绿针假单胞菌HL5-4对番茄灰霉菌的抑制活性及其定殖能力

为探讨绿针假单胞菌HL5-4对番茄灰霉病的生防潜力,通过对峙培养和孢子萌发试验测定其对灰葡萄孢菌的抑制活性;进行离体试验和苗期试验测定其对番茄灰霉病的防治效果;采用平板稀释法测定其在番茄果实和叶片的定殖能力;并根据形态特征、生理生化特性及16SrDNA序列同源性对其进行鉴定。结果表明:HL5-4显著抑制灰葡萄孢菌的菌丝生长和分生孢子萌发,萌发抑制率为70.74%;在离体试验中,对番茄果实和叶片灰霉病的防治效果分别达到72.36%和59.85%,在盆栽试验中,对番茄苗期灰霉病的防治效果为62.88%;HL5-4在番茄果实和叶片保持一定的定殖密度,处理7d时能保持10~4和10~3 cfu·g~(-1)以上;HL5-4菌株鉴定为绿针假单胞菌(Pseudomonas choloeaphtis)。     

番茄灰霉病生防菌株TL1的分离、鉴定及其生防能力分析

为了筛选对番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)具有拮抗作用的菌株,通过平板对峙法从西藏高原土壤中分离筛选到一株具有较好拮抗作用的菌株TL1。形态学观察、生理生化分析以及分子生物学鉴定结果表明,该菌株为马氏类芽孢杆菌(Paenibacillus maysiensis),并具有固氮和溶磷作用。TL1在平板上能显著抑制灰霉病菌菌丝生长,抑菌率为74.32%,且该菌产生的挥发性物质呈现显著抑菌活性。进一步平板抑菌试验表明,TL1菌株对褐斑病菌等6种病原真菌均具有显著抑菌活性,其中对烟草赤星病菌(Alternaria alternata)的抑制率最高(73.48%),对黄瓜褐斑病菌(Corynespora cassiicola)的抑制率最低(57.37%)。TL1菌株能够在番茄果实上定殖并抑制由灰霉病菌引起的腐烂,且可以显著提高番茄种子的萌发率以及促进番茄幼苗生长。     

羧甲基壳聚糖处理对采后蓝莓抗灰霉病的影响

以"灿烂"蓝莓为试材,研究不同浓度的羧甲基壳聚糖处理对采后果实灰霉病、抗病防御酶活性和果实品质的影响,以期为羧甲基壳聚糖在果实采后病害防治、贮藏保鲜应用提供参考依据。结果表明:1.5%和2.0%羧甲基壳聚糖处理能有效抑制采后蓝莓灰霉病发生、诱导果实抗病能力且维持蓝莓果实采后营养品质。体外培养条件下,羧甲基壳聚糖处理可明显抑制灰霉菌落生长、抑制体外灰霉孢子的萌发及芽孢管的生长,2.0%羧甲基壳聚糖抑制效果较显著(P0.05)。对不同浓度羧甲基壳聚糖浸泡处理的蓝莓果实接种灰霉孢子悬浮液,发现果实发病率随羧甲基壳聚糖浓度的升高而降低,羧甲基壳聚糖有效抑制了采后灰霉病的发生。常温贮藏条件下,不同浓度羧甲基壳聚糖处理显著(P0.05)提高了果实多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、β-1,3-葡聚糖酶(GLU)和几丁质酶(CHT)的活性,贮藏后期,2%羧甲基壳聚糖诱导抗病性效果最好。此外,羧甲基壳聚糖处理能明显保持贮藏期蓝莓果实品质,果实失重率显著下降,糖酸含量的损失明显减小,可溶性固形物含量维持较高水平。     

2株枯草芽孢杆菌对梨轮纹病菌的室内抑制作用研究

研究了2株枯草芽孢杆菌Sf-19和Sf-28对梨轮纹病菌的室内抑制作用,结果表明,枯草芽孢杆菌的不同浓度处理对梨轮纹病菌菌丝生长、孢子萌发及果实上梨轮纹病菌均有一定的抑制作用。枯草芽孢杆菌Sf-19培养原液对梨轮纹病菌的综合抑制效果最佳,对梨轮纹病菌菌丝生长的平板抑制率为87.33%,孢子萌发的抑制率为97%,果实上梨轮纹病菌的抑制效果研究分为保护(Ⅰ)和治疗(Ⅱ)两部分试验进行,Sf-19培养原液保护试验(Ⅰ)中对梨轮纹病菌的抑制率为71.97%,治疗试验(Ⅱ)为64.92%;生防菌Sf-28培养原液对梨轮纹病菌的综合抑制效果次之,对梨轮纹病菌菌丝生长的平板抑制率为87%,孢子萌发的抑制率为80%,Sf-28培养原液对果实上梨轮纹病菌的抑制率保护试验(Ⅰ)为64.54%,治疗试验(Ⅱ)为59.21%。2株枯草芽孢杆菌均随着稀释倍数的增大防治效果降低,综合比较枯草芽孢杆菌Sf-19、Sf-28不同浓度处理的效果好于对照生防菌株Bs-916。     

拮抗菌A02代谢产物对几种果树病害的活性

以北京市农林科学院植物保护保环境保护研究所自主分离筛选的利迪链霉菌A02为供试菌株,采用离体生物测定法评价了其对葡萄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、桃褐腐病菌(Monilinia ructicola)和枣青霉病菌(Penicillium sp.)3种果树病原真菌的室内毒力,通过小区试验测定了其对葡萄霜霉病的田间防效.结果表明:A02活性产物对葡萄灰霉病菌、桃褐腐病菌和枣青霉病菌均具有强毒力,对其菌丝生长的抑制中浓度分别为1.3696、8.1115和7.4989mg/L,最低抑菌浓度均在30 ng/L以下;对葡萄霜霉病的田间小区防效达95.7％,显著高于对照生物农药10％宝丽安可湿性粉剂和1％多抗霉素水剂.     

污水中西葫芦灰霉病拮抗细菌的分离与应用

从污水中分离得到89株细菌,筛选出对西葫芦灰霉病菌(Botrytis cinerea)有拮抗作用的生防菌株50株,占分离菌株的56.2%,其中拮抗菌株6株,占分离菌株的6.7%.同时测试了拮抗菌株及其无菌培养滤液对西葫芦灰霉病菌菌落生长的作用.结果表明:拮抗菌株对西葫芦灰霉病菌菌落生长有很强的抑制作用,抑制率在67.04%～78.51%之间,其中XTB-37的抑菌带高达12.33 mm;拮抗菌株的无菌培养滤液对灰霉菌生长的抑制率在44.94%～67.42%之间,与抑菌带的大小成正比.     

野葛花乙醇提取物对植物病原真菌的抑制作用研究

以黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum)、稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)、柑橘青霉菌(Penicillium digitatum)、番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、梨黑星病菌(Venturia nashicola)5种植物病原真菌为供试菌种,采用牛津杯法,研究了野葛花乙醇提取物的抑菌活性及其对植物病原真菌的抑菌效果.结果表明:野葛花的乙醇提取物对这5种植物病原真菌均有不同程度的抑制作用;随着提取物浓度的增大,其对植物病原真菌的抑菌效果逐渐增强,当达到某一值后,抑制效果又随其浓度的增加逐渐减弱.另外,黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum)、稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)、柑橘青霉菌(Penicillium digitatum)、番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、梨黑星病菌(Venturia nashicola)的最适野葛花乙醇提取物抑菌质量浓度分别为0.1250、0.2500、0.2500、0.2500、0.5000 g/mL,其中番茄灰霉病菌的最低抑菌质量浓度应大于0.0625g/mL.因此,野葛花的乙醇提取物在抑制植物真菌性病害方面具有广阔的开发利用前景,可作为新型植物源生物农药的良好剂型.     

采前茉莉酸甲酯(MeJA)处理对梨果实抗病性的影响

【目的】研究采前Me JA浸泡处理对梨果实抗病性的影响。【方法】将梨黑斑病病原菌链格孢菌(Alternaria alternata)接种在含有不同浓度MeJA的PDA(potato dextrose agar)培养基上并在1周后测量其病斑直径,筛选出能有效抑制黑斑病病原菌生长的MeJA浓度;以‘新梨7号’为试材,在果实成熟前30 d每隔10 d用有效浓度的MeJA浸泡处理1次,清水浸泡为对照;采后用梨黑斑病病原菌链格孢菌孢子悬浮液对果实进行损伤接种,发病后测定病斑直径以及抗病相关酶活性。【结果】7 mmol·L~(-1)的MeJA能有效抑制黑斑病病原菌的生长,其病斑直径比对照降低了91%。果实损伤接种后第5天开始,对照果实发病率为85%且病斑直径持续增加,采前MeJA浸泡处理的果实一直未发病。采前MeJA浸泡处理提高了梨果实中过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化氢酶(CAT)、β-1,3-葡聚糖酶(GLU)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、几丁质酶(CHT)等活性。【结论】MeJA可以抑制黑斑病病菌的生长,通过采前MeJA浸泡处理能提高梨果实抗病相关酶的活性,激活果实抗病防御系统,抑制成熟梨果实发病。     

抗香蕉枯萎病菌的卢娜林瑞链霉菌的分离及防效鉴定

为获得具有广谱抑菌活性的拮抗菌株,对海南多年连茬的健康香蕉园土壤进行微生物分离,并以香蕉枯萎病菌4号小种(Fusarium oxysporum f.sp.cubense Race 4)等9种病原菌为靶标菌株,采用平板对峙法、含药介质法、薄层层析法等对拮抗菌的抑菌活性进行评价,根据形态特征、培养性状、生理生化特征、细胞壁组成和16S rDNA序列分析对其进行鉴定。共分离得到放线菌25株,拮抗放线菌8株,其中B-03菌株对香蕉枯萎病菌4号生理小种菌丝生长和孢子萌发抑制率分别为85.43%和80.14%,对香蕉长形叶斑病菌等9种病原菌具有广谱抗性,菌丝生长抑制率、孢子萌发抑制率可达48.34%~85.43%和38.43%~80.14%。经鉴定该菌株为卢娜林瑞链霉菌(Streptomyces lunalinharesii),盆栽试验表明该菌株发酵液对香蕉枯萎病的防效达72.72%,具有良好的应用潜力。     

新型抗菌肽对番茄灰霉病的防治效果与机理的研究

以番茄、抗菌肽和番茄灰霉菌为试验材料,采用平板试验和番茄盆栽植株试验,研究了抗菌肽CB和D20I-39对灰霉菌(Botrytis cinerea)的抑菌效果及抑菌机制、抗菌肽对番茄灰霉病防效及对番茄叶片的抗病、抗氧化指标的影响,以期为抗菌肽防治番茄灰霉病提供参考依据。结果表明：CB和D20I-39均能抑制灰霉菌菌丝的生长和孢子萌发且具剂量依赖效应,并造成灰霉菌胞内核酸和蛋白质的泄露;CB和D20I-39处理后灰霉菌菌丝呈扁平状、皱缩变细,且随浓度增大菌丝皱褶越发严重甚至出现破裂。番茄盆栽试验显示,预防试验的CB和D20I-39防治效果分别为96.37%±0.13%和83.41%±0.17%;治疗试验的CB和D20I-39的防治效果则分别为14.86%±0.35%和59.74%±0.23%。外源喷施抗菌肽能够提高苯丙氨酸解氨酶(PAL)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和游离脯氨酸(Pro)含量,降低丙二醛(MDA)含量。新型抗菌肽CB和D20I-39通过破坏细胞膜抑制灰霉菌,降低番茄灰霉病发病率和病情指数。抗菌肽CB和D20I-39对番茄灰霉病具有良好的防治效果。     

辣椒疫霉菌拮抗细菌L14-3的生防潜力及其鉴定

为探讨L14-3菌株对辣椒疫病的生防潜力,采用皿内对峙试验和孢子萌发试验,测定其对辣椒疫霉菌的抑制活性,通过盆栽试验验证其对辣椒疫病的防治效果,并根据形态特征、生理生化特性和16S rDNA序列同源性分析对其进行鉴定.结果表明,L14-3菌株对辣椒疫霉菌的菌丝生长、游动孢子囊的形成、游动孢子的释放和休止孢子的萌发均具有...     

细辛精油对5种黄瓜病害致病菌的离体抑菌活性

采用生长速率法和孢子萌发法测定了细辛精油对引起黄瓜病害的5种病原菌的菌丝生长和孢子萌发的影响。结果表明,对灰霉病菌菌丝生长和孢子萌发的抑制效果均较好,其次是对褐斑病菌、枯萎病菌和叶斑病菌;而对根腐病菌菌丝生长和孢子萌发的抑制效果均较差。对于同一种病原菌来说,细辛精油对其孢子萌发的抑制效果和对其菌丝生长的抑制效果存在差异,如灰霉病菌和根腐病菌,对其孢子萌发的抑制效果好于对其菌丝生长的抑制效果。     

细辛精油对5种黄瓜病害致病菌的离体抑菌活性

采用生长速率法和孢子萌发法测定了细辛精油对引起黄瓜病害的5种病原菌的菌丝生长和孢子萌发的影响.结果表明,对灰霉病菌菌丝生长和袍子萌发的抑制效果均较好,其次是对褐斑病菌、枯萎病菌和叶斑病菌;而对根腐病菌菌丝生长和孢子萌发的抑制效果均较差.对于同一种病原菌来说,细辛精油对其孢子萌发的抑制效果和对其菌丝生长的抑制效果存在差异,如灰霉病菌和根腐病菌,对其孢子萌发的抑制效果好于对其茵丝生长的抑制效果.     

洋葱油和大蒜提取物对灰霉菌的作用效果

研究了洋葱油和大蒜提取物对灰霉菌分生孢子萌发、菌丝生长的抑制作用以及对草莓灰霉病的防治效果。结果表明,浓度为0.5 g?L-1的洋葱油和200 g?L-1的大蒜提取物即能抑制分生孢子的萌发;处理24 h后,洋葱油和大蒜提取物对灰霉菌菌丝生长有效抑制浓度分别为0.5和100 g?L-1,抑制率分别为89.3 %和85.9 %,48 h后有效抑制浓度分别为2.0和200 g?L-1,抑制率分别为90.5 %和85.6 %。然而在草莓灰霉病防治试验中,洋葱油和大蒜提取物都未表现出较好的防治效果。而化学杀菌剂Seibear能够抑制灰霉菌菌丝生长,并且对草莓灰霉病的防治效果较好,但是对灰霉菌分生孢子萌发的抑制作用不如洋葱油和大蒜提取物。     

采后葡萄果实营养对灰霉菌致病性的影响

以采后巨峰葡萄果实（Vitis vinifera L.cv.Kyooho）为试材,从葡萄的营养、pH、贮藏期生理状态以及环境温度对灰霉菌（Botrytis cinerea）生长发育和致病性影响方面进行了研究。结果表明,葡萄果实的营养和pH值适于灰霉菌的菌丝生长和分生孢子萌发。在葡萄营养培养基上灰霉菌与葡萄的其它采后致病菌,如链格孢菌（Alternaria alternata）,镰刀菌（Fusarium sp.）、芽枝霉（Cladosporium sp.）和粉红单端孢菌（Trichotecium roseum）相比具有显著的生长优势。在pH 3.46的葡萄果汁上,灰霉菌分生孢子在0～35 ℃的温度范围内都能萌发, 最适萌发温度为15～24 ℃,0 ℃培养48 h后分生孢子仍然有8.7%的萌发率。灰霉菌分生孢子在低温下萌发需要较低的pH条件, 在pH 4的葡萄果汁中,4 ℃培养72 h后萌发率可达90%以上,高于pH 5～7的果汁。葡萄果实贮藏期的生理衰老状态与灰霉菌的侵染力存在着时序关系,即灰霉菌的侵染力随着葡萄果实贮藏期的延长而加强。受灰霉菌侵染后的葡萄果实产生过氧化物酶（POD）和几丁质酶的活性均低于链格孢菌诱导的活性。     

氟嘧菌酯对番茄灰霉菌的毒力测定和田间防效

以氟嘧菌酯和番茄灰霉病菌为试材,采用菌丝生长速率法和番茄果实活体接种法,研究了25%氟嘧菌酯EC对番茄灰霉菌的影响。结果表明:氟嘧菌酯对番茄灰霉病菌菌丝生长抑制的EC50值为0.4415μg/mL。氟嘧菌酯也具有一定的保护活性,抑制菌丝侵染番茄果实;25%氟嘧菌酯EC 1 200倍液,2次施药后30d和60d对番茄灰霉病的防效为91.03%和86.25%。综合来看,25%氟嘧菌酯EC对番茄灰霉病的防效较好,值得推广应用。     

多粘类芽孢杆菌HK18-8对辣椒炭疽病菌的抑制作用及其定殖能力

从健康的化香(Platycarya strobilacea Sieb. et Zucc.)根际土壤中分离获得生防菌HK18-8,为探究其对辣椒炭疽病的生防潜力,通过对峙培养和孢子萌发试验发现,HK18-8显著抑制短尖刺盘孢(Collectotrichum acutatum)的菌丝生长和分生孢子萌发,其抑菌带达到10mm,孢子萌发抑制率为70.15%;进行离体辣椒果实接种试验表明,HK18-8菌悬液对辣椒炭疽病的防治效果达到88.58%,其预防效果高于治疗效果,HK18-8的发酵液和菌悬液的防病效果显著;采用平板稀释法测定其在辣椒果实的定殖能力,处理9 d时仍能保持10~6 cfu·g~(-1)以上;根据形态特征、生理生化特性及16S rRNA序列同源性,HK18-8菌株鉴定为多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)。     

香蕉枯萎病拮抗放线菌的分离鉴定及抑菌机理分析

为丰富香蕉枯萎病生防菌资源,探究其抑菌机理,从润楠Machilus pingii根系土壤中分离筛选对香蕉枯萎病菌具有拮抗作用的放线菌,基于16S rRNA序列进化分析和生理生化特征,鉴定其种属。利用激光共聚焦显微镜评测盆栽试验的防控效果,并通过扫描电镜、透射电镜分析其对枯萎病菌孢子形态结构及超微结构的影响。结果表明,试验筛选出1株拮抗效果较好的放线菌,鉴定为链霉菌属,命名为JRGG-11。该菌对枯萎病菌4号生理小种(Foc 4)的抑菌率为(80.48±1.49)%,发酵液的抑菌率为(58.77±1.31)%,发酵液对Foc 4的盆栽防控效果为83.10%。菌株JRGG-11提取物对Foc 4菌丝生长抑制的EC_(50)为18.70μg/mL,当用4×EC_(50)处理时,Foc 4菌丝形态和细胞完整性被严重破坏,孢子萌发完全被抑制。说明链霉菌JRGG-11具有较好的生防潜能。     

番茄灰霉病菌作用方式不同木霉菌REMI突变株生物学特性的研究

以木霉菌出发菌株T21及作用方式不同木霉菌REMI突变株为试材,研究了对番茄灰霉病菌作用方式不同木霉菌突变株间孢子萌发和产孢能力的差异以及对不同温度、pH值的适应性和对碳氮源的利用能力.结果表明:突变株Ttrm68孢子萌发率最高,为98％;突变株Ttrm25产孢能力最强,极显著高于出发菌株T21.不同木霉菌突变株对温度适应性有所改变,菌株Ttrm68表现出耐高温,在温度高达40℃时仍能生长.不同木霉菌突变株在不同pH值下的培养性状和产孢情况有所改变,菌株Ttrm68在碱性条件下能产厚垣孢子.不同木霉菌突变株对不同碳氮源的利用能力改变较大,菌株Ttrm68能够充分利用各种碳氮源,生长速度最快.     

番茄灰霉病拮抗菌TB-12菌株发酵条件优化及其生防效果

以灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea Pers.)为指示菌,采用单因素试验与正交实验相结合的方式,对TB-12菌株发酵培养基组成及培养条件进行优化,以提高番茄灰霉病拮抗菌Bacillus velezensis TB-12菌株的抑菌效果,并通过盆栽试验考察了TB-12菌株对番茄灰霉病的防治效果,为今后该菌剂生产工艺条件的进一步确定及其防治应用的开展奠定相应的基础。结果表明:TB-12菌株的最佳发酵培养基组合为乳糖2%,酪蛋白胨4%,MgSO_4·7H_2O 0.1%,KCl 0.05%;最佳培养条件为接种量10%,装瓶量50 mL,初始pH 8,发酵时间60h,培养温度30℃,摇床转速180r·min~(-1)。与采用基础发酵培养基相比,优化后TB-12菌株对灰葡萄孢菌的抑制效果增加了69.4%。盆栽试验表明,优化后TB-12菌株发酵上清液对番茄灰霉病的预防效果达到69.2%,治疗效果达到58.2%,分别提高了32.6%和19.5%。TB-12菌株对番茄灰霉病有良好的防治效果。