月季对根结线虫病抗性遗传研究

针对月季栽培过程中出现的最严重的根结线虫开门见山防治问题，开展了月季对根结线虫抗性遗传研究，研究结果如下：（1）对常用的4种月季砧木R.multiflora K1,K2,CE63及R.indica对左面种常见根结线虫即南方根结线虫（Meloidogyne incognita)、瓜哇根结线虫（M.javanica)、花生根结线虫（M.arenaria)及北方根结线虫（M.hapla)的抗性进行了测定，得出只有北方根结线虫能侵染月季，其余3种不能侵染。（2）根结指数与对数转化后的每克根中雌虫数、雄虫数、3-4龄幼虫数之和、2龄幼虫数、卵数、成虫有为3-4继幼虫数之总和、2龄幼虫与卵数之总和均呈线性相关关系，因此根结指数是进行抗性评价的可靠、简单及实用的指标，抗性划分标准如下：根结指数0.0-1.0，抗病；1.0-2.0，中等抗病；2.0-3.0，感病；3.0-4.0，比较感病；4.0-5.0，高度感病。（3）以根结指数为指标，通过对杂交所得74个子代的抗性评价试验表明；在2抗性亲本所得12个子代中，各子代抗性水平存在抗性分化，说明抗病基因不晨由单一显性基因控制；在所有的62个抗性亲本与感病亲本的杂交子代中，59个子代均比抗病亲本感病，表明抗病基因由隐性基因控制，因此，提出了月季对根结线虫的抗性遗传可能由2个基因决定。     

烟草品种对常见根结线虫抗性鉴定的研究

对19个烟草品种对南方根结线虫1号小种（Meloidogyne incognita race 1）、花生根结线虫2号小种（M.arenaria race 2）和爪哇根结线虫（M.javanica）的抗性进行了鉴定。通过聚类分析和方差分析,结果表明：NC95、K326（U）、G28、V2、3027、黔所2号、317、K326（Y）、3040、4072对南方根结线虫1号小种抗病,中烟14、温格尔、SC58、红大、Coker48、4048、3074、NC82、871则感病;供试的19个品种均对花生根结线虫2号小种、爪哇根结线虫感病,其中871对花生根结线虫2号小种、317对爪哇根结线虫具有一定的耐病性。在抗性鉴定的基础上提出了烟草品种抗根结线虫鉴定方法规范化的建议。     

南方根结线虫侵染不同抗性烟草品种的组织病理学观察

利用烟草抗病品种K326和感病品种红花大金元,研究了南方根结线虫侵染过程中的组织病理学变化。结果显示:接种后3 d,2个品种都能形成巨型细胞,且巨型细胞的数量和形态没有显著差异。接种后15 d,感病品种中巨型细胞正常发育,而抗病品种中巨型细胞出现空泡。接种25 d,抗病品种巨型细胞发生崩解。表明不同抗性品种巨型细胞的形态变化与品种的抗性有关。     

海南省番石榴根结线虫病病原的种类鉴定及其寄主范围的测试

对源自海南省3地侵染番石榴的9个根结线虫群体进行了形态观察和同工酶分析,对4个代表性群体在10种常见经济作物15个品种上的繁殖力进行了测试.同工酶鉴定结果表明,病原线虫为象耳豆根结线虫(Meloidogyne enterolobii).生物测试发现或证实:携带Mi基因的抗性番茄以及菜豆、豇豆、茄子、黄瓜、西瓜、辣椒、烟草为供试象耳豆根结线虫群体的高度适宜寄主,大豆为低度适宜寄主,棉花为非寄主.寄主范围的测试结果提示,象耳豆根结线虫可潜在地对农业生产造成巨大的经济损失.     

海南省番石榴根结线虫病病原的种类鉴定及其寄主范围的测试

对源白海南省3地侵染番石榴的9个根结线虫群体进行了形态观察和同工酶分析，对4个代表性群体在10种常见经济作物15个品种上的繁殖力进行了测试。同工酶鉴定结果表明，病原线虫为象耳豆根结线虫（Meloidogyne enterolobii）。生物测试发现或证实：携带Mi基因的抗性番茄以及菜豆、豇豆、茄子、黄瓜、西瓜、辣椒、烟草为供试象耳豆根结线虫群体的高度适宜寄主，大豆为低度适宜寄主，棉花为非寄主。寄主范围的测试结果提示，象耳豆根结线虫可潜在地对农业生产造成巨大的经济损失。     

番茄砧木对南方根结线虫抗性鉴定

 【目的】研究确定准确鉴定评价番茄砧木抗南方根结线虫侵染能力的方法,筛选抗性砧木材料。【方法】通过测定16个盆栽番茄砧木幼苗接种南方根结线虫50 d时的相对生长量及相关抗病指标,利用系统聚类分析和隶属函数运算相结合的方法进行综合分析。【结果】南方根结线虫侵染对不同番茄砧木幼苗各器官相对生长量、相关抗病指标及其变异系数的影响显著不同,其中生长量的变异系数以相对根鲜质量较大,为20.20%,相对茎粗较小,仅6.22%。采用相对生长量及抗病指标分别进行系统聚类的结果与利用根结指数的聚类结果一致,但与病情指数的聚类结果存在些微差异。根据综合指标隶属函数运算,确定了供试番茄砧木抗南方根结线虫的顺序。【结论】采用多指标综合聚类分析较单一指标聚类分析更能准确划分番茄砧木抗根结线虫的类群,通过聚类分析和隶属函数相结合的方法,确定Bパリア为免疫材料,BESUPA、坂砧2号、砧木606、砧木002、砧木001、TMS-150、サポ-ト、MIKADO、砧木401为抗病材料,アンカ-T为耐病材料,坂砧1号、北京1号为感病材料,128、BF兴津101、LS-89为高感材料。     

云南植物根结线虫种类调查与鉴定

 1986年以来,从云南省的昆明市及10个地区(州)约30个县(市)的60种(或品种)作物上采集到150个根结线虫种群,根据形态特征与鉴别寄主反应试验,对141个种群进行了种与寄主小种的鉴定,绝大多数为4种常见根结线虫,优势种为南方根结线虫,其余依次为爪哇根结线虫,北方根结线虫和花生根结线虫,南方根结线虫中,优势小种为1号小种,其次为2号小种和3号小种,未发现4号小种。花生根结线虫中,鉴定出2号小种,未发现1号小种。     

番茄品种Mi基因对根结线虫抗性的检测

采用酶切扩增多态性序列(Cleaved amplified polymorphic sequences,CAPS)方法对国内市场上的26个番茄Solanum lycopersicum品种进行Mi基因检测.结果表明,特璐丝、红丽、TRS-401、仙客1号和仙客5号5个品种含有纯合体Mi基因,其余品种均不含Mi基因.进一步用南方根结线虫Meloidogyne incognita和象耳豆根结线虫M.enterolobii对这26个品种进行接种试验,计算根结率和根结指数.结果发现,南方根结线虫和象耳豆根结线虫侵染不含Mi基因的21个番茄品种的根结率为100%,根结指数为100;而含Mi基因的5个番茄品种对南方根结线虫的根结率为1%~5%,根结指数为0~4,而对象耳豆根结线虫的根结率为26.7%~45.6%,根结指数为56~64.表明含Mi基因的番茄高抗南方根结线虫,但对象耳豆根结线虫感病或比较感病.     

5个油茶物种对南方根结线虫的抗性研究

采用人工接种的方法,研究了普通油茶、博白大果油茶、广宁红花油茶、香花油茶和陆川油茶对南方根结线虫的抗性.结果表明:普通油茶易感南方根结线虫,广宁红花油茶、香花油茶和陆川油茶中抗南方根结线虫,博白大果油茶高抗南方根结线虫;接种60 d内调查,南方根结线虫侵入博白大果油茶后不能完成其生活史,而普通油茶在28 d内就能完成生活史并繁育后代;接种根结线虫后对博白大果油茶、广宁红花油茶、香花油茶和陆川油茶的生长没有显著性影响,但抑制普通油茶茎、叶的生长的同时促进其侧根的生长.     

烟草品种对南方根结线虫抗性鉴定及抗性指标筛选

为了综合评价烟草抗南方根结线虫的能力,筛选出抗病指标,以20份烟草品种为试验材料,采用盆栽培育烟草幼苗人工接种南方根结线虫的方法,测量供试烟草品种在接种60 d后相对生长量和有关抗性指标,利用隶属函数和聚类分析相结合的方法对试验数据进行分析。结果表明,20个烟草品种受到南方根结线虫侵染后各器官的相对生长量、有关抗性指标均有差异。相对于其他指标,根结指数、抗性综合指标的聚类结果最相似,与相对生长量综合指标的聚类结果差异性也较小;通过隶属函数和聚类分析相结合的方法对烟草品种进行综合鉴定的结果与其他研究结果相符。综合表明,根结指数可基本反映烟草品种抗南方根结线虫的水平。     

陕南蔬菜根结线虫群体的mtDNA-PCR-RFLP快速种类鉴定

[目的]运用mtDNA-PCR-RFLP技术快速鉴定陕南蔬菜根结线虫,为根结线虫的有效防治提供参考。[方法]在形态学、同工酶鉴定的基础上,运用mtDNA-PCR-RFLP电泳技术,对采自陕南3市18县区的37个为害蔬菜的根结线虫种群进行了鉴定。[结果]在所鉴定的种群中,32个种群为南方根结线虫（Meloidogyne incognita）,2个种群为花生根结线虫（M.arenaria）,1个种群为北方根结线虫（M.hapla）,1个种群为南方根结线虫和花生根结线虫的混合群体,1个种群为南方根结线虫和北方根结线虫的混合群体;其中南方根结线虫是陕南为害蔬菜的主要根结线虫。[结论]形态学方法应仅作为辅助鉴定手段,而同工酶表型和mtDNA-PCR-RFLP分析均可作为快速而可靠地鉴定中国常见根结线虫种类的方法。     

30种作物根结线虫病的病原鉴定

从广东省和海南省的１３个县市的３０种作物上，采集了根结线虫病标本５２个，对其病原采用形态特征观察，鉴别寄主反应，电镜扫描和染色体数目等方法进行分类鉴定。其中，柑桔、花生、甘蔗（湛江）、节瓜（新兴）的根结线虫病的病原属于花生根结线虫１号小种（ＭｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅａｒｅｎａｒｉａＲａｃｅ１）；大蕉、香蕉、茄、茶、胡椒，大红花根结线虫病的病原为爪哇根结线虫（Ｍ．ｊａ－ｖａｎｉｃａ）；葡萄、番石榴、木瓜、丝瓜、南瓜、黄瓜、番茄、辣椒、菜豆、蕹莱、橡胶、益智、甘薯和木棉等根结线虫病的病原为南方根结线虫（Ｍ．ｉｎｃｏｇｎｉｔａ）。在广东以南方根结线虫为优势种。南方根结线虫中优势小种为２号小种。调查中未发现北方根结线虫（Ｍ．ｈａｐｌａ）。     

中国南方地区作物根结线虫种和小种的鉴定

对采自中国南方地区34种作物的根结线虫83个种群进行了单卵块纯化和培养，在形态学研究的基础上，结合利用全自动快速水平电泳系统测定了雌虫的酯酶和苹果酸脱氢酶，鉴定出南方根结线虫(Meloidogyne incognita)、爪哇根结线虫(M.javanica)、花生根结线虫(M.arenaria)和番禺根结线虫(M.panyuensis)。其中南方根结线虫是最主要的根结线虫。鉴别寄主试验表明，南方根结线虫的优势小种是1号小种。     

根结线虫rDNA-ITS片段的克隆与序列分析

用PCR方法扩增了16个不同地区和不同作物上根结线虫群体的ITS片段,并进行了克隆、序列测定分析和比对。结果表明:采自北京密云苦瓜和豇豆、北京通州月季以及山东胶州、烟台、潍坊花生上的6个根结线虫群体为北方根结线虫(Meloidogyne hapla),其ITS片段大小为772 bp;来自云南番茄、成都黄瓜和海南石榴上的3个根结线虫群体为爪哇根结线虫(M.javanica),其ITS片段大小为767 bp;来自河北廊坊番茄、北京海淀番茄和浙江黄瓜上的3个根结线虫则属于花生根结线虫(M.arenaria),其ITS片段大小为768 bp;而安徽和县、宿州的番茄以及太和桔梗上的3个根结线虫则属于南方根结线虫(M.incognita),其ITS片段大小为766 bp;海南胡椒上的根结线虫群体为番禺根结线虫(M.panyuensis),ITS片段大小为869 bp。     

陕南蔬菜根结线虫种类的同工酶酶谱鉴定

在形态学鉴定的基础上,运用同工酶电泳技术,对采自陕南3市18县区的37个为害蔬菜的根结线虫种群进行鉴定。结果表明:在所鉴定的种群中,32个种群为南方根结线虫(Meloidogyne incognita),2个种群为花生根结线虫(M.arenaria),1个种群为北方根结线虫(M.hapla),1个种群为南方根结线虫和花生根结线虫的混合群体,1个种群为南方根结线虫和北方根结线虫的混合群体;其中南方根结线虫是陕南为害蔬菜的主要根结线虫。     

萨克拉普奇尼亚菌串孢变种对南方根结线虫卵和雌虫的致病性

根结线虫卵和雌虫的寄生真菌对根结线虫病害生物防治具有很大应用潜力。本项研究采用分离自北方根结线虫卵的萨克拉普奇尼亚菌串孢变种Pochonia suchlasporia var.catenata CFCC84965,测定其对南方根结线虫卵和雌虫的致病性。被寄生的卵内充满菌丝且胚胎破坏,胚前发育期的卵对菌丝的侵染敏感,即将孵化出2龄幼虫的卵很少被寄生。菌丝环绕于被寄生卵周围形成致密菌网和侵染钉,卵壳皱缩和凹陷,有时可见到菌丝上形成瓶梗细胞和分生孢子;卵胚胎发育停止和幼虫发育畸形,卵内容物聚集变态,卵壳破裂,内容物外渗。萨克拉普奇尼亚菌串孢变种CFCC84965对卵的寄生率为65.18%。该菌对南方根结线虫雌虫具有致病性,菌丝接触雌虫体壁形成侵染钉,穿透体壁,虫体皱缩变形。该菌对根结线虫雌虫的寄生致病是首次报道。     

东北山樱桃对三种主要根结线虫的抗性评价

为评价东北山樱桃抗根结线虫种质资源价值,以实生钵苗为试材,采用人工接种等方法,研究了其对南方根结线虫,北方根结线虫和花生根结线虫的抗性。结果表明:接种后30d,南方根结线虫的侵入率为0.40%,根内雌成虫数量占接种总量的0.16%,依据抗性评价标准判定东北山樱桃高抗南方根结线虫;北方根结线虫的侵入率为1.20%,根内雌成虫数量占接种总量的0.80%,依据抗性评价标准判定东北山樱桃高抗北方根结线虫;花生根结线虫的侵入率为0.82%,根内雌成虫数量占接种总量的0.60%,依据抗性评价标准判定东北山樱桃高抗花生根结线虫。其对3种根结线虫的抗性均存在显著的株间分离现象,均分离为免疫、高度抗病、中度抗病3种类型,对南方根结线虫免疫、高度抗病、中度抗病型植株分别占群体总数的16.0%、80.0%和4.0%;对北方根结线虫免疫、高度抗病、中度抗病型植株分别占群体总数的2.0%、68.0%和30.0%;对花生根结线虫免疫、高度抗病、中度抗病型植株分别占群体总数的6.0%、78.0%和16.0%,东北山樱桃是优异的抗南方、北方和花生根结线虫砧木和种质资源。     

海南岛冬季蔬菜根结线虫病的发生及其防治研究

海南冬季蔬菜中所有瓜类、茄果类和豆类均可感染根结线虫病，病害严重程度与寄主作物连作年限呈正相关，连作两年以上地块株发病率高达100％，根结指数为3.2。经鉴定，病原线虫优势种群为南方根结线虫，还有爪哇根结线虫和工化生根结线虫行复合侵染。化学防治试验结果表明，10％IKI－1145G能有效地控制二龄幼虫的群体数量和根结形成，10％益舒宝G次之。     

利用性反转特性大量获取四种常见根结线虫雄虫

 对接种4种常见根结线虫的寄主植物番茄适时控制浇水,使番茄出现间断的暂时萎蔫,侵入番茄的寄生性二龄幼虫生活环境变劣,能促使根结线虫寄生性二龄幼虫的性别向雄性方向分化,而获得大量雄虫。试验结果,控水处理的番茄平均每株分离到的雄虫量,北方根结线虫47.0条,花生根结线虫43.8条,南方根结线虫37.6条,爪哇根结线虫30.6条;对照植株最多仅为2.0条。t测验表明,控水与否获得的雄虫量有显着差异(p=0.05);LSR法(q测验)分析表明,控水处理的番茄上产生的雄虫量,除北方根结线虫与花生根结线虫之间无差异外,其余各种相互间均有差异显着性(p=0.01)。