头花蓼愈伤组织诱导及分化

研究了2种外植体(叶片、茎段)、消毒方法、培养基种类、活性炭、植物生长调节剂等因素对头花蓼愈伤组织诱导及分化的影响。结果表明,最佳消毒方法为以0.15%HgCl2消毒叶片6min和10%NaClO消毒茎段9min;不同培养基诱导愈伤组织发生率依次为MS1/2MSB5;MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.3mg/L有利于愈伤组织形成;MS+6-BA 4mg/L+NAA 0.2mg/L有利于愈伤组织增殖;MS+6-BA 8mg/L+IBA 0.1mg/L有利分化,分化率为83.33%,产生不定芽平均数为5.1个。培养基中附加100mg/L活性炭,褐化率仅为6.80%,愈伤组织生长和分化效果较好。     

三尖杉愈伤组织诱导及其分化的初步研究

以三尖杉茎尖、嫩叶为外植体,应用正交设计法对愈伤组织诱导及其继代分化进行了研究。结果表明,不同外植体灭菌的难易程度相差较大,叶片较茎尖容易;叶片用体积分数为75%的酒精浸泡30-45 s,经体积分数为0.1%HgCl2溶液灭菌12 min,效果最好;茎尖则用体积分数为75%酒精浸泡1 min,经体积分数为0.1%HgCl2溶液灭菌12 min,效果较好;诱导叶片、茎尖愈伤组织的最佳培养基配方为MS+NAA 1.0 mg.L-1+2,4-D 1.0 mg.L-1;愈伤组织在继代培养基上均能进行分化,其中结构紧密的茎尖愈伤组织在MS+6-BA3.0 mg.L-1培养基上继代培养能诱导分化形成不定芽。     

微型月季组培快繁关键技术研究

以微型月季带腋芽的幼嫩茎段为试材,对微型月季组培快繁中外植体消毒、愈伤组织诱导、丛芽增殖培养以及植株生根等关键技术进行研究。结果表明,用75%酒精消毒2 min后,再用HgCl_2消毒10~15 min时,外植体存活率最高;培养基MS+2 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA的愈伤组织诱导率可达95%;愈伤组织增殖最适培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT+0.2 mg/L NAA;丛芽分化增殖最适培养基为MS+3 mg/L 6-BA+0.2 mg/L KT+0.2 mg/L NAA;生根最适培养基为1/2 MS+0.1 mg/L NAA。     

小菊悬浮细胞辐射育种初步研究Ⅰ.基因型、外植体和诱导愈伤组织培养基的选择

以小菊七月红、金莲、七月蜂黄、矮红、盏黄5个品种的叶片为外植体,用MS+2.0 mg@L-1 2,4-D+0.2 mg@L-1 6-BA诱导愈伤组织培养基和MS+2.0 mg@L-1 6-BA+0.1 mg@L-1 NAA分化培养基,选出分化能力较强的品种七月红.再以七月红的叶片上部、叶片下部、叶柄、茎段为外植体,在不同培养基(B5、MS)上诱导胚性愈伤组织,发现茎段最易诱导出胚性愈伤组织,培养基以B5添加0.5 mg@L-1 2,4-D+0.2 mg@L-1 6-BA,MS添加1.0 mg@L-1 2,4-D+0.2 mg@L-1 6-BA效果较好;在添加2.0 mg@L-1 6-BA和0.1 mg@L-1 NAA的分化培养基(B5、MS)上,茎段再生能力较理想.     

生姜茎尖脱毒培养研究

以生姜茎尖为外植体进行培养,筛选诱导愈伤组织和芽分化的最佳培养基。结果表明,消毒时间对茎尖成活率影响很大,以0.1%HgCl2消毒10 min最为有效。不同的激素配比对生姜试管苗再生诱导有明显影响,诱导茎尖愈伤组织生长及分化的最适培养基为1/2MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.1 mg/L,丛生芽继代培养增殖效果较好的培养基为1/2MS+BA2.5mg/L+NAA0.1 mg/L+KT1.0 mg/L。     

金艳猕猴桃组织培养适宜条件筛选

以金艳猕猴桃嫩叶、茎段作为外植体材料,研究不同消毒体系灭菌效果及不同激素组合对愈伤组织、不定芽、生根等诱导的影响。结果表明,叶片消毒相对最优方法为70%乙醇30 s+0.1%HgCl_2 3 min,茎段消毒相对最优方法为70%乙醇30 s+0.1%HgCl_2 4 min;茎段比叶片更容易染菌,而叶片比茎段更容易褐化;愈伤组织诱导时,叶片最优激素组合为6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L,茎段为6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L;不定芽诱导最优激素组合为6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,在此条件下不定芽长势较快,含单芽或多芽,有少量愈伤组织;最适生根培养基为1/2MS+IBA 0.8 mg/L,生根率达到87.78%,植株生长健壮,根密、多。     

生姜芽的组培快繁

[目的]寻找生姜芽组培快繁的最佳方案。[方法]以MS为基础培养基,设计生姜芽组培快繁的两条途径,选择生姜芽组培快繁的最佳培养基配方。[结果]结果表明,茎尖→芽最适培养基为:改良MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;茎尖→愈伤组织→芽,茎尖诱导愈伤组织的最适培养基为:改良MS+2,4-D 2.0 mg/L+KT 1.0 mg/L,愈伤组织诱导芽分化的最适培养基为:改良MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L。采用超净工作台上用75.0%酒精30 s+10.0%NaClO 15 min+0.1%HgCl210 min+50 ug/L青霉素与台外消毒相结合对外植体进行表面消毒,去污效果最佳。[结论]对愈伤组织进行切割并继代培养后再诱导芽分化,可获得较大的增殖倍数。     

绿萝组织培养与快繁技术

[目的]研究绿萝组培快繁技术要点,为绿萝再生体系建立和工厂化生产提供技术支持.[方法]以绿萝叶片和无节茎段为外植体,以MS为基本培养基,探讨不同浓度的激素组合(1.0~3.0 mg/L 6-BA、0.1~0.3 mg/L NAA、0.1~0.3mg/L IBA)对愈伤组织诱导及其分化、不定芽诱导、生根培养等的影响.[结果]两种外植体均能产生愈伤组织,但茎段产生愈伤组织较快,产生不定芽也快.叶片诱导愈伤组织的最适培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L,愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L.茎段诱导愈伤组织及其分化的最适培养基均为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2 mg/L,最适生根培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg/L.[结论]绿萝叶片和茎段可作为愈伤组织培养的较好外植体,茎段培养效果优于叶片.     

桔梗叶片愈伤组织诱导分化研究

以桔梗叶片作为外植体,采用酒精和氯化汞组合消毒,研究不同消毒时间对消毒效果的影响,并比较不同浓度激素下愈伤组织诱导及分化的变化。结果表明,桔梗外植体最适合的消毒方案为:酒精消毒30 s后氯化汞消毒6 min;桔梗叶片愈伤组织诱导的最适培养基为:1/2MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L;桔梗叶片诱导分化的最适培养基为:1/2MS+6-BA 0.1mg/L+NAA 0.2mg/L,此培养基培养,桔梗不定芽的诱导分化率能达到37%,且不定芽数量多,芽强壮。     

国兰灭菌与原球茎诱导初探

取国兰的侧芽为外植体,在75%酒精+0.2%HgCl2消毒法污染率最低,萌动率最高。同时在添加不同浓度的6-BA和NAA的MS固体培养基上诱导国兰愈伤组织,比较国兰愈伤组织的出愈率,其中当外植体在MS+1.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA+0.1%活性炭+7.5～8g/L琼脂+3%蔗糖+25g/L香蕉泥的培养基上时,愈伤组织出愈率最好。比较切割方式对原球茎恢复周期的影响,其中以原球茎顶端向基部压碎法的恢复速度最快。     

柑橘品种茎段离体培养条件的优化及微芽嫁接试验

[目的]优化柑橘品种茎段离体培养条件并开展微芽嫁接(试管内茎尖嫁接)试验,为培育无毒柑橘组培种苗提供参考依据.[方法]对温州蜜柑和纽荷尔脐橙成年态枝条进行不同浓度HgCl2和NaClO消毒,筛选适宜组培利用的柑橘外植体消毒方式、采集季节及激素配比;开展嫁接砧木种子消毒和微芽嫁接试验,分析两个柑橘品种微芽嫁接的萌发状况.[结果]温州蜜柑外植体的最适消毒方法为70%酒精+1.0‰HgCl2消毒6 min处理两次;纽荷尔脐橙外植体的最佳消毒方法为70%酒精+15.0%NaClO处理两次;采集成年态柑橘茎段进行离体培养的最佳时期为夏季;在MS固体培养基中添加1.0 mg/L 6-苄氨基嘌呤(6-BA)和0.1 mg/L萘乙酸(NAA)均有利于两个柑橘品种外植体腋芽萌发.砧木种子最适消毒方法为剥去内外种皮+70%酒精+1.5%NaClO溶液处理;两个柑橘品种微芽嫁接的萌发率较低,分别为10.00%和6.67%,但嫁接成功后柑橘苗长势良好.[结论]于夏季剪取温州蜜柑和纽荷尔脐橙成年态枝条带芽茎段,分别经70%酒精+1.0‰HgCl2消毒6 min处理两次、70%酒精+15.0%NaClO处理两次,在添加1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA的MS固体培养基中接种,可获得最佳的培养效果.利用微芽嫁接技术嫁接的柑橘苗长势良好,可在提高其嫁接萌发率基础上推广应用.     

甘蓝型油菜DH系培养技术优化

[目的]研究消毒处理方式、培养基成分和胚状体培养方法对油菜游离小孢子培养的影响。[方法]以B5培养基为基础培养基,添加不同浓度的蔗糖、琼脂及不同激素组合进行试验,对油菜DH系的组培技术进行优化。[结果]含2%Cl-的NaClO消毒15 min与0.1%HgCl2消毒10 min培养效果较好,都能达到良好的消毒和产胚效果;在游离小孢子提取的过程中,B5液体培养基中蔗糖浓度为2%时能达到较好的产胚效果;小孢子培养首先在32℃暗培养5~7 d,然后25℃暗培养12~15 d,最后25℃振荡暗培养3~7 d胚状体就可完全成熟;1/2 MS培养基(附加1.2%琼脂+0.02%NAA+2.0 mg/L6-BA+3.4 mg/LAgNO3+2%蔗糖)有利于胚的分化和苗的形成,其褐化程度小,玻璃化程度低。[结论]该研究结果有助于甘蓝型油菜DH系的规模化生产及高效转化体系的建立。     

甘蓝型油菜DH系培养技术优化(英文)

[Objective] The aim of this study is to reveal the disinfectants and disinfection methods,medium components,and embryoid culture method on dissociative microspore culture.[Method] B5 as basic medium appended with different concentrations of sucrose,agar and different hormone combinations was used to optimize the culture technique for DH line in Brassica napus L.[Result] Both the 15 min disinfection of NaClO containing 5% Cl-and 10 min disinfection of 0.1% HgCl2 performed well in disinfection and subsequent embryo production;in the extraction process of dissociative microspores,B5 medium containing 2% sucrose could achieve a good embryo production effect;under dark condition microspores were firstly incubated at 32 ℃ 5-7 d,then at 25 ℃ 12-15 d,and finally transferred to 25 ℃ oscillator(60-65 r/min)for 3-7d,when the embryoid would become full ripeness;1/2MS medium appended with 1.2% agar,0.02% NAA,2.0 mg/L 6-BA,3.4 mg/L AgNO3 and 2% sucrose was helpful for embryoid differentiation and plantlet generation,presenting low degree of browning and slight vitrification.[Conclusion] The results may facilitate DH Line in rape production in large scale and high efficient transformation system.     

甘蓝型油菜DH系培养技术优化(英文)

[Objective] The aim of this study is to reveal the disinfectants and disinfection methods,medium components,and embryoid culture method on dissociative microspore culture.[Method] B5 as basic medium appended with different concentrations of sucrose,agar and different hormone combinations was used to optimize the culture technique for DH line in Brassica napus L.[Result] Both the 15 min disinfection of NaClO containing 5% Cl-and 10 min disinfection of 0.1% HgCl2 performed well in disinfection and subsequent embryo production;in the extraction process of dissociative microspores,B5 medium containing 2% sucrose could achieve a good embryo production effect;under dark condition microspores were firstly incubated at 32 ℃ 5-7 d,then at 25 ℃ 12-15 d,and finally transferred to 25 ℃ oscillator(60-65 r/min)for 3-7d,when the embryoid would become full ripeness;1/2MS medium appended with 1.2% agar,0.02% NAA,2.0 mg/L 6-BA,3.4 mg/L AgNO3 and 2% sucrose was helpful for embryoid differentiation and plantlet generation,presenting low degree of browning and slight vitrification.[Conclusion] The results may facilitate DH Line in rape production in large scale and high efficient transformation system.     

粗勒草茎段的消毒灭菌和不定芽诱导的研究

研究不同灭菌处理、不同基本培养基、不同激素种类及浓度对粗勒草“黑美人”和“银皇后”两品种茎段不定芽诱导的影响,结果表明：“黑美人”：以75％酒精1min＋0．1％HgCl2 20min的灭菌效果最佳,污染率为25．56％;以MS＋6-BA4．0mg／L＋NAA0．05mg／L的诱导效果最好;“银皇后”：以75％酒精1min＋0．1％HgCl2 22min的灭菌效果最佳,污染率为29．6％;以MS＋6-BA4．0mg／L＋NAA0．1mg／L的诱导效果最好。     

贵州特有爬竹的组织培养研究

以无菌苗率和优良芽率为主要指标,通过对比不同基本培养基和6-BA浓度的试验,以探索爬竹侧芽适宜的消毒方法和诱导培养基。结果表明,爬竹侧芽适宜的消毒方法为:75%酒精处理1 min后再用0.1%升汞处理8～10 min,无菌苗率可达75%左右;采用3/5MS基本培养基时优良芽率最高,显著优于MS、3/4 MS及1/4 MS;在不同激素组合下,6-BA浓度为2 mg/L时优良芽率最高,当6-BA浓度高于2 mg/L时,优良芽率呈显著性减小。     

马铃薯新品种桂农薯1号组培快繁研究

【目的】探索马铃薯新品种桂农薯1号组培快繁技术,为实现工厂化生产脱毒种薯提供技术支撑。【方法】采用茎尖培养脱毒法,以马铃薯顶芽为外植体,按不同灭菌时间进行单因子(3%NaClO和0.1%HgCl2)和双因子(75%酒精和0.1%HgCl2)消毒处理,再剥取0.3~0.7 mm茎尖接种到分别添加了不同浓度GA3、6-BA及6-BA和NAA的诱导培养基上诱导成苗。将诱导出的苗进行单腋芽切段快繁,并接种到添加有6-BA和PP333的单因子及双因子组合MS培养基中进行无菌苗继代增殖。【结果】75%酒精+0.1%HgCl2双因子灭菌较单因子3%NaClO和0.1%HgCl2效果好,污染率降至21.67%;茎尖诱导培养中,GA3和6-BA均能诱导茎尖萌芽,诱导趋势均先增后减,而以1.5 mg/L 6-BA和0.2 mg/L NAA配合,诱导率达53.67%;增殖壮苗阶段,0.1 mg/L PP333和2.5 mg/L 6-BA配合,增殖倍数达6.59倍,且苗长势好,茎粗壮、叶色正常。【结论】桂农薯1号外植体消毒最佳灭菌处理为:75%酒精2 min+0.1%HgCl211 min;最佳茎尖诱导配方为:MS+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA;适合继代增殖壮苗培养基为:MS+2.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L PP333。     

百香果茎段愈伤组织诱导分化研究

本研究以百香果茎段为试验材料,采用不同的消毒方法,研究不同消毒处理对百香果消毒效果的影响,并筛选出愈伤组织诱导分化的最佳培养基配方。结果表明：百香果茎段使用洗衣粉溶液浸泡5min,结合75%酒精30 s+HgCl212min的消毒效果最好,污染率最低仅20%,愈伤组织诱导与分化的最适培养基为：MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,诱导率为70%,分化率为40%。此研究为百香果脱毒及组培快繁体系的建立奠定基础。     

驼峰藤组织培养及快速繁殖

以驼峰藤(Merrillanthus hainanensis)带芽茎段为外植体,研究不同消毒方法及植物生长调节剂对其离体培养及植株再生的影响,建立了驼峰藤离体快繁技术体系。结果表明,带芽茎段的最佳消毒灭菌方法为75%乙醇浸泡20 s,0.1%HgCl_2浸泡10 min;腋芽诱导的最适宜培养基为MS+2.00 mg/L 6-BA+0.10mg/L NAA+0.10 mg/L GA_3,诱导率可达81.11%;适宜腋芽增殖的培养基为MS+3.50 mg/L 6-BA+0.15mg/L NAA,增殖系数可达6.24;最佳生根培养基为1/2MS+0.30 mg/L NAA,生根率为84.44%,该结果为驼峰藤的快繁提供了一条新途径。