超声波-酶协同提取西藏猫乳总黄酮工艺及抗氧化活性

以西藏猫乳茎枝为试材，采用超声波-酶协同法提取其中的总黄酮，通过单因素试验与响应面设计法对提取工艺进行优化，得到最佳工艺参数。在该基础上，将超声波-酶协同法与超声波法、酶解法进行比较，考察其抗氧化活性，以期为西藏猫乳的进一步开发利用提供参考依据。结果表明：超声波-酶协同提取西藏猫乳总黄酮最优条件为纤维素酶浓度0.31 mg·mL^-1、乙醇浓度53%、酶解pH 5.0、酶解时间2 h、酶解温度50℃、超声温度50℃、液料比40∶1 mL·g^-1、超声时间30 min,在该条件下，总黄酮提取量为17.01 mg·g^-1,提取工艺稳定可靠。与超声波法和酶解法比较，超声波-酶协同提取总黄酮含量较高，且具有更好的DPPH·和ABTS⁺·清除能力。     

酶解低温提取灵芝水提取物过程研究

通过试验选出了以木瓜蛋白酶、纤维素酶、果胶酶为组合的复合酶的最佳灵芝水提取物(粗多糖)初步提取条件,以硫酸苯酚法检测其多糖产出率,结果表明:最佳酶解条件为pH4.5,反应温度45℃,料液比1∶30,复合酶用量0.8%(对底物),反应时间3 h,酶解次数2次。复合酶最佳酶配比为木瓜蛋白酶∶纤维素酶∶果胶酶=1∶2∶2。酶解低温提取所获得的灵芝水提物中的灵芝多糖含量较传统的水提醇沉法中的热水浸提提升了20%以上,为今后酶解低温提取在工业上的应用提供了重要依据。     

超声波-酶协同提取枸杞总黄酮的工艺及其抗氧化活性

以枸杞子为试材,采用超声波-酶协同法提取枸杞子中的总黄酮,通过单因素试验与响应面分析法分析液料比、纤维素酶添加量、酶解时间、酶解温度、酶解pH和超声时间对枸杞总黄酮提取率的影响,优化得出最佳工艺参数。结果表明:超声波-酶协同提取枸杞总黄酮的最佳提取条件为液料比20∶1 mL·g~(-1)、纤维素酶添加量1.0%、酶解时间1.5 h、酶解温度51℃、酶解pH 5.1和超声时间21 min,该条件下枸杞总黄酮的提取率为1.3%,与模型的预计值基本相符;枸杞总黄酮具有对DPPH自由基清除能力和对Fe~(3+)还原能力,呈抗氧化活性,并且抗氧化活性与质量浓度呈一定的量效关系。     

纤维素酶果胶酶辅助提取西瓜番茄红素工艺优化

本试验以质量比为4:1的纤维素酶、果胶酶组成的复合酶辅助提取西瓜番茄红素,分析了纤维素酶、果胶酶的最佳提取条件,分析了纤维素酶、果胶酶的最佳作用条件,采用正交试验优化了纤维素酶、果胶酶辅助提取西瓜番茄红素的工艺。结果得出,提取西瓜番茄红素最佳工艺为添加复合酶(维素酶:果胶酶=4:1)至西瓜糊(0.60%,w/w),调节体系pH值为4.5,55℃下酶解2.0 h;采用乙酸乙酯-丙酮混合溶剂(7:1,V/V)提取,提取率91%,提取效果较好。     

槐花多糖提取工艺优化及自由基清除活性研究

以秦巴山区野生槐花为试材,以pH 6.0柠檬酸盐酸性缓冲溶液作为浸提溶剂,采用单因素试验结合正交实验方法研究了纤维素酶-超声辅助提取槐花多糖的工艺条件,并考察其对羟基自由基、超氧阴离子自由基和ABTS自由基正离子的清除活性及还原能力。结果表明:槐花多糖的最佳提取工艺为提取温度60℃、提取时间20min、料液比1∶25kg·L~(-1)、纤维素酶10mg·g~(-1),该条件下槐花多糖的提取率为17.1%,槐花多糖对ABTS自由基正离子、羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除IC_(50)值为0.047、0.75、0.87g·L~(-1),优于同浓度条件下天然抗氧化剂维生素C。     

香灰菌与银耳混合培养过程中酶系的相互作用

该实验对纯香灰菌(Hypoxylon sp.)培养及其与银耳(Tremella fuciformis)混合培养过程中的纤维素酶、淀粉酶、漆酶等培养原料基质降解相关酶变化规律进行了比较与分析。结果表明,香灰菌长满菌袋后淀粉酶与漆酶活力随着培养时间的延长逐渐下降,木聚糖酶活力在培养至15 d达到最大值5 000 U·m L-1,纤维素酶活力培养至5 d后,稳定在40 U·m L-1左右,可以有效降解木料培养基。银耳与香灰菌混合培养后,在固体培养过程中,其中胞外可溶性蛋白浓度和木聚糖酶、纤维素酶活力变化规律与香灰菌纯培养相似,而淀粉酶在培养至第10天达到最大值2 253 U·m L-1,其胞外可溶性蛋白浓度与木聚糖酶、纤维素酶和淀粉酶活力显著提高,漆酶活力培养至第5天达到最大值71.33 U·m L-1,随后迅速下降,蛋白酶活力变化情况与淀粉酶相似,第15天酶活力达到最大值3.05 U·m L-1。说明混合培养中两者具有互作效应,可以有效促进胞外蛋白的分泌,提高基质降解相关酶活力,促进菌体对基质的降解,提高养分的供应。该结果可为银耳优良菌种的选育,两者的配比以及栽培料的选择与优化提供科学依据。     

超声波辅助纤维素酶法提取绣球菌多糖

采用超声波辅助纤维素酶法对绣球菌多糖提取进行试验设计优化,以确定最佳提取条件。对超声功率、超声时间、提取温度、料液比、纤维素酶添加量等5个因素进行单因素试验,确定在超声功率570 W、纤维素酶添加量3%的条件下,选定料液比、超声时间、提取温度作为3个交互因素,进行Box-Behnken试验设计和响应面优化。预测最佳方案为料液比1∶87.62(g · mL~(-1)),提取温度38.4 ℃,超声时间94.56 min,预测多糖得率为31.49%。对最佳预测模型参数进行验证,结果表明,在料液比1∶90(g · mL~(-1)),超声温度38 ℃,提取时间95 min的条件下,对5 g绣球菌粉进行粗多糖提取,提取率达到30.60%;对50 g绣球菌粉进行粗多糖提取,第1次粗多糖提取率为31.70%,第2次粗多糖提取率为7.1%。将提取的粗多糖进行浓缩、除蛋白、除色素及透析纯化后,多糖保留率为73.20%。     

香菇子实体多糖分步酶解法提取研究

首先采用正交试验优化纤维素酶﹑果胶酶和木瓜蛋白酶对香菇(Lentinula edodes)子实体多糖酶解提取的工艺参数,然后在优化酶解条件下,依次采用纤维素酶﹑果胶酶和木瓜蛋白酶分步处理香菇子实体以提取香菇多糖,并与单一酶解提取法和传统热水浸提法进行对比.结果表明,纤维素酶﹑果胶酶﹑木瓜蛋白酶的最佳提取工艺参数依次为加酶量0.8%、温度45 ℃、pH 4.5、提取时间1 h,加酶量1.0%、温度45 ℃、pH 3.5、提取时间2.0 h和加酶量1.0%、温度45 ℃、pH 4.0、提取时间1.5 h;在优化提取条件下,分步酶解法提取香菇粗多糖的提取率可达14.17%,比传统热水浸提法提高128.2%,比单独采用纤维素酶﹑果胶酶﹑木瓜蛋白酶酶解提取分别提高了43.71%、46.99%和23.11%.紫外光谱分析表明,分步酶解法提取的香菇多糖纯度明显高于热水浸提法提取的香菇多糖.-     

超声波辅助酶法提取‘蜜本南瓜’水不溶性膳食纤维工艺优化及理化性质测定

通过初选酸法、碱法和超声波辅助酶法提取‘蜜本南瓜’水不溶性膳食纤维(Insoluble dietary fiber,IDF),选用酶法进行提取试验。结果显示,料液比、超声时间、木瓜蛋白酶酶解温度对南瓜IDF得率的影响较其他单因素显著。进一步响应面试验优化得出IDF的最佳提取工艺参数是:液料比14.5 mL·g~(-1)、超声时间15 min和木瓜蛋白酶酶解温度60.67℃,在此条件下南瓜IDF的得率可达29.99±0.1%。经理化测定,‘蜜本南瓜’IDF的持水力为(7.10±0.05)g·g~(-1),持油力为(1.03±0.09)g·g~(-1),膨胀力为(5.52±0.08)mL·g~(-1)。IDF中游离酚含量为(187.97±0.20)mg GAE·100 g~(-1),结合酚含量(82.62±0.14)mg GAE·100 g~(-1)。此外,IDF对·OH、DPPH·和O_2~-·均有一定的清除能力,与其所含酚类的成分有关。综上,超声波辅助酶法提取南瓜IDF方法切实可行,产品具有良好的理化特性,是一种天然的抗氧化膳食纤维,发展前景广阔。     

斑玉蕈培养过程中酶活性与菌包成熟度的关系

为建立科学可靠的判断斑玉蕈(Hypsizygus marmoreus)菌包成熟度的生物学参数评价指标,为工厂化生产菌包成熟度的判断提供科学依据。分别通过3,5-二硝基水杨酸法、碘试液比色法、福林酚法、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐法、愈创木酚法分析斑玉蕈菌包不同培养时间其羧甲基纤维素酶、木聚糖酶、淀粉酶、中性蛋白酶、漆酶和锰过氧化物酶活性变化,以及培养时间与出菇产量之间的关系。结果表明,菌包培养温度在21℃~25℃,培养时间120 d左右,菌包上、中、下各部木聚糖酶活力趋于13.7 U·mL~(-1);在70 d菌包上部漆酶活力达到最高值,在100 d中部与下部漆酶活力达到最大值;在120 d各部分漆酶活力趋于173.5U·L~(-1),纤维素酶活力达6 U·mL~(-1)~8 U·mL~(-1),淀粉酶活力保持在20 U·mL~(-1)左右,中性蛋白酶活力4 U·mL~(-1)左右,下部锰过氧化物酶活力达40 U·mL~(-1)时,此阶段出菇的产量最高达461.7 g·袋~(-1)。     

超干燥基质保藏杏鲍菇菌种及其特性和生产性能

菌种退化是食用菌在保藏过程中易出现的一个难题。该研究通过比较分析由超干燥基质保藏分离的杏鲍菇菌株Ple-tm与子实体组织分离的菌株Ple-fs的形态特征、生长速度及酶活,探索超干燥基质保藏法的可行性。研究结果显示,菌株Ple-tm菌丝生长洁白浓密,生长速度明显快于菌株Ple-fs,分别为1.08 cm·d~(-1)和0.86 cm·d~(-1),两者间具有极显著差异。酶活测定结果表明Ple-tm各酶活均高于同期生长的Ple-fs,漆酶、锰过氧化物酶、木质素过氧化物酶、木聚糖酶、纤维素酶活分别为205.65 U·L~(-1)、446.55 U·L~(-1)、2.34 U·L~(-1)、40.77 U·L~(-1)和22.93U·L~(-1)。经出菇培养,Ple-tm比Ple-fs具有明显优势,产量为27.28 g·瓶~(-1),生物学效率比Ple-fs高26.3%,Pletm的菌丝生长速度、菌株生长周期、产量均保持原种优势。该实验表明超干燥基质保藏法可有效防止菌种退化,为食用菌菌种保藏方法的探究开辟新思路。     

不同方法对虫草花多糖提取效果的研究

以虫草花子实体为原料,分别采用热水提取法、单一酶法(纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶)、超声波法对虫草花多糖进行提取,用苯酚-硫酸法测定虫草花多糖,并比较几种提取方法的多糖提取率和提取条件。结果表明:果胶酶法是虫草花多糖提取的较优方法,在加酶量1.00%、pH 5.5、提取温度40℃下提取90min,其多糖提取率为22.23%,而在最佳提取条件下,热水提取法、纤维素酶法、木瓜蛋白酶法和超声波法的多糖提取率分别为18.12%、15.01%、18.57%、13.34%。     

刺芹侧耳子实体中水溶性膳食纤维的提取工艺研究

以刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)子实体为试验材料,通过单因素和正交试验L9(34)探讨碱法提取其水溶性膳食纤维(soluble dietary fiber,SDF)的最佳工艺。结果表明,最佳提取条件为:液料比45∶1(mL/g),NaOH浓度0.5%,提取温度60℃,提取时间3h。在此条件下SDF得率为4.05%,持水力为1.25±0.05g/g,SDF溶胀性为29.38±0.78mL/g,糖含量为76.74±3.30%。     

吴茱萸多酚的酶法提取工艺及其抗氧化抑菌活性

以吴茱萸为试材,在单因素试验的基础上,通过正交实验对吴茱萸中多酚的酶法提取工艺进行了优化,采用清除DPPH·法评价了吴茱萸多酚的抗氧化活性,利用滤纸片法研究了吴茱萸多酚的抑菌活性。结果表明:吴茱萸中多酚酶法提取的最佳工艺为提取温度60℃、提取时间2.5h、纤维素酶酶浓度0.25mg·mL~(-1)、pH 4.0。在此工艺条件下,吴茱萸多酚提取率为5.58%。吴茱萸多酚清除DPPH·的能力弱于维生素C,但也具有一定的抗氧化活性。吴茱萸多酚对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌均具有抑制作用,抑制作用大小顺序为大肠杆菌枯草芽孢杆菌金黄色葡萄球菌。吴茱萸多酚具有作为天然抗氧化剂和食品防腐剂的应用前景,值得进一步研究开发。     

"索蚌"百合原生质体分离及培养的研究

用纤维素酶、离析酶、果胶酶、山梨醇的混合酶液提取"索蚌"百合的幼叶和愈伤组织的原生质体.对影响原生质体提取得率因素进行分析,用液体浅层培养法在MS、改良MS和NLN培养基附加不同浓度6-BA,2,4-D等进行培养.结果表明:纤维素酶和酶解时间对原生质体提取得率有极显著影响,最适合百合幼叶原生质体提取的酶液组合为:2?llulase R-10,0.5% Macerozyme R-10,酶解4 h.百合愈伤组织的原生质体提取的酶液混合液组合为:2% Cellulase R-10 0.5% MacerozymeR-10 0.05%Pectolyase Y23 147 mg/L CaCl2·2H2O 976 mg/L MES 0.6 M Sorbitol.进行原生质体的培养仅愈伤组织为来源的观察到细胞的分裂,幼叶为来源的原生质体几乎没有分裂,但两者最终都没有形成愈伤组织.     

响应面优化酶解—超声提取菠萝蜜果皮单宁工艺

以菠萝蜜废弃果皮为原料,在单因素试验基础上,采用响应面法的Box-Behnken模式,建立纤维素酶—超声法提取菠萝蜜果皮单宁的二次多元回归方程,探讨了酶解时间、酶解温度、超声时间等因素对提取的作用规律;并对提取物进行分离纯化及抗氧化活性研究。结果表明,酶解时间2h、超声时间19min、酶解温度50.4℃条件下,单宁提取量到达最大值10.1mg/g。经D-101大孔树脂纯化后的单宁纯度96%,回收率38%。单宁浓度2mg/mL,对·OH清除率为33%。     

混合酶提法提取铁皮石斛中石斛多糖的优化工艺研究

以铁皮石斛为试材,采用纤维素酶与果胶酶的等量混合提取法,通过单因素试验与正交实验,研究了pH值、酶浓度、酶解时间、酶解温度等因素对石斛多糖提取效率的影响。结果表明:铁皮石斛多糖提取最佳工艺为pH 6.5、1%浓度的纤维素酶和果胶酶1∶1等量混合、50℃下提取135min,在此条件下石斛多糖提取率为41.33%;说明该工艺是可行的,且具有较高的提取率。     

复合酶法提取蝙蝠蛾拟青霉菌丝体有效成分

以蝙蝠蛾拟青霉(Paecilomyces hepiali)菌丝体为材料,以腺苷和D-甘露醇为评价指标,在单一酶提取实验基础上,采用正交实验设计对复合酶法提取工艺进行优化.优化的复合酶法提取工艺:浸提pH 5.5、浸提温度40℃、酶组合为纤维素酶0.1%+蜗牛酶0.1%,在此工艺条件下,提取物中甘露醇、腺苷含量分别为12.56%和2 065μg/g.     

纤维素酶解复合碱提酸沉法提取杏鲍菇蛋白质

为提高杏鲍菇(Pleurotus eryngii)蛋白质的提取率,本试验采用纤维素酶解复合碱提酸沉法进行提取,以料液比、酶的添加量、反应时间和温度为因素进行单因素试验,蛋白质提取率为响应值,利用Box-Behnken进行响应面优化纤维素酶解条件,与单一碱提酸沉法提取蛋白质后的提取率进行比较。试验结果表明,纤维素酶解最佳工艺条件为:料液比1:55,温度40℃,时间100 min,酶的添加量1.5%,复合碱提酸沉后蛋白质提取率为51.36%,显著高于碱提酸沉法的45.89%。因此,纤维素酶复合碱提酸沉法提取杏鲍菇蛋白质优于碱提酸沉法。     

西瓜不同类型样品的DNA提取研究

为比较不同类型西瓜样品DNA提取效果,以西瓜种子、子叶、下胚轴、种芽、新鲜真叶、干燥真叶为研究材料,采用改进的DNA试剂盒法进行了DNA提取研究,结果表明,从新鲜真叶和干燥真叶提取的DNA质量浓度最高,分别为1 130.2、1 039.7 ng·μL~(-1),子叶、下胚轴、种芽提取的DNA质量浓度为中等,分别为434.3、406.3、429.0 ng·μL~(-1),种子提取的DNA质量浓度最低,为55.1 ng·μL~(-1)。d CAPS扩增和酶切表明,全部类型样品提取的DNA均可扩增出稳定的条带,并能被内切酶顺利酶切,说明从西瓜不同类型样品中提取的DNA均可以满足d CAPS分子标记研究的需求。