蛹虫草活性成分的测定

分别用薄层层析法和高碘酸氧化法测定了蛹虫草(Cordyceps militaris)、冬虫夏草(C.Sinensis)及其发酵菌丝中腺苷和甘露醇的含量。结果证明,蛹虫草Y3菌株发酵菌丝的甘露醇含量达16.04％,明显高于天然蛹虫草。不同来源的蛹虫草的腺苷含量相近,为1.4％左右。刚联苯三酚自氧化法测定了蛹虫草的SOD)活性,人工栽培的蛹虫草SOD)活性最高,为1882U/mgPr。上述结果表明,蛹虫草具有和冬虫夏草相似的药效成分,有重要的开发应用价值。     

低温刺激对蛹虫草子实体产量及品质的影响

目的:研究温差刺激对蛹虫草子实体干重、虫草素和腺苷含量的影响.方法:以蛹虫草同一子实体头部和中部组织分离的异核体菌株CMS1和CMZ1为材料,采用小麦固体栽培基质室内培育子实体,在原基形成阶段进行温差刺激,培养45 d后,测定子实体数及干重、虫草素和腺苷质量分数.结果:低温10℃处理,CMS1菌株处理6 h/d时,子实...     

激发子对蛹虫草子实体中虫草素和腺苷含量的影响

研究了不同激发子菌株对蛹虫草子实体中虫草素和腺苷含量的影响。结果表明:就虫草素而言,JF4对虫草素积累的诱导作用在发酵培养40d时达到最大,为162.22 mg/L,与对照组相比增加了3.85倍,并且JF4对虫草素的诱导作用是4种激发子中作用最强的;就腺苷而言,JF2对腺苷积累的诱导作用在发酵培养40d时达到最大,为29.16mg/L,与对照组相比增加了4.13倍。由此可见,激发子对蛹虫草子实体中虫草素和腺苷的积累因激发子种类及添加后培养时间的不同而产生不同的影响。     

氮源和无机盐对蛹虫草子座产量及虫草素和腺苷的影响

以小麦为主要栽培基质,通过添加不同的氮源和无机盐,选用优质蛹虫草菌株CM-16进行人工培养,探索这2个因素对蛹虫草子座产量及虫草素和腺苷的影响。结果表明:栽培过程中选用6g·L~(-1)的蛋白胨作为最佳氮源,子座干样质量、虫草素和腺苷的生成量均较高,分别为43.1g·盒~(-1)、3.95mg·g-1和2.35mg·g~(-1)。无机盐则选择1.0mg·L~(-1)的硫酸亚铁最为合适,此时子座干样质量、虫草素和腺苷的生成量分别为48.8g·盒~(-1)、4.98mg·g~(-1)和2.10mg·g~(-1)。     

蛹虫草虫草酸虫草素含量测定与分析

本文采用HPLC法对蛹虫草的虫草酸、虫草素含量作了测定与分析。结果表明同种培养基质中蛹虫草不同部位和不同培养基质中蛹虫草相同部位的虫草酸、虫草素含量均有不同, 通过比较确定了虫草酸、虫草素含量较多的部位, 从而为今后虫草酸、虫草素的开发利用提供了科学依据。     

甲基化相关基因和交配型基因在蛹虫草退化过程中的作用

通过继代培养正常蛹虫草(Cordyceps militaris)菌株CmHY-1(双交配型)获得不同继代次数菌株CmHY-2～CmHY-9并栽培,测定菌株CmHY-1、CmHY-7和CmHY-9液体培养时的腺苷和虫草素含量;制备菌株CmHY-1、CmHY-5、CmHY-7和CmHY-9分生孢子单孢分离菌株并鉴定交配型;...     

蓖麻蚕蛹虫草的培育及其虫草素腺苷分析

利用蓖麻蚕蛹人工接种蛹虫草菌种,在适宜条件下,可长出子实体,子实体丛生,经过30～40d,子实体成熟,测定虫草素与腺苷含量分别为640mg/kg,146.5mg/kg。     

不同接种物对蛹虫草子实体营养成分的影响

以蛹虫草菌株母种的表层菌皮、母种基内菌丝和成熟的待分离的新鲜子实体顶端接种到液体培养基进行液体培养,分析比较栽培所获得不同蛹虫草子实体的有效成分得出:以母种表层菌皮接种液体培养所获得的子实体虫草素和硒元素含量最高;以母种培养基的基内菌丝接种培养栽培所获得子实体的虫草酸、腺苷、虫草多糖、SOD酶、蛋氨酸、酪氨酸含量较高。     

蛹虫草的两株虫草素高产菌株

Cm-1和Cm-2是两株虫草素高产菌株．文章描述了它们的形态特征和培养特性，对二者和参比菌株液体培养的培养液与菌丝体、固体培养的培养基、人工栽培的子实体和采后培养基，用高效液相色谱法测定虫草素含量，测定了它们虫草素含量。研究发现虫草素含量和菌丝体产率无直接关系．同一菌株液体培养和固体培养的表现不尽一致，并发现固体培养的培养基中虫草素含量比液体培养的菌丝体高得多．两菌株人工栽培采后培养基的虫草素含量比子实体还要高。     

广东虫草与冬虫夏草及蛹虫草的成分比较

对人工驯化的广东虫草(Cordyceps guangdongensis)子实体进行成分分析,并与冬虫夏草和蛹虫草进行比较.结果表明,广东虫草的虫草酸含量较高,达151.00 mg/g,高于冬虫夏草(127.80 mg/g)和蛹虫草(39.00 mg/g);腺苷为0.81 mg/g,是冬虫夏草的3倍;虫草素为0.02 mg/g,粗蛋白为27.5%;水解氨基酸总量为15%.     

高产虫草菌素蛹虫草菌株的紫外线诱变选育

蛹虫草是重要的药食用真菌。通过对蛹虫草原生质体进行紫外诱变处理，筛选到1株优良的菌株CMM-81。经固体发酵，虫草菌素和腺苷含量分别为0．437％和0．036％，是出发菌株的2倍。菌株CMM-81经连续15代传代培养，虫草菌素和腺苷的含量保持稳定。     

不同储存时间对蛹虫草中化学成分含量的影响

以蛹虫草为试材,研究了不同储存时间对新鲜蛹虫草中多糖、虫草酸、总黄酮及7种核苷类成分含量的影响。结果表明:随着处理时间的递增,蛹虫草颜色由橙黄色变为暗黄色,最终变为黑色;气味由菌香味变为腐烂臭味;储存时间对新鲜蛹虫草中化学成分含量影响明显,其中的化学成分变化规律为多糖含量先下降后升高,而总黄酮含量则是先升高后降低,虫草酸含量变化为逐步下降;尿嘧啶和腺嘌呤含量逐渐升高,与之相反,腺苷、虫草素和鸟苷含量则是逐渐降低,尿苷和肌苷含量先升高后降低。三次曲线方程可用于描述新鲜蛹虫草中化学成分含量与储存时间的变化关系。多糖、虫草酸、尿嘧啶、腺嘌呤、腺苷和虫草素等指标,可用于新鲜蛹虫草质量控制。     

硒和钙对蛹虫草活性物质含量的影响

向培养液中分别添加不同浓度的亚硒酸钠、氯化钙,用液体振荡培养法培养蛹虫草菌丝体,用HPLC法测定虫草素与腺苷含量,用苯酚-硫酸法测定多糖含量,用高碘酸钠比色法测定虫草酸含量.以研究2种微量元素对蛹虫草菌丝体中虫草素、腺苷、多糖和虫草酸含量的影响.结果表明:向培养液中添加适量的硒或钙,可显著提高蛹虫活性物质含量.添加15 mg/L亚硒酸钠,虫草素和虫草酸含量比对照组分别提高了29.0％和34.9％;添加16 mg/L氯化钙,虫草素含量比对照提高24.05％.     

蛹虫草固体发酵生产虫草素的条件优化

用直径6 cm,高10 cm聚乙烯培养罐固体发酵蛹虫草(Cordyceps militaris),以固体发酵产物中虫草素含量为指标,从16个蛹虫草菌株中筛选出虫草素含量最高的菌株,考察固体发酵该菌株的培养基组成、培养时间、培养基装量、料液比、培养温度、接种量和添加物对虫草素含量的影响,得到了有利于蛹虫草固体发酵产虫草素的培养条件:培养罐装20 g小麦,按小麦干重6％的量分别加入玉米粉和黄豆粉,按料液比1∶1.4(w∶v,以小麦干重为基准)加入营养液(g/L:2.0 K2HPO4·3H2O,0.5 MgSO4·7H2O,16甘氨酸),培养温度为26℃,时间46 d,接种量10％.     

蛹虫草液体发酵过程中虫草素含量的分析

以2个蛹虫草菌株2014072503-1和2014072301-1为试材,采用高效液相色谱(HPLC)法,分析蛹虫草40d液体发酵过程中其发酵液中的虫草素产量,研究了蛹虫草发酵时间对虫草素产量的影响,旨在确定虫草素开始产生、产量迅速升高、产量最高的3个关键时间点,为下一步对以上时间节点的菌丝样品进行转录组测序分析,进而挖掘与虫草素产量密切相关的候选基因奠定基础。结果表明:2个蛹虫草菌株发酵过程中产虫草素的起始时间点为发酵后3d,迅速升高的时间点是12d,虫草素产量最高的时间点2014072503-1号菌株为发酵后37d,而2014072301-1号菌株为发酵后34d。2014072301-1号菌株发酵产生的虫草素含量高(382.43μg·mL~(-1)),时间短(34d),更适于作为生产虫草素的菌株。     

不同光照强度对蛹虫草主要活性成分的影响规律

以优质蛹虫草菌株为试材,分别以不同光照强度对蛹虫草发菌、转色、原基分化、子实体生长等阶段进行单因子对照试验,比较不同阶段不同光照强度下的各蛹虫草试验组在蛋白质、多糖、虫草素、虫草酸等主要活性成分含量的差异及特点,探索蛹虫草不同生长阶段的适宜光照强度及规律。结果表明:蛹虫草发菌、转色、原基分化、子实体生长等阶段的光照强度分别约为0~10、500~200、200~500、300~500lx时,蛹虫草主要活性成分含量相对较高。说明不同生长阶段不同光照强度对蛹虫草主要活性成分的合成和积累可产生明显影响,以各阶段相应适宜光照强度对蛹虫草进行栽培是保证和提高主要活性成分含量的重要措施之一。     

比色法测定冬虫夏草和蛹虫草中多糖和甘露醇的含量

应用苯酚-硫酸法、3,5-二硝基水杨酸法和高碘酸钠氧化法建立虫草多糖和甘露醇的定量分析方法,并比较市售天然冬虫夏草和人工栽培蛹虫草在多糖和甘露醇含量上的差异。结果发现,用比色法测定三种天然虫草和六种蛹虫草中多糖和甘露醇的含量,其多糖平均加样回收率分别为:94.7%(RSD为2.29%),甘露醇的含量平均加样回收率为98.8%(RSD为1.79%)。实验表明,本研究方法可用于虫草多糖和甘露醇的定量分析。     

蛹虫草退化菌株的生理生化特征

为了初步鉴定蛹虫草(Cordyceps militaris)退化菌株的生理生化特征,采用倒置显微镜、扫描电子显微镜观察蛹虫草退化菌株与正常菌株的形态特征,分别用高效液相色谱(HPLC)、氟硼二吡咯(BODIPY)脂滴染色、荧光定量PCR测定腺苷与虫草素含量、脂质含量、细胞自噬相关基因的表达水平。结果表明:蛹虫草退化菌株的菌丝体分枝多、畸形,呈弯曲的不规则状;退化菌株的菌丝中腺苷含量比正常菌株的低30.23%,两者发酵液中的腺苷含量无差异,而退化菌株的菌丝和发酵液中均未检测到虫草素;退化菌株的荧光亮度明显低于正常菌株;细胞自噬相关基因Atg13、Atg18、Atg22、Atg22-2表达量在退化菌株中上升,退化菌株比正常菌株分别上升了432.19%、170.45%、336.06%、61.01%;Atg17呈下调表达,退化菌株比正常菌株下调了65.28%,两者Atg28的表达量无差异。     

野生蛹虫草的分离与高产菌株的筛选

人工栽培蛹虫草时，往往遇到出草率下降的情况。着重阐述野生蛹虫草菌株的分离和高产菌株的筛选。     

蛹虫草和冬虫夏草主要活性成分含量比较

对米饭培养蛹虫草、柞蚕蛹虫草和冬虫夏草中的虫草素、虫草多糖、虫草酸和氧基酸含量进行了分析比较,结果表明：米饭虫草中的虫草素、虫草多糖和虫草酸含量均高于柞蚕蛹虫草和冬虫夏草,尤其是虫草素含量为2465mg/kg,是冬虫夏草的20倍;三种虫草均含有18种氨基酸,氨基酸总量最高的是柞蚕蛹虫草为27130mg／100g,是冬虫夏草的1．4倍。