不同解冻液对精子呼吸强度的影响

呼吸是精子重要的生命现象之一。当精液中有氧存在时精子就通过呼吸,氧化代谢精液中可以利用的营养物质。本试验测定了4种不同解冻液所解冻公牛冻精中精子的耗氧量,结果表明,不同解冻液对精子的呼吸强度有显著影响。一、材料与方法 (一)解冻液的组成见《中国奶牛》,1991年,第4期。 (二)精液山西省家畜精液冷冻中心HB63号公牛颗粒冻精。     

冷冻方法对杜泊绵羊冷冻精液品质的影响

试验对绵羊精液分别采用液氮熏蒸冷冻法和冷冻仪冷冻法进行冷冻,通过测定精液解冻后精子活率、顶体完整率、质膜完整率和谷草转氨酶活性及乳酸脱氢酶活性来比较不同的冷冻方法对解冻后精液品质的影响;通过测定精液稀释后、平衡后、冷冻仪法冷冻后的酶活性来比较谷草转氨酶与乳酸脱氢酶在不同阶段的释放量。结果表明,采用冷冻仪法冷冻后的精子活率和质膜完整率极显著高于液氮熏蒸冷冻法（P<0.01）;冷冻仪法冷冻后的谷草转氨酶和乳酸脱氢酶活性极显著低于液氮熏蒸冷冻法（P<0.01）;精液稀释后的谷草转氨酶和乳酸脱氢酶活性极显著低于精液冷冻后的活性（P<0.01）。表明采用冷冻仪冷冻法的绵羊精液品质好于液氮熏蒸冷冻法。精子中谷草转氨酶主要在平衡阶段释放,而乳酸脱氢酶主要在冷冻阶段释放。     

稀释方法对绒山羊冷冻精液品质的影响

选取7只精液品质优良的雁门绒山羊种公羊,通过测定其冷冻精液解冻后的精子活率（0、4 h）、精子存活指数、顶体完整率及精清中透明质酸酶（HYD）、谷草转氨酶（GOT）、乳酸脱氢酶（LDH）酶活力,研究一步稀释法和二步稀释法对冷冻精液品质的影响。结果表明,二步稀释法解冻后的精子存活指数显著（P＜0.05）高于一步稀释法,其解冻后精清中透明质酸酶、谷草转氨酶、乳酸脱氢酶的活力均显著（P＜0.05）低于一步稀释法。表明采用二步稀释法冷冻的绒山羊精液品质好于一步稀释法。     

不同解冻程序对荣昌猪冷冻精液解冻效果的影响

为优化猪冷冻精液解冻程序,本研究使用3种解冻液(M、J和C)对荣昌猪冷冻精液进行解冻,检测冷冻精液在不同解冻温度(32、37、42、47、52℃)和不同解冻时间(10 s或20 s)解冻后的精子活率、精子活力、快速前进运动精子数和慢速前进运动精子数,并使用因子分析法评估不同解冻液最佳解冻程序。结果显示:解冻液M在保存指标和持续指标方面较优;解冻液J在即时指标和持续指标方面较优;解冻液C在持续指标方面较优。综合分析表明,解冻液M和解冻液J的最佳解冻程序为42℃水浴解冻20 s,解冻液C的最佳解冻程序为32℃水浴解冻20 s。     

添加咖啡因对解冻后牛精液品质的影响

<正> 为了提高冻精的使用效果,有人研究在精液、稀释液、解冻液中加入不同的添加物。日本的宫元、西川(1979)报道了牛冷冻精液解冻后添加不同浓度的咖啡因所得到的不同的生存指数表明咖啡因可以改善解冻后精子的某些性状。为了进一步探讨咖啡因对解冻后精子的作用和影响,我们在解冻液中加入不同浓度的咖啡因以观察精子某些生理生化指标的变化。 1.材料与方法 试验共分为4组,以2.9％柠檬酸钠为基础液分别配制成含有不同浓度咖啡因的解冻液,1组为对照,含量为0,2、3、4为试验组,含量分别为5、10和20mm,(咖啡因系用20％安那加,     

双优解冻液

双优解冻液是牛羊冷冻精子的良好复苏剂,其解冻质量的各项指标均比其它解冻液高。我们用2.9％的柠檬酸钠、维生素B_(12)注射液和双优解冻液分别对牛羊颗粒冷冻精作了解冻效果比较,并用解冻精液对内蒙古乌盟冷冻站的奶牛进行了输精试验。结果,双优解冻液解冻的精液比用上述二种溶液解冻的精液精子活力提高26.4％(20％～     

不同制剂维生素B_(12)注射液解冻奶牛冻精效果的探讨

自奶牛冷冻精液使用以来,人们一直在寻求理想的解冻液。2.9％柠檬酸钠溶液作为常用的解冻液而延用至今。1987年,安徽省皖河农场奶牛场报道了用维生素B_(12)注射液解冻奶牛冻精,但其机制迄今尚未明了。为探讨维生素B_(12)注射液不同制剂的解冻效果,我们用药典所列出的维生素B_(12)针剂为每毫升0.05毫克、0.1毫克、0.5毫克和1毫克4种     

不同浓度咖啡因对三黄鸡精液冷冻效果的影响

试验以湛江海洋大学家禽育种中心的三黄鸡为试验材料 ,利用液氮制做颗粒冷冻精液 ,比较冷冻保护液中不同浓度添加物如咖啡因、甘油、二甲基桠枫以及平衡时间、解冻液种类及解冻液温度对广东三黄鸡冷冻精液解冻后精子活力、畸形率和存活时间的影响。结果表明 ,咖啡因添加量为 4～ 5mmol/L时 ,鸡精液冷冻解冻效果最佳 ,精子活力最高 ,为 0 4 4～ 0 4 8,畸形率最低 ,为 7 2 %～7 4 %,精子体外存活时间最长 ,为 1 0 4～ 1 0 9min(P <0 0 1 )。     

山羊夏季精液品质分析及冷冻方法优化

用假阴道法采集山羊精液,进行品质分析,应用正交设计L(934),4因素为稀释液种类(A)、稀释比例(B)、平衡时间(C)和解冻液(D),每因素选择3个水平,分析解冻精液品质,构建其综合指数,优化夏季山羊精液冷冻-解冻方法。结果表明:乏情季节精液品质略有下降,但仍能满足制作冻精的需要。4因素影响解冻后精液综合指数的显著性顺序是A>C>D>B,其中稀释液种类对解冻后精液综合指数影响差异显著(P<0.05),稀释液Ⅱ优于稀释液Ⅲ和Ⅰ;精子稀释密度影响差异不显著(P>0.05),但稀释至108个/mL时综合指数高于稀释至5×108个/mL和2×108个/mL;平衡时间对解冻后综合指数影响差异显著(P<0.05),平衡4h效果优于1h和2h;解冻液种类对解冻后综合指数影响差异显著(P<0.05),维生素B12较TALP液和2.9%柠檬酸钠效果好。优选各因素最佳水平,确定夏季山羊精液冷冻-解冻方法为选用高卵黄稀释液Ⅱ,将精子密度稀释至108个/mL,平衡时间4h,以维生素B12作为解冻液40℃湿解冻。     

不同解冻液对公牛冻精受胎率的影响

公牛颗粒冻精的受胎率受着许多因素的影响。除了精子活力、密度、形态以及母畜的发情是否正常、输精时间是否适宜外,还受着解冻温度、解冻技术和解冻液等因素的影响。本试验测定了四种不种解冻液所解冻精液的受胎率。结果表明不同的解冻液对受胎率有显著影响。     

稀释液中添加多不饱和脂肪酸(PUFA)对绵羊精液冷冻效果的影响

以葡3-3稀释液(葡萄糖-柠檬酸盐-卵黄)为基础,添加富含多不饱和脂肪酸(PUFA),且含较高比例DHA和EPA的深海鱼油作为冷冻绵羊精液的新型添加剂,进而研究PUFA对绵羊精子冷冻-解冻过程优良的保护作用.研究结果表明,绵羊精液冷冻稀释液中添加3%PUFA的处理组,同时添加1%VE(V/V)作为抗氧化剂,经冷冻-解冻对精子的损害较小,解冻后活率和顶体完整率分别比对照组1(0)显著提高6%和10%(P＜0.05),精清中LDH酶(乳酸脱氢酶)活力和GOT酶(谷-草转氨酶)活力比对照组1(0)显著降低65%和15%(P＜0.05).     

猪精液细管法冷冻保存技术的研究

为研制更为简易、高效的冷冻稀释液配方及冷冻程序,充分发挥优良种公猪的生产潜力,本实验采用细管法对种公猪精液冷冻保存技术进行了研究,比较了4种基础液配方稀释液冷冻效果,基础液I:葡萄糖、蔗糖、柠檬酸钠;基础液II:葡萄糖、蔗糖;基础液III:葡萄糖、乳糖、柠檬酸钠;基础液IV:葡萄糖、乳糖。结果表明:采用一步法稀释和IV液冷冻保存猪精液,其解冻后精子活率(0.501)极显著(P<0.01)高于I液(0.359)和III液(0.359),显著(P<0.05)高于II液(0.476),II液显著(P<0.05)高于I液和III液;解冻后IV液的精子顶体完整率(26.9%)显著(P<0.05)高于I液(22.4%)、II液(24.2%)和III液(22.5%),IV液冷冻解冻后精液的精子活率,在室温(23±2)℃下4h内能够保持0.30以上。     

TST三重染色在评定公牛精子顶体反应上的应用

<正> 前言 顶体反应是精子受精过程的重要步骤,也是估测精子受精能力的重要指标。本文就是从这个角度出发,采用TST三重染色法染色黑白花奶牛不同公牛个体解冻后的精子,观察精子的顶体反应率,同时测定了精子的活力,顶体完整率和畸形率,以及精清中钙的含量和乳酸脱氢酶(LDH)活性,从而来探讨TST三重染色法是否可作为评定精液品质的可靠方法。     

牛人工授精技术

牛的人工授精技术分：冷冻颗粒精液制作工艺(引进良种公牛→采精→制成颗粒冻精→利用液氮在零下196℃的条件下保存)和人工授精操作流程(准备工作→保定母牛作发情鉴定→器械消毒→利用2.9％柠檬酸钠液解冻精液→镜检活力达0.35以上→对发情适期母牛输精)两个部分。(一)精液的解冻冷冻精液使用前必须使用解冻液解冻，方能进行人工授精。1.解冻液配制：解冻液一般使用2.9％的柠檬酸钠溶液和维生素B12(2毫升1支)。解冻液配制必须准确，浓度不可偏高偏低，pH为6，宜现配现用，也可用安瓶分装备用。维生素B12注意避光保存，防止购进伪劣产品，…     

解冻稀释液及孵育温度对冷冻-解冻后犬精液品质的影响

实验旨在比较解冻后解冻稀释液(Tris-柠檬酸-葡萄糖稀释液)的添加比例(1:0、1:1、1:2)对精液品质的影响,并比较了4种孵育温度(37、34、25、4℃)对精子寿命及精子活力的影响,探索合适的冷冻-解冻后犬精液的孵育条件。结果显示:解冻稀释液的添加与否及添加比例对解冻后孵育30 min的精子活力、活率、质膜完整率及顶体完整率均无显著影响;解冻后,在不同温度下孵育30 min,4组精子活率和质膜完整率无显著差异,而4℃孵育温度下精子活力和顶体完整率高于37℃(P0.05);解冻后孵育2 h,4℃孵育温度下的精液品质(精子活率、精子活力、质膜完整率、顶体完整率)最佳(P0.05),34℃和25℃组之间差异不显著,而37℃组的精液品质最差。结果表明,解冻稀释液对解冻后精液的孵育效果无影响,而解冻后精液的孵育温度以4℃最佳。     

绒山羊精液冷冻保存技术的研究

为了使绒山羊精液得到长期保存,充分发挥和提高优良种公羊的利用率,本实验对绒山羊精液冷冻保存技术进行了研究,比较了4种自行研制的保存稀释液的冷冻效果。结果表明:采用Ⅰ液(葡萄糖-卵黄-柠檬酸钠)冷冻保存绒山羊精液,解冻后精子活率(0.508±0.010)极显著高于Ⅱ液(葡萄糖-卵黄-乳糖-柠檬酸钠)(0.275±0.008)、Ⅲ液(葡萄糖-卵黄-蔗糖-柠檬酸钠)(0.354±0.012)和IV液(葡萄糖-卵黄-蔗糖-乳糖-柠檬酸钠)(0.319±0.006)(P<0.01);Ⅲ液极显著高于Ⅱ液(P<0.01)和显著高于Ⅳ液(P<0.05)。解冻后Ⅰ液的精子顶体完整率(59.4%±0.5%)极显著高于Ⅱ液(47.1%±0.8%)、Ⅲ液(52.4%±0.6%)和IV液(51.3%±0.5%)(P<0.01)。精液解冻后在室温(23±2)℃下避光培养,Ⅰ液中精子活率在5h内能够保持0.30以上,Ⅱ、Ⅲ液和Ⅳ液精子活率维持在0.3不到2h。     

不同甘油浓度对兔精液冷冻保存的影响

本试验以不同浓度甘油对家兔精液冷冻保存的影响为研究目的,以柠-葡-卵基础液于三种浓度(6%、8%、10%)的甘油相配伍做为冷冻保存液对精液进行稀释,平衡,冷冻,解冻等处理,从而确定兔精液冷冻保存的最佳甘油浓度,得出如下结论:冷冻保护液中添加浓度为6%的甘油时,对精液进行冷冻保存、稀释、平衡,解冻后的精子活率与浓度为8%,10%的甘油冷冻效果比较差异显著.     

版纳微型猪近交系精子冷冻保存研究

在版纳微型猪近交系（BMI）公猪精液冷冻保存稀释液中添加不同浓度甘油,并对不同解冻液配方和解冻方法进行研究,对比解冻后的精子活力、质膜完整率和顶体完整率,优化BMI公猪精液冷冻保存方法。结果表明,解冻后,甘油浓度为2%和3%组的精子活力、质膜完整率、顶体完整率显著高于1%、4%和5%组（P<0.05）;Ⅰ号解冻液解冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率均显著高于Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ号解冻液（P<0.05）;在活力、质膜完整率和顶体完整率方面,40℃ 6 s和50℃ 6 s这两种程序的解冻效果都显著优于38℃ 30 s（P<0.05）。由此可见,2%或3%的甘油作为抗冻保护剂、Ⅰ号解冻液解冻、40℃ 6 s或50℃ 6 s水浴解冻是较为理想的BMI公猪精液冷冻保存方法。     

维生素B12解冻牛冷冻精液效果探析

用ＶＢ１２液在３５℃,４０℃,７０℃三种解冻温度下,解冻牛冷冻精液,并与Ｔｒｉｓ－果糖液和２．９％柠檬酸钠液作解冻效果比较。结果表明：三种解冻液解冻后精子的活力相近,经过保存后ＶＢ１２液显著高于２．９％柠檬酸钠液（Ｐ〈０．０５）。而与Ｔｒｉｓ－果糖液相近,不同解冻液解冻后的精液作精子上游法测定,在第２、第３段中所含精子数,Ｔｒｉｓ－果糖液和２．９％柠檬酸钠解冻液解冻的每段递减３０％￣９０％,而ＶＢ     

牛人工授精操作过程中应注意的问题

1 冷冻精液的解冻 冷冻精液的解冻关键是“快取、快投、快融解”。 (1) 颗粒精液的解冻方法 先将1毫升解冻液注入无菌试管内,然后把解冻缸内水温调到41～42℃,再把试管放入,待管内解冻液温度恒温至40℃时,立刻从液氮罐内取一粒精液解冻。