宁夏滩羊体大品系血清生长激素及生长介素的测定分析研究

从宁夏区畜牧工作站在盐池滩羊选育场试验选育的羊群中,选择体大、快肥、体长及两系的杂交后代共152只.测定血清中GH和IGF-I的含量.结果显示体大品系公羊血清GH水平比裘皮系高2.82 ng/ml,体大群及快肥群母羊比裘皮系高2.75和2.60 ng/ml;体大品系公羊血清IGF-I含量均高于袭皮系,其中成年公羊比裘皮系高出32.4%,差异极显著(P＜0.01),表明体大羊血清GH、IGF-I生理表达水平明显高于裘皮系羊群,并可作为生理遗传标记和比常规表型选育更精确可靠的选育方法用于生产实践.     

滩羊体大品系遗传标记的研究

本研究首先采用RAPD(Romdom Amplified Polymorphic DNA)技术,利用混合基因池(DNApool)法,对滩羊体大品系、普通品系进行DNA多态性分析.从100种具有10碱基的随机引物中筛选出84种引物可在滩羊群体基因组中得到扩增,共扩增出358条带,其中22种引物扩增产物表现为多态(占22%),且扩增出32条有差异的条带,占总带数的8,94%(32/358);62种引物的扩增产物表现为单态(占62%);另有16种引物扩增非常微弱,不便分析(占16%).根据Nei氏片段共享度公式计算出滩羊的体大品系和普通品系间的遗传距离为0.14±0.25,表明两品系之间的亲缘关系很近.同时在分析过程中发现滩羊体大品系,普通品系均出现了具有品系特征的特异性条带.滩羊普通品系有7条PS-107-550,PS-510-500,PS-512-450,PS-101-450,PS-512-400,PS-511-400,PS-12-370;体大品系有5条PS-509-875,PS-515-875,PS-106-750,PS-1008-700,PS-1010-370;以上引物可作为区分两品系的标记引物,特征性条带可以作为各自的分子标记来进行品系鉴定.     

宁夏滩羊体大品系遗传标记的研究

研究首先采用RAPD技术,利用混合基因池(DNA pool)法,对滩羊体大品系、普通品系进行DNA多态性分析。从100种具有10个碱基的随机引物中,筛选出84种引物在滩羊群体基因组中共扩增出358条带,其中22种引物扩增产物表现为多态(占22%),且扩增出32条有差异的条带,占总带数的8．94%(32/358);62种引物的扩增产物表现为单态(占62%)。滩羊体大品系的特异性条带5个,而普通品系的特异性条带7个。这些特异标记可以用来鉴定滩羊的2个品系。滩羊体大品系和普通品系间的遗传距离为0．136±0．087,表明2个品系之间的亲缘关系很近。     

宁夏滩羊体大品系、裘皮品系及其杂交后代血红蛋白多态性比较

采用醋酸纤维素膜电泳分析法,测试体大品系、裘皮品系及其杂交后代血红蛋白多态性.发现滩羊血红蛋白位点鉴别出的四种等位基因HbA、HbB、HbC和HbD控制着HbAA、HbBB、hbAB、HbCC、HbAC、hbDA和HbDB七种表现型.其中体大品系滩羊(76只)主导基因频率HbA为0.546 1,裘皮品系滩羊(34只)主导基因频率Hb为0.485 3,两者相差4个百分点.HbD基因体大品系比裘皮品系高6个百分点,而表现型HbAA和HbDA体大品系高于裘皮品系,但差异均不显著.     

滩羊公羊特异性RAPD标记的研究

利用混合样本分析方法对滩羊进行了RAPD分析 ,筛选了 6 0种随机引物 ,结果发现OPB17 32 0这一扩增片段只出现在公羊的混合样中 ,进一步对 5 0只滩羊进行逐个检测 ,发现 2 1只公羊均出现了OPB17 32 0这一DNA片段 ,而 2 9只母羊无一出现此条片段 ,据此推断OPB17 32 0为滩羊公羊的特异性RAPD标记。这一发现为滩羊胚胎性别鉴定和Y染色体上基因的研究提供了新的方法和标记参考座位。     

宁夏滩羊保种选育项目工作总结

1 项目来源 滩羊是荒漠草原区的优质粗毛型绵羊裘用地方良种，曾被农业部列为一级保护对象，后又被划为国家级三羊(滩羊、小尾寒羊、湖羊)保护行列。我场于1994年提出“宁夏滩羊保种立项申请”和“宁夏滩羊保种实施方案”，后经宁夏畜牧局组织专家考察论证，报农业部批准，于1995年10月签定了“宁夏滩羊种质资源保护合同”，并相继付诸实施。 2 技术路线、方法和创新 本项目以家畜遗传育种和系统科学为基本理论基础，优化种羊选育、营养、卫生、管理、肥育等保护系统资源，并以此为技术支撑，建立苏井核心牧站，保护和选育裘皮羊和体大羊两个种群，实现种羊质量、环境资源和经济效益的协调发展。 3 任务完成情况和主要成果 3.1 羊群超过计划规模经过5年组群和选育，保种选育羊已达3 400只(其中，裘皮羊2 600只，体大羊800只)，比计划数多1 400只，超任务41.2%。 3.2 裘皮羊保护取得显著效果裘皮品质是滩羊的种质特征，必须首先予以考虑。盐池滩羊场经过几十年的裘皮选育工作，于1985年育成了滩羊串字花一号品系。但是，该品系实际上走的是系祖建系之路，品系育成之日就已积存了不少矛盾。长期近亲选配，加之体重与毛弯存在负的相关关系，当到第4～5个世代时，出现明显的退化现象，遇到干旱年景则很难过关。1994年我们在个体系谱分析和表型鉴定的基础上，经过选优淘汰，组建了2 530只的裘皮系种羊群，采取群体继代选育方式，严格控制近交系数，加强种羊选留和饲养管理，种羊质量和生产性能稳步提高(见表1)。     

滩羊体大品系生长激素基因的RFLPs的检测

研究运用了PCR－RFLPs方法，根据羊生长激素基因序列合成的特异性引物，对滩羊两个品系的基因组进行多态性分析。结果表明，其扩增产物的PVU Ⅱ酶切结果分别出现了两种基因型。并对两个品系滩羊生长激素基因检测结果进行了基因型和基因频率的初步分析，结果显示，BB基因型频率，滩羊普通品系显著高于体大品系（P＜0．05）；AB基因型频率，体大品系极显著的高于普通品系（P＜0．01）。而基因频率，两个品系之间无差异（P＞0．05）。     

以随机扩增多态性DNA(RAPD)技术筛选意大利蜜蜂重要农艺性状遗传标记

为了获得意大利蜜蜂重要农艺性状的分子遗传标记 ,本研究以 30种RAPD随机引物对平湖浆蜂、美意、澳意、苏意等 4个在产浆、采蜜和抗病性上存在较大差异的意蜂品系的基因组DNA进行RAPD_PCR扩增筛选。试验结果显示 ,随机引物W 1 8(5′_CGGACGGCGG_3′)和W2 3(5′_GTACCGCCCG_3′)的扩增图谱呈多态性。其中 ,在引物W 1 8所扩增出的 9条片断中 ,2 35 2bp和 36 4bp条带为美意所特有 ,表明可将之用于鉴别美意 ;2 0 92bp条带仅出现于蜂蜜高产的美意和澳意中 ,意味着该条带为一个蜂蜜高产性状的遗传标记 ;而 6 32bp条带在王浆高产品系平湖浆蜂中出现的频率 (0 91 )显著高于 (P <0 0 1 )美意(0 0 4 )、澳意 (0 0 2 )和苏意 (0 0 0 ) ,说明 6 32bp条带可能为王浆高产性状的一个遗传标记。在W2 3引物扩增条带中 ,6 5 1bp条带为澳意所特有 ,可用于澳意鉴别     

宁夏滩羊体大品系OB基因的RFIP检测

将PCR技术与RFLPs原理相结合而产生了PCR-RFIPsDNA分析方法,并运用了PCR-RFIPs方法,根据人和猪肥胖(ob)基因序列合成的特异性引物,对滩羊体大品系与普通品系的基因组进行多态性分析,表明其扩增产物对HinfI酶切结果出现了一种T等位基因,而无C等位基因,说明滩羊两品系在(ob)基因座位上无基因型差异.     

4个绵羊品种随机扩增多态DNA分析

本研究利用RAPD技术研究了小尾寒羊、大尾寒羊、洼地绵羊、滩羊 4个绵羊品种的亲缘关系。从 10 0条引物中筛选出的 16条引物 ,共扩增出 14 6条带 ,其中 94条表现出多态性 ,占 6 4 .4 %。它们间遗传距离较小 ,小尾寒羊与大尾寒羊、洼地绵羊、滩羊的遗传距离分别为 0 .0 6 4 9、0 .0 6 73和 0 .10 2 8,用UPGMA法构建了树状聚类图。结果显示 ,小尾寒羊、大尾寒羊和洼地绵羊首先聚一起 ,说明它们亲缘关系较近 ,起源于共同的原始祖先。据推测滩羊也起源于蒙古羊 ,但它生活在陕西、宁夏等省 ,与山东环境条件差别较大 ,在自然选择的作用下发生了变异 ,这可能是滩羊与其它绵羊间遗传距离大的主要原因。在本研究过程中还发现了各品种的分子标记     

宁夏滩羊种公羊单核苷酸多态性与遗传进化分析

为了分析宁夏滩羊主产区种公羊遗传分化情况,加强滩羊定向选育力度,充分开发利用优良品种的遗传特性,试验根据国际绵羊基因组联合会(ISGC)公布的用于亲缘鉴定的突变中,精心挑选7组单核苷酸多态性(SNPs)设计特异性引物,对3个种羊场的190只个体进行扩增测序,并利用生物信息分析软件对搜寻的SNPs进行遗传演变分析。结果表明:7个核心SNPs位点差异极显著(P0.001),5个SNPs位点(DU206327_107、DU271929_382、DU480434_533、DU471913_499、DU444709_372)为种公滩羊的亲缘鉴定的SNPs标记组合,且3个场区的种公羊之间存在亲缘关系。说明尽管3个种羊场之间存在不同程度的基因变异,但遗传进化相对稳定。     

鹌鹑高低应激品系的RAPD标记研究

本研究对美国路易斯安那州立大学家禽系选育的高应激和低应激两个品系鹌鹑进行ＲＡＰＤ分析,评定其遗传多态性。采用两个Ｋｉｔ共４０个引物,至少能得到１个多态性片段的引物有３５个。扩增片段大小范围为２００～２６００ｂｐ。９个引物测得高低应激系中共享条带为１０～１３。２８个引物的品系内条带共享率为０５～０９１,６个引物为０３５～０４９。２８个引物的系间条带共享率在０７以上。两个Ｋｉｔ测定品系间遗传距离的差异显著,ＫｉｔＡＱ测得的遗传距离大于ＫｉｔＵ。结果表明两个品系的鹌鹑间存在遗传变异。利用ＫｉｔＡＱ和ＫｉｔＵ的引物进行ＲＡＰＤ分析,可以评定鹌鹑高应激和低应激品系的个体间、品系间的遗传变异。     

桑树变异株系基因组DNA扩增多态性(RAPD)研究

利用RAPD技术对新一之品系的二倍体 (新一之、薪一圆、凤尾一之 )、三倍体 (陕桑 30 5 )、四倍体(40 2 - 1、40 2 - 1A、40 2 - 9)和 70 7品系的二倍体 (70 7)、四倍体 (40 3- 2 )进行了基因组DNA多态性研究。在用 91个引物单独扩增和 5 7对引物混合扩增后 ,有 73个单引物、38对混合引物扩增出了条带。在新一之的二倍体和四倍体间没有条带的差异 ,在新一之相同倍数体的不同株系之间也没有发现条带的差异 ,新一之的三倍体陕桑30 5和二倍体、四倍体相比有 4条特异性条带。在 70 7的四倍体 40 3 - 2中 ,发现 1条不同于二倍体 70 7的条带。本试验为桑树的性状变异提供了分子水平的证据     

宁夏滩羊产区草地与饲草料生产系统建设效果

宁夏滩羊是世界稀有的裘皮用绵羊品种 ,也是国家羊种重点保护对象。近年来 ,结合体大滩羊选育推广研究和滩羊饲养方式改变的需要 ,加大了产区草地和人工饲草料生产基地建设的力度 ,取得了显著成效 ;草原围栏 10 6 12万亩 ,补播改良 12 5 6 8万亩 ,人工种植多年生牧草留床面积达到 6 0 73万亩 ,一年生牧草 2 2 5 7万亩 ;种植玉米 16 1 4万亩 ,年生产玉米 76 98万t;农区年提供各类农作物秸秆 2 4 0 97万t,其中玉米秸秆 115 4 7万t,对改善滩羊饲养条件 ,促进其发展起到了重要作用     

猪配套系选育方法的研究

利用8个微卫星标记对杜长大三元杂交群体5个种群和斯格配套系8个种群的遗传结构进行了分析,并通过计算等位基因频率、F-统计量分析配套系群体间和群体内的遗传变异情况。结果表明,不同的微卫星位点上有特异的条带,可以作为专门化品系定位的辅助标记,如S0214位点138bp可作为父本父系的选育方向的特有条带,S0003位点162bp可作为母系方向选育的特有条带,S0003位点的155bp可作为母本母系方向选育的特有条带,S0515位点中156bp和161bp是母本父系不具有的条带。固定系数Fst在斯格猪和杜长大纯种上的遗传分化不大,可作为专门化品系选育程度的指标。     

甘肃省小麦条锈病主要流行小种的RAPD分析及Su11-4小种SCAR标记建立

本研究应用RAPD标记技术对甘肃省小麦条锈菌主要流行的8个生理小种进行多态性标记分析,旨在寻找小麦条锈菌不同生理小种的特异性标记,共选用220条10碱基随机引物进行筛选,其中有147条可得到稳定清晰的扩增条带。研究结果显示,通过使用147条引物对甘肃省流行的8个条锈菌的生理小种进行RAPD分析,发现各致病小种间遗传变异丰富,其中引物S301在条中33号中扩增得到约507bp的特异条带;引物S39在条中32扩增得到长度约183bp的特异条带;引物S36在Hybrid46-8扩增得到约510bp的特异条带;引物S2140在Su11-4扩增得到约317bp的特异条带。另外,本研究还对扩增得到的特异片段进行回收并进行测序分析,其中依据小麦条锈菌生理小种Su11-4特异条带的测序结果设计特异引物,成功将其转化为对Su11-4小种特异的SCAR标记,这对不同条锈菌生理小种的快速准确检测具有重要意义。     

波尔山羊和江苏本地山羊的AFLP和RAPD分析

实验山羊共 10 5只 ,其中波尔山羊 6 0只 (公母羊各半 ,采血样 2 0个 ,组织样 4 0个 ) ,徐淮山羊 30只 (公母羊各半 ,每羊采血样 1个 ) ,海门山羊 15只 (公羊 7只 ,母羊 8只 ,每羊采血样 1个 )。分别提取DNA ,按品种构建池DNA。应用 36个选择性引物组合对波尔山羊、徐淮山羊和海门山羊种间AFLP多样性进行研究 ,其中 2 9个引物组合共扩增出 32 5 3个标记 ,包括可变标记 92个 ,平均每个引物组合扩增 3 17个标记 ,多态频率达 2 8%。可变标记数较多的引物组合为 :E0 0 ACG/M0 0 CAC(13个 )、E0 0 ACG/M 0 0 CAG(10个 )、E0 0 AAC/M 0 0 CAC(8个 )和E0 0 AAC/M0 0 ACT(7个 )。从 93个随机引物中筛选出品种间多态性较强、重复性好的引物 2 2个 ,对三个品种池DNA进行随机扩增 ,共扩增出 183个标记 ,其中可变标记 6 0个 ,平均每个引物扩增 2 73个标记 ,多态频率为 32 8%。两种方法得到一致结果 ,即徐淮山羊与海门山羊遗传距离最近 ,...     

多年生黑麦草种质SSR分子标记遗传多样性分析

多年生黑麦草(Lolium perenne)是广泛栽培利用的优质牧草、草坪草.为研究多年生黑麦草种质资源的遗传多样性,选用简单重复序列(SSR)分子标记技术对10份多年生黑麦草自主选育品系和75份来自于23个不同国家的种质资源进行了分析.结果表明,26对引物扩增出的多态性条带有91条,占总条带数的69.5％.每个SSR...     

应用RAMP标记分析长白山地区中国林蛙的遗传多样性

应用随机扩增徽卫星多态性DNA（RAMP）标记技术对长白山地区中国林蛙60个个体间遗传多样性进行了分析。以便为中国林蛙种质资源的保护和利用以及物种分化研究提供基础资料。结果表明：120个RAMP引物中。有14个引物组合可扩增出清晰且具多态性的条带。这14个引物组合共扩增出107条带,其中105条具有多态性,多态条带比率为98．13％。每个引物可扩增出3～10条多态性条带,平均7．5条。多态条带比率、Shannon多样性指数（I）以及Nei氏基因多样度（h）均显示长白山地区中国林蛙具有较为丰富的遗传多样性。RAMP标记遗传相似性系数（岱）变异范围为0．4860～0．8505,平均值为0．6634,以GS平均值0．6634为闻值,可将所有供试材料划分为10类,其中大部分个体归为同一类,群体内并没有形成较明显的遗传分化。     

优良浆意蜂DNA分子特异标记(W316bp)的鉴定研究

第一部分分离提取三品系意蜂 (浙农大、萧山、平湖 )的DNA ,使用紫外分光光度计 ,波长 2 6 0nm鉴定DNA纯度 ;第二部分以W (5′ -CGGCCCCGGT - 3′)为随机引物进行PCR ,扩增 ,电泳 ,获得DNA多态性图谱 ;第三部分比较三品系意蜂工蜂与雄蜂的DNA多态性图谱。结果凡是三品系意蜂的工蜂均出现一高产浆特异标记W316pb条带 ,但三品系意蜂的雄蜂均无W316bp条带。则进一步鉴定了W316bp是高产浆意工蜂DNA分子的特异标记