苹果褪绿叶斑病毒PBM1(李假痘)毒株的提纯、抗血清制备及ELISA检测

 从木本植物分离的苹果褪绿叶斑病毒(apple chlorotic leaf spot virus,Trichovirus组)的PBM 1毒株能引起李品种"Hauszwetshe"的假痘病,将其繁殖在昆诺藜(Chenopodium quinoa)上。感染PBM 1毒株的昆诺藜叶组织用两次蔗糖梯度离心提纯。每100 g叶组织的病毒产量平均为1.68mg。在电镜下可观察到弯曲状病毒颗粒上的螺纹结构。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,病毒外壳蛋白的分子量为21.5 kDa。用提纯的病毒免疫家兔制备的抗血清和ELISA法,对感染PBM 1的昆诺藜叶片和桃花进行了灵敏的检测。     

昆明地区香石竹斑驳病毒的鉴定、提纯及抗血清制备

在昆明地区栽培的香石竹上发现了香石竹斑驳病毒,人工接种可局部侵染苋色藜、墙生藜、千日红及番杏,可系统侵染昆诺阿藜和美国石竹,分别造成褪绿斑、斑驳或坏死斑。经二轮ＰＥＧ（分子量６０００）沉淀,病毒提纯量约２２０ｍｇ／ｋｇ鲜组织。电镜观察病毒颗粒直径为２８ｎｍ,等轴对称。提纯物紫外扫描呈典型病毒核蛋白吸收峰,Ａ２６０／Ａ２８０值为１．５６。提纯病毒经４次免疫家兔,所得抗血清经试管沉淀测定效价为１∶４０９６,琼脂糖双扩散效价为１∶１０２４。     

侵染勿忘我花卉的蚕豆萎蔫病毒的鉴定

从勿忘我（Ｍｙｏｓｏｔｉｓｓｉｌｖａｔｉｃａ）上采集到１病株，接种昆诺阿藜，接种叶褪绿斑，系统顶枯，最后整株枯死。蚕豆接种叶呈黑色坏死斑，主茎变褐、全株萎蔫。矮牵牛接种叶褪绿斑，系统花叶。用诱捕修饰法制片，观察到病毒粒体球形，并在病毒粒体外面包被着一层抗体。琼脂双扩散试验呈阳性反应     

黄瓜花叶病毒运动蛋白基因及其缺失突变体在大肠杆菌中的表达和表达产物的纯化

利用ＣＭＶＦｎｙ 株系ＲＮＡ３ 全长ｃＤＮＡ 克隆, 构建了运动蛋白（ＭＰ） 基因５′端缺失突变体和３′端缺失突变体的原核表达载体。ＳＤＳ－ ＰＡＧＥ 分析表明, 经ＩＰＴＧ 诱导, ＭＰ 基因及其２ 种缺失突变体均能在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３） ｐＬｙｓＳ中高效表达。利用分离包含体的方法, 提纯了全长的及Ｃ 端缺失的ＭＰ。光密度扫描分析表明, 提纯产物的纯度达９６ ．６ ％ 。     

用A蛋白免疫电镜快速检测几种蔬菜作物的两种杆状病毒

应用Ａ蛋白免疫电镜技术对几种蔬菜作物的长叶车前草花叶病毒（ＲＭＶ）、烟草花叶病毒（ＴＭＶ）的检测比常规的电镜负染技术至少要灵敏近１０，０００倍，比普通的免疫电镜技术要灵敏１０～１００倍，抗血清浓度稀释至４００，０００倍，病毒粗提液稀释到１，０００，０００倍或病毒提纯液浓度为２．５×１０－７ｍｇ／ｍｌ时均能观察到病毒粒子。同时由于抗体分子能特异性地结合到病毒粒子表面，能够很容易地区分不同的病毒种类。应用此项技术作者检测了杭州地区几种常见的蔬菜病毒病，对大白菜（ＢｒａｓｉｃａｃａｍｐｅｓｔｒｉｓＬ．），蕃茄（ＬｙｃｏｐｅｒｓｉｃｕｍｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍＭｉｌ），榨菜（Ｂｒａｓｉｃａｊｕｎｃｅａｖａｒ．ｔｓａｔｓａｉＭａｏ），雪里（Ｂｒａｓｉｃａｊｕｎｃｅａｖａｒ．ｍｕｌｔｉｃｅｐｓＴｓｅｎｅｔＬｅｅ）等作物发病期的叶或果的浸提液用Ａ蛋白免疫电镜进行快速检测，结果在大白菜，番茄等病株上检测到较多的病毒粒子，且大多能被ＲＭＶ抗血清修饰，同时在番茄病株检测到的少量病毒粒子亦能被ＴＭＶ抗血清修饰，而榨菜及雪里等病株上检测到的病毒粒子很少能被ＲＭＶ及ＴＭＶ抗血清所修饰，另外，病毒粒子的含量以番茄病果中为最高，要比     

蒲桃实蝇和昆士兰面包果实蝇

蒲桃实蝇和昆士兰面包果实蝇梁广勤（广州动植物检疫局５１００１０）１蒲桃实蝇学名Ｂａｃｔｒｏｃｅｒａ（Ｂａｃｔｒｏｃｅｒａ）ａｌｂｉｓｔｒｉｇａｔａ（ｄｅＭｅｅｊｅｒｅ）异名ＤａｃｕｓａｌｂｉｓｔｒｉｇａｔｕｓｄｅＭｅｉｊｅｒｅＤ，（Ｂａｃｔｒｏｃｅｒ...     

中国棉铃虫核型多角体病毒VHA273毒株的克隆及基因组物理图谱

利用ＨＺ－ＩＢ３细胞对中国棉铃虫核型多角体病毒（ＨａＮＰＶ）ＶＨＡ２７３毒株进行了三轮空斑纯化，得到一个克隆株Ｈ９。电镜观察表明，此克隆株Ｈ９为单粒包埋核型多角体病毒（ＳＮＰＶ）。Ｈ９的基因组ＤＮＡ经限制性内切酶ＢｇｌＩ，ＨｉｎｄⅢ，ＰｓｔＩ，ＸｈｏＩ，ＥｃｏＲＩ，ＢａｍＨＩ，ＫｐｎＩ，ＢｓｔＥⅡ完全酶切后分别产生１０，１３，７，６，２７，１１，６和１２条片段，以λＤＮＡ／ＥｃｏＲＩ－ＨｉｎｄⅢ双酶切片段和ＨｉｇｈＭｏｌｅｃｕｌａｒＷｅｉｇｈｔＤＮＡＭａｒｋｅｒｓ为标准作工作曲线，求出了各限制性内切酶片段的大小。实验测得ＨａＮＰＶ－Ｈ９基因组的大小为１２９．９６ｋｂ，分子量为８５．７７×１０６，表明Ｈ９不同于其它已报道的ＨａＳＮＰＶ。利用单、双酶混合酶切分析和部分酶切分析，通过逻辑推导，完成了Ｈ９基因组ＤＮＡ的ＰｓｔＩ和ＸｈｏＩ各单酶解片段的重叠和延伸，最终构建了Ｈ９基因组ＤＮＡ的ＰｓｔＩ、ＸｈｏＩ的物理图谱     

绿僵菌研究的新进展

绿僵菌研究的新进展高松（中国农科院生物防治研究所，北京１０００８１）ＣＵＲＲＥＮＴＳＴＡＴＵＳＯＦＳＴＵＤＩＥＳＯＮＭＥＴＡＲＨＩＺＩＵＭＳＰＰ．ＧＡＯＳｏｎｇ（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｏｎｔｒｏｌ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏ...     

植物促生细菌诱导水稻对白叶枯病抗性的初步研究

水稻白叶枯病是使水稻遭受重大损失的主要病害。曾有利用白叶枯病原菌胞外多糖（ＥＰＳ）和白叶枯病原菌弱毒株诱导水稻对白叶枯病害抗病性的报道。但有关应用植物促生细菌（ＰｌａｎｔＧｒｏｗｔｈＰｒｏｍｏｔｉｎｇＢａｃｔｅｒｉａ,ＰＧＰＢ）诱导水稻对白叶枯病害抗性的研究还未见报道。本文采用分离于水稻苗期根内、根面的具有固氮能力的植物促生细菌阴沟肠杆菌（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｃｌｏａｃａｅ）ＭＲ１２和争论产碱菌（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓｐａｒａｄｏｘｕｓ）Ｒ４作为诱导子处理孕穗期水稻叶片,研究了它们对水稻白…     

四种药用植物炭疽病的病原鉴定

本文以ＶｏｎＡｒｘ和Ｓｕｔｔｏｎ提出的炭疽菌分类系统的依据，对玉竹，朱砂莲，当归，升麻４种药用植物上的炭疽病病原进行了分类鉴定，鉴定出玉竹炭疽病菌Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｃａｐｓｉｃｉ（Ｓｙｄ）Ｂｕｔｌ＆Ｂｉｂｓｙ，朱砂链炭疽病菌Ｃ．ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｄｅｓ（Ｐｅｎｚ．）Ｓａｃｃ．和当归炭疽病毒Ｃ．ａｃｕｔａｔｕｍＳｉｍｍｏｎｄｏ３个合格的种。     

侵染马铃薯的烟草坏死病毒(TNV)的分离鉴定

毒株来源:1983年8月,在黑龙江省克山县第二良种场附近的马铃薯地里,从植株中部叶片采到显褐色枯斑略皱症状的Po—12毒株。经病汁液接种于昆诺阿藜和苋色藜上,表现褐色枯斑。毒源经单斑分离纯化后进行鉴定。寄主反应:该病毒经汁液接种可侵染昆诺阿藜、苋色藜、墙生藜、土荆芥,矮牵牛、番杏、龙葵、曼陀罗、黄花烟、     

多酚类物质和过氧化物酶在陆地棉抗角斑病中的组织化学,生物化学及电子显微镜研究

多酚类物质和过氧化物酶在陆地棉抗角斑病中的组织化学，生物化学及电子显微镜研究Ｎｉｃｏｌｅ，Ｍ．，戴光辉，ＧｅｉｇｅｒＪ．Ｐ．，Ｍａｒｔｉｎｅｚ，Ｃ．，Ａｎｄａｒｙ，Ｃ＊＊．，ＢｒｅｓｓｏｎＥ．，Ｄａｎｉｅｌ，Ｊ．（ＯＲＳＴＯＭ，植病研究室，ＢＰ５０...     

南方菜豆花叶病毒(SBMV)两典型株系特异cDNA和RNA探针的制备及应用

南方菜豆花叶病毒（ＳＢＭＶ）主要有２株系：菜豆株系（ＳＢＭＶ－Ｂ）和豇豆株系（ＳＢＭＶ－Ｃ）,血清学方法不能予以区分。根据已报道的核酸序列设计了２对特异引物,进行ＲＴ－ＰＣＲ扩增并克隆到载体Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ中,序列测定予以证实后利用随机引物法合成放射性ｃＤＮＡ探针,再进行体外转译合成地高辛ＵＴＰ标记的ＲＮＡ探针。２种探针均可分别特异地检测Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ膜上的ＳＢＭＶ－Ｂ和ＳＢＭＶ－Ｃ。ＲＮＡ探针检测ＳＢＭＶ－Ｂ和ＳＢＭＶ－Ｃ灵敏度分别为：０．１μｇ和０．０１μｇ。     

新疆三种旱生藓类植物的比较解剖学观察

本文应用石蜡切片法及扫描电镜相结合的方法对旱生藓类植物茎、叶内部及表面同时进行分析分析,观察到旱藓（Ｉｎｄｕｓｉｅｌｌａｔｈｉａｎｓｃｈａｎｉｃａ Ｂｒｏｔｈ ｅｔ Ｃ．Ｍｕｅｌｌ）茎的皮部细胞面民中冰细胞面积相差悬殊,叶背面细胞皱折相对平滑;山地紫萼藓（ＧｒｉｍｍｉａｍｏｎｔａｎａＢｒｕｃｈｅｔＳｃｈｉｍｐ）茎的内皮层与单子叶植的的内皮层相似,叶背面皮表皱折呈鳞片状;细叶筛齿藓（Ｓｃｈｉｓｔｉｄ     

爱福丁（BA－1）乳油防治温室番茄二点叶螨试验

爱福丁（ＢＡ－１）乳油防治温室番茄二点叶螨试验曹玉信，王淑芝，郭文英（北农大新技术开发总公司，１０００９４）（东北旺农场植物医院）（静海县植保站）１．８％爱福丁（ＢＡ──１）乳油是抗生素杀虫杀螨剂，产素菌为Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓａｖｅｒｍｉ－ｔｉｌ...     

香石竹环斑病毒的分子检测

试验具体研究了两类不同性质的ｃＤＮＡ探针对香石竹环斑病毒的检测效果。毒源由中国农业大学植物病毒室提供，繁殖于苋色藜Ｃｈｅｎｏｐｏｄｉｕｍａｍａｒａｎｔｉｃｏｌｏｒ上，提纯该病毒，然后抽提其核酸ＲＮＡ，将ＲＮＡ多聚腺苷化后，以Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）为引物，反转录合成ｃＤＮＡ，补平后与载体连接，转化大肠杆菌，获得阳性克隆，用３２Ｐ和光敏生物素分别标记ｃＤＮＡ制作探针，与ＣＲＳＶ及其ＲＮＡ进行点杂交，结果表明，两类不同性质的探针在检测ＲＮＡ水平上具有相同的灵敏度，其检测极限均达到１ｎｇ／ｍｌ，并对二类探针进行了比较。     

对“葡萄保加利亚潜隐病毒”毒株的检验技术研究

为了研究葡萄病毒的检验技术,进行了匈引“葡萄保加利亚潜隐病毒”毒株的寄主范围、提纯和 dsRNA 的研究。人工接种28种或品种的植物,可以局部侵染14种或品种的植物,其中番杏是新报道的寄主。病毒繁殖在昆诺阿藜上,用磷酸缓冲液抽提,PEG 6000沉淀,超离心得粗提纯液为免疫抗原,提纯得率为45mg/1000g病叶,经琼脂糖凝胶电泳,检测昆诺阿藜病叶中有2条 dsRNA 的带谱。     

渗透胁迫对梭梭幼苗体内保护酶活性的影响及其抗旱性研究

分别用浓度为０、－０．５、－１．０、－１．５和－２．０ＭＰａ的ＰＥＧ（６０００）处理梭幼苗１２ｈ，测定体内ＳＯＤ、ＣＡＴ和ＰＯＤ活性，ＭＤＡ和蛋白质含量以及膜透性。结果表明：Ｄ 渗透胁迫小于－１．５ＭＰａ情况下，梭梭幼苗具有较高的ＳＯＤ活性，ＣＡＴ和ＰＯＤ活性随渗透胁迫加强而升高；ＭＤＡ含量和膜透性维持在较低的水平。表明梭纪苗具有较强的抗旱性。     

应用单克隆抗体检测香蕉束顶病

应用香蕉束顶病毒（ＢＢＴＶ）的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）建立了检测香蕉束顶病的间接ＥＬＩＳＡ方法，其检测香蕉病组织汁液的最大稀释度为１：１２８０，健康香蕉组织汁液无非特异性反应。用间接ＥＬＩＳＡ方法检测了采自广东、广西９个市（县）的香蕉产区的８０个大田香蕉束顶病样本和２５个荫棚香蕉试管苗样本，其中大田样本ＢＢＴＶ的带毒率为７６．５％，试管苗样本的带毒率为８．０％。香蕉束顶病株不同部位ＢＢＴＶ含量检测表     

用酶联免疫法检测香蕉花叶心腐病病毒

用纯化的黄瓜花叶病毒株ＣＭＶ－Ｂ制备小鼠腹水抗体，其效价为１：５０００，间接ＥＬＩＳＡ法可检测香蕉病叶汁液的最大稀释度为１：１２８０，健叶汁液无非特异性反应，在送检的５０份香蕉试管苗中，有１份样品被出带有ＣＭＶ病毒。