北柴胡根尖染色体制片技术研究

以北柴胡新品种川北柴1号为材料,采用新型植物染色体制片方法研究剪根时间、取样根长、笑气处理时间及酶解时间对染色体制片效果的影响,以探寻适宜于北柴胡根尖染色体制片的安全有效技术。结果表明,北柴胡根尖染色体制片最佳条件为:在胚根长至0.5~1cm时进行取样,最佳取样时间为09:00—10:00时和16:00—17:00时2个时间段;制片预处理采用笑气处理4h;酶解液酶解40min。本研究采用的技术更加安全高效,且易操作。     

龙葵杂10号向日葵染色体核型分析

为了探索向日葵染色体核型和染色体制片技术,以向日葵龙葵杂10号为试验材料,探索了低温预处理向日葵根尖细胞对制片效果的影响;使用Photoshop和Excel软件辅助分析染色体图像进行核型分析。结果表明：低温预处理向日葵根尖细胞,可以获得较理想的染色体制片用于核型分析,龙葵杂10号染色体数量为2n=34,核型公式为2n=34=30m+2sm+2M。     

大白菜适于FISH的染色体制片技术研究

采用酶解去壁低渗法进行大白菜染色体制片,研究了影响其有丝分裂相指数和制片质量的根尖长度、预处理药剂和时间、前低渗和酶解的温度与时间等相关因子,并对大白菜制片质量进行了25SrDNA的FISH检测。结果表明：当大白菜生长旺盛的根尖长为1.5~2.0 cm时中期分裂相指数最高;最佳预处理药剂为0.002 mol/L 8-羟基喹啉,当预处理时间为2 h时能获得较多的分裂相和清晰的染色体形态;0.075 mol/L KCl中25℃前低渗0.5 h,然后采用2%纤维素酶和2%果胶酶混合液4℃消化5~6 h或25℃消化2~2.5 h,染色体分散良好,酶解完全,无细胞质残留,制备的染色体标本可不经预处理直接用于FISH杂交。本研究结果为在大白菜上开展FISH技术的相关研究奠定了基础。     

柚单染色体微分离制片技术研究

以‘琯溪蜜柚’幼胚为材料,对单染色体微分离制片过程中酶解时间、冰水固缩时间和染色三因素的影响效果进行了研究。结果表明：用2%纤维素酶与0.5%果胶酶的混合液处理40～60 min,后低渗处理之后进行20～30 min冰水固缩处理和卡宝品红染色组合可以得到理想的制片效果。该方法制片背景干净,各单染色体充分分散,适合下一步的小型单染色体微分离研究     

染色体原位杂交的发展及其应用

原位杂交是由放射性同位素或非放射性标记的核酸探针与细胞学制片上的染色体ＤＮＡ或组织切片上的ＲＮＡ杂交,通过放射自显影或酶促生色反应、抗原抗体反应检测具有特定序列的ＤＮＡ或ＲＮＡ,从而在细胞内进行外源染色体或特定序列定位。１原位杂交技术的发展原位杂交技...     

蜀葵根尖染色体制片技术优化和核型分析

本研究以蜀葵‘春庆’(Althaea rosea‘Spring Celebrities’)为材料,从预处理试剂、固定时间、解离试剂和时间四个角度,优化常规染色体制片技术,获得了一套蜀葵染色体制片技术,并以此为基础进行核型分析,获得完整核型指标。根据研究结果,使用冰水混合物预处理24 h,卡诺氏液固定处理24 h,接着1 mol/L HCl解离处理90 min后,用卡宝品红染色5 min,在100×油镜下观察,可以观察到结构完整、分散清晰的蜀葵染色体制片。蜀葵为二倍体,核型公式为K(2n)=38=22m+12sm+4st,核型不对称系数为64.91%,核型分类属于2B型,染色体相对长度组成为2n=38=8L+8M2+12M1+10S。这些核型指标为研究蜀葵的进化和育种提供了重要的参考数据。     

大兴安岭产胎生蜥蜴的染色体组型研究

本文采用骨髓细胞制片法,对分布在黑龙江省大兴安岭地区呼玛县的胎生蜥蜴(Lacerta vivipara)染色体组型进行了研究。结果表明,雄性胎生蜥蜴的二倍体染色体数是36,性染色体为ZZ型,2n=34+ZZ;雌性胎生蜥蜴的二倍体染色体数是35,性染色体为W型,2n=34+W,胎生蜥蜴的性别决定机制为ZZ/W型,其染色体全部为顶端着丝点染色体(除雌性的性染色体为中部着丝点染色体外)。     

粗山羊草(Aegilops squarrosa)的染色体和同工酶分析

利用火焰干燥涂片法制片和吉姆沙染液分化染色,分析了粗山羊草的染色体组型和 C-带带型。粗山羊草具有7对染色体,包括5对中部着丝点染色体、1对亚中部着丝点染色体和1对随体染色体。除第1对染色体外,所有染色体都具着丝点带。有的染色体具变化较大的中间带和末端带。据聚丙烯酰胺凝胶电泳分析粗山羊草的酯酶和过氧化物酶同工酶,在幼苗不同时期,其酶谱是不同的。     

基于荧光原位杂交的‘燕山红栗’核型分析

板栗染色体核型分析是开展育种工作的基础。为明确板栗染色体形态结构特征,本研究以‘燕山红栗’为试验材料,采用体细胞染色体常规制片法及荧光原位杂交法,对其染色体进行核型检测及分析。结果表明:板栗染色体数为2n=24,核型公式为2n=2x=24=2M(sat)+18m+4sm,染色体组总长度为13.04滋m,其中长臂总长为7.31滋m,核型不对称系数为52.06%,核型相对对称。精准的染色体核型分析为板栗种质资源利用和新品种选育提供了细胞学基础。     

葛氏鲈塘鳢（Perccottus glenii）的染色体组型研究

以葛氏鲈塘鳢（Perccottus glenii）的鳃、肾及肠细胞为材料,用空气干燥法制片,用Leica显微镜进行观察,依据Levan等（1964）的分类标准进行其染色体的数目及组型分析。结果表明葛氏鲈塘鳢的染色体数目为2n等于44条,n=22。染色体总臂数(NF)为82。其中,亚中部着丝点染色体为18对,亚端部着丝点染色体为1对,端部着丝点染色体为3对。核型公式为2n=36sm+2st+6t。根据染色体形态分析的结果,没有发现性染色体的存在。     

药用植物知母染色体核型分析

目的：研究分析知母（Anemarrhena asphodeloides Bge.）染色体核型。方法：采用常规制片方法,并进行显微摄影。结果：知母细胞染色体数目2n=22;核型公式K(2n)=2x=22=16m+6sm。结论：11对染色体中8对为中部着丝点染色体(m),3对为近中部着丝点染色体(sm),未发现非整倍变异和多倍现象,核型不对称上属于为“2B”。     

贵州本地两种豆类资源的细胞学分析

通过染色体滴片制片法对收集自贵州的一种地方栽培大豆材料和一种野生绿豆材料进行染色体核型研究,结果表明,贵州威宁大豆的核型公式为2 n=2 x=40=34 m+6 sm,平均臂比为1.31,染色体长度比为1.56;核型不对称指数为55.97％;核型类型为2 A型;贵州野生绿豆核型公式为2 n=2 x=20 m(2 sat...     

粗根鸢尾染色体制片技术及核型分析

以粗根鸢尾根尖为试材,研究取样时间、预处理液、解离时间等对其染色体制片的影响,并以此最佳条件进行粗根鸢尾核型分析,为其细胞学研究及开展杂交育种提供参考。结果表明,根尖取样以上午8:00～11:00从田间植株取材为佳;用2 mmol/L 8-羟基喹啉溶液预处理2.5 h,经卡诺固定液固定2 h后,在5 mol/L盐酸常温下解离10 min,卡宝品红溶液染色压片镜检,能取得良好的制片效果;粗根鸢尾的染色体数目为2n=18,核型公式为2n=2x=18=2M+10m+6sm,核型属于2A型。     

植物染色体G带的研究(摘要)

经过十几种方法,约400次流程对25种植物材料的探索,得到了可用于多种植物的植物染色体AMD(放线菌素D)法高分辨G显带技术,其流程为:AMD和秋水仙素共同预处理植物种子根尖,Ohnuki’s溶液低渗,酶解,固定,固定液中捣碎涂片法制片,Wright—Giemsa染色。该技术已在一     

黑麦(Secale cereale)的染色体组型分析

本试验用涂片法制片,以低渗、酶解、火焰干燥以及分带等处理我国“甘肃黑麦”和加拿大黑麦“Kustro”的根尖细胞。从形态、C 带带型分析和比较了其染色体组型。两个品种无显著差异。其染色体的端粒带、核仁缢痕带都显著而较稳定。着丝点带也常出现。中间带变化较大。所有染色体分为三组:中部着丝点染色体;亚中部着丝点染色体;     

黑麦(Secale cereale)的染色体组型分析

本试验用涂片法制片,以低渗、酶解、火焰干燥以及分带等处理我国“甘肃黑麦”和加拿大黑麦“Kustro”的根尖细胞。从形态、C 带带型分析和比较了其染色体组型。两个品种无显著差异。其染色体的端粒带、核仁缢痕带都显著而较稳定。着丝点带也常出现。中间带变化较大。所有染色体分为三组:中部着丝点染色体;亚中部着丝点染色体;     

巴西橡胶树 ‘热研 7-33-97’ 单染色体显微分离与扩增

巴西橡胶树是天然橡胶的重要来源。而染色体显微分离技术对基因组研究有重要意义。本研究以巴西橡胶树‘热研7-33-97’幼叶为材料,采用酶解去壁低渗法制片,建立了微细玻璃针法分离巴西橡胶树单条染色体技术体系。成功分离出8条染色体;随机选取其中2条进行了2轮LA-PCR扩增,得到400-1800 bp之间的DNA片段,通过Southern blot杂交对LA-PCR产物进行验证,结果表明扩增片段与巴西橡胶树基因组DNA之间有同源性。从而说明单染色体DNA已被成功的扩增。这就证明利用染色体微分离、微克隆技术对巴西橡胶树基因组进行研究是可行的。为构建巴西橡胶树单染色体文库奠定了基础。     

中华鳖太湖种群淋巴细胞培养及染色体核型分析

为给中华鳖种质研究和染色体操作提供理论依据。以中华鳖太湖种群为材料,采用淋巴细胞培养、空气干燥法制片、Giemsa染色,对中华鳖染色体核型进行了分析。结果表明：通过淋巴细胞培养法可以得到良好的染色体制片;中华鳖太湖种群具有33对染色体,其中6对是大型染色体,27对是小型染色体。     

陆地棉单体和端体细胞学行为与鉴定技术

报道了陆地棉单体和端体的细胞学鉴定时的染色体构型表现及其鉴定技术方法，并就陆地棉花粉母细胞减数分裂研究的取样、染色体制片和两种细胞学材料的传递等进行了讨论。     

葫芦巴(Trigonella foenum-graecum)染色体核型分析

葫芦巴是现在较为常用的中药材之一,但对其染色体的核型分析研究较少。为了研究葫芦巴染色体形态结构特征以及探索遗传机制,本试验以采自河北的葫芦巴种子为研究对象,采用根尖染色体制片与显微摄影技术相结合的方法,以确定染色体数目和进行核型分析。结果显示:河北葫芦巴有16条染色体,核型公式为2n=16=4m+2m (SAT)+10sm,染色体相对长度在4.63%~8.17%范围内,臂比在1.17~2.43范围内,核型不对称系数为64.03%,随体在第8对染色体的短臂上,核型类别为2A型。本研究结果既可为今后选择种内杂交和种间杂交育种种类提供科学依据,又可为探索其物种遗传机制、亲缘关系与进化、远缘杂种的鉴定等提供重要依据。