利用SSR技术对黄瓜新品种津优35号进行种子纯度鉴定

利用天津科润农业科技股份有限公司建立并优化的黄瓜种子纯度鉴定技术体系,筛选黄瓜新品种津优35号特异分子标记。所试验的80多对SSR引物中,有2对引物(85号和212号)在杂交种和亲本间表现多态性,杂交种条带为父母本的互补型,且特异性强,适合做杂交种纯度鉴定。用该2对引物对津优35号50粒种子进行SSR鉴定。结果表明:该2对引物鉴定结果相同,且与田间鉴定结果吻合率高达96%以上,表明所筛选到的2个SSR标记可以作为津优35的特异分子标记用于其种子纯度的鉴定。     

基于复合EST-SSR 标记的大白菜种子纯度 鉴定及SNP 位点获取

以10 份大白菜杂交种及其亲本为研究对象,基于NCBI 基因组数据库中EST 序列信息,应
用SSR 标记及高分辨 率溶解曲线技术筛选出用于大白菜杂交种纯度鉴 定的SNP 位点及复合 SSR 位 点,并
根据 高通量分子检测技术 种子纯度鉴定的需要 ,对单粒种子育苗条件、单株植株提取 状态、快速DNA
提取方法、复合PCR 体系的建立等关键 技术进行了摸索及优化。结果显示：经过48 h 破壳状态的单粒
种子,采用改良CTAB 法可于3 h 内得到较高质量的DNA;同时经7 d 达到苗期状态的单株叶片,采用
chexe-100 法亦可于40 min 内完成DNA 提取;筛选得到的SNP 位点可对6 份大白菜杂交种进行纯度鉴定,
复合SSR 位点可对10 份大白菜杂交种进行纯度鉴定。     

利用SSR技术对黄瓜新品种津优35号进行种子纯度鉴定

利用天津科润公司建立并优化了的黄瓜种子纯度鉴定技术体系,筛选黄瓜新品种津优35号特异分子标记。试验选用80多对SSR引物中,有2对引物(85号和212号)在杂交种和亲本间表现多态性,杂交种条带为父母本的互补型,且特异性强,适合做杂交种纯度鉴定。用这2对引物对津优35号50粒种子进行了SSR鉴定。结果表明:这2对引物鉴定结果相同,且与田间鉴定结果吻合率高达96%以上,表明所筛选到的2个SSR标记可以作为津优35的特异分子标记用于其种子纯度的鉴定。     

利用SSR技术鉴定西葫芦杂交种子纯度

为了建立一套快速、简单、准确、高效的西葫芦种子纯度检测方法,以西葫芦'福美1号'及其亲本为试验材料,利用SSR分子标记技术鉴定杂交种子纯度。从114对SSR引物中筛选出了1对引物(SGSSR25),在杂交种和父、母本之间存在显著差异的条带,且杂交种含有父、母本的特异互补带型。利用该引物对23株'福美1号'杂交种进行纯度鉴定,结果为91.30%,与大田种植鉴定结果一致,表明该引物可用于'福美1号'杂交一代种子纯度的快速检测和准确鉴定,SSR分子标记技术应用于西葫芦杂交种子纯度检测具有可行性。     

黄瓜线粒体DNA指纹图谱的构建及其在杂交品种纯度鉴定中的应用

为实现黄瓜杂交种子纯度的快速鉴定,利用分子标记技术构建‘长春密刺’等21份黄瓜品种的线粒体DNA指纹图谱。结果表明:从69对线粒体引物中,共筛选出13对在21份黄瓜品种中呈现出多态性的引物。同时,基于亲本材料的指纹图谱,利用引物mtSSR 4对‘南水3号’商品种子进行检测,分子标记鉴定纯度为95.7%,且真、假杂种编号与田间形态鉴定结果一致。黄瓜线粒体DNA指纹图谱的构建,不仅能为‘南水3号’等杂交种的纯度检测工作提供新的技术指导,还可为黄瓜品种的鉴定、遗传亲缘关系分析等提供一种新的方法。     

SSR技术检测‘津优48’种子纯度试验

利用成熟的黄瓜SSR技术体系,筛选‘津优48号’黄瓜新品种的特异分子标记。共采用30多对SSR引物对亲本及杂交一代进行了谱带筛选,其中有3对引物(N618号、N383号和N251号)在杂交种和亲本间有多态性,杂交种同时具有父母本的谱带,且特异性强。用N618引物、N383引物和N212引物对50粒‘津优48’种子进行了分子鉴定。结果表明:该3对引物所鉴定的种子纯度与田间纯度结果吻合率高达96%以上,表明上述3个SSR标记可以作为黄瓜新品种‘津优48’的特异分子标记进行其种子纯度的鉴定。     

佳宝苦瓜杂交种纯度的SRAP鉴定

利用SRAP技术对佳宝苦瓜杂交种子进行纯度鉴定。试验结果表明,从153对SRAP引物中筛选出1对引物Me6-Em4,能同时扩增出F_1代及其父母本的多态性条带,且PCR扩增产物具有高度的稳定性和重复性;利用该引物对48株佳宝苦瓜进行纯度鉴定,其种子纯度为97.9%,与其田间鉴定结果接近,表明利用SRAP分子标记可以快速、准确地鉴定佳宝苦瓜杂交种纯度。     

SSR标记鉴定甜瓜品种‘红月亮’种子纯度

为明确甜瓜品种‘红月亮’F1代的种子纯度,通过提取甜瓜‘红月亮’子叶DNA,利用SSR(Simple Sequence Repeats)分子标记对甜瓜品种红月亮F1代种子DNA进行了PCR扩增、检测与分析。结果表明,在20个SSR引物组合对亲本及F1代筛选中,共有6对引物组合具有多态性,多态率30%。选择CMBR026用于‘红月亮’F1代种子纯度鉴定,使用该标记共检测118株,其中2株为自交株,种子纯度为98.3%;试验用的‘红月亮’种子田间鉴定纯度为99.5%,鉴定结果一致。SSR分子标记方法更能准确鉴别出‘红月亮’中的不纯株,且大大缩短纯度鉴定周期。     

应用数码相片鉴定西葫芦种子品种纯度试验报告

传统的西葫芦种子纯度鉴定方法是田间种植观察.为节约田间种植时间,对西葫芦杂交种和亲本种子及其幼苗的数码影像进行比对,结果发现,室内影像比对结果与田间种植鉴定结果基本吻合.将这种鉴定方法用于生产,可以极大地缩短品种纯度鉴定时间,节省开支.     

SSR标记鉴定甜瓜品种‘红月亮’种子纯度

为明确甜瓜品种‘红月亮’F1代的种子纯度,通过提取甜瓜‘红月亮’子叶DNA,利用SSR（SimpleSe—quenceRepeats）分子标记对甜瓜品种红月亮F。代种子DNA进行了PCR扩增、检测与分析。结果表明,在20个SSR引物组合对亲本及F。代筛选中,共有6对引物组合具有多态性,多态率30％。选择CMBR026用于‘红月亮’F1代种子纯度鉴定,使用该标记共检测118株,其中2株为自交株,种子纯度为98．3％;试验用的‘红月亮’种子田间鉴定纯度为99．5％,鉴定结果一致。SSR分子标记方法更能准确鉴别出‘红月亮’中的不纯株,且大大缩短纯度鉴定周期。     

川翠3号黄瓜SSR指纹图谱的构建及种子纯度鉴定

为了建立杂交黄瓜品种川翠3号的快速纯度鉴定体系,用164对全基因组覆盖的SSR引物对川翠3号及其亲本进行了多态性筛选及纯度鉴定。其中4对引物表现出稳定的共显性,电泳图谱清晰、易分辨,特异性强,对川翠3号种子鉴定纯度为99.0%,真、假杂种编号与田间鉴定结果一致,可以用来区别其中混杂的母本、父本及其他种子,说明这4对引物组成的指纹图谱能为川翠3号杂交种的真伪鉴定、纯度检测及亲本提纯等提供准确的技术指导。     

SSR标记技术在甜瓜杂交种纯度检验中的应用

 以两个甜瓜杂交品种(系) ‘东方蜜1号’和‘01231’及其亲本为材料, 用SSR分子标记技术研究杂种与其双亲之间扩增谱带的多态性, 以甄别真假杂种。所试验的23对SSR引物中有8对引物分别在两个甜瓜杂交种和其双亲之间存在扩增多态性, 表现为: 多数SSR引物对自交系的扩增只出现1条带,但部分引物在某些自交系中扩增出2条带, 杂交种条带均为父母本的互补型, 很适合做杂交种纯度鉴定。用引物M6 对‘东方蜜1号’和引物M17对‘01231’各100粒单种子进行SSR鉴定, 所测纯度分别为100%和96% , 与田间纯度99.6%和96.2%非常接近, 显示出SSR标记技术在甜瓜杂交种子纯度的室内快速检测中有广泛应用前景。     

SRAP标记在夏华2号甘蓝种子纯度检测中的应用

应用SRAP技术对夏华2号甘蓝种子纯度进行了分子检测研究。结果表明,从100对SRAP引物中筛选出1对引物(Me-5/Em-8)能清晰地扩增出父、母本的特异性条带,并且F1代带型呈双亲互补。利用这对SRAP引物对夏华2号种子进行纯度检测,检测纯度为97%,与田间生物学性状表现相符合,表明SRAP技术可用于夏华2号甘蓝种子纯度鉴定。     

黄瓜Rubisco 活化酶基因CsRCA 表达载体构建与遗传转化

 核酮糖–1,5–二磷酸羧化/加氧酶（Rubisco）是光合碳循环中的关键酶,为了探明其在植物体内的活化机制,用农杆菌介导法将Rubisco活化酶（RCA）基因CsRCA导入黄瓜,分别用PCR、real-time PCR和Western杂交法进行分子检测,分析转基因植株的表达量。酶切鉴定结果显示,CsRCA正向插入植物表达载体pCAMBIA1301的CaMV 35S启动子和NOS终止子之间,成功构建CsRCA的正义表达载体。将pCAMBIA1301-CsRCA导入黄瓜自交系‘08-1’,获得7株转基因植株,拷贝数均为2（非转基因植株的拷贝数为1）,转化率约为3.5%。表达分析结果表明,7株T0代转基因植株叶片的CsRCA mRNA表达量为野生型（WT）的1 ~ 1.98倍,在蛋白水平的表达信号显著强于WT。T1代转基因植株的叶片叶绿素和类胡萝卜素含量、光合速率（P_n）及可溶性糖和淀粉含量均显著高于WT。研究结果表明,利用农杆菌介导法获得了稳定遗传的黄瓜CsRCA转基因植株,CsRCA过量表达能显著提高黄瓜叶片的P_n,增加干物质积累。     

利用RAPD方法鉴定两个春甘蓝品种的纯度

利 用 Ｒ Ａ Ｐ Ｄ （ 随机 扩增多 态性 Ｄ Ｎ Ａ） 方 法， 通过 对１００ 个 随机 引物 的 筛选 获得 能 区分中甘１１ 号及其 亲本和８３９８ 及其 亲本的引 物 Ｏ Ｐ Ｒ１５ ，并 得到 单株 验证。 结果 表明 ，利 用 Ｒ Ａ Ｐ Ｄ 方法对中甘１１ 号和８３９８ 这 两个早熟 春甘蓝一 代杂种 进行快速 、准确的 纯度鉴定 是可行 的。     

黄瓜专用砧木新品种北农亮砧的选育

北农亮砧是以从日本引进南瓜砧木材料中选育出的自交系H45471为母本,以国内南瓜砧木材料选育出的自交系MH67156为父本配制而成的黄瓜专用砧木一代杂种。该砧木与黄瓜嫁接亲和性好、成活率高,有提高黄瓜抗枯萎病能力和增加产量的效果,尤其是对嫁接黄瓜果实的表皮具有很强的脱蜡粉能力,使黄瓜皮色鲜绿光亮,可明显地提高黄瓜的商品性。同时可以提高黄瓜果实中可溶性糖和VC含量,降低单宁和亚硝酸盐含量,适于秋冬季及春季保护地黄瓜嫁接栽培。     

辣椒黄绿苗突变体9906M的选育及利用

对辣椒黄绿苗突变休9906M生物学性状、抗病性、遗传规律等的研究结果表明,该系为隐性突变体,属细胞核遗传,苗期性状明显,在辣椒材料更新、杂交育种及纯度鉴定上有较大的利用价值。     

利用RAPD技术快速鉴定辣椒杂交种纯度的研究

以新椒系列辣椒杂交种父母本和一代杂种为材料,采用液氮-SDS法提取辣椒基因组DNA,研究PCR反应的主要影响因子,建立适合辣椒杂交种纯度RAPD分析的PCR反应体系,从120个随机引物中筛选出1个能鉴定新椒10号杂种纯度的引物S1220,从7个随机引物中筛选出1个能鉴定新椒3号杂种纯度的引物S1213。     

硝普钠和硫氢化钠对硝酸盐胁迫下黄瓜种子萌发及幼苗生长的影响

以设施栽培面积较大的黄瓜为材料,研究了外源硫化氢(H2S)和一氧化氮(NO)对硝酸盐胁迫下黄瓜种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明,硝酸钙胁迫抑制了黄瓜种子的萌发和幼苗的生长,加入H2S供体硫氢化钠(NaHS)或NO供体硝普钠(SNP)均能有效缓解硝酸钙胁迫对黄瓜种子萌发和幼苗生长的抑制作用,使种子萌发率提高,根系长度、根尖数、表面积和活力增加,胚轴长度增加,叶片叶绿素含量提高,幼苗鲜质量增加;并且加入NaHS和SNP共同处理时,二者对硝酸钙伤害的缓解作用有叠加效应。因此,可通过外源添加SNP和NaHS提高黄瓜的耐硝酸盐胁迫能力。     

NaCl处理对不同黄瓜品种幼苗生长发育的影响

以“津杂”、“津优”和“津春”系列10个黄瓜品种为试材,通过NaCl胁迫,研究不同黄瓜品种之间的耐盐性差异.结果表明:种子的发芽率不仅随着黄瓜耐盐性的不同而异,而且也依盐溶液浓度的变化而发生变化；浓度为0.1％的盐溶液对种子发芽率无影响,浓度为1％的盐溶液显著影响黄瓜种子的发芽率；盐胁迫还明显提高幼苗叶片的相对电导率、降低叶片和根系的相对含水量,其中经盐胁迫后黄瓜幼苗的相对电导率增加50％～100％.