槲皮素对BEL-7402细胞生长抑制作用的研究

[目的]探讨槲皮素对人肝癌细胞株BEL-7402的增殖抑制及凋亡诱导作用。[方法]体外培养BEL-7402细胞,以不同浓度槲皮素处理细胞后,采用酸性磷酸酶（APA）法检测细胞增殖抑制率;光镜观测BEL-7402细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率。[结果]槲皮素对人肝癌BEL-7402细胞有明显的增殖抑制作用,其72h的IC50为4μg/ml。光学显微镜下可见细胞密度明显降低。经槲皮素作用6、12h后,流式细胞术检测到细胞凋亡率显著增加。[结论]槲皮素对人肝癌细胞的增殖抑制呈浓度相关性,可诱导肝癌细胞凋亡。     

槲皮素对CBRH-7919细胞增殖及线粒体膜电位的影响

[目的]探讨槲皮素对肝癌细胞株CBRH-7919增殖及线粒体膜电位的影响。[方法]体外培养肝癌CBRH-7919细胞,以不同浓度槲皮素处理细胞后,采用酸性磷酸酶(APA)法检测OD405;倒置显微镜观测CBRH-7919细胞形态变化;Rhodamine 123染色后流式细胞仪检测线粒体膜电位(△ψm)变化。[结果]槲皮素对肝癌CBRH-7919细胞有明显的增殖抑制作用,并与剂量和作用时间成正比;光学显微镜下可见槲皮素作用后细胞密度明显降低;经10μg/ml槲皮素作用122、4、48 h后,流式细胞术检测到Rhodamine 123染色弱荧光细胞百分比逐步增加,线粒体膜电位下降。[结论]槲皮素体外能抑制肝癌细胞株CBRH-7919增殖,引起线粒体膜电位下降。     

槲皮素对CBRH-7919细胞增殖及线粒体膜电位的影响(英文)

[目的]探讨槲皮素对肝癌细胞株CBRH-7919增殖及线粒体膜电位的影响。[方法]体外培养肝癌CBRH-7919细胞,以不同浓度槲皮素处理细胞后,采用酸性磷酸酶(APA)法检测OD405nm;倒置显微镜观测CBRH-7919细胞形态变化;Rhodamine123染色后流式细胞仪检测线粒体膜电位(△ψm)变化。[结果]槲皮素对肝癌CBRH-7919细胞有明显的增殖抑制作用,并与剂量和时间成正比。光学显微镜下可见槲皮素作用后细胞密度明显降低。经10μg/ml槲皮素作用12、24、48h后,流式细胞术检测到Rhodamine123染色弱荧光细胞百分比逐步增加,线粒体膜电位下降。[结论]槲皮素体外能抑制肝癌细胞株CBRH-7919增殖,引起线粒体膜电位下降。     

益气解毒方主要三萜类化合物抑制鼻咽癌CNE2细胞增殖效应的比较

目的 研究比较益气解毒方4种主要三萜类化合物齐墩果酸、熊果酸、茯苓酸、黄芪甲苷抑制鼻咽癌CNE2细胞增殖的效应。方法 实时无标记细胞功能分析技术（real-time unlabeled cell function analysis technique,RTCA）动态监测不同浓度的4种益气解毒方三萜类化合物对体外培养的人鼻咽癌CNE2细胞生长的影响,高通量细胞成像多功能检测系统Cytation5（C5）监测不同化合物对鼻咽癌CNE2细胞形态的影响,Western Blot法检测不同化合物对鼻咽癌CNE2细胞增殖相关蛋白表达的影响。结果 RTCA结果显示齐墩果酸、熊果酸、茯苓酸、黄芪甲苷均能够不同程度地抑制鼻咽癌细胞增殖,呈剂量依赖性,不同单体发挥最佳药效的时间不同。茯苓酸和黄芪甲苷起效较快,茯苓酸在处理后24 h达到最佳药效,IC₅₀值为7.51 μmol/L,黄芪甲苷持续作用36 h,抑制效果达到最佳,熊果酸在刺激28 h后IC₅₀值最低,为0.70 μmol/L,齐墩果酸后期作用效果较好,且所需浓度低。C5结果显示,与对照组相比,4种三萜类化合物在作用36 h后,CNE2细胞数量及形态均发生明显变化。Western Blot结果显示,与对照组相比,齐墩果酸、熊果酸、茯苓酸、黄芪甲苷能明显抑制CNE2细胞中增殖相关蛋白Survivin、XIAP、PCNA的表达。结论 益气解毒方主要三萜类化合物均能抑制鼻咽癌细胞增殖,降低增殖相关蛋白Survivin、XIAP、PCNA的表达水平,但药物的作用时间和浓度均有差异。     

朊蛋白多肽PrP 106-126对小鼠成神经瘤细胞N2a的毒性研究

采用Annexin V-FITC/PI双重染色的流式细胞检测和细胞凋亡的形态学观察,探讨了朊蛋白多肽PrP106-126对小鼠成神经瘤细胞系N2a细胞的毒性作用.结果表明:15、25和50μmol/L浓度的PrP 106-126作用于N2a细胞24 h均引起了细胞明显的形态学变化,提高了细胞凋亡率(P＜0.05),且浓度越大,凋亡效果越明显;在浓度为25μmol/L时,PrP 106-126作用N2a细胞48 h引起的毒性作用明显大于24 h,而100μmol/L PrP 106-126作用N2a细胞12 h并未引起细胞凋亡(P＞0.05).试验还表明PrP 106-126对神经细胞产生的毒性是淀粉样纤维物质作用细胞逐渐造成的结果.     

白雪花诱导舌癌细胞凋亡及其作用机制初探

[目的]探讨白雪花诱导舌癌细胞凋亡及对端粒酶活性的影响。[方法]用流式细胞术检测白雪花的石油醚提取物诱导体外培养的人舌鳞癌细胞凋亡作用;以Tca-8113细胞株作为靶细胞,采用原位TRAP法检测端粒酶活性。[结果]浓度8 mg/ml白雪花的石油醚提取物作用人舌鳞癌Tca细胞24和48 h后,凋亡细胞明显增加;白雪花的石油醚提取物对舌癌细胞作用72 h后,端粒酶活性明显降低,且随药物浓度增大,抑制端粒酶活性的作用增强,呈剂量依赖性。[结论]白雪花的石油醚提取物对人舌鳞癌Tca细胞的增殖具有明显抑制作用;其抗癌作用机制可能是通过抑制端粒酶活性,诱导癌细胞凋亡。     

葡萄籽提取物对人鼻咽癌细胞HIF-1α表达的影响

目的 研究葡萄籽提取物(GSE)对鼻咽癌细胞生长及HIF-1α表达的影响.方法 用100 μmol/L CoC12处理鼻咽癌CNE-2Z细胞,建立细胞拟缺氧模型;不同质量浓度GSE干预一定时间后,MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,荧光定量PCR和Western blot检测HIF-1α表达.结果 GSE抑制低氧环境下CNE-2Z细胞生长,12.5、25mg/L GSE处理细胞发生G1/S期阻滞,不同质量浓度GSE处理减少CNE-2Z细胞表达HIF-1α蛋白.结论 GSE抑制低氧环境下CNE-2Z细胞HIF-1α表达.     

西罗莫司酯化物对肾癌细胞系786-0的抑制作用及其机制初探

目的:研究西罗莫司酯化物(Temsirolimus)对肾癌细胞786-0增殖与凋亡的影响,并探讨分子作用机制.方法:采用显微镜形态学观察和MTT法检测细胞增殖抑制;流式细胞仪分析用药48h后肾癌细胞周期变化和细胞凋亡率;Western免疫印迹法检测P70S6K,4EBP-1蛋白水平表达变化.结果:西罗莫司酯化物作用786-0细胞的IC50=3.31μmol/L;给药48h后,细胞明显阻滞于G0/G1期,G2/M期细胞比例减少,细胞凋亡率增加;肾癌786-0细胞中P70S6K和4EBP-1蛋白的磷酸化水平明显下降.结论:西罗莫司酯化物能显著抑制肾癌细胞786-0的细胞增殖作用,阻滞细胞周期于G0/G1期且诱导细胞凋亡,其机制可能与P70S6K和4EBP-1磷酸化相关.     

扇贝多肽对H2O2损伤HaCaT细胞的保护作用

[目的]建立H2O2诱导HaCaT细胞氧化应激损伤的体外模型,探讨扇贝多肽(PCF)对H2O2损伤HaCaT细胞的保护作用及其作用机制。[方法]采用不同浓度的H2O2(50、100、200、300、500μmol/L)作用HaCaT细胞12 h后,采用CCK-8法检测细胞存活率;用不同浓度(1.42、2.84、5.68 mmol/L)的PCF分别处理细胞12 h后,加入H2O2(300μmol/L)继续作用12 h,采用CCK-8法检测细胞活力,采用酶生化法法测定细胞上清液中LDH活性以及细胞质中GSH-Px、T-AOC和CAT水平。[结果]与正常组相比,50~500μmol/L浓度的H2O2依赖性地引起HaCaT细胞氧化损伤,300μmol/L的H2O2使存活率降低到56%(P0.01);与模型组相比,不同浓度的PCF均可保护H2O2诱导的氧化损伤,增加细胞存活率,降低细胞LDH的释放量,提高GSH-Px、T-AOC和CAT含量,增强细胞抗氧化作用。[结论]扇贝多肽能对抗H2O2诱导的氧化应激,对细胞受损具有保护作用,其机制可能与提高抗氧化酶活力有关。     

BIX-01294对山羊胎儿成纤维细胞生长状态和组蛋白H3K9二甲基化的影响

为探讨BIX-01294对供核细胞的影响,使用不同浓度的BIX-01294处理山羊胎儿成纤维细胞(Goat embryonic fibroblasts,GEFs),并检测其细胞活力、细胞周期、细胞凋亡、H3K9me2水平和多能性基因的mRNA水平。细胞活力检测结果显示,BIX-01294浓度在1.0μmol/L以下不会影响细胞活力,2.0μmol/L时24h和48h处理组的细胞活力显著下降(P0.05),≥4.0μmol/L时所有处理组的细胞活力均极显著下降(P0.01)。细胞周期和凋亡检测结果显示,H3K9me2下调会引起细胞周期的停滞和正常细胞的减少,其中BIX-01294在大于2.0μmol/L时G0/G1期细胞的比例极显著升高(P0.01),4.0μmol/L时凋亡细胞极显著增加(P0.01)。处理后的细胞H3K9me2水平均极显著下降(P0.01),但大于1.0μmol/L的处理浓度能获得较好的下调效果。处理后细胞Oct4、Sox2和Nanog的mRNA水平均有不同程度的增加,其中Oct4和Nanog的mRNA水平增加极显著(P0.01)。说明:采用1.0μmol/L BIX-01294处理山羊胎儿成纤维细胞,可以下调H3K9me2水平,增加G1/G0期细胞比例,上调细胞多能性基因表达量,而且不影响细胞活力。     

益气解毒方对鼻咽癌CNE2细胞增殖的影响

目的 研究益气解毒方抑制鼻咽癌CNE2细胞增殖的效应。方法 采用实时无标记细胞功能分析技术（real-time unlabeled cell function analysis technique, RTCA）动态监测不同浓度（0.125、0.250、0.500、1.000 mg/mL的益气解毒方水提物对人鼻咽癌CNE2细胞增殖的影响;采用CCK-8法检测不同浓度益气解毒方水提物对人鼻咽癌CNE2细胞增殖能力的影响;通过高通量细胞成像多功能检测系统Cytation5监测不同浓度益气解毒方水提物对鼻咽癌CNE2细胞增殖形态的影响;采用Western Blot技术检测不同浓度益气解毒方水提物对鼻咽癌CNE2细胞增殖相关蛋白Survivin、XIAP、PCNA表达的影响。结果 RTCA 和 CCK-8 法实验结果显示,与空白对照组比较,益气解毒方水提物可以明显抑制鼻咽癌CNE2细胞的增殖,而且随着益气解毒方水提物的作用时间越长,其抑制效应越显著（P<0.05）;Cytation5结果显示,与空白对照组比较,不同浓度益气解毒方水提物处理CNE2细胞后,细胞形态发生了明显变化,且浓度越高,作用时间越长,细胞膜皱缩,细胞核质浓缩、破碎更明显;Western Blot结果显示,与空白对照组比较,益气解毒方水提物能明显抑制CNE2细胞中增殖相关蛋白Survivin、XIAP、PCNA的表达（P<0.05）。结论 益气解毒方水提物能明显抑制鼻咽癌细胞增殖,该效应与其抑制增殖相关蛋白Survivin、XIAP、PCNA的表达有关。     

漆姑草石油醚提取物化学成分分析及抗肿瘤活性筛选

[目的]对漆姑草[Sagina japonica（Sw.）Ohwi]石油醚提取物的化学成分进行分析鉴定,并对其抗肿瘤活性进行研究。[方法]采用GC-MS联用技术分析漆姑草石油醚提取物的化学成分;选用3种人癌细胞株（人白血病K562细胞株、人宫颈癌Hela细胞株和人乳腺癌MCF-7细胞株）,采用MTT法和SRB法,对其抗肿瘤活性进行研究。[结果]从漆姑草石油醚提取物中分离鉴定出25种成分,其中脂肪酸含量最多,亚油酸含量达49.318%;漆姑草石油醚提取物对人白血病K562细胞株的生长具有微弱的抑制作用,对人宫颈癌Hela细胞株和人乳腺癌MCF-7细胞株均无抑制作用。[结论]该研究可为漆姑草资源在临床上的广泛应用奠定基础。     

龙爪槐正己烷提取物对铜绿微囊藻抑制机理的研究

[目的]对前期研究发现的具有显著抑制铜绿微囊藻的龙爪槐正己烷提取物进行抑制机理分析。[方法]采用龙爪槐正己烷提取物处理铜绿微囊藻,通过考察铜绿微囊藻的叶绿素a含量、蛋白质含量、细胞膜透性和SOD活性,初步分析龙爪槐提取物对铜绿微囊藻抑制作用的机理。[结果]龙爪槐正己烷提取物破坏铜绿微囊藻的细胞膜系统,增加细胞膜透性;叶绿素a和蛋白质含量在培养7 d后分别减少为对照组的10%和50%左右,对藻细胞的光合反应系统造成破坏;另外,藻细胞的SOD活性在龙爪槐正己烷粗提物作用下,在初期呈现为应激性上升,在后期表现为抑制的阶段性变化。[结论]龙爪槐正己烷提取物抑制铜绿微囊藻的可能机理是：破坏细胞膜,使膜通透性增大;破坏光合反应系统,造成光合色素和蛋白质含量减少;SOD活性发生阶段式变化。     

龙爪槐正己烷提取物对铜绿微囊藻抑制机理的研究(英文)

[目的]对前期研究发现的具有显著抑制铜绿微囊藻的龙爪槐正己烷提取物进行抑制机理分析。[方法]采用龙爪槐正己烷提取物处理铜绿微囊藻,通过考察铜绿微囊藻的叶绿素a含量、蛋白质含量及细胞膜透性和SOD活性,初步分析龙爪槐提取物对铜绿微囊藻抑制作用的机理。[结果]龙爪槐正己烷提取物破坏铜绿微囊藻的细胞膜系统,增加细胞膜透性;叶绿素a和蛋白质含量在培养7d后分别减少为对照组的10%和50%左右,对藻细胞的光合反应系统造成破坏;另外,藻细胞的SOD活性在龙爪槐正己烷粗提物作用下,在初期呈现为应激性上升,在后期表现为抑制的阶段性变化。[结论]龙爪槐正己烷提取物抑制铜绿微囊藻的可能机理是:破坏细胞膜,使膜通透性增大;破坏光合反应系统,造成光和色素和蛋白质含量减少;SOD活性发生阶段式变化。     

不同产地谷精珠中槲皮素含量的测定

[目的]测定不同产地谷精珠中槲皮素的含量,考察2种脱脂溶剂对谷精珠中槲皮素提取率的影响.[方法]采用2种溶剂脱脂处理,并用高效液相色谱-四通道紫外检测法测定不同产地谷精珠中槲皮素的含量.[结果]在5个产地中,石油醚脱脂后的谷精珠中槲皮素的含量分别为:301.4、597.77、622.36、582.56、453.51和406.06μg/g;其中,以浙江产的含量最高,海南产的最低.氯仿脱脂后的谷精珠中槲皮素的含量分别为:1057.56、953.43、916.16、809.17、738.28和627.32μ,g/g;其中,以海南产的含量最高,安徽产的最低.[结论]不同产地谷精珠中槲皮素含量差异较大;氯仿脱脂效果好,提取液中槲皮素的含量较高.     

落地生根黄酮类成分分析及抗氧化活性研究

[目的]建立落地生根提取物中黄酮类成分的定性定量测定方法,并初步评价其体外抗氧化活性。[方法]将落地生根药材经水解后提取总黄酮,并采用紫外分光光度法（UV）测定总黄酮的含量、薄层色谱法（TLC）进行槲皮素和山柰酚的定性分析、Fenton反应法评价提取物的抗氧化活性、高效液相色谱法（HPLC）检测槲皮素及山柰酚的含量。[结果]UV法测得芦丁在11.0～110.0μg/ml浓度范围内线性关系良好（r=0.999 8）,平均加样回收率为99.3%（n=6,RSD为1.3%）;TLC可清晰检测出懈皮素与山柰酚;HPLC测得槲皮素在37.5～1 200.0 ng/ml浓度范围内线性关系良好（r=0.999 7）、山柰酚在62.5～2 000.0 ng/ml（r=0.999 4）浓度范围内线性关系良好;平均加样回收率分别为101.67%（n=6,RSD为1.92%）、98.68%（n=6,RSD为1.40%）;结果显示提取物具有较大抗氧化能力,并成量效关系。[结论]该方法准确可靠、重复性好,可作为落地生根黄酮类成分定性定量的测定方法和落地生根药材的质量控制方法。     

低温胁迫下硼酸对兰引3号结缕草的生理效应初探

［目的］探讨低温胁迫下不同浓度的硼酸溶液对兰引3号结缕草各项生理指标的影响,为提高低温胁迫下兰引3号结缕草草坪质量提供参考。［方法］以兰引3号结缕草为供试品种,用2种不同浓度的硼酸溶液（16、32μmol/L）喷施2次,研究低温胁迫下硼酸对兰引3号结缕草叶绿素、可溶性糖、游离脯氨酸、丙二醛含量及相对膜透性的影响。［结果］低温胁迫下16μmol/L硼酸处理及32μmol/L硼酸处理都能提高兰引3号结缕草叶绿素、可溶性糖、游离脯氨酸含量,同时降低丙二醛含量,另外,对保护细胞膜系统也起到积极作用。其中,以16μmol/L硼酸处理的效果较好,叶绿素含量、可溶性糖含量及游离脯氨酸含量分别比对照提高了37.5%、41.2%、45.1%,而丙二醛含量则降低了16.4%,相对膜透性降低了145.0%（A260）和50.0%（A280）。［结论］低温胁迫下,16μmol/L硼酸处理有利于增强兰引3号结缕草抵御低温冷害的能力。     

茶多酚与银杏叶提取物联用对人乳腺癌细胞增殖的影响

[目的]研究茶多酚与银杏叶提取物联合作用对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的影响。[方法]采用MTT法测定茶多酚、银杏叶提取物单独及联合应用对人乳腺癌细胞系MDA-MB-231的抑制作用;利用光镜观察茶多酚、银杏叶提取物对人乳腺癌系MDA-MB-231形态的影响。[结果]MTT法显示银杏叶提取物与低浓度（10、20μg/ml）的茶多酚联合使用,对乳腺癌细胞抑制率明显高于单独用药组,但是联合用药组只有在一定的浓度范围内才会产生协同作用抑制乳腺癌细胞增殖;在细胞形态方面,与单独用药组、对照组相比,联合用药组乳腺癌细胞生长状况差,折光性弱,贴壁细胞皱缩,变圆。[结论]银杏叶提取物在低浓度下对人乳腺癌细胞系MDA-MB-231生长无明显抑制作用,茶多酚和茶多酚联合银杏叶提取物均可抑制MDA-MB-231细胞生长,联合用药组强于单独用药,在一定浓度范围内起协同作用。