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鸡病原性大肠杆菌的分离与鉴定 总被引:1,自引:1,他引:0
鸡大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的多种疾病的总称。为了掌握我市鸡大肠杆菌病病原性 ,笔者进行了病原性大肠杆菌的分离与鉴定。现报告如下。1 材料与方法1.1 菌株的分离 :共 4 0株 ,分别从当地鸡场病死鸡脏器中分离。取具有典型病理变化的鸡尸肝脏、心血、脾脏及淋巴结涂抹于普通琼脂平板上 ,置 37℃温箱中培养2 4 h后取出 ,观察单个菌落的生长情况。选取典型菌落接种到普通琼脂斜面上 ,置 37℃温箱中培养 2 4 h后 ,进行生化鉴定。1.2 菌株的鉴定1.2 .1 培养特性及形态染色 将上述纯培养物 ,接种于麦康凯和 S.S.琼脂平板、三糖铁… 相似文献
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鸡大肠杆菌病是由大肠埃希氏菌引起的一种严重威胁养鸡业发展的传染性疾病,由于其致病菌易产生耐药性,降低了治疗效果,笔者通过采用本地典型发病鸡分离出的菌株制造出的灭活菌,对预防鸡大肠杆菌病的发生起到了良好的效果,现报道如下:一、菌株的分离与培养选择典型病变的临死病鸡肝脏,以无菌操作接种于麦康凯琼脂平板上,37℃,培养24小时,挑取边缘整齐扁平或呈波状稍凸起,表面光滑,湿润深红或粉红色菌落,作进一步生化试验和致病力试验。1.生化反应及镜检挑取疑为大肠杆菌的菌落1~2个抹片进行G染色。同时接种于乳糖发酵管中,… 相似文献
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1 试验材料1.1 收集徐闻县内不同养殖场的病、死鸡 ,解剖后主要呈现肝周炎、气囊炎、心包炎、腹膜炎等病理变化。1.2 按常规方法配制普通肉汤、普通琼脂平板、麦康凯琼脂平板 ;商品化药敏试验纸 13种。2 试验方法2 .1 细菌分离培养剖检病、死鸡 ,无菌取其肝、脾、心包液和腹水划线接种于普通琼脂平板上 ,3 7℃培养 2 4小时。同时涂片、革兰氏染色、镜检。挑取普通琼脂上圆形、微隆起、湿润、半透明、对光观察有光泽的单个散在菌落划线接种于麦康凯琼脂平板上 ,3 7℃培养 2 4小时。同时挑取普通琼脂平板上对光观察有光泽的单个菌落涂片、革兰氏染色、镜检 ,观察其形状及染色特性 ;获得 6株大肠杆菌菌株。将其接种于普通肉汤中纯培养后密封 ,4℃保存备用。2 .2 生化试验取上述纯培养菌进行葡萄糖、乳糖、蔗糖等糖发酵试验、吲哚试验、H2 S试验、甲基红 (MR)试验、V -P试验、枸椽酸盐利用试验、尿素分解试验。2 .3 动物试验取上述大肠杆菌肉汤培养液腹腔接种于三日龄健康小鸡 5只 ,接种量 0 5ml/只 ,另 5只三日龄健康小鸡皮下注射 0 5ml/只灭菌水作对照 ,记录死亡数。剖检观察病变 ,并对其肝脾... 相似文献
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<正>1采集和细菌的分离培养对不同养殖户的临床型乳房炎的牛奶采样20份。采集前先用温水洗涤乳房,继用0.2%新洁尔灭,再用75%酒精棉消毒乳头,清洗消毒乳头后用消毒纸巾擦干。采样乳区弃去头3把乳,以排除部分污染的杂菌,然后以无菌操作的方法在每个乳室采集奶样约10毫升,置于灭菌试管中,0℃~4℃保存。细菌的检查,先将乳样摇匀,分别接种普通营养琼脂、三糖铁琼脂、血液琼脂、麦康凯、伊红美蓝琼脂平板,然后置37℃温箱培养18~36小时,根据情况可延长至60小时。观察平板细菌生长的情况,作好记录。根据菌落的形态特点,挑取典型菌落涂片,革兰氏染色,镜检,初步鉴定分离病菌种类,然后接种肉汤,琼脂平板进行纯培养,并根据生化特性进一步鉴定细菌。 相似文献
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猪李氏杆菌病发病率低,病死率高,经常给养猪业造成很大的经济损失。药物防治是控制本病的重要手段,而该菌易产生耐药性,这就给该病的诊断和防治带来一定困难。因此,猪场进行猪李氏杆菌病的药敏试验,对该病诊断和防治提供重要理论依据具有重要意义。1试验方法1.1病原的分离培养无菌取心、肝、肺、脾、淋巴结和脑等组织,分别接种于普通琼脂、鲜血琼脂、麦康凯琼脂平板培养基上,37℃需氧培养24h,观察生长情况:该菌在鲜血平板上菌落呈淡灰色、细小、透明、光滑、边缘整齐,并有窄窄的β型溶血环;在普通培养基上培养24h后,可形成直径为0.15~1.00mm、圆形、灰色、透明、边缘整齐的菌落,菌落较小,生长缓慢,呈乳白色、圆点状;在麦康凯琼脂培养基上,形成针尖大小、无色、透明菌落。钓取单个菌落再进行纯培养。 相似文献
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河北省肃宁县肉鸭养殖业兴起于上世纪90年代末。近几年鸭传染性浆膜炎在鸭群中发生较多.其中2008年上半年至2009年上半年尤其严重,这期间调查鸭群约500群,本病平均发病率为10%左右,死亡率为3%左右。有的鸭群发病率高达30%左右,死亡率10%以上。正一细菌分离培养及免疫试验1细菌的分离无菌采取病料分别接种于巧克力平板、麦康凯平板、营养琼脂平板,于10%CO_2浓度环境中培养48小时,挑取只在巧克力平板上生长的单个圆形细菌菌落,经镜检证明为纯培养物后,将其接种于血平板或巧克力平板进行扩繁培养。 相似文献
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对无锡6个奶牛场做了临床型乳房炎和隐性乳房炎调查,并对采集的63份临床乳房炎乳样和61份隐性乳房炎乳样分别做了细菌学检查,将样品分别划线接种于麦康凯琼脂平板、普通肉汤琼脂平板、Todd-Hewittbroth(THB)琼脂平板进行分离纯化培养。挑取纯化平板上的单菌落进行生化试验。试验结果表明,引起奶牛乳房炎主要病原菌包括凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、链球菌、肠杆菌等。药敏试验表明,三种主要致病菌对多种抗生素都产生了耐药性。 相似文献
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鸡大肠杆菌病的实验室诊断 总被引:1,自引:0,他引:1
《北方牧业》2006,(9)
<正> 1 大肠杆菌病简介大肠杆菌是人和动物、禽类肠道中的常在菌。本菌有148个血清型。我国鸡的致病性大肠杆菌血清型有50个。病鸡的病变为气囊炎、心包炎、肝周炎、腹膜炎、全眼球炎和肉芽肿,并引起鸡胚和鸡的死亡。2 病料的采集从感染病鸡的肝脏、输卵管、腹膜内的干酪样物进行无菌采样。组织和脏器的采集:新鲜尸体剖开腹腔后,不损坏肠道。首先烧烙脏器表面,将接种环自烧烙部位插人组织内缓缓转动接种环,取少量组织和液体做涂片镜检或接种在培养基上。3 检验程序3.1 分离培养营养琼脂:将病料直接接种在营养琼脂平板上,置37℃恒温箱培养24小时后观察。菌落为灰白色,1.5~2.0毫米圆形菌落。(营养琼脂配制:肉汤100毫升,琼脂2~3克。直接高压灭菌15磅30分钟。待琼脂冷至50℃~60℃倒板。)麦康凯琼脂:将病料直接接种在麦康凯平板上,置 相似文献
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猪瘟猪副伤寒混合感染的诊断报告 总被引:1,自引:0,他引:1
2002年11月,贵州省某公司从北京引进40~50kg大约克种猪(曾接种过猪瘟兔化弱毒疫苗),1周后,有30头猪先后发病,其临床症状为:体温升至40℃以上,全身皮肤发红,后期发绀,同时伴有腹泻。经青霉素等抗生素治疗,效果不显著,死亡20头,病死率达66.7%。经实验室诊断,报告如下:1材料与方法1.1材料(1)病料贵州省某公司送检病死亡猪。(2)猪沙门氏菌标准血清购于兰州生物制品研究所。1.2方法1.2.1细菌分离无菌取肝脏、脾脏、淋巴结病料分别接种在鸡鲜血琼脂培养基上37℃培养24h后,挑取鸡鲜血琼脂培养基上单个菌落接种在麦康凯琼脂培养基上37℃培养24h。1.… 相似文献
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云南省某规模化肉牛养殖场2~6月龄犊牛持续出现轻度腹泻,粪便呈灰绿色水样。粪便样品经牛腺病毒(BAd V)3、7型、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)、牛疱疹病毒I型(BHV-I)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛细小病毒(BPV)、牛冠状病毒(BCV)、牛轮状病毒(BRV)、隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)real-time PCR及常规PCR检测均为阴性,将样品划线接种于血清琼脂、营养琼脂及麦康凯琼脂平板上37℃培养24 h,在血清琼脂及营养琼脂平板上生长出直径2~3 mm、稍突、圆形、湿润、灰白色、边缘整齐、不透明菌落,在麦康凯琼脂平板上菌落呈现粉红色。该分离株细菌经革兰氏染色镜检、细菌生化鉴定为大肠埃希氏菌,昆明小白鼠致病性实验显示致病力较强,实验组20只小白鼠接种后48 h内全部死亡,并从死亡小白鼠肝脏及心血成功分离出该株细菌。药敏试验结果显示该株细菌对环丙沙星、左氧氟沙星、氧氟沙星、头孢噻肟、头孢哌啶、头孢吡啶、头孢曲松钠高度敏感。 相似文献
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本文对延边部分地区送检的病死猪、疑似大肠杆菌感染的腹泻病猪采集病料,分别接种在营养琼脂平板、麦康凯琼脂培养基、伊红美兰培养基上,进行分离培养及纯培养,对可疑菌落革兰氏染色,涂片镜检。对初步鉴定的细菌进行生化试验及血清型鉴定。结果从48份样本中,共分离出符合大肠杆菌生长特性的菌株40株。将培养后的40株大肠杆菌菌液分别接种小鼠。结果表明,其中36株为高致病性大肠杆菌、4株呈低致病性。本试验验中对分离得到的大肠杆菌菌株进行血清型分型,结果共分离出37个血清型。其中O6(4/37),O78(5/37)、O90(7/37)、O107(7/37)为优势血清型。 相似文献
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《云南畜牧兽医》2016,(2)
巍山县某山羊养殖户,出生15 d内的羔羊出现共济失调等神经症状,死亡率高达85%。样品经阿卡班(AKA)、山羊病毒性关节炎-脑炎(CAE)、梅迪-威斯纳病(MV)、蓝舌病(BTV)real-time PCR及普通PCR检测均为阴性。样品(脑组织)划线接种于5%的绵羊血琼脂、营养琼脂及麦康凯琼脂培养基上,37℃培养24 h。结果:在5%的绵羊血琼脂、营养琼脂平板上生长出直径2~3 mm、稍凸、圆形、湿润、灰白色、边缘整齐、不透明的菌落;在麦康凯琼脂平板上菌落呈粉红色。经革兰氏染色镜检、细菌生化鉴定为大肠埃希氏菌,血清型鉴定为O78型。昆明小白鼠致病性试验显示,致病性较强,实验组25只小白鼠接种后48 h内全部死亡,并从死亡小白鼠肝脏和心血内成功回收到该株细菌。 相似文献
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取AHP-A菌株划线接种于马丁琼脂斜面,经37℃培养24小时,用灭菌生理盐水5毫升洗下菌苔,并立即接种于马丁琼脂扁瓶内,接种量为每瓶2毫升,涂布均匀。经37℃培养24小时后,加入30毫升灭菌生理盐水,洗下菌苔,并将净菌液收集于1万毫升的灭菌玻瓶内。取样稀释,平板计数,并与硫酸 相似文献
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《中国家禽》2017,(10)
从扬州大学动物医院收集送检病鸡的病料,无菌采集病死鸡的肝脏、肺脏等组织接种于麦康凯平板和血琼脂平板上进行细菌分离与培养,并对分离菌进行生化试验、16 S r RNA基因序列分析和荚膜分型PCR鉴定,同时用12种抗菌药物对分离菌株进行药敏试验。细菌分离结果显示,分离菌在麦康凯平板上未见菌落生长,在血琼脂平板上呈光滑、湿润的露滴样小菌落;革兰氏染色镜检结果为革兰氏阴性小杆菌,瑞氏染色镜检可见大量两极浓染的短杆菌;生化试验结果表明分离菌株能够发酵葡萄糖、果糖、蔗糖等糖类,不能发酵乳糖和麦芽糖;同时,16 S r RNA基因序列和荚膜分型PCR测定结果显示分离菌为荚膜A型多杀性巴氏杆菌。药敏试验结果表明,分离菌株对痢特灵、左氟沙星、强力霉素的敏感性较高,而对氯霉素、美洛西林、卡那霉素等高度耐药。 相似文献
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《中国动物传染病学报》2019,(1)
无菌采集病死鸡的肝脏、肾脏、脾脏、肺脏等组织,接种于麦康凯平板和普通琼脂,进行细菌分离与培养,并对分离菌进行生化试验和16s rDNA基因序列分析,同时用14种抗菌药物对分离菌株进行药敏试验。结果显示,分离菌在麦康凯平板上呈红色圆形菌落;镜检结果为革兰氏阴性杆菌;分离菌株能够发酵葡萄糖、棉籽糖、乳糖、木糖等糖类并产酸产气,鸟氨酸及赖氨酸试验阳性,苯丙氨酸脱氨酶及硫化氢阴性,符合大肠杆菌的生化特性;16s rDNA基因序列测定结果显示分离菌株为大肠杆菌;分离菌株对菌必治、美洛西林、恩诺沙星、诺氟沙星的敏感率较高,而对萘啶酸、青霉素等耐药。本研究为鸡大肠杆菌的诊断和防治提供了依据。 相似文献