萱草新品种‘大眼睛’的组织培养技术研究

本研究以萱草新品种‘大眼睛’的茎尖为外植体,采用植物组织培养技术,建立一套完善的萱草快繁技术体系。以MS为基本培养基,添加了不同浓度的6-BA和NAA等植物植物生长调节剂,探讨了不同培养条件对‘大眼睛’启动培养、继代增殖培养和生根培养的影响。结果表明:适合‘大眼睛’的最佳启动培养基是MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L,不定芽分化率达76.7%,40d不定芽平均生长量为2.90cm。最佳增殖培养基为MS+6-BA4.0mg/L+NAA1.0mg/L,平均增殖芽数为4.97个。培养基1/2MS+IBA0.25mg/L有利于试管苗根系的生长,移栽成活率达100%。     

矾根‘莓果’不定芽诱导与快速繁殖

【目的】为了筛选出适于矾根‘莓果’组培快繁的最佳培养基配方,并初步建立其离体繁殖技术体系,从而给矾根种质保存和分子育种提供技术支撑。【方法】分别以矾根‘莓果’的叶片和叶柄为试材,研究了不同浓度的植物生长调节剂对其不定芽诱导率、增殖和生根的影响情况:先分别将叶片和叶柄接种于添加了不同浓度TDZ或6-BA的MS培养基上,55 d后统计其诱导率和出芽数;然后将诱导的丛生芽转移至添加了不同浓度6-BA的MS培养基上进行增殖培养,30 d后观察并记录其增殖系数和生长状况;再将试管苗置于添加了不同浓度的NAA和IBA的1/2MS培养基上进行生根培养,30 d后观测其生根率、生根数和根长。【结果】在适宜的培养基上,矾根叶片和叶柄的不定芽诱导率分别达到86.11%和91.67%,其平均出芽数分别为3.20和2.73个;其丛生芽的增殖系数达到3.97,且植株生长快,长势健壮;其试管苗的生根率达到95.0%,试管苗的生长健壮,且其单株平均生根数最高,达到47.6条。【结论】建立了高效的矾根离体培养体系:矾根叶片和叶柄不定芽诱导的最适培养基均为MS+1.0 mg/L的6-BA+0.1 mg/L的NAA;其丛生芽增殖的适宜培养基是MS+0.5 mg/L的6-BA;其试管苗生根的适宜培养基是1/2MS+1.0 mg/L的NAA。     

秋水仙素对离体培养辣木多倍体的诱导

以印度辣木栽培品种PKM(Moringa oleifera PKM-1)一年生植株茎尖为外植体,采用秋水仙素结合组织培养技术诱导多倍体的方法,研究了秋水仙素浓度及处理时间对诱导染色体倍性变异的影响,以及不同外源植物生长调节剂浓度对茎段培养的增殖影响,结果表明:辣木芽初代培养的最适培养基为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L,不定芽增殖的最佳培养基为MS+6-BA0.6mg/L,增殖系数为3.57,用0.1%秋水仙素处理24h左右,可诱导获得四倍体再生植株。     

非洲紫罗兰离体叶片不定芽的诱导及植株再生

为建立非洲紫罗兰的离体培养及植株再生体系,以叶片为外植体,采用MS作为基础培养基,试验研究了不同因子对不定芽诱导、增殖分化、生根壮苗和移栽的影响。结果表明:非洲紫罗兰诱导不定芽产生的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L,平均诱导率达100%,平均芽数4.80个;不定芽增殖的适宜培养基为MS+6-BA2.0mg/L+NAA 0.2mg/L,增殖系数为18.60;生根壮苗的最佳培养基为MS+NAA2.0mg/L,生根率为91.11%;在表土∶椰糠(V1∶V5)的混合基质上移栽,成活率达86.67%。该试验建立了非洲紫罗兰的离体再生体系,实现了开发利用及工厂化育苗。     

花叶玉簪组织培养技术的研究

以花叶玉簪‘France’,‘So Sweet’2个品种嫩芽为外植体进行的组织培养技术研究结果表明,以培养基MS+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA诱导不定芽萌发较为适宜;在培养基MS+3.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA上进行不定芽增殖,诱导效果最好,增殖系数分别达3.5和3.4,且植株生长健壮。最适宜的生根培养基为1/2MS+0.5mg/L NAA+1 g/L活性炭。     

刺槐组培快繁体系的建立

以刺槐(Robinia pseudoacacia Linn.)成熟种子为材料获得无菌苗,以MS或1/2MS为基本培养基附加不同浓度的植物激素,分别用无菌苗的叶片、茎段和上胚轴进行愈伤组织诱导、分化,芽增殖及不定根诱导。结果表明,诱导愈伤组织的最佳外植体为茎段和上胚轴,其最佳配方均为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;茎段产生的愈伤组织分化效果最佳,其最佳配方为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA(0.1～0.2)mg/L;芽增殖的最佳配方为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.2mg/L,增殖系数高达15.4;生根的最佳配方为1/2MS+IAA(0.5～1.0)mg/L,生根率达100%。移栽后植株生长良好,成活率达97%。     

巴西人参组培快繁体系的建立

以巴西人参带芽茎段为外植体,研究培养基、植物生长调节剂、移栽基质等对巴西人参组培快繁的影响。结果表明:最佳的初代诱导培养基为WPM+6-BA 0.4 mg/L+NAA 0.4 mg/L,初代芽诱导率达90.65%,每个外植体平均萌芽数为2.90个,平均芽高2.70 cm;最佳的继代增殖培养基为WPM+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,采用平铺的方式接种,培养25 d增殖系数可达5.21;最佳的生根培养基为1/2WPM+6-BA 0.3 mg/L+NAA 0.5 mg/L+PP333200,培养9.85 d即可生根,生根率高达98.85%,株平均生根数为18.87条;选择椰糠︰谷壳=4︰1(v/v)作为移栽基质,移栽成活率最高,可达98.67%。本研究建立的组培快繁技术体系可适用于巴西人参工厂化育苗生产,为巴西人参种苗快速繁殖提供技术保障。     

4个楸树品种组培快繁能力的比较研究

【目的】为探索出不同基因型楸树离体培养条件的差异,并分别建立相应的快繁技术体系,以期为今后楸树良种产业化生产和繁育提供理论借鉴和科学依据。【方法】以‘洛楸1号’‘朝霞楸’‘云朵楸’和‘鲁楸1号’4个楸树优良品种为试材,研究植物生长调节剂对诱导、增殖及生根培养的影响,并对4个品种的植株再生能力进行了比较。【结果】4个楸树品种对培养基所用的外源激素的要求不同,诱导阶段:6-BA质量浓度为1.0 mg/L时,‘洛楸1号’和‘鲁楸1号’的诱导率可达100%;6-BA质量浓度为2.0 mg/L时,‘朝霞楸’和‘云朵楸’的诱导率最高,依次为100%,81.82%。增殖阶段:同一增殖处理对楸树4个品种的增殖效果不同,1.0 mg/L 6-BA最适于‘洛楸1号’增殖,增殖系数为4.70;1.5 mg/L 6-BA最适于‘云朵楸’和‘鲁楸1号’增殖,增殖系数依次为3.38、5.68;6-BA 3.0 mg/L最适宜‘朝霞楸’增殖,增殖系数为5.49。生根阶段:相同质量浓度的NAA比IBA能更好地促进楸树4个品种生根,0.1 mg/L NAA最适合‘朝霞楸’生根,生根率为97.50%;0.2 mg/L NAA最适合‘云朵楸’和‘鲁楸1号’生根,生根率依次为76.67%、93.33%;0.4 mg/L NAA最适合‘洛楸1号’生根,生根率为96.97%。【结论】4个楸树品种在组织培养阶段对培养基所用的外源激素的要求不同,繁殖能力存在差异,应针对品种建立相应的快繁技术体系。     

不同激素处理对红火球紫薇组织培养的影响

以红火球紫薇（Lagerstroemia indica ‘Dynamite’）优树嫩枝为外植体,研究了不同浓度激素组合对红火球紫薇组培苗增殖及生根的影响。结果表明,最适腋芽诱导培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L-1+IBA 0.05 mg·L-1,诱导率达72 %。最佳增殖培养基为改良MS+6-BA 0.3 mg·L-1+IBA 0.02 mg·L-1,增殖系数可达4.6,芽高为3.8 cm;生根最适培养基为改良WPM+IBA 0.4 mg·L-1,生根率为98.5%,平均每株苗生根3～4条。炼苗后,移栽于泥炭土+珍珠岩（3:1,V/V）混合基质中,成活率为90%以上。     

丽格海棠组培快繁技术体系的建立及优化

对丽格海棠离体快繁的关键技术作了进一步的优化,利用种子萌发的无菌幼苗,建立了丽格海棠的快繁技术体系,主要结果有:1/2MS+3%蔗糖的培养基是丽格海棠种子萌发的最适培养基,萌发率达72.7%.16种不定芽发生的培养基中,MS+6-BA1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L最有利于幼叶不定芽的分化,不定芽数达10.6个/外植体;9种不定芽增殖培养基中,MS+6-BA0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L效果最优,诱导出的芽数多,增殖系数达6.8倍,且小苗健壮.在MS+IBA 0.2 mg/L+1.5%蔗糖为最佳生根培养基,根粗而壮.炼苗移栽后易成活,成活率达90%以上,上盆移栽后,3个月植株开出艳丽的花朵.     

玫瑰海棠的组织培养

以玫瑰海棠的幼嫩组织作外植体,在含不同植物激素的培养基上进行丛生芽的诱导、芽的继代增殖、芽生根与移栽研究,以快速获得再生植株.结果表明,丛生芽诱导培养基以MS＋6-BA 1.5 mg/L＋NAA 0.1 mg/L较好,诱导系数达12;增殖培养基以MS＋6-BA1.5 mg/L＋IAA 0.1 mg/L较好,增殖系数达11.3,且增殖芽生长好;生根培养基以1/2MS＋NAA 0.5 mg/L为最佳,生根率达100%,幼苗生长势旺.     

赛黑桦组织培养技术研究

以赛黑桦休眠枝萌发的腋芽为外植体,研究了不同种类和不同浓度植物激素对赛黑桦外植体诱导、愈伤组织诱导、不定芽增殖和生根等环节的影响。结果表明:(1)外植体芽的诱导培养以WPM+6-BA0.5 mg·L~(-1)+NAA0.1 mg·L~(-1)为最佳培养基;(2)愈伤组织诱导以WPM+6-BA1.0 mg·L~(-1)+NAA0.02 mg·L~(-1)为最佳培养基;(3)在芽增殖培养中以WPM+6-BA0.1 mg·L~(-1)+NAA0.02 mg·L~(-1)增殖效果最好,增殖系数达4.0;(4)生根培养以WPM+NAA0.05 mg·L~(-1)效果最佳,生根率91.7%;(5)生根苗移栽成活率达90%以上。     

‘玲珑’枫香叶片愈伤组织培养技术

【目的】‘玲珑’枫香是自主选育的观赏枫香新品种，具有叶片娇小（约为枫香的1/3）、生长旺盛、抗病虫害强和耐低温等特点，在园林观赏及绿化中具有较高的应用价值。由于受母株繁殖材料质量和数量限制，制约了扦插、嫁接等无性繁殖方式的规模化应用。开展‘玲珑’枫香的组织培养研究，以缩短快繁周期、提高繁殖系数。【方法】本试验选用‘玲珑’枫香叶片作为试验材料，设置4种培养基（WPM、MS、1/2MS和DCR）、4种激素种类（KT、TDZ、6-BA、ZT）和3种质量浓度的配比，比较了基本培养基及激素对愈伤组织增殖系数及相对生长速率的影响，观测了愈伤组织不定芽诱导及茎段伸长生长的情况。【结果】1）‘玲珑’枫香叶片愈伤组织增殖培养的最佳培养基为：DCR+0.2 mg/L TDZ+0.1 mg/L NAA+1 mg/L PVP，在30 d内，增殖系数达到15.10;2）愈伤组织不定芽诱导的最适培养基为：WPM+0.2 mg/L TDZ+0.1 mg/L KT+0.3 mg/L NAA，最高诱导率达76.67%;3）促进不定芽茎段生长的最适培养基为：WPM+1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA，其平均伸长量可达24.96 mm。【结论】1)DCR培养基是适合愈伤组织增殖的培养基，WPM对不定芽诱导及生长具有显著的影响。2)TDZ具有较高的活性，能够有效促进不定芽的诱导及其植株的生长。本研究初步建立了‘玲珑’枫香叶片愈伤组织增殖培养和不定芽诱导体系，繁殖周期短（30 d），繁殖系数高（15.10），为‘玲珑’枫香的规模化繁殖奠定了基础。     

黑松直接器官发生和植株再生的优化

以黑松无菌苗带子叶顶芽为外植体,从丛生芽的诱导、伸长、增殖及不定根形成等方面进一步优化直接器官发生和植株再生体系。结果表明:丛生芽诱导最佳组合为GD+3 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA+25 g/L蔗糖,丛生芽诱导率为95.7%,平均每外植体芽数为3.1;在DCR+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+20 g/L蔗糖的培养基上丛生芽伸长明显,添加0.5 g/L活性炭对丛生芽伸长也有明显的促进作用;在GD、1/2 GD、DCR 3种基本培养基中,DCR培养基较适合黑松增殖培养;根伸长阶段用珍珠岩培养基,提高了再生植株的根系质量和移栽成活率;基因型对移栽成活率有一定的影响,30-B 1个月移栽成活率最高达80%。     

铁线莲‘Avant-Garde’组织培养及快速繁殖试验

以铁线莲品种‘Avant-Garde’为材料,进行了植物组织培养和快速繁殖试验。通过比较试验发现,使用WPM作为基本培养基的效果优于MS培养基。在此基础上,采用全因子设计,研究不同质量浓度的植物生长调节剂对铁线莲具节茎段芽苗增殖和幼苗生根的影响,并对结果进行了方差分析和邓肯测验,发现较高质量浓度(≥2.0 mg/L)的6-BA会抑制芽苗的生长;幼苗生根率随着NAA质量浓度(0.05—0.15 mg/L)的升高而增加,随着IBA质量浓度(0.2—1.5 mg/L)的升高而减少。试验筛选得到芽增殖最佳培养基配方为WPM+0.1 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA,增殖系数为2.83;最佳生根培养基配方为1/2 WPM+0.15 mg/L NAA+0.2 mg/L IBA,生根率达到50%。     

84k杨叶片离体快繁体系的优化

以84k杨成熟叶片为外植体,诱导愈伤组织及不定芽的分化,经过壮苗、生根过程获得再生植株,建立了84k杨组织培养和快速繁殖技术新体系。结果表明:最佳叶片不定芽诱导培养基MS+6-BA 0.8mg/L+NAA0.1mg/L,诱导率100%,平均丛生芽数为15.06;最佳壮苗培养基为MS+IBA 0.6mg/L+6-BA 0.1mg/L;最佳生根适宜培养基为MS+IBA 0.6mg/L+NAA 0.4mg/L,生根率100%;将生长良好的组培苗移栽并扣瓶培养1周,成活率达97%。     

白榆组培快繁体系的建立

以速生白榆半木质化枝条为外植体,经过启动培养后,进行丛生芽诱导,再将丛生芽单株进行生根诱导,最终建立起成熟的速生白榆组培快繁体系。结果表明,外植体消毒处理的最佳组合为0.1%HgCI 7 min+75%酒精1 min,污染率为15%,成活率为85%;启动培养20 d,筛选出最适启动培养基为EM+0.5 mg/L 6-BA,萌芽率为88%;将腋芽接种到增殖培养基中进行丛生芽诱导,筛选出最佳增殖培养基为EM+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA+0.2 mg/L IAA,增殖系数达6.2;将丛生芽单株接种到生根培养基中进行生根诱导,筛选出最佳生根培养基为1/2 EM+0.1 mg/L IBA+0.2 mg/L IAA,生根率达95%;将生根瓶苗经过炼苗后,移栽到珍珠岩∶蛭石∶泥炭土=1∶1∶1的基质中,成活率达到90%以上。实验证明,较高的增殖系数、生根率和移栽成活率可以降低生产成本,进而实现工厂化育苗。     

盐桦芽器官离体培养与快繁技术的研究

研究了以盐桦的带芽茎段为外植体诱导丛生芽及植株再生的过程,并筛选出其最佳分化增殖培养基为MS 6-BA0.5 mg.L-1 NAA0.02 mg.L-1 蔗糖3.0% 琼脂0.6%。经过4~6周的培养,其增殖系数为5.8;最佳生根培养基为1/2MS IBA0.3 mg.L-1 蔗糖0.15% 琼脂0.6%,生根率为100%,平均根数5.7条。     

林下药用植物风柜斗草茎段组培快繁

以风柜斗草茎段为外植体,研究了其组培快繁技术。结果表明:外植体在0.1%HgCl_2溶液消毒10 min外植体成活率最高为65.56%;在MS培养基中添加2.0 mg/L 6-BA和0.1 mg/L NAA处理中诱导最佳为86.46%,且87%为多芽;最佳增殖配方为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,增殖倍数最大为6.32,芽苗生长正常;最佳根诱导配方为MS+0.2 mg/L IBA+0.1 mg/LNAA+0.1%AC,平均根数5.66,平均根长3.16 cm,根生长粗壮;在配以营养土∶黄泥土∶珍珠岩(3∶1∶1)的移栽基质中,移栽成活率最高为90.89%,植株长势好,叶色正常。可见,所建立的风柜斗草快繁体系可快速的繁殖,实现工厂化育苗。     

乌桕的组织培养及植株再生研究

以乌桕当年萌发的新梢上的芽为外植体,建立了乌桕的组织培养和再生体系。作者研究了不同种类和不同浓度生长调节物质对乌桕初代培养、增殖和生根的影响。结果表明:①初代培养以WPM+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L为最佳培养基。②在增殖培养中以WPM+6-BA1.0mg/L+GA30.5mg/L效果最好,其增殖系数达7.8。③生根培养以WPM+NAA0.05mg/L效果最好,其生根率100%。生根苗移栽时其成活率达85%。