DNA疫苗在动物疾病预防中的研究进展

DNA疫苗的出现是疫苗研究史上重大事件,被誉为疫苗研究的第三次革命。DNA疫苗既能激发机体的细胞免疫,也能诱导特异性的体液免疫,在预防和治疗细菌、病毒、寄生虫等感染性疾病等方面具有广阔的应用前景。利用DNA疫苗预防动物疾病是DNA疫苗发展的一个重要方面,并且在一些重大动物疾病预防研究上取得许多突破。可以肯定,随着人们对DNA疫苗免疫机制深入理解以及提高其诱导特异性免疫应答水平经验的积累,DNA疫苗定会在预防动物各种疾病方面发挥巨大作用。     

佐剂对DNA疫苗的影响

DNA疫苗是近年来发展较为迅速的一类生物制剂,它能诱导动物机体产生持久的体液免疫和细胞免疫,其在抗病毒、细菌和寄生虫的感染方面起到了重要作用。但与传统的灭活疫苗相比,其免疫效果并不理想。为了攻克DNA疫苗免疫效力低下的难题,一些学者已经研制了多种佐剂制品,以提高DNA疫苗对动物疾病免疫保护的能力。该文针对使用佐剂提高DNA疫苗免疫效力的最新概况做一综述。     

DNA疫苗及其在水产养殖中的应用研究进展

DNA疫苗是近年来发展起来的用于防治动物疾病的新型药物,被称作第三代疫苗。DNA疫苗可导致体液免疫和细胞介导免疫两种免疫类型。其基本的成分是质粒DNA,由5个部分构成：1）细菌的复制起点;2）抗性选择基因;3）编码抗原蛋白或多肽的基因;4）转录调控因子;5）mRNA的转录终止信号。本文介绍了DNA疫苗的作用原理、免疫方式以及DNA疫苗在水产养殖业中的应用研究进展。     

普通变形杆菌TWN3株DNA疫苗的初步研究

普通变形杆菌TWN3分离自死亡大口鲇,菌的DNA文库已构建成功,通过免疫印迹法从文库中筛选到TWN3抗原片段PV4,将其克隆到真核表达载体pcDNA3上,构建DNA疫苗pcDNA3-PV4.肌肉注射免疫小鼠进行真核表达检测.免疫组织化学分析DNA疫苗在接种局部肌肉中抗原的表达,ELISA检测小鼠血清中的IgG及IFN-γ含量.免疫pcDNA3-PV4疫苗的小鼠肌肉细胞中检测到PV4相关抗原蛋白的表达.外周血中的IgG及IFN-γ显著高于免疫pcDNA3组.对小鼠进行免疫保护试验,免疫DNA疫苗的小鼠对TWN3菌有免疫力.初步显示构建的DNA疫苗有一定效果.试验结果为鱼类水体试验提供了参考依据,同时随着TWN3株菌DNA疫苗研究的深入,将对该疫苗最终大规模用于鱼类提供理论基础.     

白斑综合征病毒囊膜蛋白VP19及VP28的研究进展

自二十世纪90年代,白斑综合征病毒(WSSV)就因其暴发范围广、致死率高得到了广泛的关注。研究主要集中在确定该病毒蛋白的结构及功能,以及利用其囊膜蛋白制备亚单位疫苗、研发DNA疫苗等来提高对虾抵抗白斑综合征病毒的能力,尽管免疫防治目前在实验室阶段已取得了显著的保护效果,但因其给药方式局限以及成本较高等因素一直没有应用于实际生产中。VP19和VP28是白斑综合征病毒主要的囊膜蛋白,在WSSV感染对虾的过程中起着非常重要的作用。本文从WSSV的基因组学、VP19和VP28的蛋白质结构及其在免疫防治中的应用等方面概述了VP19和VP28的研究进展,包括蛋白亚单位疫苗、DNA疫苗、RNA疫苗以及相关抗体的研究。在总结了不同类型疫苗的保护效果后发现,VP19和VP28的双价疫苗的保护率较高,为今后制定有效的WSSV控制方法提供了参考。     

DNA疫苗在禽病防治中的应用研究进展

DNA疫苗是继减毒疫苗、灭活疫苗、亚单位疫苗和重组多肽疫苗之后的又一新型疫苗,比其它疫苗高效、安全且易于大量生产。本文主要对禽用DNA疫苗的构建战略、在禽类一些病毒病防治中的应用效果及其安全问题等方面的研究近况作一综述,以促进我国养禽业的发展。     

动物免疫失败的原因分析及对策

动物疫苗免疫接种是预防和控制动物疫病的主要手段,但在生产实践中免疫失败现象极为普遍,其原因有疫苗、免疫技术和动物本身等几方面的。对动物疫苗种类介绍和动物免疫失败原因详细分析,提出了科学合理地选用疫苗、制定合理的免疫程序、规范操作与采用正确的操作方法等防止对策,以期为动物成功免疫提供参考。     

海豚链球菌simA和pgmA真核表达质粒对尼罗罗非鱼免疫保护的研究

尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)是世界水产养殖业中的重要经济鱼类,但在养殖生产中易受海豚链球菌(Streptococcus iniae)感染而致病致死,使用疫苗是一种相对理想的防感染措施。该研究采用海豚链球菌simA、pgmA基因构建的真核表达载体作为DNA疫苗,肌肉注射罗非鱼评估疫苗保护效果。免疫后在DNA和RNA水平上,在注射鱼体内检测到2个目的基因。首次免疫后第7至第28天,鳃、肝、肾脏、头肾中疫苗组的白介素1 (Interleukin,IL-1β)与肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF-α)表达量高于PBS对照组;疫苗组的抗体滴度、血清抗菌活性显著(P<0.05)高于PBS对照组。攻毒后,注射pcDNA3.1-pgmA、pcDNA3.1-simA、pcDNA3.1-pgmA与pcDNA3.1-simA等比例混合疫苗的相对保护率(Relative percent survival,RPS)分别为60.7%、49.9%和75.0%。结果表明所制备的疫苗具有免疫保护效果,可作为候选疫苗。     

寄生虫学的发展与生物学革命

现代生物学革命对寄生虫学的发展产生了重大的影响,将寄生虫的研究带入了分子学领域。重点介绍了PCR、RAPD分子标记等现代生物学技术在寄生虫的分类、免疫与药理研究上的应用,通过这些技术已经研制出了寄生虫基因工程亚单位疫苗、活载体苗、人工合成肽疫苗及DNA疫苗等,这些疫苗有望在寄生虫预防中起主导作用。     

渔用疫苗免疫佐剂应用研究

<正>免疫佐剂简称佐剂,是先于抗原或与抗原同时使用时,能非特异性地改变或增强机体特异性免疫应答、增强抗原的免疫原性,而本身并不引起机体产生相应的免疫应答、可以积极发挥辅助作用的一类物质。近年来,随着免疫学研究的不断深入,渔用减毒活疫苗、亚单位疫苗和DNA疫苗等新型疫苗的研究已逐步开始,也促进了疫苗佐剂研究的迅速发展。与传统疫苗相比,开发新型     

我国H5N1禽流感疫苗研究取得新突破

<正>近年来,哈尔滨兽医研究所在新型禽流感疫苗的研制方面取得了显著进展。2007年研制成功的表达H5亚型禽流感病毒HA基因的重组新城疫病毒载体疫苗,可以同时预防H5N1禽流感和鸡新城疫两种家禽烈性传染病。2010年研制成功的表达H5亚型HA基因的重组鸭瘟病毒载体疫苗,可以显著提高H5N1禽流感的免疫覆盖率。2013年研制成功的H5N1禽流感DNA疫苗,具有易于生产和储存,可以同时诱导细胞和体液     

疫苗及其在水生动物疾病预防中的应用(四)

正上接2018年9期四、鱼类免疫佐剂的研究及其前景免疫佐剂简称佐剂,是先于抗原或与抗原同时使用时,能非特异性地改变或增强机体产生免疫应答,增强抗原的免疫原性,而本身并不引起机体产生免疫应答,可以积极发挥辅助作用的一类物质。近几年来,随着免疫学研究的不断深入,渔用减毒活疫苗、亚单位疫苗和DNA疫苗等新型疫苗的研究逐步深入,也促进了疫苗佐剂研究的迅速发展。疫苗佐剂作为生物反应调节中的免疫调节剂,可刺激机体产生一定的非特异性免疫反应,且无毒副作用、     

溶藻弧菌鞭毛蛋白flaC基因DNA疫苗对红笛鲷的免疫保护研究

为研究溶藻弧菌鞭毛蛋白flaC基因DNA疫苗对红笛鲷的免疫保护作用,实验构建了重组真核表达质粒pcDNA-flaC并将该质粒肌肉注射红笛鲷,采用PCR、RT-PCR、ELISA和攻毒试验等方法检测了该真核表达质粒在红笛鲷组织内的分布、表达和对红笛鲷的免疫保护.PCR结果显示,免疫接种7和28 d,注射点周围肌肉、鳃、肾脏、肝脏和脾脏都存在质粒分布;RT-PCR结果显示,免疫接种后第7天、14天和28天,红笛鲷不同组织内均有目的基因表达.ELISA结果表明,鱼血清内产生了抗FlaC蛋白的抗体,表明DNA疫苗免疫后鱼体表达了目的蛋白,并诱导产生了相应抗体.攻毒实验表明,免疫后的红笛鲷能较好地抵抗致病性溶藻弧菌的感染.结果表明,质粒pcDNA-flaC可能是抵抗溶藻弧菌感染的有效的疫苗候选物.     

鲤疱疹病毒3型ORF148 DNA疫苗对建鲤鱼苗的免疫保护

鲤疱疹病毒3型(Cyprinid herpesvirus 3, CyHV-3)又称为锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus, KHV),是一种高传染性、致死性病毒。为开发新型CyHV-3 DNA疫苗,前期研究中将CyHV-3 ORF148基因插入pEGFP-N1构建重组质粒,在此基础上,本研究通过转染试验、间接免疫荧光试验证实pORF148-EGFP融合蛋白可以在CCB-J细胞系和建鲤体内表达;将重组质粒作为DNA疫苗,肌肉注射免疫建鲤鱼苗,ELISA检测表明免疫pEGFP-ORF148重组质粒可以显著提高建鲤血清特异性抗体水平; RT-qPCR检测显示,免疫pEGFP-ORF148重组质粒后,建鲤脾脏和头肾中的免疫相关基因如IFN-a1、Mx-1、CXCa、CXCR1、TNF-α、IL-1β及IgM基因表达量均显著提高。攻毒实验显示, CyHV-3攻毒21 d后, PBS组、pEGFP-N1组和pEGFP-ORF148组的建鲤存活率分别为30%、35%和85%,免疫pEGFP-ORF148可以显著提高建鲤的存活率(P0.01)。本研究旨在为CyHV-3 DNA疫苗的应用提供理论依据。     

牙鲆淋巴囊肿病核酸疫苗的免疫效果评价

<正>核酸疫苗是将编码某种抗原蛋白的外源基因(DNA或RNA)直接导入动物体内,并通过宿主细胞的表达系统合成抗原蛋白,诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答,以达到预防和治疗疾病的目的。动物实验证明,在合适的条件下,DNA接种后既能产生细胞免疫又能引起体液免疫,核酸疫苗可诱导机体产生全面的免疫应答,     

黏膜免疫疫苗的研究现状

黏膜免疫系统是机体整个免疫网络的重要组成部分,又是具有独特结构和功能的独立免疫系统,在抵抗感染方面起着积极重要的作用,目前,通过黏膜免疫途径接种疫苗在生产实践中已被广泛应用,如呼吸道粘膜疫苗、肠道粘膜疫苗、生殖道黏膜疫苗及寄生虫粘膜疫苗。     

鱼用DNA疫苗的研究现状

DNA疫苗是一种新型疫苗。章简要介绍了DNA疫苗的构建、作用机理、接种方法，并对DNA疫苗在水产上的应用做了展望。     

传染性造血器官坏死病疫苗的研究进展

传染性造血器官坏死病(infectious hematopoietic necrosis,IHN)是引起鲑鳟鱼暴发性死亡的急性传染性病毒疾病。IHN分布广、传播快,每年给全球鲑鳟养殖业造成重大的经济损失。疫苗免疫是防控该病的最有效手段。本文总结了IHN疫苗的研究进展,主要包括灭活疫苗、减毒疫苗、亚单位疫苗、合成肽疫苗及DNA疫苗等,以期为水生动物疫苗的研制提供参考。     

新型免疫佐剂的研究现状及应用

近年来,随着免疫学研究的不断深入及基因工程技术的迅速发展,活载体疫苗、DNA疫苗等新型疫苗的研究也取得了可喜的进步,但这些疫苗免疫原性弱,诱导机体产生的免疫应答不够强,需要配合佐剂以提高其免疫原性。然而常规佐剂存在着一定的局限性,于是新型佐剂的研究受到越来越多的关注。对一些新型免疫佐剂的研究现状和应用前景进行简要的综述和分析。     

鱼用疫苗的研究概况

鱼用疫苗在提高动物体特异性免疫水平的同时亦能增强机体抗应激的能力,不污染环境,无药物残留。随着研究的不断深入,鱼用疫苗的种类愈来愈多。根据获得疫苗的不同方法,可将其分为死疫苗、减毒活疫苗、亚单位疫苗、DNA疫苗、合成肽疫苗等。鱼用疫苗的使用还有一系列问题尚未解决,如寻找保护性抗原,如何改进接种方式,如何将安全、经济、高效疫苗及时、大规模应用到养殖生产中等。