鸡产蛋下降综合征的研究及防制

ＥＤＳ７６是近几年传入我国引起蛋鸡产蛋下降的主要原因。研究结果表明：该病由腺病毒引起，可通过垂直和多种水平途径传播，对２６－４３周龄产蛋鸡影响最大，只产薄壳蛋、无壳蛋，卵巢和输卵管是该病侵害的主要部位，从鸡体分离鉴定的３个毒株经血清学交叉试验证明，与ＥＤＳ７６ＡＶ１２７标准株密切相关，而与其它禽腺病毒无关，用ＡＶ１２７特异性单抗建立的荚心ＥＬＩＳＡ特异，灵敏。筛选的Ｈ９１－１毒株制备的油乳剂灭活苗     

ND─EDS二联油乳剂灭活苗的研制

用鸡新城疫（ＮＤ）克隆３０毒株接种鸡胚，鸡产蛋下降综合症（ＥＤＳ）ＢＨ９１毒株接种鸭胚，分别收获ＮＤ鸡胚尿囊液毒和ＥＤＳ鸭胚尿囊液毒，用福尔马林灭活，二者混合后，加入１０号白油油相中，制成ＮＤ─ＥＤＳ二联油乳剂灭活苗。该苗接种在产前母鸡，可使接种鸡获得对ＮＤ和ＥＤＳ强毒攻击坚强的抵抗力。该苗安全、稳定，４℃保存期至少可达１２个月以上，适用于基层推广使用。     

ND-EDS-76异源二联油苗田间试验研究

鸭源ＮＤＶ－Ｄ１０毒株与ＥＤＳ－７６ＧＣ２每株混合接种同一鸭胚，培养９６ ｈ收集尿囊液，制成ＮＤ－ＥＤＳ－７６异源二联油乳剂灭活疫苗，然后与普通二联油乳剂灭活疫苗接种同一鸡群，在 １０，２０，３０，１８０，３６０ ｄ分别检测抗体滴度并进行比较，结果差异不显著。在免疫后 ３０，１８０，３６０ ｄ随机取鸡各 ６０只为 １组，用 ＮＤＶ－Ｆ４８Ｅ９和 ＥＤＳ－７６ＧＣ２强毒株进行攻毒保护试验并进行比较，结果表明两种疫苗在 ３０，１８０ ｄ免疫保护率均为 １００％，３６０ ｄ对ＮＤ和ＥＤＳ－７６的免疫保护率分别为９２％和８７％以上．对临床２００万只开产前１２０日龄左右蛋鸡群免疫接种ＮＤ－ＥＤＳ－７６异源二联油乳剂灭活疫苗，可有效地保护整个产蛋期对ＮＤ和ＥＤＳ－７６强毒的攻击。     

鸡新城疫和减蛋综合症异源二联油乳剂灭活疫苗的研制

将鸭源鸡新城疫（ＮＤ）病毒Ｄ１０株和鸡减蛋综合症（ＥＤＳ－７６）病毒ＧＣ２株同时接种于同一鸭胚内复制，增殖 ９６ ｈ收取尿囊液，用甲醛灭活后加白油佐剂制成 ＮＤ和 ＥＤＳ－７６异源二联油乳剂灭活疫苗。简化了生产工艺、降低了制苗成本。经试用表明，该疫苗可有效地预防ＮＤ和ＥＤＳ－７６的发生。     

鸡产蛋下降综合症油乳剂灭活苗的研制与应用

将ＥＤＳ７６的１２７株腺病毒接种到鸭胚尿囊腔内，制备抗原液，经福尔马林灭活与油相佐剂乳化制备成ＥＤＳ７６油乳剂灭活苗。通过对不同日龄鸡群的安全性、免疫性及保存期测定，灭活苗以双倍以上使用剂量肌肉或皮下注射１～６０日龄雏鸡，安全性良好；甩１、１／２和１／４个使用剂量分别免疫２月龄雏鸡，免疫后２１～２８天，血清中血凝抑制（ＨＩ）抗体平均滴度达到高峰，均可达到２７以上，其免疫原性均达到效力检验的标准要求；灭活苗在室温２０～２５℃保存２个月，４～８℃保存７个月时，ＨＩ抗体平均滴度仍保持相当高的水平。     

鸡减蛋综合征,新城疫二联灭活油的免疫比较试验及临床应用

本课题组研制的ＥＤＳ／ＮＤ二联灭活苗乳剂苗，免疫接种后产生的ＥＤＳ和ＮＤ的抗体效价分别达到国外进口的ＥＤＳ灭活苗和ＮＤ灭活苗的水平。     

EDS_（76）灭活油乳剂疫苗的乳化工艺研究

本研究是在研制成ＥＤＳ７６油乳灭活苗的基础上．用高压匀浆机代替原先使用的高速均装机来大批量生产疫苗．系统地研究了整个工艺流程中质量控制的各种因素，确定了水相和油相比例、乳化剂和稳定剂的ＨＬＢ值和乳化压力这３个技术参数．结果表明３３％的水相、复合乳化剂的ＨＬＢ值为７．１和在２０Ｐ压力下初次乳化。再在３０Ｐ压力下匀乳的工艺流程能获得稳定性好、粘度低、质量可靠的ＥＤＳ７６油乳剂灭活疫苗，适宜于生产实际使用．     

ND—EDS-76异源二联油乳剂疫苗与普通二联疫苗田间对比试验研究

鸭源ＮＤＶ—Ｄ１０毒株与ＥＤＳ－７６ＧＣ２毒株混合接种同一鸭胚,培养 ９６ ｈ后收集尿囊液,制成ＮＤ—ＥＤＳ－７６异源二联油乳剂灭活疫苗。然后与普通二联油乳剂灭活疫苗接种同一鸡群,在 １０ ｄ、２０ ｄ、３０ ｄ、１８０ ｄ、３６０ ｄ分别检测抗体滴度并进行比较,结果差异不显著。在免疫后３０ ｄ、１８０ ｄ、３６０ ｄ,随机取鸡各 ６０只为一组,用 ＮＤＶ—Ｆ４８Ｅ９和 ＥＤＳ－７６ＧＣ２强毒株进行攻毒保护试验并进行比较,结果两种疫苗在 ３０ ｄ、１８０ ｄ免疫保护率均为 １００％,３６０ ｄ对 ＮＤ和 ＥＤＳ－７６的免疫保护率分别为９２ ％和８７ ％以上,差异不显著。对开产前１２０日龄左右蛋鸡群免疫接种ＮＤ—ＥＤＳ－７６异源二联油乳剂灭活疫苗,可有效地保护整个产蛋期对ＮＤ和ＥＤＳ－７６自然强毒的攻击,是一种理想的生物防疫制剂。     

鸡产蛋下降综合征的研究及防制

ＥＤＳ_（７６）是近几年传人我国引起蛋鸡产蛋量严重下降的主要原因。研究结果表明：该病由腺病毒引起，可通过垂直和多种水平途径传播，对２６～４３周龄产蛋鸡影响最大，只产薄壳蛋、无壳蛋，卵巢和输卵管是该病侵害的主要部位。从鸡体分离鉴定的３个毒株经血清学交叉试验证明，与ＥＤＳ＿（７６）ＡＶ＿（１２７）标准株密切相关，而与其它禽腺病毒无关。用ＡＶ＿（１２７）特异性单抗建立的荚心ＥＬＩＳＡ特异、灵敏．筛选的Ｈ＿（９１－１）毒株制备的袖乳剂灭活苗在江苏大面积使用后有效地控制了该病的流行。     

鸡减蛋综合症——新城疫二联苗的研制与应用

用减蛋综合症（ＥＤＳ‘７６）ＡＶ－１２７和新城疫（ＮＤ）Ｌａｓｏｔａ毒株，分别接鸭胚和鸡胚，收获尿囊液，福尔马林灭活，用白油佐剂乳化成二联灭活疫苗。本苗接种产量鸡后１４天产生ＮＤ和ＥＤＳ’７６抗体，１个月持续升高，而ＮＤＨＩ抗体产生时间略早。二联苗物单苗有相同的免疫效果，两者无干扰性，免疫剂量以０．５ｍｌ／只为宜。接种后９个月ＨＩ抗体仍维持在较高水平，并能经受强毒的入击，疫苗在４－８℃条件下贮存１     

鸡减蛋综合征、新城疫二联灭活油的免疫比较试验及临床应用

本课题组研制的ＥＤＳ／ＮＤ二联灭活苗乳剂苗，免疫接种后产生的ＥＤＳ和ＮＤ的抗体效价分别达到国外进口的ＥＤＳ灭活苗和ＮＤ灭活苗的水平。用本课题组研制的ＥＤＳ／ＮＤ二联灭活苗、Ｉｎｔｅｒｖｅｔ公司和ＴＡＤ公司的ＥＤＳ／ＮＤＭ联灭活苗接种２０周龄的蛋鸡后，ＥＤＳ抗体和ＮＤ抗体的增长曲线无明显差异。在协作场免疫接种了１９群商品蛋鸡，共２０．６万羽，ＨＩ抗体抽测结果为ＥＤＳ抗体峰值达８．０ｌｏｇ２～９．３ｌｏｇ２，ＮＤ抗华峰值达９．０ｌｏｇ２～１０．２ｌｏｇ２，无一群免疫鸡发生副反应，产蛋率正常，有效地控制了ＥＤＳ和ＮＤ的流行。     

减蛋综合征油佐剂灭活疫苗的研制

减蛋综合征（ＥＤＳ）病毒南京毒株（ＮＥ４）在鸭胚中增殖后，用甲醛灭活，加入７号白油，制成ＥＤＳ油佐剂灭活疫苗，抗原量为每头份５０００血凝（ＨＡ）单位。经１２００万只鸡的试用表明，该苗能够有效地预防ＥＤＳ的发生。     

鸡霍乱组织灭活苗的研究

选择鸡源多杀性巴氏杆菌C481强毒株(血清1型)接种鸡胚,收集死胚组织,分别以油乳剂、蜂胶和铝胶为佐剂,按一定比例配制成含1.5×1010个/ml巴氏杆菌的灭活苗。经试验证明,该疫苗安全、有效,其中油乳剂灭活苗的保护期和蜂胶灭活苗的保护期相当,但蜂胶灭活苗的抗体水平上升速度比油乳剂苗快且保护率高;铝胶苗的效果不及蜂胶苗和油苗。     

蜂胶免疫佐剂的研究

用蜂胶作为免疫佐剂制成鸡新城疫（ＮＤ）蜂胶灭活苗，与含有相同抗原的油乳剂苗、氢氧化铝胶苗和无佐剂灭活苗，对鸡进行ＮＤ免疫效果比较。结果表明，蜂胶苗的抗体上升速度比油乳剂苗快。与氢氧化铝苗和无估剂灭活苗相比，蜂胶苗的抗体水平较高、维持时间较长，经安全试验、证明蜂胶无毒、无刺激性。是一种值得研制和开发的新型免疫佐剂。     

蜂胶免疫佐剂的研究

用蜂胶作为免疫佐剂制成鸡新城疫（ＮＤ）蜂胶灭活苗，与含有相同抗原的油乳剂苗、氢氧化铝胶苗和无佐剂灭活苗，对鸡进行ＮＤ免疫效果比较。结果表明，蜂胶苗的抗体上升速度比油乳剂苗快；与氢氧化铝苗和无估剂灭活苗相比，蜂胶苗的抗体水平较高、维持时间较长。经安全试验、证明蜂胶无毒、无刺激性。是一种值得研制和开发的新型免疫佐剂。     

鸡新城疫──减蛋综合症二联油乳剂灭活疫苗研制新工艺及应用

用高压均质机制备的ＮＤ－ＥＤＳ７６二联油乳剂灭活疫苗,经３０００ｒｐｍ,１０ｍｉｎ离心不破乳,３７℃恒温保存３２ｄ以上未破乳,粘度为３～４Ｓｅｃ;用该油乳剂灭活疫苗接种商品蛋鸡,每羽经肌肉注射０．５ｍＬ,接种１４ｄ后即可产生足够保护力的中和抗体,２个月时间抗体可达高峰;接种５０周后,ＮＤＨＩ抗体效价仍维持在８．２ｌｏｇ２,ＥＤＳ７６ＨＩ抗体效价７．０ｌｏｇ２。在４～８℃冰箱中保存,有效期在一年以上,经８０万头份中间试验证明,该疫苗对外来品种鸡和地方品种鸡同样有效,能有效控制ＮＤ和ＥＤＳ７６两种疾病。     

鸡传染性支气管炎及大肠杆菌病二联灭活油乳苗的研制和应用

用本地分离株及标准株筛选出４个ＩＢＶ强毒株（呼吸型和肾型）及７个至Ｅ．ｃｏｌｉ强毒菌株（血清型为Ｏ１，Ｏ２，Ｏ７８）作为制苗基础毒株和菌株，并加入发病鸡场的自家分离株，作为制苗毒种和菌种，并将制成灭活的尿囊液和菌液以及油佐剂配成鸡传染性支气管炎及大肠杆菌病二联灭活油甩苗。试验证明：该油苗可使鸡产生坚强的免疫力，二免后１０个月攻毒保护率达１００％，ＩＢＶ抗体的ＨＩ价为１：２５６，Ｅ．ｃｏｌｉ抗体直接     

传染性法氏囊病病毒主要结构蛋白基因及其表达产物免疫学试验

用传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）ＶＰ２、ＶＰ３重组质粒ＤＮＡ及其大肠杆菌表达产物全菌裂解液油乳剂苗肌肉注射１４日龄仔鸡,免疫后１４和２１ｄ测定血清ＥＬＩＳＡ抗体效价,并于免疫后２１ｄ用ＩＢＤＶ南京野毒株攻击。结果显示：（１）ＶＰ２基因重组质粒ＤＮＡ除可诱导产生较高的ＥＬＩＳＡ抗体外,还可明显降低仔鸡ＩＢＤＶ攻击所引起的急性发病率和死亡率;（２）ＶＰ３－ＧＳＴ融合蛋白表达产物全菌裂解液可较早地诱导产     

Dot—ELISA在鸡IBD免疫检测及诊断中的应用研究

利用鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）细胞适应株在鸡胚ＣＥＦ单层培养物上增殖后经超速冷冻离心制备抗原，以国产ＮＣ膜为载体建立了检测与诊断鸡ＩＢＤ的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ方法。经与ＡＧＰ、ＶＮ、ＥＬＩＳＡ等方法进行比较，表明本方法灵敏，快速，简易，特异性强，重复性良好。对ＩＢＤ抗体的检测结果表明，采用首次以ＩＢＤ弱毒苗与灭能油乳剂苗同时免疫，再次用油乳剂苗加强免疫的接种程序，可获得显著而持久的抗体水平，带     

Dot－ELISA在鸡IBD免疫检测及诊断中的应用研究

利用鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）细胞适应株在鸡胚ＣＥＦ单层培养物上增殖后经超速冷冻离心制备抗原，以国产ＮＣ膜为载体建立了检测与诊断鸡ＩＢＤ的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ方法。经与ＡＧＰ、ＶＮ、ＥＬＩＳＡ等方法进行比较，表明本方法灵敏，快速，简易，特异性强，重复性良好。对ＩＢＤ免疫抗体的检测结果表明，采用首次以ＩＢＤ弱毒苗与灭能油乳剂苗同时免疫、再次用油乳剂苗加强免疫的接种程序，可获得显著而持久的抗体水平；带母源抗体（ＭＡｂ）的雏鸡于２１日龄首次免疫，效果良好；带ＭＡｂ的鸡胚于１８日胚龄接种ＩＢＤ弱毒苗，雏鸡出壳后可在较长时间内获得良好的保护。