲哚丁酸的浓度范围可提高到2 mg/L,其有效原球茎的诱导率仍能达到100%.     

铁皮石斛组培快繁及栽培技术研究

通过对铁皮石斛的种子萌发、茎尖和腋芽的诱导,从而形成原球茎,由原球茎的增殖培养、器官分化,建立快速繁殖体系,成功培育出再生植株。并从试管苗的大棚移栽和养护等方面进行技术研究,初步形成从组培快繁到大棚生产的一系列生产过程。     

秋水仙素离体诱导大花蕙兰多倍体试验

在离体培养条件下,以大花蕙兰“红宝石”原球茎为材料,比较了秋水仙素浸泡法和混培法在不同浓度、不同处理时间诱导大花蕙兰体细胞染色体加倍的效果。结果表明：无论是用秋水仙素溶液浸泡处理还是将秋水仙素加入培养基中混培处理,均可诱导大花蕙兰多倍体的产生。但以后者混培法效果较好,在秋水仙素浓度为3%,处理15 d的条件下,诱导率最高达30%。对变异株进行细胞学观察后发现,染色体为2n=4x=80,为四倍体;而二倍体对照染色体为2n=2x=40。     

利用二硝基苯胺类除草剂离体诱导西瓜四倍体

 以二倍体西瓜单系Z-A和Z-R为试验材料,采用不同浓度的二硝基苯胺类除草剂——胺磺灵、二甲戊乐灵和氟乐灵处理其离体子叶,并以秋水仙素和不含任何诱导剂的液体培养基为对照,研究诱导西瓜四倍体的效果。结果表明,3种除草剂诱导西瓜四倍体的效果都比秋水仙素好,二甲戊乐灵、胺磺灵、氟乐灵和秋水仙素的四倍体诱导率分别为40.0%、33.3%、26.7%和13.3%。采用子叶直接处理比间接处理的四倍体诱导率高。通过 FDA荧光法对西瓜试管苗叶片表皮保卫细胞叶绿体计数,进行四倍体变异早期鉴定,准确率为90%以上。     

秋水仙素和胺磺灵除草剂诱导小型西瓜四倍体研究

用0.2%秋水仙素水溶液和不同浓度胺磺灵除草剂滴苗处理诱导小型西瓜四倍体。结果表明,用秋水仙素处理,诱变频率基因型间差异较大,高的可以达到26.3%,低的仅有1.4%。胺磺灵诱导小型西瓜四倍体有一定的效果,但整体诱导频率不高。     

金冠苹果成熟胚离体诱导四倍体的研究

 以自然授粉的‘金冠’苹果种子为材料，研究了秋水仙素处理成熟胚离体诱导四倍体技术和嵌合体分离方法。结果表明：将完整胚在0.5%秋水仙素+1%二甲基亚砜的混合溶液中暗处理48 h，然后接种在MS+TDZ 1.0 mg·L^-1+IBA 0.5 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1的再生培养基中，变异率高达10.6%。与二倍体相比，四倍体试管苗生长缓慢，节间变短，叶片增大，叶形指数趋小化，气孔密度降低，保卫细胞增大。经压片法鉴定茎尖染色体数和流式细胞仪分析DNA含量，表明多数变异植株为同质四倍体。利用叶片离体再生器官技术，从诱导获得的嵌合体植株中分离出同质突变体。     

Induction of tetraploidy in meristematically active seeds of Japanese barberry (Berberis thunbergii var. atropurpurea) through exposure to colchicine and oryzalin

Japanese barberry (Berberis thunbergii DC) is an invasive shrub, widely naturalized across the United States, whose numerous cultivars remain an important horticultural commodity. Maintaining this crop for the future necessitates the development of sterile clones. Exposure to the mitotic inhibitors colchicine and oryzalin is a traditional method for inducing tetraploidy in breeding lines as a precursor to creating sterile genotypes. Treatments utilized pre-germinated B. t. var. atropurpurea seeds with emerged radicles. Seeds were immersed in aqueous solutions of colchicine (.02%, .05%, .1% and .2%) and oryzalin (.002%, .005%, .01% and .02%) dissolved in 1% DMSO for 6, 12 and 24 h durations. Seedling ploidy level was determined via flow cytometry following 6 and 52 weeks of growth in the greenhouse. Both anti-mitotic chemicals proved effective at inducing tetraploidy and produced comparable efficiency rates. The survival rate of treated seeds decreased in response to both increased mitotic inhibitor concentration and longer exposure duration. While exposure to oryzalin produced greater seed mortality than colchicine, most seedlings that survived had altered ploidy levels. The most efficient oryzalin concentration was 0.002% with a rating of 28%, while the most efficient colchicine concentrations were in the range from 0.05% to 0.2%. Duration of exposure to mitotic inhibitor was not a significant factor over the range from 6 to 24 h. Reversion of tetraploid plants to the diploid state occurred at a low frequency following a dormancy period. Some tetraploid seedlings derived from exposure to both chemicals displayed foliar abnormalities including irregular leaf margins and mottled lamina. The primary advantage of colchicine was low seedling toxicity, while oryzalin was notable for its ability to induce tetraploidy at low concentrations.     

外源NH4+ 对非洲菊舌状花着色与生长的影响

 在非洲菊(Gerbera hybrida) 舌状花离体培养条件下, 研究了外源NH₄⁺对花瓣着色与生长的影响。结果表明, 10.00 mmol·L^-1NH₄⁺明显抑制舌状花花瓣的着色与展开, 宽度、鲜样质量和干样质量也明显下降。对照(3%蔗糖溶液) 舌状花花色素苷含量在36 h后开始缓慢增加, 54～84 h快速积累, 以后增加较慢。在36 h之内进行NH₄⁺处理, 可完全抑制着色与展开, 而36 h之后进行处理则抑制作用减弱。NH₄⁺处理时间长于12 h, 则抑制作用更加明显NH₄⁺处理下, 蔗糖含量的增加能够促进花色素苷的积累, 果糖、乳糖、麦芽糖和葡萄糖等不影响NH₄⁺对着色的抑制作用。     

君子兰未成熟胚四倍体诱导及染色体数鉴定

 以君子兰（Clivia miniata Regel.）品种‘胜利’为试材,采用一种新型外植体未成熟胚,利用秋水仙素与组织培养相结合的方法,研究秋水仙素浓度、处理时间和不同胚龄对未成熟胚诱导加倍的影响。结果表明：在MS + NAA 2.0 mg · L-1 + BA 1.5 mg · L-1培养基上,0.01%秋水仙素处理180 d胚龄的未成熟胚20 d诱变效果最佳,四倍体诱变率最高,达30.8%,形态变化率达36.5%,死亡率为34.1%。经0.03%秋水仙素处理120 d胚龄的未成熟胚30 d诱变效果也较好,四倍体诱变率较高,达24.0%,形态变化率达21.1%,死亡率为46.7%。经染色体数观察,加倍处理后代中存在2x、4x和混倍体植株。随机调查了267株加倍处理植株,得到30株四倍体（2n = 4x = 44）、194株二倍体（2n = 2x = 22）和43株混倍体,平均四倍体诱变率为11.2%。秋水仙素处理出现的植株生长缓慢,生根明显较晚,叶片变宽变短等形态变化可以作为加倍的初期有效判断指标。     

优质四倍体猕猴桃新品种‘武植3号’

猕猴桃新品种‘武植3号’是从高海拔地区自然形成的四倍体中华猕猴桃优良单株后代中选出,该优株综合性状优良：维生素C含量高达2.75～3.00 mg·g^-1, 可溶性固形物15.2%, 总糖11.2%, 果肉硬度17.7 kg·cm^-2。品质上等,抗逆性强,丰产稳产,产量33 t·hm^-2。     

杂交兰‘韩国桃花’×蕙兰种间杂交种子无菌萌发特征研究

 以大花蕙兰和墨兰杂交育成的品种‘韩国桃花’为母本, 再与蕙兰进行种间远缘杂交, 取其不同成熟度的种子进行无菌播种, 研究了杂交种子萌发、原球茎和根状茎的增殖与分化特征。结果表明: 授粉后240 d的种胚具有较好的萌发能力, 在所试的4种培养基中, 以1/2MS添加6-BA 0.5 mg·L^-1和NAA 2.0 mg·L^-1的处理萌发效果较好; 萌发的种子可以通过原球茎和根状茎两条途径增殖; 1/2MS培养基添加6-BA 0.5 mg·L^-1和NAA 2.0 mg·L^-1适于原球茎增殖, 培养30 d后增殖系数可达4.25; 而NAA 0.5、1.0 mg·L^-1适宜原球茎的发育和植株再生; 根状茎的增殖以NAA:6-BA = 2:1较适宜, 培养40 d后增殖系数可达6. 0以上; 当NAA浓度为1.0 mg·L^-1时, 根状茎发育及植株再生效果佳, 培养70 d后超过80%的根状茎茎端分化成苗。杂交后代通过原球茎和根状茎均可获得再生植株, 且形态无明显差别。     

同源四倍体青花菜离体再生及其倍性鉴定

以同源四倍体青花菜带柄子叶为外植体,研究其离体再生体系。结果表明： 10 d苗龄外植体在MS + 0.05 mg·L^-1 NAA + 3.0 mg·L^-1 6-BA+0.8% 琼脂 + 3% 蔗糖培养基上不定芽的再生频率最高为63.3％;继代培养(MS + 0.04 mg·L^-1 NAA + 4.0 mg·L^-1 6-BA + 0.8% 琼脂 + 3% 蔗糖)增殖系数为6,诱导(1/2MS + 0.1 mg·L^-1 NAA + 0.7% 琼脂 + 3% 蔗糖)生根率100％,移栽成活率90％。流式细胞技术分析及染色体计数鉴定结果表明,再生植株的DNA相对含量为二倍体的2 倍,染色体数为2n=4x=36。     

霍山石斛类原球茎诱导及其发育过程研究

 以霍山石斛试管苗带节茎段为材料, 诱导产生类原球茎, 并研究类原球茎发育过程。结果表 明, 霍山石斛类原球茎诱导的适宜培养基为Knudson + 2, 4-D 0.1 mg·L ^{- 1} + KT 0.05 mg·L ^{- 1} , 诱导率为25.50%。以固体静置、固液双层静置、液体静置、液体振荡4种不同培养方式进行增殖培养, 其中液体振荡培养方式更适于类原球茎快速增殖。类原球茎通过胚状体发生途径形成, 类似于合子胚的发育, 即经历原胚、心形胚、鱼雷形胚和子叶胚, 最后发育为成熟胚。类原球茎发育进程大致可分为类原球茎形成期、类原球茎肥大期、茎叶分化期、茎叶形成期以及茎叶伸长期等阶段。