剑麻茎腐病6个病原菌生物学特性的研究

对6株剑麻茎腐病原菌黑曲霉菌生物学特性的研究结果表明,在不同种类培养基、pH值、温度、光照等培养条件下病原菌生长速率有差异,病原菌的孢子生长的温度范围为10～44℃,最适温度为32℃,菌落生长的最适pH值为9,全光照条件下菌落生长最适,分生孢子的致死温度为60℃,50 min。     

中国桉树焦枯病病原菌物种多样性及致病力初步分析

为了明确中国桉树焦枯病病原菌的物种多样性、生物学特性和致病力强弱,本试验对在中国报道的桉树焦枯病病原菌进行了形态学比较,β-tubulin、Histone H3、TEF-1α三段基因系统发育学分析,并测定各病原菌在7个温度下的菌落生长速度,以及对4个桉树无性系(DH32-29、广州1号、广林4号、OC14)离体叶片的致病力大小。结果表明,到目前为止我国桉树焦枯病病原菌分属6个不同的物种,分别是Ca.cerciana、Ca.crousiana、Ca.pauciramosa、Ca.pseudocolhounii、Ca.pseudoreteaudii和Ca.fujianensis。不同病原菌的形态存在一定差异,病原菌分属于不同的系统发育树分枝。被测试病原菌的最适生长温度为20~30℃,在5℃和35℃下均停止生长。被测试的5种桉树焦枯病病原菌在4个桉树无性系上的致病力差异显著,总体致病力强弱顺序为:Ca.cercianaCa.pauciramosaCa.pseudoreteaudiiCa.crousianaCa.fujianensis。桉树无性系对不同种桉树焦枯病病原菌的抗性存在显著差异。研究结果显示桉树焦枯病病原菌物种存在多样性,各病原菌的致病性差异显著,有针对性地选择抗特定病原物种的桉树无性系是解决桉树焦枯病危害的一条有效途径。     

咖啡细菌性叶斑病病原的分离与鉴定

2012年在云南瑞丽咖啡种植苗圃发现一种细菌性病害,称为咖啡细菌性叶斑病.该病主要危害咖啡叶片.将田间感病咖啡叶片上分离所得的6个菌株进行柯赫氏法则回接试验,发病症状与田间自然症状一致,重新分离得到此病原菌,确定了病菌的致病性.经培养性状、菌落形态观察、生理生化特性分析(Biolog系统)和ITS序列分析(NCBI ace.no.JX876899),确定该病原菌为丁香假单胞菌咖啡致病变种(Pseudomonas syringae pv.garcae).     

剑麻离体叶片接种剑麻茎腐病菌方法的研究

以剑麻茎腐病菌为接种病原菌,以H.11648离体叶片为接种对象,研究了5种接种方法、6种分生孢子浓度以及不同温度条件下和植株不同部位叶片的接种效果.结果表明,叶面打孔法或切口滴108个/ml的分生孢子悬浮液接种效果最好.采用该方法,20℃～42℃才能接种成功,30℃～35℃是接种后的最适培养温度;中部叶片的接种效果好于下部叶片,上部叶片接种效果最差.     

7个木薯细菌性萎蔫病菌致病性相关突变体的鉴定及插入位点基因的分子分析

由地毯草黄单胞木薯萎蔫致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.manihotis)侵染引起的细菌性萎蔫病是世界范围内木薯种植中的重要病害,也是为害中国木薯最严重的病害。目前,国内外有关该病病原菌致病分子机理方面的研究还很少,制约了相关防控工作的开展。本项目组在前期构建国内菌株Xam GX11的转化子库的基础上,开展了7个致病相关突变体的分子鉴定、表型变异评价、插入位点侧翼序列的分离和相关基因的分子分析等研究,发现氨基转移酶、葡萄糖-果糖氧化还原酶等基因可能参与病原菌的致病过程。     

花生网斑病原菌孢子差异及其致病力分析

花生网斑病（peanut web blotch），由花生亚隔孢壳菌（Didymella arachidicola）引起，病原菌又称花生茎点霉（Phoma arachidicola）或派伦霉（Peyronella arachidicola），在我国南北的各大花生产区均有发生，已成为生产上严重的叶部病害。为筛选产孢效率高、致病力强的菌株，研究病原菌进化机制和环境适应性，从来自不同地区的花生网斑病叶片样本中分离病原菌菌株，研究分生孢子及致病力差异。结果表明，18个菌株中YY187的产孢时间最短，22℃黑暗条件下燕麦琼脂培养基培养7 d即可产孢；菌株YY187和NY206产生的分生孢子器数量显著多于其它菌株；采用孢子悬浮液接种花生叶片，供试所有菌株均可造成叶片发病，其中菌株LY128和YY187在供试18个菌株中致病力相对较强。因此，综合评价产孢效率更高、致病力更强的本地菌株YY187适合作为花生抗网斑病研究的材料。     

山茶炭疽菌对茶树的致病性及其对杀菌剂的敏感性研究

山茶炭疽菌（Colletotrichum camelliae）是引起茶树叶部病害的优势致病菌。从中国13个产茶省的茶树病叶中分离获得65株炭疽菌菌株,基于多基因系统发育树,结合菌落和分生孢子形态特征,对分离菌株进行鉴定,结果表明,分离菌株均属于山茶炭疽菌。采用离体叶片接种的方法进行致病力测试,结果显示,所有菌株均能导致茶树叶片发病,但不同菌株间的致病力存在显著差异。YCW1180、YCW1331、YCW1382、YCW1387、YCW1419、YCW1443、YCW1451、YCW1453、YCW1454、YCW1461、YCW1613和YCW2134等12个菌株致病力显著强于其他菌株,菌株YCW1378致病力最弱。采用菌落生长速率法测试65个山茶炭疽菌菌株对25%吡唑醚菌酯的敏感性,药剂敏感性结果显示,25%吡唑醚菌酯对菌株YCW1436的菌丝生长抑制率仅为36.00%,抑菌效果最差,而对大部分菌株的抑制率高于70.00%,表明大部分菌株对该药剂高度敏感。显微镜观察结果显示,25%吡唑醚菌酯影响了山茶炭疽菌分生孢子的萌发。以上研究结果为有效防治茶树叶部病害提供了理论基础。     

橡胶树新发茎杆溃疡病病原鉴定及其生物学特性测定

2014至2015年,对海南省橡胶树主栽区的病害普查中发现1种新的茎杆溃疡病。该病在海南省部分农场发生严重,为害中小龄胶树和开割树的茎杆,造成树皮隆起并呈褐色,严重时流出白色胶乳,对橡胶树的长势和产胶量造成重要影响。通过形态观察、rDNA-ITS序列比较和聚类分析结果表明,分离自不同地点的8株病原菌均为茄类镰刀菌(Fusarium solani)。菌株HHNBS01的生物学特性表明,CMA、PDA和Czapek培养基中,以蔗糖和硝酸钾为碳源和氮源,30℃,pH6为菌落生长最适条件,15℃,pH6,完全黑暗,D-木糖和草酸铵分别为碳源和氮源是产孢最适条件,30℃,pH7为分生孢子萌发最适条件,而菌丝和分生孢子的致死温度均为60℃10 min。     

花生抗旱性与生理生态指标关系的研究

用干旱棚分别在正常供水与水分胁迫条件下，研究了抗旱性不同的4个花生品种叶片相对含水量、失水率、萎蔫指数、株高、根干重，座果的变化与品种抗旱性的关系，并用隶属函数进行抗旱性综合分析，结果表明：4个花生品种各项抗旱性生理及形态指标的变化与抗旱指数的相关性大小次序是：根干重、叶片萎蔫指数、叶片失水率、叶片相对含水量、座果率、株高。品种综合抗旱性强弱为：远杂9307、远杂9102、豫花6号、白沙1016。     

剑麻离体叶片接种剑麻茎腐病菌方法的研究

以剑麻茎腐病菌为接种病原菌，以H．11648离体叶片为接种对象，研究了5种接种方法、6种分生孢子浓度以及不同温度条件下和植株不同部位叶片的接种效果。结果表明，叶面打孔法或切口滴10^8／ml的分生孢子悬浮液接种效果最好。采用该方法，20℃-42℃才能接种成功。30℃～35℃是接种后的最适培养温度；中部叶片的接种效果好于下部叶片，上部叶片接种效果最差。     

拮抗香蕉枯萎病镰刀菌木霉菌株的分离筛选

香蕉枯萎病是由尖孢镰刀菌古巴专化型引起的,目前尚缺乏有效的防治方法,木霉菌是重要的植物病害防治菌,广泛分布于自然界。木霉菌具有广泛的适应性,能杀伤多种重要的植物病原菌且作用机制多种多样。笔者从广东湛江、海南儋州等地152份土样中分离出330株木霉,通过对峙法对木霉菌进行体外拮抗作用测定及评价,选出10株对尖孢镰刀菌有较好拮抗效果的木霉菌;并测定无菌土中木霉与病原菌的种群动态变化,结果表明木霉在土壤中对病原菌有一定的抑制作用。     

番茄、茄子和辣椒枯萎病原菌分子鉴定及其致病性测定

调查了福建省番茄、茄子和辣椒3种主要茄科枯萎病的发生与症状情况,通过常规分离,依据Booth鉴定和分子鉴定相结合的方法,对从这3种茄科作物上采集的40个菌株进行了鉴定。结果表明,40株镰刀菌中有35株属于尖孢镰刀菌,占总数的87.5％;3株为串珠镰刀菌,另2株为茄形镰刀菌。进一步利用Koch氏法则进行菌株致病性检测,结果表明,尖孢镰刀菌是本研究中所采集的番茄、茄子和辣椒病株的病原菌,而3株串珠镰刀菌和2株茄形镰刀菌均不造成寄主植物发病。     

香蕉内生细菌分离、活性评价及数量分布

从香蕉健康植株的根、假茎、叶柄、叶片等组织中分离获得386份内生细菌分离物。通过体外活性评价筛选出对9种常见的植物病原真菌具有一定抗性的内生细菌分离物28份,占总分离物的7.25%,其中对香蕉枯萎病菌抑制率达到80%~100%的分离物有9份。初步测定结果表明,这些分离物的基础生物学特性的分类地位初步归属为不动杆菌属(Acinetobacter)、芽孢杆菌属(Bacillus)、短杆菌属(Brevibacterium)、产碱杆菌属(Alcaligenes)和伯克霍尔德菌属(Burkholderia)细菌。9份分离物与病原真菌菌丝体对峙培养镜检结果表明,供试的9种病原真菌菌丝体均出现不同程度的肿胀与断裂。内生细菌在香蕉植株体内的数量分布分析发现,内生细菌在根、假茎、叶柄、叶片等组织中的数量分布呈递减趋势。     

Pathogenicity ofFusarium oxysporum f.sp.tuberosi isolates from tubers and potato plants

Summary A study was carried out on eightF. oxysporum f.sp.tuberosi isolates from northern Italy. Six were from rotten tubers and two were from weak, but not wilted plants from seed-growing areas. Greenhouse and laboratory tests were done to assess the pathogenicity and potential spread of the fungus within the plant. All isolates caused dry rot on inoculated tubers. They were also able to infect vascular tissues through roots and leaves, but none caused wilt, stemend rot or other symptoms.F. oxysporum is often not visible in the field, but its propagules can increase under favourable conditions. It may therefore become a potential danger during potato storage.     

香蕉枯萎病菌pacC基因的克隆与序列分析

采用PCR和RT-PCR方法扩增尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f sp.cubense,FOC)1号和4号生理小种的pacC基因(FOC1-pacC,FOC4-pacC),对FOC1-pacC和FOC4-pacC相似序列进行搜索和比对,以及对基因编码蛋白进行结构预测,发现FOC1-pacC和FOC4-pacC开放阅读框分别为1 863、1 905 bp,编码634、620个氨基酸,2个小种之间基因序列和氨基酸序列差异明显,FOC1-pacC比FOC4-pacC缺少1个基因片段,FOC-pacC与其相似序列有显著差异,比对缺少2个基因片段;初入侵转录组表达分析说明,2生理小种pacC基因在小种侵染不同品种香蕉过程中表达有差异,FOC1-pacC基因只在粉蕉中检测到表达,而FOC4-pacC则在粉蕉和香蕉中都检测到表达,但在粉蕉中的表达量明显高于香蕉。     

Comparison of inoculation methods for field studies on varietal response to verticillium wilt of potatoes

Verticillium albo-atrum, cultured on potato dextrose agar plates or on sterilized wheat kernels, was used to incite disease in field studies. Immediately prior to planting, seed potatoes were dipped in a spore/mycelium suspension that was prepared from agar plate cultures. A second inoculation treatment involved placing infested wheat kernels under the potato seed at planting time. Both inoculation methods resulted in verticillium wilt development. However, the inoculum suspension dip method resulted in slightly greater incidences of verticillium wilt than did the infested wheat method. Inoculation by means of a suspension dip immediately after cutting the seed resulted in more wilted plants than when seed was inoculated 24 hours or 7 days after cutting. The spore/mycelium suspension dip method is now routinely used for field studies on disease susceptibility or resistance in potato cultivars.     

培养基营养成分对香蕉枯萎病尖孢镰刀菌生长的影响

通过对香蕉枯萎病发病株病组织的分离、纯化,得到香蕉枯萎病病原菌--尖镰孢菌古巴专化型[Fusarium oxysporum f.sp.cubense(E.F.Smith)Snyder et Hansen].该病原菌在不同pH值培养基上培养4 d后,发现尖孢镰刀菌菌落在pH值4.0～9.0范围内均可生长,pH值为6.0～7.0时最适,菌落直径平均在3.7～3.9 cm之间.尖孢镰刀菌在不例营养成分的培养基上培养,结果表明,N源对尖孢镰刀菌菌丝的生长影响大于C源.生长到第6天时,全糖型培养基产孢量最大,且小型分生孢子的产孢量也最大,可使香蕉苗发病率达到100%.而大型分生孢子的产生最佳培养基为低氮型培养基.     

2种樱属植物对水湿胁迫生理响应研究

对2种樱属植物福建山樱花和樱桃幼苗进行人工模拟水湿胁迫,在不同处理时间取其根系和叶片测定相对电导率、叶绿素、可溶性蛋白、脯氨酸、超氧物歧化酶和丙二醛等生理指标。结果显示:樱桃在第6天即表现出萎蔫状态,而福建山樱花在第8天才出现萎蔫;从生理指标测定来看,2种植物根部各生理指标均低于叶片,其中福建山樱花可溶性蛋白降解速度比樱桃慢,而且超氧化物歧化酶(SOD)活性和脯氨酸含量更高;从两者地上部与地下部生理指标变化的同步性来看,福建山樱花也优于樱桃。由此判断,福建山樱花抗水湿能力大于樱桃。     

Factors affecting sporulation of Pestalotiopsis disseminata causing grey blight disease of Persea bombycina Kost., the primary food plant of muga silkworm

The effect of inoculum concentrations, temperature, relative humidity (RH), incubation period and leaf age on sporulation of Pestalotiopsis disseminata and the development of grey blight disease on som (Persea bombycina Kost.) were studied in controlled environmental conditions. These factors had a significant role on spore germination and germ tube development of P. disseminata, the causal organism of the disease. The optimum inoculum concentration of the pathogen were found to be 1 × 10⁷ spores ml⁻¹ for maximum infection percentage. A nonlinear relationship was found between temperature and germination percentage of spores at a given relative humidity (RH). However, 25 °C (±2) temperature and 70% RH were the optimum parameters for better spore germination of the pathogen. Young leaves (leaf no. 1–4 from the top) were more susceptible for development of the diseases in a controlled environment than the older leaves. The germination of spores started at 8 h of incubation and gradually increased up to 20 h (maximum). The disease severity was favoured in the optimum range of temperature (25 ± 2 °C) and RH (70%) which had a combined effect. These epidemiological parameters could help in the management practices of the disease.     

一株拮抗香蕉枯萎病菌的链霉菌分离和鉴定

从海南温泉中分离到1株对香蕉枯萎病病原菌4号小种有强拮抗作用的链霉菌菌株HW1,对该菌株进行了形态特征、培养特征、生理生化特征及16S rDNA序列分析。并对该菌株和香蕉枯萎病病原菌4号小种在土壤中进行了不同温度下的共培养试验。结果表明,其在PDA培养基上,内生菌丝无横隔、不断裂;孢子圆形,簇聚在气生菌丝上。在PDA培养基上,菌落生长开始为白色,培养成熟后,气丝逐渐由白色变灰,最后因为产生孢子变为褐色,并可产黄色可溶色素。以16S rDNA序列为基础构建了菌株HW1的系统发育树,其与模式链霉菌株的16S rDNA序列的同源性为99%。初步将该菌株鉴定为Streptomyces costaricanus。HW1菌株和香蕉枯萎病病原菌4号小种在土壤中的共培养试验表明,HW1菌株在45℃温度的生长环境中,表现出对香蕉枯萎病病原菌较好的抗性。