不同锌源对母羊和羔羊体液免疫及羔羊肠道黏膜组织形态和免疫的影响

本试验旨在研究妊娠母羊饲粮中添加不同锌源对母羊和羔羊体液免疫及羔羊肠道组织形态、黏膜免疫功能的影响。选取体重(38.1±9.7)kg、胎次(第2~3胎)相近的怀双羔湘东黑山羊21只,随机分为3组,每组7个重复,每个重复1只羊。各组分别在基础饲粮中添加60 mg/kg的硫酸锌、蛋氨酸螯合锌和甘氨酸螯合锌。基础饲粮中锌含量为22 mg/kg,各试验饲粮中锌含量均为82 mg/kg。预试期7 d,正试期45 d。分别于母羊产前第10天及羔羊出生后的第30、60和100天采集颈静脉血,测定妊娠母羊和羔羊血浆免疫球蛋白(Ig)和细胞因子含量;羔羊在出生后的第100天进行屠宰并采集肠道组织,测定羔羊肠道组织形态及肠道黏膜Ig、细胞因子含量。结果表明:1)母羊产前第10天,甘氨酸螯合锌组血浆白细胞介素(IL)-6和IL-8含量显著高于硫酸锌组和蛋氨酸螯合锌组(P<0.05)。2)羔羊出生后第30天,蛋氨酸螯合锌组血浆IgG含量显著高于甘氨酸螯合锌组(P<0.05)。羔羊出生后第60天,硫酸锌组和蛋氨酸螯合锌组血浆IL-4含量显著高于甘氨酸螯合锌组(P<0.05),蛋氨酸螯合锌组血浆IL-6、IL-22含量显著高于硫酸锌组和甘氨酸螯合锌组(P<0.05),甘氨酸螯合锌组血浆IgG含量显著高于蛋氨酸螯合锌组和硫酸锌组(P<0.05)。羔羊出生后第100天,各组之间血浆细胞因子和Ig含量均差异不显著(P>0.05)。3)各组之间空肠和回肠的绒毛宽度、绒毛高度、隐窝深度和绒毛高度/隐窝深度无显著差异(P>0.05)。4)蛋氨酸螯合锌组和甘氨酸螯合锌组空肠黏膜IL-6、IL-22、IL-23和IgG含量显著高于硫酸锌组(P<0.05),甘氨酸螯合锌组空肠黏膜IL-4含量显著高于硫酸锌组和蛋氨酸螯合锌组(P<0.05),蛋氨酸螯合锌组空肠黏膜分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量显著高于硫酸锌组和甘氨酸螯合锌组(P<0.05)。蛋氨酸螯合锌组和甘氨酸螯合锌组回肠黏膜IL-4、IL-6、IL-23、IgM和IgG含量显著高于硫酸锌组(P<0.05),蛋氨酸螯合锌组回肠黏膜sIgA含量显著高于硫酸锌组和甘氨酸螯合锌组(P<0.05),且蛋氨酸螯合锌组回肠黏膜IgM和sIgA含量显著高于甘氨酸螯合锌组(P<0.05)。由此可见,妊娠母羊饲粮中添加蛋氨酸螯合锌和甘氨酸螯合锌能够改善羔羊体液免疫和肠道黏膜免疫功能,且蛋氨酸螯合锌优于甘氨酸螯合锌。     

不同锌源对断奶小鼠生长及机体抗氧化能力的影响

选用断奶小鼠72只作为研究对象,随机分为3组(对照组,硫酸锌组和蛋氨酸锌组),每组设4个重复。测定体重、组织锌含量及相关生理生化指标,以研究硫酸锌、蛋氨酸锌2种不同锌供给形式对机体的生长效应及抗氧化能力的影响。结果表明,硫酸锌组和蛋氨酸锌组均能不同程度地提高小鼠体重,蛋氨酸锌组小鼠体重显著高于对照组与硫酸锌组(P<0.05)。饲粮中添加硫酸锌可提高小鼠肝脏和血清中的锌含量(P>0.05);蛋氨酸锌组小鼠肝脏和血清锌含量高于对照组(P<0.05)及硫酸锌组(P>0.05)。2种锌源均显著提高碱性磷酸酶(AKP)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)活性(P<0.05),不同锌源间无明显差异(P>0.05)。添加不同的锌源不同程度地提高总抗氧化能力(TAOC)、总SOD(TSOD)、铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD)活性(P<0.05),蛋氨酸锌组TAOC、TSOD显著高于硫酸锌组(P<0.05)。添加锌显著降低NO含量(P<0.05),蛋氨酸锌效果显著强于硫酸锌(P<0.05);一氧化氮合酶(NOS)活性表现出与NO相反的趋势(P>0.05)。     

不同锌源对肉用仔鸡早期生长及免疫的影响

试验选用 1日龄Avine肉用仔鸡 75羽 ,随机分成 3组 ,每组设 5个重复 ,每重复 5羽。 1组饲喂玉米—豆粕基础日粮作为对照 ;2、 3组日粮中分别加入硫酸锌、蛋氨酸锌 40mg/kg (以锌计 )。测定试验鸡生长性能及部分免疫学指标 ,以研究不同锌源对仔鸡早期生长和免疫的影响。结果表明 ,基础日粮中添加蛋氨酸锌和硫酸锌均能有效提高仔鸡生长和改善饲料效率 ;蛋氨酸锌组效果优于硫酸锌组。添加锌能提高胫骨、胰脏中锌含量 ;蛋氨酸锌组锌增加幅度高于硫酸锌组。血清锌含量及血清AKP活性三组间无显著差异 (P >0 0 5)。添加锌对仔鸡 7日龄ANAE+ 有一定影响 (P >0 0 5) ;不同锌源对仔鸡ND抗体滴度、免疫器官指数、补体C3均无明显差异 (P >0 0 5)。     

蛋氨酸螯合锌的制备及其对蛋鹑生产性能的影响

本文介绍了蛋氨酸螯合锌的制备方法及其对蛋鹑生产性能的影响。试验结果表明 :获得蛋氨酸螯合锌的最佳条件为 :反应液蛋氨酸浓度为 6.1 2 % ,p H值为 5。运用自制的蛋氨酸螯合锌饲喂蛋鹑 ,将 66只蛋鹑随机分成 3组 ,每组基础日粮相同 , 、 组为试验组 ,分别添加0 .0 2 %的蛋氨酸螯合锌 +0 .0 2 %硫酸锌 ,0 .0 4 %蛋氨酸螯合锌。 组为对照组 ,添加 0 .0 4 %硫酸锌。试验结果表明 :各试验组与对照组相比 ,总产蛋数、总产蛋重及料蛋比均差异显著 (P<0 .0 5) ,平均蛋重及蛋中概略养分各试验组与对照组相比差异不显著 (P>0 .0 5)。     

不同锌源及其水平对肉仔鸡血清抗氧化指标的影响

试验选用1日龄爱拔益加(AA)肉仔鸡288只,按体重随机分为6个处理组,每组设4个重复,每个重复12只鸡。在基础日粮中分别添加硫酸锌、蛋氨酸锌(以锌计)30 mg/kg、60 mg/kg和90 mg/kg,研究不同锌源及其水平对肉仔鸡血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)含量、碱性磷酸酶(AKP)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响。结果表明:GSH-Px活性在锌源60 mg/kg添加量时低于其他各水平,21日龄30 mg/kg硫酸锌组与30、60 mg/kg蛋氨酸锌组差异极显著(P0.01);适量锌对肉鸡血清MDA含量有一定的增加趋势,42日龄90 mg/kg蛋氨酸锌组与60 mg/kg硫酸锌组差异极显著(P0.01);不同锌源在各组间对不同日龄肉仔鸡血清AKP活性差异均不显著(P0.05),蛋氨酸锌组AKP活性趋于稳定;同一种锌源,锌添加量为60 mg/kg时肉仔鸡血清SOD活性最高;不同日龄肉仔鸡血清SOD活性硫酸锌组间差异不显著(P0.05),蛋氨酸锌组间SOD活性差异不显著(P0.05)。研究表明,蛋氨酸锌对肉仔鸡血清抗氧化指标的改善效果优于硫酸锌。     

不同锌源及其水平对肉仔鸡免疫性能的影响

试验选用1日龄AA肉仔鸡384只,随机分成8组,每组4个重复,每个重复12只。采用2×4因子设计,选用蛋氨酸锌和硫酸锌2种锌源,设30 mg/kg、60 mg/kg、90 mg/kg、120 mg/kg 4个添加水平,考察不同的锌源和水平对肉仔鸡免疫器官指数、新城疫抗体效价和T淋巴细胞阳性率的影响。结果表明,蛋氨酸锌组的免疫器官指数均高于硫酸锌组,但各组之间差异不显著(P0.05);蛋氨酸锌组的新城疫抗体效价、T淋巴细胞阳性率均高于硫酸锌组。提示蛋氨酸锌能够提高肉仔鸡的免疫功能,适宜添加量为30~90 mg/kg。     

锌源对凡纳滨对虾生长免疫的影响

凡纳滨对虾配合饲料中添加20、40、60、80和100mg/kg硫酸锌和蛋氨酸锌。饲养4和10周称质量,并采集对虾血清、肝胰脏和肌肉,测定血清中酚氧化酶(PO)和碱性磷酸酶(AKP)活性及肝胰脏和肌肉中的锌含量。试验结果表明,锌源和锌水平影响对虾4周末体质量,但对10周末的体质量无影响。锌源和锌水平不影响血清中的PO,但硫酸锌组AKP表现出随添加量的升高而显著提高,蛋氨酸锌组AKP差异不显著。2种锌源的添加水平对肌肉中的锌含量无影响,但对肝胰脏中锌含量影响显著。生长、酶活和组织锌含量的统计结果表明,锌源之间存在显著差异,蛋氨酸锌的营养效果好于硫酸锌。饲料中蛋氨酸锌的添加量为40~60mg/kg时,凡纳滨对虾的生长和免疫效果最好。     

蛋氨酸螯合锌对绿头野鸭生产性能的影响

本试验研究蛋氨酸螯合锌对绿头野鸭生长性能及能量和蛋白质代谢的影响,探讨蛋氨酸螯合锌的最佳添加量。试验采用单因子完全随机试验设计,供试绿头野鸭54只,分为3个处理组,每组18只,设3个重复。第Ⅰ组为对照组,添加150 mg/kg硫酸锌;第Ⅱ、Ⅲ组为试验组,分别添加75 mg/kg硫酸锌 150 mg/kg蛋氨酸螯合锌3、00 mg/kg蛋氨酸螯合锌。试验期为8周,采用3层立体笼养,每周进行称重、称料,通过饲养试验、代谢试验,测定绿头野鸭生长率、耗料量及营养物质的代谢率。研究结果表明,各试验组的平均日增重显著高于对照组(P<0.05),分别提高了12.13%、11.96%,以4~7周效果最明显;能量和蛋白质代谢率均显著高于对照组(P<0.05);料肉比显著低于对照组;从试验的总体效果看,添加75 mg/kg硫酸锌 150 mg/kg蛋氨酸螯合锌效果较好。因此,提倡蛋氨酸螯合锌与硫酸锌混合饲喂绿头野鸭效果好,成本低,建议推广使用。     

锌源对凡纳滨以虾生长免疫的影响

凡纳滨对虾配合饲料中添加20、40、60、80和100mg／kg硫酸锌和蛋氨酸锌。饲养4和10周称质量，并采集对虾血清、肝胰脏和肌肉，测定血清中酚氧化酶（PO）和碱性磷酸酶（Al（P）活性及肝胰脏和肌肉中的锌含量。试验结果表明，锌源和锌水平影响对虾4周末体质量，但对10周末的体质量无影响。锌源和锌水平不影响血清中的PO，但硫酸锌组AKP表现出随添加量的升高而显著提高，蛋氨酸锌组AKP差异不显著。2种锌源的添加水平对肌肉中的锌含量无影响，但对肝胰脏中锌含量影响显著。生长、酶活和组织锌含量的统计结果表明，锌源之间存在显著差异，蛋氨酸锌的营养效果好于硫酸锌。饲料中蛋氨酸锌的添加量为40～60mg／kg时。凡纳滨对虾的生长和免疫效果最好。     

氨酸螯合锌对野鸭免疫器官及血液指标的影响

研究蛋氨酸螯合锌对绿头野鸭免疫器官指数及血液指标的影响,探讨蛋氨酸螯合锌的最佳添加剂量。试验采用单因子完全随机试验设计,供试野鸭54只鸭,分为3个处理组,第Ⅰ组为对照组添加150 mg/kg硫酸锌;第Ⅱ组添加75 mg/kg硫酸锌+150 mg/kg蛋氨酸螯合锌,第Ⅲ组添加300 mg/kg蛋氨酸螯合锌。结果表明:各试验组的免疫器官指数均显著高于对照组;尿素氮水平明显降低,其他血液指标均无明显变化。     

新城疫病毒F48E9感染CEF细胞特异性表达基因的筛选鉴定

分别以NDV F48E9和La Sota株感染鸡胚成纤维细胞,于感染后8 h提取NDV感染CEF细胞总RNA,通过mRNA差异显示技术筛选病毒感染诱导表达的特异性基因.主要方法是先以锚定引物经反转录后,然后以9～10 bp随机引物为上游引物,以锚定引物Oligod(T)18为下游引物,进行PCR扩增,PCR产物采用8%的尿素变性PAGE胶电泳进行分离鉴定.对于特征性差异带进行第二次PCR扩增,克隆后测定其核苷酸序列.结果我们发现数个差异条带,选取差异带在500 bp以内的条带,经测序后显示经NDV F48E9感染后,有一条差异条带特异性表达的基因所编码的蛋白与Receptor(TNFRSF)-interacting serine-threonine kinase 2有47 %同源,是一个新基因,其蛋白功能不明确,有可能和细胞的凋亡有关.     

牛睾丸差异表达基因Septin10的筛选、鉴定及组织表达研究

本研究旨在筛选出决定或影响公牛睾丸周长(SC)的基因片段,并研究其功能和表达特征,为今后种公牛的选育提供理论基础。用mRNA差异显示技术从睾丸周长极显著差异(P0.01)的睾丸组织中筛选差异表达的基因片段,并用反Northern杂交及荧光定量的方法鉴定筛选的结果,研究筛选出基因的组织表达谱。结果,筛选出1条差异表达片段A71,经测序和BLAST分析发现该片段与牛Septin10基因高度同源(99%),且该基因在肝脏等9个组织中都有表达,在2组睾丸组织中相对表达量差异显著(P0.05)。分析结果表明,Septin10基因是牛睾丸差异表达基因,可作为一个研究牛繁殖性状的候选基因。     

小鼠新的印迹基因MPI的克隆及其特征

ＤＤＲＴ－ＰＣＲ技术用于寻找小鼠印迹基因的原理,主要通过观察小鼠亲本及它们杂交后代等位基因的多态表达,就能清楚区分基因的母源表达与父源表达,从而筛选出印迹基因。本研究通过ＤＤＲＴ－ＰＣＲ技术克隆到了一个新的印迹基因,并对其染色体定位,基因结构和表达等特性进行了初步研究。     

绵羊单卵反转录平台的优化及应用

为了研究发育生物学中单个卵母细胞基因的表达,优化由单卵得到质量良好cDNA的操作步骤,试验应用试剂盒并增加质控环节,得到优质cDNA,同时将cDNA试用于差异显示PCR(DDRT-PCR)。结果表明:该试验方法得到的cDNA稳定性、重复性、完整性都很可靠。     

球虫抗药性分子生物学检测技术的建立

选择在敏感虫株中沉默、抗药虫株中表达的特异序列AGD5设计检测引物，采用RT—PCR方法。以总RNA反转录的cDNA为模板，RT—PCR方法能够鉴别马杜霉素抗药虫株和3株马杜霉素敏感虫株（2株对所有药物敏感的不同地理株，1株地克珠利抗药性虫株对马杜霉素敏感），此鉴定结果与鸡体试验的结果一致，说明敏感虫株和抗药虫株在该序列上的差异发生在转录水平。而以卵囊总DNA为模板的PCR方法不能鉴别敏感和马杜霉素抗药性虫株。     

北京鸭/番鸭杂交体系肝脏组织基因表达差异的研究

以番鸭、北京鸭及其杂交后代半番鸭为研究对象,利用mRNA差异显示技术得到肝脏组织基因表达差异图谱。mRNA差异显示表明,肝脏组织的基因表达在纯种群和杂种群之间存在着显著的质和量的差异;5对引物组合显示出41条差异带;分属于7类10种基因表达模式,其中量的差异有3类4种,质的差异有4类6种。这些基因差异表达模式说明了杂种的基因表达调控方式发生了变化,可能是mRNA水平上杂种优势形成的分子遗传基础。     

Differential transcription of the bovine AMPD3 gene in single blastocysts cultured under various oxygen tensions

Studying gene expression during the early embryonic stages of in vitro culture is essential and of special interest, not only to gain insights in embryo development but also to find candidate genes that can be used as markers to assess embryo quality. Using differential display RT‐PCR expression of AMPD3 coding for AMP deaminase 3 was found in bovine blastocysts cultured in vitro only under 2% but not under 5 and 20% oxygen tensions. Mapping of this gene to bovine chromosome 15 confirmed its identity. The differential expression of bovine AMPD3 was confirmed by RT‐PCR with specific primers.