两种扁柏属植物精油对蚊虫的毒杀、驱避活性及化学成分分析

为了解绒柏Chamaecyparis pisifera精油和日本扁柏Chamaecyparis obtuse精油对蚊虫的生物活性,通过浸渍法测试了两种植物精油对白纹伊蚊Aedes albopictus和致倦库蚊Culex pipiens quinquefasciatus 4龄幼虫及蛹的毒杀活性,采用人体局部涂肤法测试其对白纹伊蚊成蚊的驱避活性,并利用气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）定性分析了精油的化学成分。结果表明,绒柏精油和日本扁柏精油对白纹伊蚊4龄幼虫/蛹的24 h LC₅₀分别为47.66/152.33和73.11/205.06 μg/mL,对致倦库蚊4龄幼虫/蛹的24 h LC₅₀分别为31.74/107.61和63.94/131.42 μg/mL。以1.5和2.0 μL/cm²剂量涂抹人体皮肤,绒柏精油、日本扁柏精油驱避白纹伊蚊的完全保护时间分别是3.24 h和0.78 h、5.45 h和1.86 h。经GC-MS分析鉴定出绒柏精油中含α-蒎烯（29.89%）、17-norkaur-15-ene（9.96%）、Δ-3-蒈烯（9.79%）等16种成分,日本扁柏精油含Δ-3-蒈烯（35.33%）、α-蒎烯（25.60%）、β-月桂烯（12.86%）等22种成分。可见,绒柏精油和日本扁柏精油对白纹伊蚊和致倦库蚊4龄幼虫及蛹有较强的毒杀活性,而且绒柏精油对白纹伊蚊还有很强的驱避活性,具有研发为环保型蚊虫防控剂的潜力。     

福建柏精油对蚊虫的生物活性

为筛选环保型植物源灭蚊剂,从福建柏Fokienia hodginsii叶中提取精油,采用浸液法测试了该精油对白纹伊蚊Aedes albopictus和致倦库蚊Culex pipiens quinquefasciatus IV龄幼虫和蛹的毒杀作用,采用密闭圆筒法研究了该精油对2种蚊虫成蚊的熏蒸活性,并用气相色谱-质谱联用法对其化学成分进行了检测。结果表明:福建柏精油对白纹伊蚊IV龄幼虫和蛹的LC50值分别为53.21和144.34μg/mL,对致倦库蚊分别为55.85和147.68μg/mL;在4.36μg/cm3熏蒸剂量下,该精油对白纹伊蚊和致倦库蚊成蚊的KT50值分别为14.63和14.90 min,24 h校正死亡率均为90.00%。从福建柏精油中共检测出16种主要化学成分:其中相对含量最高的为α-蒎烯(α-pinene),为29.25%;其次是马鞭烯醇(bicyclo[2.2.1]hept-3-en-2-ol)10.88%和氧化石竹烯(caryophyllene oxide)9.64%等。研究结果表明,福建柏精油对2种供试蚊虫具有显著的杀虫活性。     

两种圆柏属植物精油对蚊虫的熏蒸活性

用水蒸汽蒸馏法提取龙柏和铺地柏鲜枝叶精油,采用三角瓶法测定其对白纹伊蚊和致倦库蚊成蚊的熏蒸活性,利用气相色谱-质谱联用法分析两种精油的化学成分。结果表明在20.82、31.24μg/cm3和15.73、23.59μg/cm3熏蒸剂量下龙柏精油和铺地柏精油对白纹伊蚊、致倦库蚊的24 h熏蒸LC50值分别为19.44、29.08μg/cm3和16.77、21.68μg/cm3;龙柏精油和铺地柏精油对白纹伊蚊、致倦库蚊成蚊的KT50值为8.66、6.68 min和9.21、7.66 min。龙柏精油中鉴定出52种化合物,主要为α-葑酯(18.8%)、榄香醇(16.66%)、柠檬烯(12.26%)和β-月桂烯(6.75%)。铺地柏精油中鉴定出55种化合物,相对含量最高的是α-葑酯(12.49%),其次是榄香醇(10.46%)、t-木罗烯(9.05%)、桧烯(8.29%)。以上结果表明两种精油对两种成蚊均有较好的熏蒸活性,具有开发为环境友好型灭蚊剂的潜力。     

山苍子精油对白纹伊蚊的生物活性及其成分分析

研究了山苍子Litsea cubeba果实精油对白纹伊蚊Aedes albopictus成蚊的驱避活性和对其幼虫的毒杀活性;采用GC-MS定性分析了精油的化学成分,并定量分析了其中9种活性成分。结果如下：在1．5mg·cm^-2的涂抹剂量下,山苍子精油对白纹伊蚊的100％保护时间为3．70h,对白纹伊蚊4龄期幼虫的24h毒杀Lc50值为82．48μg·mL^-1。定性分析共鉴定出17种化合物,其中E-柠檬醛的相对含量最高,其峰面积百分比为44．65％,其它相对含量较高的成分分别是Z-柠檬醛（34．60％）、柠檬烯（11．70％）、甲基庚烯酮（2．28％）、芳樟醇（1．28％）等。定量分析9种活性成分在精油中的总含量为238．70mg·mL^-1,其中E-柠檬醛106．20mg·mL^-1、Z-柠檬醛68．79mg·mL^-1、桉叶油素40．90mg·mL^-1的含量较高。研究结果表明,山苍子精油对白纹伊蚊具有良好的成蚊驱避和幼虫毒杀活性,这些生物活性与精油的化学成分密切相关。     

四种植物精油对蚊虫的熏杀活性及酯酶活性的影响

为了筛选高效、环保、低抗性的植物源灭蚊剂,揭示植物精油熏杀蚊虫的作用机理,测试了湖南香薷Elsholtziahunanensis、藿香Agastacherugosus、八角Illiciumverum和剑叶金鸡菊Coreopsislanceolata精油对白纹伊蚊Aedesalbopictus和致倦库蚊Culexpipiensquinquefasciatus成蚊的熏杀活性及对2种蚊虫体内乙酰胆碱酯酶（AChE）和非特异性酯酶（NSE）活性的影响。结果表明,4种植物精油对蚊虫的熏杀效果显著,但同种植物精油对2种蚊虫的熏杀活性有差异。藿香精油对白纹伊蚊的熏杀效果最好（LC50值为26．12μg．cm-3）,八角精油对致倦库蚊的熏杀活性最强（Lc50值为29-31μg·cm-3）。4种植物精油对白纹伊蚊和致倦库蚊体内AChE活性起诱导作用;对致倦库蚊体内NSE活性均有抑制作用,其中八角精油的酶活性抑制率最高（19．79％）。湖南香薷和八角精油对白纹伊蚊NSE活性有抑制作用,酶活性抑制率分别为34．90％和25．26％;藿香和剑叶金鸡菊精油对白纹伊蚊NSE活性有促进作用,酶活性增长率分别为25．66％和66．35％。综合分析4种植物精油对蚊虫的熏杀活性及对酯酶活性的影响,湖南香薷和藿香精油更适宜作为植物源灭蚊产品的备选材料。     

山蒟中脂肪链酰胺类化合物的分离及杀虫活性

采用提取、萃取及柱层析等方法,从山蒟Piper hancei Maxim甲醇提取物的石油醚和氯仿萃取相中分离到6个脂肪链酰胺类化合物,通过核磁共振、质谱并结合相关文献比对,其结构被分别鉴定为已知化合物chingchengenamide A( C1 )、N-异丁基-反-2-反-4-癸二烯酰胺( C2 )、假荜拨酰胺A( C3 )、荜茇宁( C4 )、N-p-香豆酰酪胺( C5 )和N-反式-阿魏酰酪胺( C6 ),其中 C1 为首次从山蒟中获得。利用幼虫浸液法测试了各化合物对白纹伊蚊Aedes albopictus和致倦库蚊Culex pipiens quinquefasciatus幼虫的12 h杀虫活性。结果表明:在20 mg/L下,化合物 C1 对白纹伊蚊的杀虫活性较高,其校正死亡率为100%,LC₅₀值为5.37 mg/L;化合物 C1 、 C2 、 C3 和 C4 对致倦库蚊的杀虫活性较高,20 mg/L下的校正死亡率分别为100%、88.5%、100%和100%,LC₅₀值分别为1.03、9.68、3.08和2.87 mg/L。     

四种非寄主植物精油对小菜蛾的生物活性

为寻找小菜蛾Plutella xylostella绿色防控方法，于室内测定辣蓼、迷迭香、芸香和紫苏4种非寄主植物精油对小菜蛾的生物活性。结果表明，辣蓼植物精油对小菜蛾2龄幼虫的毒杀作用最强，24、48和72 h时的致死中浓度LC50分别为2.18、1.78和1.46μg/μL，芸香植物精油次之；当芸香植物精油浓度为15μg/μL时，小菜蛾3龄幼虫的选择拒食率最高，作用24 h和48 h时分别为100.00%和92.84%，而在10μg/μL浓度下作用24 h和48 h时非选择拒食率达到最高值，分别为65.72%和42.72%；在4种植物精油中，芸香植物精油对小菜蛾3龄幼虫的生长抑制作用最明显，相对生长率最低，为-34.72%，生长抑制率最高，为133.74%，辣蓼植物精油的生长抑制效果次之，迷迭香和紫苏植物精油的抑制作用相对较差；小菜蛾雌、雄成虫对4种植物精油均表现出一定的触角电位反应和驱避活性，其中，芸香植物精油的驱避效果最明显；气相色谱-质谱分析结果显示，芸香植物精油的主要成分为β-石竹烯、（+）-α-蒎烯和β-蒎烯。表明芸香植物精油对小菜蛾具有显著的生物活性，具备开发为小菜蛾靶标...     

八种蚊幼虫对苏云金杆菌H-14的敏感性测定

进行了苏云金杆菌H—14对我国8种重要病媒蚊种,即3株埃及伊蚊、6株白纹伊蚊、黄斑伊蚊、淡色库蚊、致倦库蚊、三带喙库蚊、中华按蚊及嗜人按蚊的幼虫的毒力测定,从24小时结果可看出,淡色库蚊最敏感,其次是白纹伊蚊的宜兴株和广东海南株,LC_(50)分别为52.5,57.0和64.5国际毒力单位/立升水,最不敏感的是嗜人按蚊和中华按蚊。对嗜人按蚊24小时LC_(50)约为48小时的5倍,别的蚊种则的为2倍。     

BsC3-41杀蚊幼制剂对蚊幼虫毒杀效果研究

通过以BsC3- 41杀蚊幼制剂对 3种蚊幼虫进行生物活性测定和野外灭蚊试验 ,结果表明 :该制剂对致乏库蚊CulexfatigansWiedemann的毒杀效果最好、对中华按蚊AnophelessinensisWiedemann次之、对白纹伊蚊AedesalbopictusSkuse的效果较差 ,2 4小时LC50值分别为 0 2 0 2 5 μg/ml、 2 5 363μg/ml和 5 9 730 2 μg/ml。野外水体灭蚊使用 3ml/m2 的浓度防治淡色库蚊效果可达 98 88%～ 1 0 0 0 0 % ,使用 1 0ml/m2 的浓度防治中华按蚊效果可达96 81 %～ 1 0 0 0 0 % ,使用 2 0 0ml/m2 的浓度防治白纹伊蚊效果达到 90 64%以上。     

三种植物精油对致倦库蚊成蚊的熏蒸活性及其混配增效作用

研究了香樟叶、香樟果实、天竺桂叶的水蒸气蒸馏精油对致倦库蚊Culex pipiens quinquefasciatus成蚊的熏蒸活性及其混配增效作用。结果表明:用香樟叶、香樟果实和天竺桂叶精油对致倦库蚊熏蒸20 min后,其24 h的LC50值分别为7.47、4.92和5.70μg/cm3;在设定的熏蒸剂量下,3种精油的半数击倒时间(KT50值)分别为16.62、15.91和16.98 min。将香樟叶精油与天竺桂叶精油以体积比1∶9、3∶7和5∶5混配,其共毒系数分别为152.09、158.20和152.86;将香樟果实精油与天竺桂叶精油以体积比1∶9、5∶5和7:3混配,其共毒系数分别为145.73、146.30和139.79。表明3种植物精油均对致倦库蚊成蚊具有显著的熏蒸活性,将其以适当比例混配后具有增效作用。     

琼胶寡糖诱导菜豆活性氧相关防御及机理初探

以琼胶寡糖作为激发子处理菜豆叶片,研究其诱导菜豆的抗性反应及作用机理.结果表明,100μg·mL-1的琼胶寡糖处理菜豆叶片下表皮,会促进菜豆叶片下表皮保卫细胞释放H2O2和气孔关闭.同时100μg·mL-1的琼胶寡糖喷施菜豆植株,能显著提高脂氧合酶(LOX)活性(P＜0.05),在3h达最高,并检测到具有抑菌作用的挥发性物质2,3-butanedione、2-methyl-butanoic acid、1-octen-3-ol和junipene含量增加.综上所述,100μ.g·mL-1的琼胶寡糖激发菜豆产生活性氧,并产生抗菌物质,进而增强其防御抗性.     

苯并咪唑酮α,β-不饱和酰胺衍生物加成反应活性与抑菌活性的关系研究

以还原型谷胱甘肽(GSH)为亲核试剂,测定了6个苯并咪唑酮 α,β-不饱和酰胺衍生物(Ⅰ~Ⅵ)与GSH的加成反应活性,并采用肉汤微量稀释法测定了上述化合物对蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus的抑菌活性,分析了供试化合物加成反应活性与其抑菌活性的相关性。结果表明:化合物Ⅰ~Ⅴ的反应活性接近,二级动力学速率常数(KGSH)在0.0559~0.0638 L/(mmol·min)之间,化合物 Ⅵ 的反应活性最高, KGSH为0.290 L/(mmol ·min);化合物Ⅱ和Ⅵ的抑菌活性最高,其最小抑制浓度(MIC)均为0.78 μg/mL;表明苯并咪唑酮α,β-不饱和酰胺衍生物加成反应活性与其抑菌活性之间无明显相关性,不能用其反应活性的高低来预测其抑菌活性。     

Antifungal activity of the essential oil of Zanthoxylum bungeanum and its major constituent on Fusarium sulphureum and dry rot of potato tubers

The composition of the essential oil of Zanthoxylum bungeanum was analyzed by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). A total of 35 components, which constitute 99.10% of the oil, were identified. The major constituent was α-pinene (19.59%). Minimum inhibitory concentrations (MICs) of the essential oil and α-pinene against Fusarium sulphureum were determined to be 6.25% and 12.50%, respectively. A determination of the antifungal activity and inhibitory effect of the essential oil and α-pinene showed that the essential oil more significantly decreased cell membrane integrity and inhibited spore germination than α-pinene. Observations using scaning electron microscope revealed morphological modification including mycelium asymmetry, hyphal swelling, curling, and a secretory appearance. Ultrastructural alterations were also observed including cell empty cavity and osmiophilic granule generation. In vivo testing showed that the oil and α-pinene effectively controlled dry rot of potato inoculated with F. sulphureum. These findings indicated that the oil and α-pinene directly inhibit fungal growth, and the essential oil showed pronounced potential than α-pinene.     

产杀虫抗菌单端孢霉烯族毒素海绵真菌Myrothecium verrucaria Hmp-F73的筛选和鉴定

从98株分离自大连海域繁茂膜海绵Hymeniacidon perleve共附生的真菌中,筛选得到具有较强杀虫抗菌活性的丝状真菌Hmp-F73。96孔板卤虫生物检测（brine shrimp assay,BSA）结果显示,该菌株发酵滤液甲醇提取物浓度为0.25μg.mL-1时,卤虫校正死亡率为100%;甲醇提取物经硅胶柱层析洗脱得到7个馏分,其中馏分3浓度为400μg.mL-1时对甜菜夜蛾具明显抑制取食活性,拒食率达到85.25%;1mg.mL-1的馏分6对玉米纹枯病菌Rhizoctonia solani抑菌圈直径达9.25mm。经色谱柱层析分离纯化得到4个杀虫抗菌活性化合物,氢核磁数据显示这些化合物均属于12,13-环氧单端孢霉烯族化合物。通过形态、培养特征及ITS1-5.8S-ITS2序列分析,将该菌株鉴定为疣孢漆斑菌Myrothecium verrucaria。     

球孢白僵菌对西花蓟马成虫的毒力及体表侵染的扫描电镜观察

本文在室内测定球孢白僵菌Beauveria bassiana CYT4菌株对西花蓟马Frankliniella occidentalis成虫的致死作用,并电镜观察分生孢子在西花蓟马成虫体表的侵染过程。结果表明：白僵菌的致死率随孢子浓度的增加而增加,1×109、1×108、1×107和1×106孢子.mL-1的孢悬液接种试虫第6d的致死率分别为83.57%、66.08%、49.78%和20.22%;0.04μL.mL-1和0.06μL.mL-1的多杀菌素与1×108孢子.mL-1白僵菌孢悬液混合后对试虫接种第5d的致死率分别为89.42%和95.76%,而单独施用菌液为58.19%,单独施用多杀菌素仅为45.55%和61.33%,表明二者混合能提高对西花蓟马成虫的致死率。扫描电镜观察发现,经白僵菌孢悬液处理的西花蓟马成虫虫体,在触角基节、复眼、足部褶皱区、刚毛窝、翅、产卵器和各体节连接处均有大量孢子附着和萌发,但腹部孢子量很少,尤其在节间膜处几乎无孢子;孢子在1h时即附着在体表,12h时已萌发,36h时有穿透体壁现象,48h后整个虫体被菌丝包被。     

脂肽类化合物bacillomycin L抗真菌活性及其对水稻病害的防治

生防菌Bs-916对水稻纹枯病具有很好的防治效果,分泌的脂肽类化合物bacillomycin L是其抗真菌活性的关键因子之一.Bacillomycin L抑菌活性的定性及定量分析结果表明:其对常见的12种病原真菌的菌丝生长均有抑制作用,但其对不同病原真菌的毒力存在显著差异.Bacillomycin L对番茄灰霉Botrytis cinerea和稻瘟病菌Magnaporthe oryzae的毒力最强,抑制中浓度(IC50)分别为0.28μg·mL-1和0.35μg·mL-1;对大多数病原真菌IC50在1～3μg·mL-1;对水稻恶苗病菌Fusarium fujikuroi和串珠镰刀菌F.moniliforme毒力最差,IC50分别为28.99μg·mL-1和45.92μg·mL-1.显微观察表明bacillomycin L能致畸病原真菌菌丝和抑制孢子萌发.Bacillomycin L对稻瘟病和水稻纹枯病都有一定的防治效果,当使用浓度为500μg·mL-1时,对水稻纹枯病和苗瘟的防效分别为70.8%和56.3%.研究结果表明,bacillomycin L具有广谱高效的抗真菌活性,具有开发为环境友好型生物农药的潜力.