欧李仁苦杏仁苷与胆酸盐的结合及对胰脂肪酶的抑制作用

为欧李资源天然功能产物的开发应用提供理论依据,以欧李仁脱脂粉为原料,采用体外模拟肠液的方法研究欧李仁苦杏仁苷提取物与胆酸盐的结合及对胰脂肪酶的抑制作用。结果表明:欧李仁提取液中苦杏仁苷的含量为62.6mg/100mL,欧李仁苦杏仁苷提取物能与3种胆酸盐结合,且对胰脂肪酶有抑制作用。其中,与牛黄胆酸钠的结合率为93.97%,与脱氧胆酸钠和甘氨胆酸钠的结合率分别为88.27%和86.84%;初始浓度下,欧李仁苦杏仁苷提取物对胰脂肪酶的抑制率为86.47%。     

天然甘氨胆酸和牛磺胆酸的提取研究

[目的]建立从牛羊胆汁中分离提纯天然甘氨胆酸和牛磺胆酸的工艺。[方法]采用盐析、萃取、脱水等生物化学方法和柱层析正交试验筛选天然甘氨胆酸和牛磺胆酸的最佳提取工艺。[结果]在流动相为氯仿和正丁醇,洗脱比例为3：2,装样量为3000ml胆汁粗提物,洗脱速度为6～10ml／s时提取量最大。所得产品经薄层层析法、红外光谱扫描法证实为甘氨胆酸和牛磺胆酸。经薄层扫描法测定含量,甘氨胆酸和牛磺胆酸平均纯度分别达98．4％和98．6％;提取方法平均回收率分别为63．7％和67．8％。该提取方法稳定可行,具有原材料丰富、价廉,产品纯度高、活性强等优点,适宜对天然甘氨胆酸和牛磺胆酸进行分离提制。[结论]建立了适宜对天然甘氨胆酸和牛磺胆酸进行分离提制的提取工艺。为甘氨胆酸和牛磺胆酸的工业化生产奠定了基础。     

生菜子多糖提取方法及其降血脂活性研究

旨在建立并优化生菜子多糖的提取工艺,并对生菜子多糖进行体外降血脂活性的研究。以生菜子为试材,水醇法提取多糖,BP（反向传播）神经网络法与正交试验相结合建立生菜子多糖的提取工艺,并以体外结合胆酸盐实验研究生菜子多糖体外降血脂能力。最终得到生菜子多糖提取工艺条件为89℃,溶剂倍量44,提取1.6 h,提取4次,体外结合胆酸盐实验表明生菜子多糖及其不同醇沉片段均对牛磺胆酸钠(STC)、甘氨胆酸钠(SGC)、胆酸钠(SC)有较高结合率。最终发现BP神经网络法与正交试验相结合,有效减少试验次数,分析生菜子多糖提取因素变化规律并寻找最佳参数。生菜子多糖降血脂机制可能为肠道内结合胆酸盐,影响脂类物质吸收。     

川秋葵微粉体外降血脂作用及对小鼠肠道菌群的影响

研究川秋葵微粉体外降血脂的能力及其对小鼠肠道菌群的影响。小鼠肠道菌群试验中,将小鼠随机分为4组灌胃6周,即对照组(等体积的生理盐水[10 mL/(kg·d)]、川秋葵微粉低剂量组[450 mg/(kg·d)]、川秋葵微粉中剂量组[900 mg/(kg·d)]、川秋葵微粉高剂量组[1 800 mg/(kg·d)]),采用16S rDNA高通量测序技术分析小鼠肠道菌群的组成及其变化。体外降血脂试验中,研究不同质量浓度的川秋葵微粉对体外胆固醇、牛磺胆酸钠、甘氨胆酸钠的吸附能力。结果显示,川秋葵微粉各剂量组的小鼠肠道菌群组成的相似度较高,中剂量组的盲肠内容物菌群的OTUs数量最高,说明中剂量组小鼠盲肠菌群的特异性高;低剂量组的结肠内容物菌群的OTUs数量最高,说明低剂量组小鼠结肠菌群的特异性高;此外,秋葵微粉能提高小鼠肠道中的益生菌比例,降低有害菌比例。通过体外胆固醇吸附试验以及体外胆酸盐吸附试验,初步证实秋葵微粉具有良好的吸附胆固醇、牛磺胆酸钠以及甘氨胆酸钠的能力,且呈明显的剂量效应关系,随着质量浓度的增加其吸附量逐渐上升;秋葵微粉对牛磺胆酸钠的吸附量较甘氨胆酸钠的吸附量多,即秋葵微粉与牛磺胆酸钠的结合能力更强。结果表明,川秋葵微粉具有体外降血脂的能力,且对小鼠肠道内环境健康具有改善调节作用,低剂量更具有实际应用价值。     

牛磺胆酸抗炎作用研究

目的:研究牛磺胆酸的抗炎作用。方法:采用多种动物模型,观察牛磺胆酸对炎症的影响。结果:牛磺胆酸能够降低炎症组织毛细血管的通透性,抑制炎症性肿胀,抑制NO、PGE2、组胺等炎症介质的产生。结论:牛磺胆酸具有明显的抗炎效应,其抗炎作用主要是通过抑制炎症介质的产生而实现的。     

黄芩苷对胰脂肪酶的抑制机理研究

[目的]探讨黄芩苷的脂肪酶抑制机理。[方法]用分光光度法测定脂肪酶活性,研究了浓度、反应时间、加酶量和加入顺序对黄芩苷抑制胰脂肪酶的作用。[结果]在一定浓度下,黄芩苷对脂肪酶的抑制作用呈上升趋势;初期抑制率的上升幅度较大,随着黄芩苷浓度的增大,抑制率的增幅减小。15min内,抑制率随着反应时间的延长而增大;但当反应时间超过15min时,黄芩苷对胰脂肪酶的抑制作用趋于稳定。在0．2～1．0mg/ml的浓度范围内,酶量对抑制率的影响不明显。黄芩苷试剂与胰脂肪酶预热10min后,加入底物乳液进行反应的胰脂肪酶抑制率最高。黄芩苷对胰脂肪酶的抑制常数为0．505mg／ml,其抑制作用为非竞争性抑制作用。[结论]该实验证实了中药黄芩中黄芩苷具有抑制胰脂肪酶的作用。     

胆酸盐、游离脂肪酸、黄体素对β-胡萝卜素-15,15′-加双氧酶活性的影响

用体外实验研究了胆酸盐、游离脂肪酸、黄体素对 β 胡萝卜素 15 ,15′ 加双氧酶 ( βCDIOX)活性的影响。结果表明 ,4和 8mmol·L -1的牛磺胆酸钠显著 (P <0 0 5 )或极显著 (P <0 0 1)促进 βCDIOX的活性 ,而且牛磺胆酸钠和胆酸对 βCDIOX活性的促进作用相近 ,脱氧胆酸钠的作用高于前两者 ,但差异不显著 (P >0 0 5 ) ;5mmol·L-1油酸对βCDIOX活性的促进作用显著高于对照 (P <0 0 5 ) ;软脂酸、硬脂酸对 βCDIOX活性无促进作用 ,亚油酸、亚麻酸能促进 βCDIOX活性 ,但差异不显著 (P >0 0 5 ) ;随着黄体素浓度的增加 ,βCDIOX活性逐步降低 ,黄体素生成的维生素A很少。     

佛手果低聚糖超声波辅助水浸提工艺研究

利用超声波辅助水提取技术,以腌制佛手果为原料,考察提取时间、超声时间、提取温度、料液比对佛手果低聚糖提取得率的影响,采用正交试验对佛手果低聚糖的提取工艺进行优化,从单因素试验、正交试验结果以及节约能源角度,得出最佳工艺条件为:提取时间2 h,超声时间20 min,提取温度80℃,料液比1∶8,在此条件下,佛手果低聚糖得率为5.99(±0.15)%。采用体外结合胆酸盐实验评价佛手果低聚糖的降血脂功能,结果显示,佛手果低聚糖对胆酸钠(SC)、牛磺胆酸钠(STC)的吸附能力较强,其结合量分别为20.30(±0.39)、19.61(±0.71)μmol/mg,对甘氨胆酸钠(SGC)吸附能力较弱,其结合量只为14.38(±2.23)μmol/mg,提示佛手果低聚糖可能具有一定的降血脂功能。     

猴头菇多肽的制备及体外抗氧化、降血脂活性

为了探究猴头菇多肽作为降血脂和抗氧化食用菌功能因子的潜力,以猴头菇蛋白为原料,采用超声波-微波辅助酶法制备猴头菇多肽(Hericium erinaceus polypeptide,HEP),以多肽得率为指标,通过单因素及正交试验优化其工艺条件;采用体外抗氧化和降血脂试验对超滤分离后的不同分子质量HEP组分进行活性测定。结果表明：酶解最佳工艺参数为超声功率300 W,超声时间50 min,酶添加量5 000 U/g,酶解温度50℃,多肽得率为(65.14±0.05)%;HEP-Ⅱ的DPPH·、·OH和O₂^·-清除率分别为(81.37±0.04)%,(51.17±0.03)%和(60.51±0.05)%;对牛磺胆酸钠和甘氨胆酸钠的结合率为(54.98±0.03)%和(57.74±0.01)%,对胰脂肪酶抑制率为(68.48±0.03)%,IC50为(2.75±0.03) mg/mL,在pH 2.0和pH 7.0的环境下对胆固醇的结合率分别为(48.08±0.05)%和(62.89±0.07)%,表明猴头菇多肽有望成为一种天然抗氧化和辅助降血脂的功...     

荷叶总生物碱降脂减肥作用的体内外试验

通过体内、体外试验探究荷叶总生物碱的降脂减肥作用.给予高脂血症大鼠模型组不同剂量荷叶总生物碱和降脂药物辛伐他汀(阳性药物对照组),观察荷叶总生物碱对高脂血症大鼠体质量、体脂以及血清脂质相关指标的影响;用对硝基苯酚法检测不同质量浓度荷叶总生物碱处理对大鼠胰脂肪酶活性的影响.结果显示:荷叶总生物碱能显著降低高脂血症大鼠的体质量,显著降低血清总胆固醇、血清甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇含量,显著降低谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性以及动脉粥样系数,升高高密度脂蛋白胆固醇/血清总胆固醇比值;荷叶总生物碱能抑制脂肪酶活性,抑制类型为非竞争性抑制;在荷叶总生物碱质量浓度为12.5～600μg/mL范围内,对脂肪酶的抑制效果随其质量浓度的增加而增强,在600μg/mL时达到最大抑制率,为25.6%,当荷叶总生物碱质量浓度继续增加时,抑制率趋于平缓,保持在最大值附近.体内、体外试验结果均表明,荷叶总生物碱类物质具有降脂减肥作用,提示其可能具有预防肥胖、调节脂代谢紊乱的功效.     

响应面法优化玉米皮中阿拉伯木聚糖超声提取工艺研究

为了提高玉米淀粉生产企业废弃物中阿拉伯木聚糖的回收率,增加副产品的经济效益,采用超声—微波辅助提取工艺对玉米淀粉生产废弃玉米皮中的阿拉伯木聚糖进行回收,在单因素试验基础上,结合响应面设计法（BBD）对提取时间（A）、微波功率（B）、提取液浓度（C）和液料比（D）等因素进行二次回归模拟。结果表明：单因素对阿拉伯木聚糖产率影响大小排序为C> B> D> A;各因素之间交互影响对阿拉伯木聚糖产率影响大小的排序为C×D> A×B> A×C> A×D> B×C> B×D;获得最优提取工艺的条件为提取时间30 min,微波功率443 W,提取液浓度0.29 mol/L,液料比20.5∶1。经试验验证,该工艺条件下的阿拉伯木聚糖提取率为27.86%,与理论预测值的误差较小。该模型可行度较高,在玉米皮阿拉伯木聚糖的提取中具有推广应用价值。     

葡萄籽多酚提取条件优化及其脂肪酶抑制影响

【目的】研究葡萄籽中多酚的最优提取工艺条件并测定其对脂肪酶的抑制率.【方法】通过响应面法优化葡萄籽多酚的提取工艺,然后分析不同体积分数乙醇对AB-8大孔吸附树脂纯化的葡萄籽多酚的脂肪酶抑制率.【结果】葡萄籽多酚最佳提取条件为70%乙醇、纤维素酶添加量为0.5 mg/mL、料液比1∶10、提取温度54℃、提取时间39 min、提取次数4次;得到的葡萄籽提取物对胰脂肪酶活性抑制活力IC_(50)值为2.46 mg/mL.【结论】经过条件优化,多酚的提取率提高,所提取的多酚具有胰脂肪酶活性抑制活力.AB-8大孔吸附树脂法中不同乙醇洗脱组分对脂肪酶活力的抑制作用有一定差异,其中40%乙醇洗脱的葡萄籽多酚溶液对脂肪酶抑制效果最好.     

粗毛纤孔菌总三萜的纯化及对胆酸盐结合能力分析

为提高粗毛纤孔菌菌丝体和子实体总三萜的纯度及体外胆酸盐结合能力,研究有机溶剂、高径比(硅胶高∶硅胶柱直径)、上样量和硅胶量质量比、洗脱体系和洗脱剂比例对总三萜纯度的影响。并且在最佳的纯化条件下与其它纯化方法作对比。通过红外光谱对总三萜的结构进行初步分析。并通过体外模拟体内环境试验对比了粗提物和纯化物总三萜的体外胆酸盐结合能力。结果表明:在高径比55∶22、上样量和硅胶量质量比4∶80、洗脱体系为丙酮∶石油醚、洗脱剂体积比3∶1时,粗毛纤孔菌菌丝体和子实体乙酸乙酯萃取后的总三萜纯度最高分别为65.35%、42.32%,是粗提物总三萜的4.26和4.60倍,该技术与大孔树脂和单纯硅胶纯化技术相比菌丝体与子实体总三萜纯度均最大。红外光谱分析显示,菌丝体和子实体总三萜存在—CH_2、—CH_3、—S-O等官能团的差异,但都符合三萜类物质的特征结构。粗毛纤孔菌菌丝体和子实体总三萜纯化后体外胆酸盐结合能力明显提高,其中菌丝体总三萜的胆酸钠、甘氨胆酸钠和牛磺胆酸钠结合能力最强,分别为1.14、1.78和2.06μmol/100mg,是菌丝体粗提物总三萜胆酸盐结合能力的1.56、1.73和1.72倍。     

酸牦牛乳中乳酸菌降胆固醇作用及胆盐耐受性研究

为了从分离自甘肃酸牦牛乳中的23株乳酸菌中筛选能够同时降低胆固醇并耐受胆盐的乳酸菌,通过邻苯二甲醛法测定降胆固醇能力,并比较各菌株对三种形式的胆盐:牛胆汁、胆酸、甘胆酸钠的耐受性。结果表明,这些菌株在不同条件下的降胆固醇能力差异显著(P<0.05),多数菌株在不含牛胆汁的培养基中培养比添加牛胆汁时有着更好的对胆固醇的去除能力;死菌体对胆固醇的去除能力较弱;对各菌株对不同形式的胆盐耐受能力比较分析得出,各种形式的胆盐对乳酸菌的生长均有抑制作用,抑制顺序由强到弱依次为:甘胆酸钠>胆酸>牛胆汁;各菌株对胆盐的耐受力与降胆固醇能力没有相关性。通过比较选择出H1,I10和W2三株菌,作为功能性菌株为开发应用进行深入研究。     

金丝桃苷在刺五加各部位中的分布及其对胰脂肪酶活性的抑制作用

采用高效液相色谱法测定了刺五加根、茎干、新枝、茎皮、茎韧皮部、叶、花蕾、果中金丝桃苷的含量,并研究了金丝桃苷体外抑制胰脂肪酶的活性.结果表明:刺五加花蕾中金丝桃苷含量最高,达2.4％,金丝桃苷对胰脂肪酶活性有一定的抑制作用,质量浓度为1mg/mL时抑制率为24.852％.     

黑小麦阿拉伯木聚糖酶提工艺优化及抗氧化活性研究

【目的】研究黑小麦阿拉伯木聚糖(arabinoxylan,AX)的最佳酶提工艺及其抗氧化活性。【方法】以黑小麦为原料,利用响应面法优化木聚糖酶提取AX的最佳工艺条件,与纤维素酶提作对比;将两种酶提残渣用碱进行提取,比较分析酶提与残渣碱提所得AX的抗氧化性。【结果】木聚糖酶提AX(xylanase extract arabinoxylan,XAX)的最佳工艺为木聚糖酶量39.99 mg、超声时间90.20 min、超声温度56.13℃、超声功率150 W,AX得率为4.83%,碱提残渣XAX-1得率为11.21%;纤维素酶提AX(cellulase extract arabinoxylan,CAX)得率为2.33%,碱提残渣CAX-1得率为15.98%。XAX、CAX对·OH和DPPH的清除能力强于XAX-1和CAX-1;XAX、CAX、XAX-1、CAX-1的还原力较弱且差异不显著;铁离子螯合率为XAX-1、CAX-1XAX、CAX,而XAX及XAX-1的O2-清除率优于CAX及CAX-1。【结论】使用碱处理酶提所得残渣可以提高AX得率;4种方式提取的AX均具有一定的抗氧化性,但其抗氧化性不完全与阿魏酸含量呈正相关。     

米糠阿拉伯木聚糖提取工艺优化

以米糠为原料,在单因素试验的基础上,采用二次通用旋转组合设计方法,研究碱性过氧化氢提取阿拉伯木聚糖过程中,NaOH浓度、H_2O_2浓度和温度3个因素对其得率的影响。结果表明,最佳提取工艺为NaOH浓度0.72mol/L,H_2O_2浓度1.25%,提取温度为66℃,在此条件下阿拉伯木聚糖的得率为23.47%,其纯度为66.31%。     

多功能半纤维素酶的构建及其酶解应用分析

以前期构建的来源于嗜热厌氧乙醇菌(Thermoanaerobacter ethanolicus JW200)的双活性阿拉伯/木糖苷酶(XarB)和来源于疏棉状嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus DSM 5826)木聚糖酶A(XynA)融合酶为基础,在融合酶的两个催化结构域间插入多肽Linker,并通过优化Linker组成和长度避免催化结构域互相之间的干扰,以增强融合酶的催化效率。通过酶解燕麦木聚糖和麦麸试验发现,带有多肽Linker的融合酶催化效率得到了提高。     

几种常用除草剂对木霉菌生长和产孢量的影响

通过平板培养、毒力测定和孢子计数的方法,研究了精喹禾灵、苯磺隆、百草枯、农基阔锄等常见除草剂对木霉菌落生长和产孢量的影响。结果表明,精喹禾灵的毒性最高,田间施用剂量下的抑菌率为78.03%,产孢抑制菌为93.41%;苯磺隆、农基阔锄、百草枯田间施用量剂量下的抑菌率分别为4.93%、27.32%、11.27%,产孢抑制率分别为18.68%、41.20%、25.27%。在施用木霉做生防菌时,可适当考虑用苯磺隆或百草枯去除杂草。     

多功能融合酶基因Linker的优化及表达

在融合酶阿拉伯/木糖苷酶-木聚糖酶(Xar-xynA)之间插入不同组成和长度的多肽Linker,避免催化结构域相互之间的干扰,改善融合酶的催化效率。5个含不同长度及Ala/Gly比例连接肽Linker的融合突变体在大肠杆菌重组表达、纯化,并对融合酶的酶学性质、动力学参数和酶解作用进行研究。结果表明,融合酶Xar-L1/L2/L3-xynA和融合酶Xar-xynA有着相似的最适温度和最适pH值。其中融合酶Xar-L1-xynA在65~80℃和pH值6.6~8.2有更强的阿拉伯/木糖苷酶热稳定性和pH值稳定性,将融合酶Xar-L1-xynA在65℃保温60 min其阿拉伯/木糖苷酶活性有着明显的激活现象。并获得连接Xar和XynA的最优Linker:L1和L4,麦麸和玉米芯木聚糖产物酶解试验的结果表明,融合酶Xar-L1-xynA和Xar-L4-xynA比其他的融合酶有着更高的催化效率。