紫茉莉耐盐突变体筛选的初步研究

以紫茉莉的带节茎段为外植体进行离休培养实验,建立了比较高效的紫茉莉离体再生体系。分析了盐胁迫对紫茉莉不定芽生长的影响,结果表明200 mmol/L NaCl严重抑制了紫茉莉不定芽的生根,故此浓度可作为耐盐突变体的筛选浓度。分析了EMS诱变对紫茉莉不定芽生长的影响,发现经0.8%EMS处理6 h或0.6%EMS处理7 h后,紫茉莉不定芽的致死率在50%左右,因此可以作为紫茉莉突变体筛选的EMS浓度和处理时间。通过合适剂量的EMS诱变和NaCl筛选,初步获得了具有抗性的耐盐紫茉莉突变体植株。     

紫茉莉耐盐突变体筛选的初步研究

以紫茉莉的带节茎段为外植体进行离休培养实验,建立了比较高效的紫茉莉离体再生体系.分析了盐胁迫对紫茉莉不定芽生长的影响,结果表明200 mmol/L NaCl严重抑制了紫茉莉不定芽的生根,故此浓度可作为耐盐突变体的筛选浓度.分析了EMS诱变对紫茉莉不定芽生长的影响,发现经0.8％EMS处理6 h或0.6％EMS处理7 h后,紫茉莉不定芽的致死率在50％左右,因此可以作为紫茉莉突变体筛选的EMS浓度和处理时间.通过合适剂量的EMS诱变和NaCl筛选,初步获得了具有抗性的耐盐紫茉莉突变体植株.     

小麦品种衡观35抗茎基腐病EMS突变及其鉴定

【目的】研究小麦品种衡观35抗茎基腐病EMS突变及其鉴定。【方法】利用不同浓度的甲基磺酸乙酯(EMS),对小麦品种衡观35进行诱变,以未经诱变的衡观35为感病对照,以石优17为中度抗病对照。人工接种假禾谷镰刀菌,对诱变材料进行抗性鉴定,经温室加代获得抗茎基腐病M₃代材料。【结果】适于衡观35突变的EMS浓度为0.4%,并且从106株M₃衡观35材料中获得7株期表现免疫的突变株,突变体材料苗期和成株期整体病情指数比感病对照分别降低34.93%和34.62%。【结论】EMS突变小麦衡观35,适宜的突变浓度为0.4%,共从供试突变品种M₃代中筛选获得了7份免疫的抗小麦茎基腐病的资源。     

提高金柑实生态离体再生效率的研究

金柑童期短,1年可多次开花结果,有利于通过遗传转化开展花、果性状和相关基因在花、果实中表达的研究,但目前金柑实生苗再生率还有待提高。以广西阳朔的金弹金柑实生苗节间茎段为材料,发现以35 d苗龄(暗培养25 d,光照10 d)的实生苗节间茎段为外植体材料,培养于再生培养基(MS+3 mg/L 6-BA)上50 d左右,可达到80%以上的不定芽再生率。而经过农杆菌侵染后,以MS+2 mg/L 6-BA+1 mg/L NAA+1 mg/L KT为共培养基,MS+3 mg/L 6-BA为筛选培养基时,并在50 mg/L卡那浓度筛选下,仍可获得13.3%的抗性芽再生率。不定芽切下放置于生根培养基(1/2MS+3 mg/L IBA+1 g/L活性炭)中获得86%左右的生根率。通过对影响不定芽和抗性芽再生频率的各种因素进行研究,最终建立了一套有效的金柑实生苗节间茎段离体再生体系。     

EMS处理甘薯茎段的耐盐性研究

运用甲基磺酸乙酯（EMS）对甘薯茎段进行处理后,通过组织培养的方法对其进行定向耐盐筛选,探讨EMS处理甘薯茎段的适宜浓度和时间组合,并得到耐盐突变体。实验结果表明：EMS对甘薯茎段的作用受处理时间和处理浓度的影响,0．3％＋1h和0．2％＋（2-3）h约为EMS处理甘薯茎段的半致死剂量。     

百合离体抗盐变异体的筛选及生理特性研究

用甲基磺酸乙酯(EMS)对百合离体叶片进行了处理。结果表明,随着处理浓度和处理时间的增加,叶片的分化率和存活率均下降,并筛选出其半致死浓度(0.6%)和处理时间(3 h)。利用筛选的EMS浓度和处理时间对离体叶片进行处理,在1%盐浓度胁迫下进行抗盐性突变体筛选,得到抗盐性诱变植株。经鉴定,其超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性增强,丙二醛(MDA)含量减少,细胞膜透性减小,可溶性蛋白含量增加,表明筛选的百合突变体比对照具有更强的抗盐性。     

大红甜橙遗传转化高效再生体系的建立

以大红甜橙的实生苗为试材,研究6-BA与IAA的不同浓度组合和Km不同浓度对大红甜橙不同外植体离体再生的影响和IBA的不同浓度对不定芽生根的影响,建立了高效的大红甜橙遗传转化再生体系.该体系的最佳条件是:1)以实生苗上胚轴为外植体.2)以MS无机盐 100mg/L肌醇 0.2mg/LV-B1 1mg/LV-B6 1mg/L烟酸 3%蔗糖 0.8%琼脂(pH5.8) 3mg/L6-BA为不定芽诱导培养基,在26℃黑暗条件下培养7d后,转移至光/暗周期16/8h的条件下诱导不定芽的分化(40d分化率达90%).以1/2MS 3%蔗糖 0.7%琼脂 2.0mg/LIBA为不定芽的生根培养基(40d生根率达94.7%).3)筛选遗传转化转化体的Km质量浓度为50mg/L.     

离体培养中利用病菌粗毒素检测香蕉枯萎病抗性研究

在香蕉组织培养过程中,将香蕉枯萎病菌粗毒素添加到组织培养基中,以测定不同品种香蕉对粗毒素的敏感性,并对薄片培养芽用粗毒素进行多次诱变以筛选抗(耐)病突变体。结果表明:供试5个品种香蕉离体培养芽对粗毒素的敏感性程度为农科1号粉蕉粉杂巴西蕉东莞大蕉,这与田间真实的品种抗病性不相符合,说明粗毒素虽然对不同抗性的香蕉品种均具有致病作用,但香蕉离体培养芽对粗毒素的敏感性程度与香蕉品种的抗病性无相关关系。巴西蕉和农科1号通过薄片诱导的不定芽对粗毒素的半致死浓度为40.63 mg/L和31.82 mg/L,两个品种香蕉离体培养芽经枯萎病菌粗毒素多次诱变筛选后可获得稳定的耐毒素芽。     

Study on Tissue Culture of Cold Rose

以萌生新枝茎段为材料,探讨了冷香玫瑰离体快繁的适宜条件。结果表明,离体茎段芽诱导需要较高的细胞分裂素浓度,适宜的培养基为M S＋6-BA3.0 m g/L＋N AA0.6 m g/L;增殖培养基和诱芽培养基相同;生根培养分别采用N AA和IBA 2种激素,IBA效果较佳,适宜的生根培养基为M S＋IBA0.6 m g/L。生根苗移栽于草炭∶沙土=1∶1的混合基质中,成活率可达70%以上。     

冷香玫瑰的组织培养研究

以萌生新枝茎段为材料,探讨了冷香玫瑰离体快繁的适宜条件。结果表明,离体茎段芽诱导需要较高的细胞分裂素浓度,适宜的培养基为M S+6-BA3.0 m g/L+N AA0.6 m g/L;增殖培养基和诱芽培养基相同;生根培养分别采用N AA和IBA 2种激素,IBA效果较佳,适宜的生根培养基为M S+IBA0.6 m g/L。生根苗移栽于草炭∶沙土=1∶1的混合基质中,成活率可达70%以上。     

柑桔木虱生物学研究

柑桔木虱在浙南平阳一年发生6～7代,以成虫在寄主叶背越冬,翌年3月中、下旬产卵于芽缝间,4月上、中旬出现若虫;第一代成虫始见于5月上旬.世代重叠,7～8月柑桔秋稍期为成虫发生高峰期.卵期2～11天;若虫5龄,若虫期11～36天;世代历或共20～67天.成虫寿命13～246天,产卵前期6～30天.产卵期1～72天,一般连续一个月左右;每雌产卵量3～762粒,每代平均172～277粒.性比为1.06:1.     

温度对沙糖桔红蜘蛛生长发育的影响

在18、22、26、28、30、35℃6种温度条件下,研究沙糖桔红蜘蛛的发育历期和存活率,分析温度对发育速率的影响.结果表明:温度对沙糖桔红蜘蛛的生长发育有较大的影响.在18～30℃内,沙糖桔红蜘蛛各虫态发育历期随温度的升高而缩短,超过30℃后,各虫态的发育历期随温度升高而增加.线性日度模型和Logistic模型都能较好地反映各虫态的发育速率.26～30℃较适合沙糖桔红蜘蛛的生长发育,30℃沙糖桔红蜘蛛各发育阶段存活率及总存活率最高.     

柑桔属10个品种对桔全爪螨种群的影响

供试柑桔属的10个品种对桔全爪螨(Panonychus citri McGregor)种群生长发育、繁殖及种群密度有明显的影响,品种间存在感螨性差异。其中,大红袍红桔、枸头橙、尤力克柠檬感螨程度较高,椪柑、哈姆林甜橙、四季抛柚感螨程度较低,华盛顿脐橙、锦橙、宫川温州蜜柑、兴津温州蜜柑感螨性居中。桔全爪螨在感螨程度较高的品种发育历期短,雌成螨寿命长,产卵量大,死亡率较低,R_0、r_m、λ等生命表参数值较大。在感螨程度较低的品种上,桔全爪螨发育历期延长,雌成螨寿命较短,产卵量降低,死亡率较高,R_0、r_m、λ值较小。桔叶角质层厚度,气孔密度,维生素C、总氮、还原糖含量的差异,是造成供试品种感螨性差异的主要理化因子。桔叶油胞密度、叶油成分及含量、总糖和氨基酸含量与感螨程度无明显关系。     

黄花蒿提取物对柑橘全爪螨的生物活性

 【目的】通过系统测定黄花蒿对柑橘全爪螨的杀螨生物活性,为综合开发利用黄花蒿提供科学依据。【方法】采集6月份和7月份的黄花蒿植株,分成根、茎、叶3个部分,采用石油醚（30～60℃）、石油醚（60～90℃）、乙醇、丙酮和水溶剂的平行和顺序提取方法,获得54种提取物,并测定了它们对柑橘全爪螨的室内杀螨活性。【结果】结果表明,7月份的黄花蒿植株的生物活性大多优于6月份,并以7月份叶的丙酮平行提取物活性最高。对柑橘全爪螨处理48 h后,7月份叶的丙酮平行提取物对柑橘全爪螨的LC50（0.4222 mg?ml-1）仅为6月份（0.9489 mg?ml-1）的44%。对黄花蒿7月叶的丙酮提取物进行柱层析得20种不同的组分,其中组分17的杀螨活性最高,与其它组分的杀螨活性存在显著差异（P＜0.05）。【结论】7月叶丙酮平行提取物对柑橘全爪螨的生物活性最强。并对其进行柱层析分离,得20种组分,组分17的杀螨活性最高,具体的杀螨活性化合物还有待进一步深入研究。     

苦楝油防治桔全爪螨的研究

本文认为苦楝(Melia azedarach L.)油对桔全爪螨Panonychus Citri(McG.)的毒杀作用,可能是因油剂堵塞螨的气门造成窒息而死亡。用电镜扫描的方法比较了桔全爪螨和捕食螨的气门结构,指出气门结构的差异是产生选择毒性的主要原因。本文提出了乳化苦楝油的经济、简易、有效的配方和方法。室内测定,苦楝油对桔全爪螨LC_(50)为0.27％;大田防治试验的效果达93.7％,是一种优良的高效杀螨剂。利用植物油防治柑桔叶螨具有广阔的前途。     

柑橘全爪螨钠离子通道基因差异性分析

为弄清钠离子通道基因与柑橘全爪螨Panonychus citri噻螨酮抗性的关系,通过柑橘全爪螨转录组分析鉴定了钠离子通道基因;采用序列比对和Sanger测序,分别对柑橘全爪螨敏感品系和噻螨酮抗性品系钠离子通道基因序列进行单核苷酸多态性分析;进一步采用RPKM法和荧光定量PCR对抗性品系和敏感品系钠离子通道基因进行表达差异分析.从柑橘全爪螨转录组中获得了39条钠离子通道基因,相对于敏感品系,抗性品系中有21条表达上调,17条表达下调,Nay1.8.1和Nay1.6.4分别为上调倍数最高的2个钠离子通道基因[log2 Ratio(RS/SS)分别为10.59,10.30],进一步荧光定量PCR分析发现,Nav1.8.1和Nav1.6.4上调倍数分别为3.92和1.68;基因序列比较和Sanger测序发现,抗性品系中,Nay1.9.4在344,441,468位和Nav1.7.3在第786分别有3个和1个SNP位点,进一步分析编码的氨基酸序列发现,Nav1.9.4只有第468位G突变为A导致蛋氨酸突变为异亮氨酸,Nav1.7.3在第786位T突变为C导致亮氨酸突变为色氨酸.钠离子通道基因差异性分析及验证为进一步研究柑橘全爪螨抗性分子机理提供了有价值的基因资源.     

桔叶受害对桔全爪螨种群的影响

本文研究了柑桔叶片受害对桔全爪螨种群的反馈作用。结果表明,桔全爪螨种群下降率与高峰期螨群密度和受害桔叶氨基酸、总N、K、还原糖含量以及含水量等营养成分下降率呈显著正相关。排除了螨群密度效应后,受害桔叶白斑率在60%以上时,雌螨平均产卵量显著下降;叶片白斑率达80%以上时,产卵量减少41%左右。在累积螨日相同的条件下,只有高密度螨群集中为害,才会对桔叶生理和营养产生较大影响,从而影响桔全爪螨的繁殖率。此外,本文还探讨了桔树对桔全爪螨为害的补偿作用。     

20%哒虱威乳油等15种农药防治柑桔木虱田间药效试验

控制柑桔木虱是柑桔黄龙病综合防治最重要的技术措施。柑桔木虱成虫的高效传病性、近距离扩散性、终生带毒性和快速传病性,决定了用来防治柑桔木虱成虫的农药要求速效性好、防效高(药后24h的防效>95%)。由于受到试验地虫源和试验条件的限制,柑桔木虱的有效防治药剂筛选严重滞后。2006—2007年做了15种农药的田间药效试验,结果表明:哒虱威EC200mg(a.i)/L、丁硫克百威EC400mg(a.i)/L对柑桔木虱成虫药后24h的防效>95%;防效在94.9%～90%的有异丙威200mg(a.i)/L、133mg(a.i)/L、丁硫克百威EC250mg(a.i)/L;噻嗪酮250mg(a.i)/L的防效只有30.8%;防效低于30%的药剂有灭多威200mg(a.i)/L、鱼藤酮150mg(a.i)/L、机油乳剂9500mg(a.i)/L、阿维菌素20mg(a.i)/L和石硫合剂1波美度。机油乳剂与哒虱威混用无增效作用。