耐低湿松毛虫赤眼蜂对苹果蠹蛾卵的寄生能力及适应性

松毛虫赤眼蜂是一种很好的生防因子，在防治苹果蠹蛾时具有很高的适用性。为提高耐低湿松毛虫赤眼蜂对苹果蠹蛾的控制效果，以苹果蠹蛾卵为寄主卵，通过赤眼蜂的寄生试验研究了寄主卵日龄和密度对耐低湿松毛虫赤眼蜂寄生效果的影响，完善甘肃地区田间赤眼蜂释放技术以减少生产成本。结果表明，松毛虫赤眼蜂对2日龄苹果蠹蛾卵有更好的寄生选择，当蜂卵比为1∶30时，寄生率最大，达82.22%。通过赤眼蜂和苹果蠹蛾卵的寄生选择关系，确定了最佳蜂卵比为1∶30，此比值下，雌蜂的单蜂寄生效能约为 26.50 粒/蜂，苹果蠹蛾卵的被寄生率约为70%，达到较好的寄生效果。经实验室长期耐低湿处理的松毛虫赤眼蜂能更好地适应不利的环境因子，其在西北干旱地区有更高的适用性。建议在田间使用时，可通过虫情监测判断苹果蠹蛾产卵时间和数量，然后可确定在苹果蠹蛾高峰产卵期48 h后释放赤眼蜂，且释放的蜂量应保持蜂卵比值约为1∶30。     

赤眼蜂生产工厂化配套设备的研究

利用赤眼蜂防治玉米螟是一项已被生产实践证明了的安全、有效、经济的生防措施。该文提出了机械化人工繁殖赤眼蜂的配套设备,解决了繁蜂生产中绿卵的有效清除、非寄生卵的快速分离及人工气候控制等问题。     

土壤微生物分子生态学研究方法

主要介绍了目前在土壤微生物生态学研究中的常用分子生物学方法,包括核酸探针杂交技术、基于PCR技术的研究方法、特异DNA片段的序列分析、DNA扩增片段梯度凝胶电泳检测技术等。     

一种不依赖酶切位点的分子克隆方法

本研究介绍一种分子克隆的新方法。该方法要求在PCR引物设计时,目的片段上游引物的5＇端和下游引物的5＇端各设计约25 bp与目标载体末端同源的序列,或目的载体反向游引物的5＇端和正向引物的5＇端各设计约25 bp与目标片段同源的序列,以便进行融合PCR,PCR反应扩增目的片段后,与载体进行融合PCR。用DpnⅠ消化原始甲基化模板,然后进行转化和重组子鉴定。结果表明利用该方法成功将目的片段插入载体。证明这是一种简便、通用、高效并值得推广的分子克隆的新方法。该方法不需要骨架载体上的特异性酶切位点,特别适用于插入片段中无限制性酶切位点的载体改造;该方法还可以引入定点突变,可便捷构建分析启动子功能等需引入定点突变的载体;该分子克隆方法还可以实现基因的无缝克隆。     

五种杀虫剂对卵寄生性天敌广赤眼蜂室内安全性评价

在实验室条件下分别用药膜法、寄主卵块喷雾法和盆栽法测定了苏云金杆菌等5种杀虫剂菜田防治推荐浓度对广赤眼蜂5种虫态的毒性及雌蜂的残留毒性。不同农药对广赤眼蜂各虫态的毒性存在差异, 对其存活、羽化和寄生能力等有不同程度的影响, 其中对成蜂的毒性最强。苏云金杆菌和啶虫脒对广赤眼蜂5种虫态的杀伤力较低, 对羽化蜂的寿命和翅的发育影响较小或无影响, 同时施药后的残效期较短, 对成蜂的存活和寄生能力的影响较小。阿维菌素除卵和幼虫期处理对广赤眼蜂无影响或影响轻微外, 预蛹和蛹期处理, 羽化率降低, 羽化后雌蜂寿命缩短, 前翅发育不全比例升高, 其不良影响随蜂的发育呈增大趋势; 此外, 喷药后7 d其残留农药对雌蜂的存活和寄生能力仍有较大影响。高效氯氟氰菊酯卵期至蛹期处理广赤眼蜂能显著降低该蜂的羽化率, 成蜂期处理的死亡率在70%以上, 但该药残留毒性期较短, 喷药后5 d成蜂存活和寄生能力基本恢复正常。毒死蜱对各虫期的广赤眼蜂均有极强的杀伤力, 喷药后10 d仍有很高的残留毒性。总之, 苏云金杆菌和啶虫脒对广赤眼蜂无毒或毒性较低, 是生防区理想的配合药剂;阿维菌素和高效氯氟氰菊酯毒性中等, 使用时要尽量避开赤眼蜂成蜂活动期;毒死蜱毒性极强, 生防区应禁止使用。     

五种杀虫剂对卵寄生性天敌广赤眼蜂室内安全性评价

在实验室条件下分别用药膜法、寄主卵块喷雾法和盆栽法测定了苏云金杆菌等5种杀虫剂菜田防治推荐浓度对广赤眼蜂5种虫态的毒性及雌蜂的残留毒性.不同农药对广赤眼蜂各虫态的毒性存在差异, 对其存活、羽化和寄生能力等有不同程度的影响, 其中对成蜂的毒性最强.苏云金杆菌和啶虫脒对广赤眼蜂5种虫态的杀伤力较低, 对羽化蜂的寿命和翅的发育影响较小或无影响, 同时施药后的残效期较短, 对成蜂的存活和寄生能力的影响较小.阿维菌素除卵和幼虫期处理对广赤眼蜂无影响或影响轻微外, 预蛹和蛹期处理, 羽化率降低, 羽化后雌蜂寿命缩短, 前翅发育不全比例升高, 其不良影响随蜂的发育呈增大趋势; 此外, 喷药后7 d其残留农药对雌蜂的存活和寄生能力仍有较大影响.高效氯氟氰菊酯卵期至蛹期处理广赤眼蜂能显著降低该蜂的羽化率, 成蜂期处理的死亡率在70%以上, 但该药残留毒性期较短, 喷药后5 d成蜂存活和寄生能力基本恢复正常.毒死蜱对各虫期的广赤眼蜂均有极强的杀伤力, 喷药后10 d仍有很高的残留毒性.总之, 苏云金杆菌和啶虫脒对广赤眼蜂无毒或毒性较低, 是生防区理想的配合药剂;阿维菌素和高效氯氟氰菊酯毒性中等, 使用时要尽量避开赤眼蜂成蜂活动期;毒死蜱毒性极强, 生防区应禁止使用.     

松毛虫赤眼蜂寄主卵的辐照效应

本文研究了松毛虫赤眼蜂（ＴｒｉｃｈｏｇｒａｍｍａｄｅｎｄｒｏｌｉｍｉＭａｔｓｕｍｕｒａ）的寄主─—柞蚕（Ａｎｔｈｅｒａｅａｐｅｒｎｙｉ）蛾卵经过电子束辐照后的生物学性能、表面微观形态及其微生物的辐照效应。结果表明，电子束辐照处理不会引起柞蚕卵表面微观形态和主要成分含量的显著变化；辐照能明显减少卵的微生物含量，有消毒灭菌作用。柞蚕卵的生物学性能没有因辐照受到不利影响。相反，辐照使卵保持其生物学性能的时间明显延长。     

DIG和碱性磷酸酶标记cDNA探针检测番木瓜PRSV的比较

利用地高辛(DIG)标记和碱性磷酸酶直接标记的cDNA探针核酸分子杂交及RT－PCR方法对番木瓜环斑病毒(PRSV)进行了检测。根据Genebank发表的PRSV中国Sm株系的外壳蛋白基因序列，设计特异引物，以美中红（Carica papaya L. cv. Meizhonghong ）带病样品的RNA为模板进行RT-PCR扩增反应,将其目的cDNA片段克隆到pGEM-T easy 质粒载体上，并测序。以重组质粒作模板，用PCR－DIG标记方法制备cDNA探针，另一种非放射性探针是经凝胶电泳分离、纯化cDNA片段，用碱性磷酸酶直接进行标记。结果表明，(1)美中红No.2序列与中国优势株系Sm的同源性为94.7%；(2) DIG标记的三种cDNA探针（861bp，455bp和215bp）对样品的总RNA检测结果是一致的, 且861bp的探针杂交斑点最为清晰，上述核酸杂交结果与RT－PCR检测结果相符, 核酸分子杂交检测的灵敏度和特异性能满足常规检测的需要；(3)碱性磷酸酶直接标记861bp的cDNA探针可进行PRSV的斑点杂交检测，而455bp的cDNA片段用碱性磷酸酶直接标记时，不能获得有效的杂交结果；(4)本试验还用DIG标记探针对叶脉进行了印迹杂交检测,结果与RT－PCR检测结果相符。     

与黄瓜感花叶病毒病基因连锁的分子标记

本研究以黄瓜(Cucumis sativus L.)高感黄瓜花叶病毒(CMV)和高抗CMV亲本组合(HZL04-1×F-3)的F2分离群体为试材,采用极端个体分组法和AFLP技术筛选与黄瓜抗CMV基因连锁的分子标记.AFLP引物组合E22M88在抗病组和感病组间约200 bp处表现多态性.经F2单株分析,在感病亲本和感病单株中扩增出了约为200 bp的特异片段,而抗病亲本和抗病个体无此条带.该特异标记与CMV抗性基因相连锁,遗传距离为9.74 cM.测序结果显示,目标片段的大小为202 bp,并将该标记转换为了序列特征化扩增区域(SCAR)标记.提供了黄瓜材料CMV抗性鉴定的分子方法和手段,可用于分子标记辅助育种.     

~(60)Co γ射线低剂量辐照对螟黄赤眼蜂生活力的刺激作用

在卵期用 1 0、70、1 5 0和 30 0mGy60 Coγ射线处理 ,对赤眼蜂的生活力基本没有影响 ;而在蛹后期用 1 5 0mGy和 30 0mGy处理 ,导致了盟黄赤眼蜂F1代的雌雄比例显著提高。扩大范围 ,用 1 0 0～ 30 0mGy的剂量处理对螟黄赤眼蜂当代的平均每寄主的棉铃虫卵产蜂数、雌雄成蜂性比、雌蜂寿命和寄生率无显著影响 ;而这些处理的F1代和F2 代的雌蜂成蜂性比都显著高于对照 ,并且每寄生棉铃虫卵的产蜂数量显著增加 ,到F3 代这些影响消失 ;1 0 0 0和 2 0 0 0mGy的辐射处理对螟黄赤眼蜂当代的生活力有一定的刺激作用 ,表现在雌蜂成蜂性比和寄生率显著提高 ,但每寄生的棉铃虫卵的平均产蜂数和雌成蜂的平均寿命都显著地低于对照 ,但随后连续 3代均与对照无显著差异     

中国拟盘多毛孢属的新组合种(Ⅳ)

按近代 Steyaert(1 95 3年 )和 Sutton(1 980年 )有关拟盘多毛孢属 (Pestalotiopsis)的分类体系和有关鉴定性状 ,本文首次报道中国拟盘多毛孢属 8个不同的新组合种。这 8个新组合种是 :(1 )寄生在石榴叶部的石榴拟盘多毛孢 Pestalotiopsispunicae(Husei) Y.X.Chen et Z.W.Wang comb.nov.;(2 )寄生在草莓叶部的阿寇东拟盘多毛孢 Pestalotiopsis jeolikotonis(S.K.Bose) Y.X.Chen et G.Wei comb.nov.;(3 )寄生在山楂叶片、幼苗、枝条与主干等部位的山楂拟盘多毛孢 Pestalotiopsis crataegine(Ell. &EV.Bull)Y.X.Chen et Z.W.Wang comb.nov.;(4 )寄生在木菠萝叶部和果实等部位的木菠萝拟盘多毛孢Pestalotiopsis artocarpi(Nag Raj&Kendric) Y.X.Chen et G.Weicomb.nov.;(5 )寄生在酸藤果叶部的酸藤果拟盘多毛孢 Pestalotiopsis embeliae (M.S.Patil &Theite) Y.X.Chen et G.Weicomb.nov.;(6)寄生在海葡萄叶部的海葡萄拟盘多毛孢 Pestalotiopsiscoccolobae(Ell.et EV.Bull) Y.X.Chen et G.Wei comb.nov.;(7)寄生在华榛叶部的华榛拟盘多毛孢 Pestalotiopsiscoryli(Roster) Y.X.Chen et G.Weicomb.nov.;(8)寄生在荔枝叶部的荔枝拟盘多毛孢 Pestalotiopsislitchii (Sawada) Y.X.Chen et G.Wei comb.nov.     

四种钻蛀性龙眼梢、果害虫的空间分布及种群动态

在福建省农业科学院果树所资源圃，从1999到2000年对荔枝尖细蛾（Conopomorpha litchielle Bradly)、荔枝蒂蛀虫（Conopomorpha sineusis Bradly)、龙眼亥麦蛾（Hypitima longae Yang et Chen)和桃蛀螟（Dichocrocis punctiferalis Guenee)4种钻蛀性龙眼梢、果害虫的空间分布和种群动态进行调查,结果表明，4种害虫均在向南方位分布较多；荔枝尖细蛾幼虫在5、6、10月以第1代、第2代和第8代分别在龙眼枝梢上形成3个高峰期；荔枝蒂蛀虫幼虫在8、9月以第5、6、7代分别在龙眼枝梢和果穗上形成高峰期；龙眼亥麦蛾在6、7月份以第2代在枝梢和果穗上形成高峰期；桃蛀螟在8、9月份以第3、4代在龙眼成熟期数量最多。     

烟粉虱B型及二个非B型种群的SCAR分子标记

用随机引物H16对浙江采集的烟粉虱(Bemisia tabaci)B型和2个非B型种群进行RAPD分子标记，结果表明: B型、非B型ZHJ-1和非B型ZHJ-2 3个种群分别能稳定地扩增出446、390和1317 bp的特异性片段。将3个种群的特异性片段分别克隆和测序，根据测序结果设计3对SCAR引物。通过PCR反应条件的优化，B型、非B 型ZHJ-1和非B型ZHJ-2 3个种群各自的SCAR引物分别能扩增出本种群的特异性条带，其大小依次为439、366和1238 bp，而其它种群与温室白粉虱(Trialeurodes vaporariorum )则无扩增。     

Molecular tools for the identification of Tuber melanosporum in agroindustry

Tuber melanosporum Vitt., Tuber magnatum Pico, and Tuber uncinatum Chat. can be differentiated by their morphological characters. Fraud problems have arisen recently with the importation to Europe of truffles from China. T. melanosporum is morphologically very close, but distinct from the Chinese species [Tuber indicum (Cooke and Massee) and T. himalayense BC (Zhang and Winter)]. We have optimized molecular tools to unequivocally identify T. melanosporum. DNA extraction from ascocarps of black truffles is not straightforward. Problems to obtain pure DNA are due to high contents of phenolic compounds, melanine, and various polymers (proteins, polysaccharides, etc). These compounds coprecipitate with the DNA during extraction and strongly inhibit the PCR reaction. We have developed an efficient and reliable protocol for DNA extraction from truffle ascocarps. It was used successfully for DNA extraction from mycorrhizal root tips as well as from canned preparations of T. melanosporum. Several approaches to identify T. melanosporum by PCR were developed. Two specific primers for T. melanosporum were designed after comparison of the ITS region of this species with those of three Chinese fungi. They proved to be efficient to specifically detect the presence of T. melanosporum by PCR. The mycorrhizal status of trees inoculated with T. melanosporum but unable to produce truffles was confirmed in a single-step PCR reaction. A multiplex PCR approach was also developed with three sets of primers (including a specific one for Chinese truffles) to detect, in one PCR reaction, the presence of any other Tuber species mixed with T. melanosporum ascocarps. This optimized protocol, in association with the specific primers we designed, is applicable to quality control in the truffle industry from the production stages to final commercial products.     

60Coγ射线对杨树种子的辐射效应

以60Co γ射线辐照杨树种子,测定不同剂量对4个杨树品种M₁代的影响。结果表明：辐照处理后,各品种杨树种子的萌发和成苗明显受到抑制。不同剂量处理间根长的差异是显著的,随着剂量增加,主根生长呈明显下降趋势;幼苗高度差异不显著。鲁山杨、I-69杨和I-72杨种子的半致死剂量为200Gy,圣山杨种子的半致死剂量为250Gy。     

酶的分子定向进化及其应用

酶的分子定向进化是20世纪90年代初兴起的一种蛋白质工程的新策略,是一种在生物体外模拟自然进化过程的、具有一定目的性的快速改造蛋白质的方法。该方法引起了生物催化技术领域的又一次革命。目前分子定向进化技术已被广泛应用于工业、农业及制药业等的相关领域。本文详细综述了酶的分子定向进化的概念、过程、基本策略及其核心技术,并着重介绍了酶的分子定向进化技术在提高酶的活力、稳定性、底物特异性和对映体选择性等几方面的应用及取得的相关成果。     

Artificial neural network-based predictive model for bacterial growth in a simulated medium of modified-atmosphere-packed cooked meat products

The data of Devilieghere et al. (Int. J. Food Microbiol. 1999, 46, 57--70) on bacterial growth in a simulated medium of modified-atmosphere-packed cooked meat products was processed for estimating maximum specific growth rate mu(max) and lag phase lambda of Lactobacillus sake using artificial neural networks-based model (ANNM) computation. The comparison between ANNM and response surface methodology (RSM) model showed that the accuracy of ANNM prediction was higher than that of RSM. Two-dimensional and three-dimensional plots of the response surfaces revealed that the relationships of water activity a(w), temperature T, and dissolved CO(2) concentration with mu(max) and lambda were complicated, not just linear or second-order relations. Furthermore, it was possible to compute the sensitivity of the model outputs against each input parameter by using ANNM. The results showed that mu(max) was most sensitive to a(w), T, and dissolved CO(2) in this order; whereas lambda was sensitive to T the most, followed by a(w), and dissolved CO(2) concentrations.     

集约经营下雷竹林土壤低分子量有机酸的初步研究

低分子量有机酸对养分循环与植物生长起着重要作用,雷竹具有发达的鞭根系统,因此了解其土壤中的有机酸状况显得尤为重要。本研究采集了雷竹主产区浙江省临安市太湖源镇不同种植年限的雷竹土样,通过高效液相色谱法对其中的低分子量有机酸进行初步的定性和定量分析。结果表明:雷竹林土壤中主要含有马来酸和丁二酸,并含有少量富马酸;随着雷竹种植年限的增加,土壤中有机酸总量有增加的趋势。     

黔西北麻窝山岩溶盆地沉积的新资料

给出麻窝山岩溶盆地环境近期变化的调查结果和沉积剖面137Cs深度分布的新资料,以回复吴攀先生的《论黔西北麻窝山岩溶盆地土壤堆积记录———兼答张信宝先生》一文(简称"吴文")。新资料表明:1)麻窝山岩溶盆地20世纪70年代前不是长期的湖泊环境。1958年落水洞阻塞,盆地下部低洼地段积水成湖,1973年泄流洞打通后,湖泊消失,复为农田。2)吴文和本文的盆地沉积物137Cs深度分布空间格局基本一致,其差异主要是:吴文的盆地下部3个孔,除剖面中下部部分层位含137Cs,且137Cs含量多高于2 Bq/kg外,其他大部分层位不含137C;本文的盆地下部3个孔,除剖面中下部个别层位不含137Cs外,其他大部分层位含137Cs,且活度多低于2 Bq/kg。因吴文未给出有关137Cs量测精度的探头类型和型号、检测限值、样品测量、量测时间和测试误差等技术参数,本文没有讨论吴文和我们的剖面土层137Cs活度存在差异的原因。