海滨雀稗再生体系的建立

以海滨雀稗(Paspalum vaginatum cv.Sea spray)的成熟种子为外植体,运用正交试验设计,在MS基础培养基上添加不同浓度的2,4-D、6-BA、NAA、KT、CuSO4、AHC等外源物质,分析其对愈伤组织诱导、胚性愈伤组织分化的影响,建立海滨雀稗高频再生体系,为基因工程育种奠定基础.试验结果表明,在MS培养基中添加2.0 mg/L 2,4-D和0.5g/L AHC 能提高种子的发芽率至97.50％;最佳胚性愈伤诱导培养基为:MS +2,4-D 3.0mg/L+CuSO4 15.0 mg/L+AHC 1.0g/L,其胚性出愈率为66.88％;最佳分化培养基为:MS+6-BA 8.0mg/L+KT 0.05 mg/L+CuSO4 10.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,其分化率为95.00％.     

几种因素对日本结缕草愈伤组织诱导与生长影响的研究

研究了基本培养基、碳源、营养添加物、pH值、固化剂等几种因素对日本结缕草‘Qingdao’和‘Zenith’两个品种成熟种子为外植体诱导愈伤组织的影响。结果表明:蔗糖作为碳源、pH值5.4～6.0、以植物凝胶或脱乙酰吉兰糖作为固化剂有利于日本结缕草愈伤的诱导与生长,NMB培养基、NB培养基分别有利于Zenith及Qingdao胚性愈伤的形成;而营养添加物的加入虽可提高愈伤诱导率,却导致胚性愈伤率的下降。同时,根据愈伤组织生长曲线得出,愈伤组织最适继代周期为24～33天。     

几种因素对日本结缕草愈伤组织诱导与生长影响的研究

研究了基本培养基、碳源、营养添加物、pH值、固化剂等几种因素对日本结缕草‘Qingdao'和‘Zenith'两个品种成熟种子为外植体诱导愈伤组织的影响.结果表明蔗糖作为碳源、pH值5.4～6.0、以植物凝胶或脱乙酰吉兰糖作为固化剂有利于日本结缕草愈伤的诱导与生长,NMB培养基、NB培养基分别有利于Zenith及Qingdao胚性愈伤的形成;而营养添加物的加入虽可提高愈伤诱导率,却导致胚性愈伤率的下降.同时,根据愈伤组织生长曲线得出,愈伤组织最适继代周期为24～33天.     

紫花苜蓿愈伤组织诱导及植株再生的研究

以中牧1号紫花苜蓿的胚轴、叶片、子叶和根为外植体,研究了不同浓度细胞分裂素对胚性愈伤组织诱导的影响,以及不同分化培养基、蔗糖浓度对胚状体分化的影响。结果表明:不同外植体间的愈伤组织诱导率差异较大,以胚轴的愈伤诱导效果最好,愈伤组织诱导率高达92.2%;改良SH+2,4-D2.0 mg/L+BA 0.5 mg/L为最佳胚性愈伤组织诱导培养基;MSO1培养基适于胚状体的分化,蔗糖浓度为25~30 g/L时胚状体诱导率最大可达30.4%;MSO培养基是最佳的成苗培养基。     

桑树叶片愈伤组织的诱导及不定芽分化影响因素的研究

通过正交试验,探讨了植物生长调节剂噻二唑苯基脲(Th id iazuron,TDZ)、α-萘乙酸(NAA)、桑品种、叶龄、叶位等5种因素对桑树叶片愈伤组织诱导的影响。筛选出了桑树叶片愈伤组织诱导的最佳条件为:21 d苗龄的陕305组培苗叶片,培养基MS+1.0 mg/L TDZ+0.2 mg/L NAA。在此条件下,陕305愈伤组织诱导率可达93.9%。对得到的陕305叶片愈伤组织进行了不定芽分化诱导,结果表明,最佳分化培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA+2%果糖,愈伤组织不定芽分化率高达100%。     

海雀稗幼穗离体培养植株再生

本研究旨在离体培养条件下建立起海雀稗植株再生的技术体系,为开展海雀稗细胞和分子生物学育种工作创造条件。以Adalay海雀稗(Paspalum vaginatum Sw.cv.Adalay)的幼穗为外植体材料,在附加2,4-D 2.0~4.0 mg/L稍作修改的MS培养基上,愈伤组织诱导率达90%以上。不同发育时期的幼穗影响其愈伤组织的诱导发生频率:1.0~2.0 cm长的幼穗,愈伤组织诱导率达80%以上;2. 0 cm以上的幼穗,诱导率降至60%以下。在添加2,4-D2.0 mg/L和BAP 0.05 mg/L的愈伤组织诱导培养基上,诱导产生的颗粒状愈伤组织占愈伤组织总数的40%以上。愈伤组织继代培养基中琼脂的用量提高到16 g/L时,愈伤组织在继代培养过程中保持颗粒状结构。颗粒状愈伤组织经连续继代培养3次后转移到附加BAP 2.0 mg/L的分化培养基上,植株再生频率达98%。通过提高愈伤组织继代培养基的渗透压,海雀稗幼穗诱导产生的颗粒状愈伤组织在继代培养过程中能够保持颗粒状的结构和高频率植株再生的能力。     

松南结缕草成熟胚愈伤组织的诱导和再生

松南结缕草成熟种子经灭菌和打破休眠后,接种于含有不同浓度2,4-D的MS和N6培养基上进行愈伤组织诱导。结果表明,结缕草种子的休眠主要在于破除种壳。2,4-D浓度在2~5 mg/L对愈伤组织诱导率无明显影响。基本培养基MS和N6诱导效果相近,初生愈伤组织为白色、半透明,质地松软、水浸状。继代培养基中添加一定浓度的甘露醇、麦芽糖和ABA以及延长继代时间有助于愈伤组织的胚性化。基本培养基MS更适于结缕草初生愈伤组织致密胚性化。胚性愈伤组织在MS添加0.1 mg/L 2,4-D培养基上即可分化出大量具有根和茎叶的再生植株。     

紫花苜蓿组织培养再生体系的建立

以紫花苜蓿无菌苗的下胚轴、子叶、叶片和叶柄为外植体,研究了不同培养基、不同激素种类和配比对胚性愈伤组织诱导的影响以及不同分化培养基对胚状体分化的影响.结果表明:下胚轴外植体胚性愈伤组织诱导率最高;最佳胚性愈伤组织诱导培养基为改良SH 2.0mg/L 2,4-D 0.5 mg/L 6-BA;最佳胚状体诱导培养基为MSO 2.0 mg/L 6-BA 0.5mg/L NAA;成苗培养基为1/2 MS 1% 蔗糖 0.7%琼脂.     

大针茅成熟胚愈伤组织诱导及分化的探索

为摸索大针茅成熟胚诱导、分化的最佳培养基,以大针茅的成熟胚为外植体,采用不同激素配比的培养基进行筛选.结果表明:在大针茅成熟胚胚性愈伤组织诱导和分化过程中,2,4-D,6-BA等激素的浓度对大针茅成熟胚的组织培养影响较大.大针茅愈伤组织诱导最佳培养基:培养基+2,4-D(2.0mg/L),平均出愈率为91.67%;继代培养基:N6+CH(500mg/L)+2,4-D(2.0mg/L)+6-BA(0.5mg/L),愈伤诱导率为80%;添加0.3mg/L ABA对非胚性愈伤组织转化为胚性愈伤组织有一定帮助,诱导率为23.3%.     

结缕草‘Zenith’离体培养植株再生体系优化研究

以结缕草Zoysia japonica栽培品种‘Zenith’的成熟种子为外植体,通过调整2,4 D浓度和凝固剂种类及其浓度,进行结缕草离体培养植株再生体系优化的研究。结果表明：愈伤组织诱导的适宜培养基为MS+2,4 D 4.0 mg/L,愈伤组织诱导率为69.97%,其中胚性愈伤组织诱导率达28.78%。胚性愈伤组织包括2种类型：淡黄色、湿润的小颗粒聚集状愈伤组织(27.36%)和黄色、干燥、颗粒状愈伤组织(1.42%)。以结冷胶为凝固剂,有利于提高愈伤组织的诱导率。提高愈伤组织继代培养基中的琼脂浓度,有利于保持胚性愈伤组织的植株再生能力。适宜的愈伤组织分化培养基为MS+KT 4.0 mg/L或MS+6 BA 3.0 mg/L,绿苗分化率达90%以上。适宜的生根培养基为1/2MS ,生根率100%。     

两性株番木瓜愈伤组织分化初探

以番木瓜两性株的愈伤组织为材料,以MS 为基本培养基,研究了不同人工激素种类、不同组合对愈伤组织诱导不定芽和无菌芽诱导生根的影响,初步建立了两性株番木瓜愈伤组织诱导分化体系。结果表明,6-BA和TDZ对番木瓜愈伤组织分化都有一定的诱导作用,而6-BA的作用更优于TDZ,最适浓度为 0.05 mg/L。GA3具有促进6-BA诱导愈伤组织分化的作用,诱导番木瓜愈伤组织分化出芽的最佳培养基为MS + 6-BA 0.5 mg/L + GA31.0 mg/L。相对NAA而言,IBA更适于诱导不定芽生根,生根培养基以MS + IBA0.3 mg/L为好。     

三叶草愈伤组织诱导及分化的研究

以4个三叶草品种的胚轴、叶片和子叶为外植体,研究了不同激素浓度配比对愈伤组织诱导和分化的影响。结果表明,不同品种不同外植体愈伤诱导率差异较大,杂三叶下胚轴为较适宜的外植体,其愈伤组织诱导率和体细胞胚形成率最高可达96.7%和33.4%;改良SH+2,4-D 4.0 mg/L+KT 1 mg/L为最佳胚性愈伤组织诱导培养基,MSO培养基适宜三叶草胚状体的形成及植株再生。     

紫花苜蓿组织培养再生体系的建立

以紫花苜蓿无菌苗的下胚轴、子叶、叶片和叶柄为外植体,研究了不同培养基、不同激素种类和配比对胚性愈伤组织诱导的影响以及不同分化培养基对胚状体分化的影响。结果表明：下胚轴外植体胚性愈伤组织诱导率最高;最佳胚性愈伤组织诱导培养基为改良SH＋2．0mg／L2,4-D＋0．5mg／L6-BA;最佳胚状体诱导培养基为MSO＋2．0mg／L6-BA＋0．5mg／LNAA;成苗培养基为1／2MS＋1％蔗糖＋0．7％琼脂。     

Thidiazuron对解除羊草种子休眠和植株再生的影响

研究了不同浓度植物生长调节剂噻苯隆(Thidiazuron,TDZ)对解除羊草(Leymus chinensis)种子休眠和植株再生的影响,并对愈伤组织进行超微结构观察。结果表明,0.02 mg·L-1TDZ低温浸种对解除羊草种子休眠和诱导胚性愈伤组织的效果最佳,发芽率和出愈率分别为11.0%和15.5%;羊草愈伤组织分化最佳培养基配方为MS+TDZ 0.5 mg·L-1+CH 2.0 g·L-1,分化率、绿芽分化率分别为56.7%和423.3%;TDZ低温浸泡处理的羊草种子诱导出的胚性愈伤组织较非胚性愈伤组织细胞质体中内含物丰富,更易于体胚形成;丛生芽经过1/2MS生根培养基的3次继代,炼苗移栽后成活率达100%。     

硫酸铜,硝酸银和脱落酸对草地早熟禾胚性愈伤诱导的影响

试验以草地早熟禾4个品种的成熟种子为外植体,研究了CuSO4、AgNO3、脱落酸(ABA)对草地早熟禾胚性愈伤诱导的影响,结果表明,K3诱导培养基中添加CuSO4对草地早熟禾胚性愈伤组织的形成有促进作用,除DP192-10之外的3个品种都发生了明显的形态上的变化,DP-LF-300和2W42-117在添加5μmol/LCuSO4的培养基上诱导出了乳白色、致密的胚性愈伤组织,2W42-117的胚性愈伤率高达40%。在MS基本培养基中添加AgNO3、ABA对草地早熟禾4个品种的胚性愈伤组织的诱导没有作用。     

禾本科牧草胚性愈伤组织诱导及再生研究进展

禾本科牧草在草畜产业发展和生态环境保护等方面起着至关重要的作用。近年来,随着生物技术的发展,国内外在牧草胚性愈伤组织诱导和再生研究方面取得了较大进展。该文在归纳总结该领域研究成果的基础上,对影响禾本科牧草胚性愈伤组织诱导和再生的几个主要因素进行了探讨。大量研究结果表明,植物激素类型和供试材料的基因型是影响胚性愈伤组织诱导和再生效率的最主要因素。培养基中添加适量的水解酪蛋白或多种氨基酸不但可以提高胚性愈伤组织的诱导效率,还可提高愈伤组织的质量。同时对禾本科牧草胚性愈伤组织诱导和再生的应用前景进行了展望。     

百慕大成熟胚的组织培养及植株再生

百慕大是一种难以培养的草坪草。本研究首次以百慕大成熟胚为外植体，通过对胚性愈伤组织的发生进行植株再生。结果表明，百慕大成熟种子的出愈能力很强，且不同的基本培养基诱导效果相近，但初生愈伤组织呈无定型棉絮状，不能再生成株。采用提高培养基中蔗糖和琼脂浓度以及在培养基中附加适宜浓度ABA，CH和一定比例的生长素与细胞分裂素的方法，对初生愈组织实施继代改造，高频诱导出致密颗粒状的，具有高度再生能力的胚性愈伤组织，此类胚性愈伤组织在含有2.0mg/L 6－BA，1.0mg/LK和0.5mg/L NAA的分化培养基上再生频率较高。     

草地早熟禾愈伤组织诱导及植株再生

以成熟种子和胚轴为外植体诱导草地早熟禾愈伤组织,比较草地早熟禾四个品种的愈伤诱导情况和不同6-BA浓度、愈伤年龄等因素对愈伤组织分化能力的影响。结果表明:成熟种子的出愈率与胚性愈伤诱导率均高于胚轴;MS 2,4—D(2mg/L) 6-BA(0.1mg/L)培养基为草地早熟禾Mardona品种较为合适的愈伤培养基,其诱导率为58.3%;MS BA(3mg/L) KT(0.2mg/L)为较为适合的分化培养基,再生率高达70%;随着继代次数的增加,草地早熟禾分化能力能够继续保持。选择致密、易碎、生长迅速的愈伤继代能够保持草地早熟禾的胚性,可以为遗传转化提供长期良好的植物材料。     

桑树幼胚培养和试管苗快速繁殖技术的研究

应用植物组织培养方法,探索了桑幼胚培养和试管苗快速繁殖技术。(1)通过培养条件的控制和各种激素的调节,盛南桑品种幼胚经培养可发生大量的不定芽,幼胚愈伤组织的诱导率为30%,不定芽的诱导率为100%。(2)通过对桑芽离体培养,得出在MS培养基中,每升附加6-卞氨基嘌呤(6-BA)1.0mg,吲哚乙酸(IAA)0.5mg,庶糖浓度3%,每缝代一次,平均单芽增殖数达12个左右.     

多年生黑麦草种子愈伤组织诱导和植株再生

研究并建立了多年生黑麦草胚性愈伤组织诱导及其再生体系.结果表明:不同品种的愈伤组织诱导率不同,最适培养基是MS,愈伤组织诱导的最适2,4-D浓度是5mg/L;继代培养时间对愈伤组织的分化率有很大影响;植物凝胶与国产琼脂相比固化效果更好;筛选剂G418对抗性愈伤的浓度在50mg/L和7mg/L时的筛选效果分别达10.31%和6.%.