真孕和假孕母犬激素水平的比较研究

选择自然发情的健康母犬25只分为2组,第1组15只母犬采用公犬进行自然配种,第2组10只母犬用输精管结扎的公犬进行自然配种作为假孕犬模型,2组母犬配种后20d采集血清分别测定孕酮、hCG、Leptin激素水平,在配种1个月后经B超诊断,选择第1组10只成功怀孕母犬和第2组的10只未孕母犬进行激素数值的统计分析.结果表明:配种后20d真孕组母犬与假孕组母犬的孕酮水平分别为(39.46 ±8.94)、(38.22±11.71)ng/mL,2组差异不显著(P＞0.05);真孕组母犬的hCG和Leptin激素水平均极显著高于假孕组母犬(P＜0.01).结论:孕酮不宜作为母犬早孕的检测指标,hCG和Leptin激素可能是判别母犬真假孕的激素指标.     

肉犬的配种技术要点

1　配种适期掌握犬的适期配种是有效地提高母犬的受胎率和产仔数的关键 ,交配过早或过晚 ,母犬的受胎率都会有所降低。一般来说 ,从母犬阴道流出第 1滴血之日起的第 10～ 13天是最适宜配种时期 ,但也因犬个体不同而提前或延后。准确地判断母犬的最佳配种时间 ,可依据外部行为特     

生殖激素制剂对母猪早期妊娠诊断效果研究

应用PMSG制剂对52头配种后14d～26d的母猪进行早期妊娠诊断,在5d内妊娠与未妊娠母猪的确诊率均为100%。并确定了用PMSG制剂对母猪进行早期妊娠诊断时的判定标准。用该制剂对母猪进行早期妊娠诊断的最佳时间是配种后14d～17d。且用该法进行检测不会造成母猪流产,母猪产仔数及仔猪发育均正常。检出的未妊娠母猪在注药后5d内即正常发情,配种后可以正常受胎、产仔,且不影响母猪以后的发情和受胎,具有早期妊娠诊断和诱导发情的以重效果。该试验还对PMSG制剂诊断法与超声波诊断法的应用价值进行了比较。     

用血清酸滴定法对梅花鹿、马鹿进行早期妊娠诊断的研究

采用血清酸滴定法对配种后10～30d的20头梅花鹿和马鹿进行了早期妊娠诊断研究。受配25d以后,10头梅花鹿中8头有白色沉淀已受孕,2头空怀;10头马鹿中6头有沉淀已怀孕,2头未检测出,但1头怀孕,1头空怀,其余2头马鹿未做统计。表明,血清酸滴定法用于梅花鹿、马鹿的早孕诊断具有诊断时间早、方法简便、结果准确等优点,宜于在基层推广。     

气肿疽梭菌胶体金诊断试纸条的研制

为建立快速、准确、简便的检测气肿疽的胶体金免疫层析试纸条,以免疫层析法为指导,根据抗原-抗体的特性,建立了不需要再加入任何检测试剂且快速简便的检测方法。结果表明,胶体金与该单抗的最佳结合量为30μg/m L,最佳pH值为8.4,最佳NC膜为Millipore HFB1350220型。将纯化的气肿疽梭菌多抗及羊抗鼠IgG分别以1∶4和1∶8的稀释倍数喷于硝酸纤维素膜的T线和C线。对胶体金诊断试纸条进行验证,敏感度高,可检测到的最低抗原量为1×10~5CFU/m L,特异性强、无假阳性与交叉反应现象、有较好的稳定性。本研究旨在建立快速、准确、简便的检测气肿疽的胶体金免疫层析试纸条。     

肉犬的配种技术

1.配种适期一般来说,从母犬阴道流出第1滴血之日起的10～13天是最适宜配种时期.准确判断母犬的最佳配种时间可依据以下外部行为特征:第一,外阴继续肿胀、变软,流出的粘液变淡,滴血减少或停止:第二,用手按压腰部或抚摸尾部,母犬站立不动,尾巴抬起偏向一侧:第三.母犬主动接近公犬,当公犬爬跨时,主动下蹋腰部,臀部对向公犬,将尾巴偏向一侧,阴门频频开闭,允许交配。     

快速检测联苯菊酯的胶体金层析试纸条研制

[目的]采用免疫胶体金技术,建立一种快速检测联苯菊酯的试纸条方法。[方法]利用有机合成方法制备了联苯菊酯半抗原,并与载体蛋白偶联得到免疫抗原,利用人工免疫的方法获得其单克隆抗体,通过酶联免疫法对制备的单克隆抗体的性能进行了验证。联苯菊酯胶体金层析试纸条是利用单克隆抗体标记胶体金,并将联苯菊酯抗原与羊抗鼠Ig G分别喷制到硝酸纤维膜上,与样品垫、吸水垫组装在PVC衬板上制备而成。[结果]联苯菊酯胶体金层析试纸条检测限为500~800μg/kg,具有速度快、简单等优点。此外,该试纸条与大部分的拟除虫菊酯没有明显的交叉反应,利用该试纸条可实现对苋菜中联苯菊酯添加试验的准确判定。[结论]胶体金试纸条方法具有前处理简单、检测速度快、可以肉眼判断结果等优点,该试纸条有望实现对果蔬中联苯菊酯残留的快速筛查。     

B超监测母羊妊娠研究进展

对B超在母羊早期妊娠诊断、母羊怀胎数判定、母羊妊娠日龄预测、胎儿发育监测和胎儿性别鉴定中的应用研究进行了综述,认为超声断层扫描是目前最迅速、最安全、最直观、最有效的母羊妊娠监测手段;对腹壁探查和直肠探查结果进行的对比和总结认为,配种后50～100d是通过腹壁探查进行母羊妊娠诊断的最佳时期,配种后30～30d是通过直肠探查诊断母羊妊娠的最佳时期。     

用血清酸滴定法对3个品种绵羊进行早期妊娠诊断的研究

[目的]为了建立一种快速简易的绵羊早期妊娠诊断方法,提高母羊的繁殖效率,降低繁殖成本。[方法]选择1 317只母羊,为新疆地方品种多浪羊、策勒羊和卡拉库尔羊。于人工授精配种后16～30 d,采用血清酸滴定法进行了早期妊娠诊断。[结果]在试验绵羊中,共检出妊娠母羊1 128只,未妊娠羊189只。与实际妊娠结果相比,妊娠符合率为89.88%（1 013/1 128）,未孕符合率为96.83%（183/189）,总符合率为90.81%（1 196/1 317）。经卡方检验,这些指标在3个品种母羊或2个品种母羊间差异均不显著。[结论]血清酸滴定法诊断时间早、方法简便、结果准确,可以用于绵羊的早孕诊断,极具实用性和推广价值。     

高海拔地区奶牛妊娠硫酸铜试验法早期诊断

应用3%分析纯硫酸铜对高海拔地区奶牛进行早期妊娠诊断试验,结果表明:硫酸铜试验法诊断早期妊娠操作简便、检查迅速,一般配种15d后就可进行;饲养管理条件、海拔及品种对此法影响不大,影响因素主要在于早孕因子的表现和持续时间的长短。     

饲料中黄曲霉毒素B1快速筛查胶体金免疫层析检测方法应用研究

本文介绍饲料行业中黄曲霉毒素B1目前检测方法的整体情况,并对优缺点进行分析,通过用胶体金免疫层析法和酶联免疫吸附法对饲料样品的检测进行对比,结果表明:胶体金免疫层析试纸条法与酶联免疫吸附法相符率可达95%以上,胶体金免疫层析试纸法操作简单、快速、方便,可以应用于谷物及饲料产品黄曲霉毒素B1现场快速检测。     

胶体金免疫层析试纸条法和HPLC-QTOF-MS法检测保健品中那非类化学药物的比较

采用胶体金免疫层析试纸条法与高效液相色谱-飞行时间串联质谱法(High performance liquid chromatography-quadrupole time of flight-mass spectrometry,HPLC-QTOF-MS)检测保健品中的那非类药物,并对这两种方法进行了比较.结果表明:胶体金免疫层析试纸条法对豪莫西地那非的检测限为30μg/mL,对硫代艾地那非、红地那非、那红地那非及伪伐地那非的检测限均为60μg/mL;HPLC-QTOF-MS法对豪莫西地那非、硫代艾地那非、红地那非、那红地那非、伪伐地那非的检测限为0.2μg/mL.两种方法对实际样品的定性检测结果一致.与HPLC-QTOF-MS相比,胶体金免疫层析试纸条具有操作简便、快速、直接的特点,可作为样品的快速定性筛查,HPLC-QTOF-MS法可作为阳性样品的进一步确证和精确定量.     

母牛发情鉴定方法

<正>母牛发情鉴定的目的是及时发现发情应配母牛,正确掌握配种时间,适时配种,防止误配漏配。实践证明,正确掌握母牛发情和排卵规律、抓住最佳配种期进行适时配种是提高母牛受胎率的重要措施之一。鉴定母牛发情的方法有外部观察法、试情法、阴道检查法和直肠检查法等。1、外部观察法外部观察法是鉴定母牛发情的主要方法,主要根据母牛的外部表现来判断发情情况。母牛发情时往往兴奋不安,食欲和奶量减少,尾根举起,追逐、爬跨其他母牛并接受它牛爬跨,发情牛爬跨其他牛时,阴门搐动并滴尿,具有公牛交配动作。外阴部红肿,从阴门流出     

猪瘟胶体金免疫层析快速诊断法的建立及应用

运用胶体金免疫层析技术,建立一种操作简单、灵敏度高、特异性好,能区分强弱毒感染,适合临床诊断的检测猪瘟病毒的方法。本试验利用大肠杆菌表达猪瘟病毒E2蛋白作为弱毒抗原,利用PK15细胞培养纯化后的猪瘟病毒强毒用作强毒抗原,研制了胶体金免疫层析猪瘟病毒抗体检测试纸条。结果显示,经过37℃破坏,该试验方法制备的试纸条仍具有很好的稳定性;与间接血凝法、美国IDEXX酶免试剂比较,发现该试纸条灵敏度在一定程度上优于前者;用多种病毒、病原菌阳性血清考核,显示该试纸条亦具有较高特异性。该试纸条的研制为猪瘟的快速诊断提供了一种更加实用的方法。     

五氯酚钠胶体金快速检测试纸条的研制

[目的]研制五氯酚钠胶体金快速检测试纸条。[方法]利用胶体金免疫层析技术,研制一种快速检测猪肉、鸡肉、鱼、虾、水质中五氯酚钠的试纸条。[结果]经测试,该试纸条对猪肉、鸡肉、鱼、虾的检测限为1μg/kg,对水质的检测限为2μg/kg,检测时间为15 min,假阳性率和假阴性率均为0。[结论]该方法准确、可靠,使用简便,适合大量样品的现场检测。     

农业三新

一种新型莱克多巴胺的快速检测试纸研制成功据我国华南理工大学科研人员根据胶体金免疫层析原理制备莱克多巴胺胶体金试纸条,建立了一种快速、有效的莱克多巴胺检测方法。该方法采用柠檬酸钠还原法制备胶体金颗粒,标记莱克多巴胺单     

免疫金试纸法快速检测盐酸克伦特罗

试验选取自身蛋白制备克盐酸伦特罗克伦特罗载体抗原,免疫动物后产生高效价的特异性抗体,纯化抗体与胶体金结合成免疫金,制备成简易的检测试纸条。通过检测试纸条敏感性、保存期、金标抗体工作浓度选择、操作方法对比、实验检测及与单抗金标试纸条平行检测等试验,证明建立的免疫金试纸法快速检测盐酸克伦特罗具有实用性、可靠性和稳定性。自身全血清作载体可使抗盐酸克伦特罗的ELISA效价高达4万以上。免疫金试纸法对盐酸克伦特罗的最小检测量为40ng·mL-1,试纸条在室温保存150d不影响检测结果。实验检测86份ELISA试剂盒阴性样品和42份阳性样品,其符合率分别为100%和95.2%。市售单抗金标试纸条检测结果与ELISA法的阳性符合率为95%(19/20)。     

赭曲霉毒素产生菌筛选方法的对比与优选

【目的】探求一种能够快速、准确地筛选出赭曲霉毒素产生菌的分析方法,为赭曲霉毒素的检测与防治奠定基础。【方法】分别采用紫外荧光法、胶体金免疫试纸条法和高效液相色谱 (HPLC) 法,对分离自葡萄表面的189株霉菌产生赭曲霉毒素A（OTA）的能力进行分析,并对3种方法的鉴定结果进行比较。其中在紫外荧光法中,黑曲霉接种至可可浆培养基（CCA）培养,其他霉菌接种至察氏培养基（CA）培养,培养后能够产生荧光的菌株被认为是OTA产生菌。同时分别用高效液相色谱法（HPLC）和OTA胶体金试纸条对所有菌株培养物中的OTA进行检测。【结果】以HPLC检测结果为标准,用紫外荧光法对OTA产生菌初筛的假阳性率较高,假阴性率为0;胶体金免疫试纸条法用于筛选OTA产生菌的假阴性率为47.4%,假阳性率为0,适合于产毒量高的菌种筛选。【结论】用紫外荧光法作为OTA产生菌的初筛方法可以排除大部分非OTA产生菌,漏检率低,从而大大降低HPLC检测的工作强度和检测成本;将紫外荧光法和HPLC定量分析结合使用,可以快速、准确地分离到OTA产生菌;将紫外荧光法和胶体金免疫试纸条相结合,可以快速筛选OTA产量高的菌株,且该方法较为经济,对环境和人体的污染较小。     

奶牛人工授精的技术要点

一、准确的发情鉴定 准确的发情鉴定是适时配种的前提条件,通过发情鉴定,才能判断母牛是否发情,发情是否正常和发情处于的阶段,从而确定适时输精.牛的发情期虽短,但外部特征明显.外部观察法和直肠检查法是最为实用、简便的2种方法.     

禽流感病毒感染与疫苗免疫鉴别诊断试纸条的研制及应用

 【目的】结合胶体金免疫层析技术建立一种适合养鸡业基层生产人员使用的便捷的快速诊断禽流感病毒感染鸡群的方法。【方法】将含禽流感病毒非结构基因ns1的表达载体KG-NS1转化入BL21（DE3）感受态细胞,筛选阳性克隆进行诱导表达,表达产物用GST亲和层析柱进行纯化和Western-blot分析;以NS1重组蛋白为诊断抗原,抗鸡IgFc的单抗标记的胶体金为示踪物,结合免疫层析技术,组装禽流感病毒NS1抗体的免疫胶体金鉴别诊断试纸条,评价其灵敏度和特异性,并对试验感染和临床采集的血样进行检测。【结果】NS1重组蛋白分子量约为52 kD,具有免疫学活性。在25 min内用肉眼观察到禽流感病毒感染鸡血清和NS1蛋白免疫鸡血清在试纸条的检测线处出现明显的棕红色,呈明显的阳性反应,而其它病原的血清在试纸条的检测线处不出现任何颜色,呈阴性反应。而且感染鸡群的NS1抗体在感染后3 d即可检测到,感染后1～2周为高峰期,维持时间约1周,检测阳性率为80%左右。临床样品的阳性率为9.1%。【结论】试纸条使用方便,操作简单,25 min内可以用肉眼判断结果,可区分禽流感疫苗免疫和野毒感染家禽,具有很大的推广应用价值。