N-己酰高丝氨酸内酯对马铃薯生长及抗软腐病能力的影响

[目的]研究细菌个体间通讯信号N-己酰高丝氨酸内酯（C6-HSL）是否可以影响植物的生长和抗病能力。[方法]以马铃薯脱毒苗为试验材料,C6-HSL为诱导剂研究了经不同浓度C6-HSL处理后,马铃薯生长、抵抗胡萝卜软腐欧文氏菌浸染的情况,特别研究了C6-HSL对植株标志性防御酶活性和H2O2含量的影响。[结果]不同浓度的C6-HSL能明显抑制马铃薯的出根率和生根数。而对株高、茎节数及叶片大小没有影响;植物标志性防御酶类中POD和SOD的活性以及H2O2的产生量经C6-HSL诱导后显著提高,而PAL和PPO的活性则没有明显变化;抗痛试验中,经C6-HSL诱导的马铃薯植株能有效抑制胡萝卜软腐欧文氏菌的侵染,发病率明显低于对照组。[结论]细菌AHL有可能成为一种新的植物抗病激活剂。     

镉胁迫对桑树与马铃薯间作植株生理生化的影响

【目的】探明镉胁迫不同种植模式桑树与马铃薯植株超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性及丙二醛(MDA)和可溶性蛋白(SP)含量的变化,为桑树与马铃薯间作修复Cd污染土壤提供科学依据。【方法】在土培条件下,研究镉胁迫不同种植模式桑树与马铃薯植株SOD、CAT、POD活性及MDA、SP含量的变化。【结果】镉胁迫下,间作桑树根、茎和叶的SOD活性较单作显著降低17.89%、6.77%和14.10%,根、茎和叶的SP含量较单作显著提高24.39%、25.85%和4.84%,根的POD活性较单作显著升高187.62%;间作马铃薯叶的MDA含量较单作显著提高20.4%,茎的SOD活性较单作显著升高28.89%,根和叶POD活性较单作显著升高20.37%和28.35%。【结论】间作模式可改变镉胁迫桑树和马铃薯的生理特性,POD和CAT可清除Cd毒害产生的活性氧自由基。     

寡糖·链蛋白对马铃薯叶片抗氧化酶的影响

通过对3个不同抗病品种马铃薯植株上喷施6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂,测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)的活性变化,明确6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂诱导植物抗病机制,筛选出最优药剂稀释倍数,为马铃薯抗病提供理论依据。结果表明:在一定时间内,马铃薯植株叶片SOD、POD和CAT酶活性均呈现上升趋势。可见,6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂可以提高马铃薯体内抗氧化酶活性,从而增强其抗病性。     

甘蓝型油菜防御酶活性变化与抗病性的关系

对不同抗性油菜品种7～8叶期及盛花期感染油菜菌核病后及对照叶片中几种重要防御酶类活性变化的研究结果表明：7～8叶期叶片SOD活性极显著高于盛花期，而盛花期POD、PPO、PAL活性显著或极显著高于7～8叶期。与对照相比，感病品种处理叶片中SOD、POD活性显著增加，而抗病品种变化较小且因品种而异；7～8叶期及盛花期处理叶片中，各品种(系)PPO活性有不同程度的下降，其中抗(耐)菌核病品种(系)下降达显著水平，并且中R888达极显著水平；7～8叶期各品种(系)处理叶片中PAL活性没有明显变化，盛花期各品种(系)处理叶片中PAL活性均显著地下降，并以抗(耐)菌核病品种(系)下降较多，其中，中R888的PAL活性的下降达极显著水平。酶活与病斑直径的相关性分析也表明，品种抗性主要与7～8叶期对照叶片中SOD、POD活性及盛花期对照SOD、PPO、PAL活性水平较高有关，感病品种处理叶片中防御酶活性与对照相比增加比例较高，说明酶活增加比例与感病性有关。不同时期不同品种(系)防御酶活性的变化不同说明不同抗(耐)菌核病品种(系)在不同的发育时期存在不同的抗病机制。     

T-2毒素在马铃薯品种对镰刀菌干腐病抗性评价中的应用

为明确T-2毒素作为抗病筛选指标的可行性,采用T-2毒素对不同抗性的马铃薯品种进行抗病性评价,对其进行抗病生理生化特性研究。结果表明,50 ng/mL T-2毒素可以作为马铃薯抗干腐病抗病性筛选的最佳指标。在生理生化测定中,经T-2毒素处理的3个品种块茎内的可溶性糖和还原糖含量均增加;细胞防御酶——超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性增强;苯丙氨酸代谢途径关键酶苯丙氨酸解氨酶(PAL)和4-香豆酰-辅酶A连接酶(4CL)活性提高;丙二醛(MDA)含量升高。抗病品种可溶性糖、还原糖、SOD、POD、PAL、4CL生理指标均高于感病品种,而抗病品种的MDA含量低于感病品种。由此表明,T-2毒素可以作为马铃薯抗病筛选的指标。     

马铃薯对马铃薯块茎蛾取食危害的生理响应

[目的]明确云南马铃薯主栽品种合作88和青薯9号对马铃薯块茎蛾危害胁迫的生理响应,为抗虫马铃薯品种筛选及抗虫机制研究提供科学依据.[方法]室内盆栽合作88和青薯9号马铃薯,人工接种健康的马铃薯块茎蛾初孵幼虫,分别于取食危害胁迫0、3、6、12、24、48、72和96 h时进行马铃薯叶片取样,每处理重复3次;采用紫外分光光度计法测定不同取食胁迫时段马铃薯叶片丙二醛(MDA)、可溶性糖和过氧化氢(H2O2)含量及主要防御酶超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性.[结果]在马铃薯块茎蛾取食胁迫的3~96 h,两个马铃薯品种叶片的MDA和H2O2含量均增加,受害合作88和对照叶片的MDA平均含量分别为8.24±1.55和5.61±0.66 nmol/gFW,H2O2平均含量分别为2.92±0.16和2.14±0.11 U/gFW;受害青薯9号和对照叶片的MDA平均含量分别为9.60±0.58和4.62±0.55 nmol/gFW,H2O2平均含量分别为3.03±0.21和2.45±0.14 U/gFW;其中合作88叶片MDA和H2O2含量达最高值的时间(取食胁迫24 h)均早于青薯9号,青薯9号则分别在取食胁迫96和48 h时达最大值.虫害后,合作88叶片可溶性糖平均含量略低于对照,青薯9号叶片可溶性糖平均含量略高于对照.两个品种中POD活性均略低于对照,其中受害合作88和对照叶片POD平均活性分别为143.55±21.21和144.41±25.43 U/gFW,青薯9号和对照叶片POD平均活性分别为53.17±3.65和67.99±2.34 U/gFW.虫害后,合作88和青薯9号叶片SOD活性均高于对照,其平均活性分别增长了59.13%和20.61%.[结论]云南马铃薯主栽品种合作88对马铃薯块茎蛾取食危害胁迫的生理响应强于青薯9号.     

接种瘤黑粉病对不同抗性玉米品种生理生化指标的影响

采用孢子粉粘附法和孢子液注射法,对‘郑58’、‘178’、‘齐319’及其F1代等7个材料进行了瘤黑粉菌人工接种鉴定,测定了供试材料根、茎、叶SOD、POD的活性及蛋白质含量和可溶性糖含量.结果表明:在接种初期与病症高发期,根、茎SOD活性升高,叶片中除抗病亲本‘178’外,SOD活性均降低;POD活性随染病期时间延长,有逐渐升高的趋势;随染病期时间延长,根、茎中蛋白质含量、可溶性糖含量大多逐渐降低,而叶片中蛋白质含量和可溶性糖含量有逐渐升高趋势.接种亲本与未接种亲本相比,抗病亲本SOD活性、POD活性及蛋白质含量、可溶性糖含量升幅均高于感病亲本.     

补光对'金观音'相关酶活性的影响

[目的]研究补光对‘金观音’茶树叶片PPO、POD和SOD活性的影响。[方法]采用3年生砂培‘金观音’茶树为试验材料,以自然光为CK,用荧光灯(白灯、蓝灯、红灯)、LED灯和钠灯进行补光处理。在补光第3、6和9天,分别测定PPO、POD和SOD活性。[结果]各光质补光处理第6天叶片PPO活性均显著高于CK,其中钠灯补光处理第6、9天的PPO活性最高,且在第6天比CK高24.6%;各光质补光处理第3、6天叶片SOD活性均低于或显著低于CK,第9天均显著高于CK;钠灯、LED灯补光处理与CK相比,对叶片POD活性影响呈现"高—低—高"的变化趋势,第6天钠灯补光处理显著低于CK。[结论]6 d的短时间钠灯补光处理不仅未破坏‘金观音’叶片SOD、POD保护酶的平衡而造成胁迫,还能显著提高PPO活性,可为生产上采用间歇补光栽培以提高PPO活性提供参考。     

茉莉酸对马铃薯苗期低温胁迫耐性的影响

[目的]研究不同茉莉酸(JA)施用浓度对马铃薯叶片活性氧(ROS)含量及其清除酶活性以及抗寒关键基因CBF表达的影响,初步确定提升马铃薯抗寒性的最适施用浓度,为马铃薯产业的发展提供一定的理论基础.[方法]以马铃薯品种费乌瑞它为研究对象,采用叶面喷施JA的方法,探究正常和低温胁迫条件下,植株叶片的活性氧含量,活性氧清除酶过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶SOD活性,以及抗寒关键基因CBF的表达.[结果]随着JA浓度的增加,马铃薯苗期叶片的活性氧含量逐渐降低,低温胁迫后活性氧含量能维持在较低水平,适宜浓度范围为100～400μmol/L,以200μmol/L JA处理效果最好,ROS含量降低47.6％.JA能够提升活性氧清除酶CAT和POD活性,且随着JA浓度增加效果越显著,低温胁迫后200μmol/L JA处理分别显著提升1.30、2.53倍.正常条件下,JA处理抑制SOD活性最低达70.7％;低温胁迫条件下,JA又可能通过其他途径提升SOD活性,最高达2.11倍.外源JA能诱导CBF1-3基因的表达,而低温胁迫能促进内源JA的合成,诱导CBF1-3基因的表达,提升马铃薯的抗寒性.[结论]马铃薯苗期的抗寒性与外源施加JA的浓度具有明显的相关性,适宜的JA浓度能够促进抗寒关键基因CBF1-3的表达,显著提升CAT、POD、SOD的活性,抑制低温胁胁迫诱导的活性氧生成,提高马铃薯抗寒性.适宜施用JA浓度为100～400μmol/L,以200μmol/L效果最佳.     

臭氧水浇灌和喷施对马铃薯幼苗生理特性的影响

为研究臭氧水处理对马铃薯幼苗生理特性的影响,本试验以清水为对照,采用1.0 mg/L臭氧水土壤浇灌和0.6 mg/L臭氧水叶面喷施处理,测定了幼苗生长35 d后叶片质膜透性、SOD、POD和CAT活性及矿质元素含量等指标。结果表明,臭氧水浇灌和喷施处理均能显著降低马铃薯叶片质膜透性,显著增加马铃薯叶片POD和CAT活性,明显提高马铃薯幼苗抗逆性;臭氧水喷施处理的马铃薯叶片Ca含量显著降低,臭氧水浇灌和喷施处理的马铃薯叶片Fe含量显著增加,且臭氧水浇灌处理增加幅度更大。     

表油菜素内酯诱导大白菜抗软腐病研究

试验采用叶面喷施的方法,研究了24-表油菜素内酯(24-Epibrassinolide,EBR)对大白菜软腐病的诱抗作用及其生理机制。结果表明,外源EBR处理大白菜幼苗病情指数明显比对照降低,下降了25.8%;喷施EBR提高了大白菜叶片中H2O2含量,使丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量下降,提高了过氧化氢酶(Catalase,CAT)活性,过氧化物酶(Peroxidase,POD)活性先缓慢升高然后下降;接种软腐病菌后,EBR使H2O2和MDA含量缓慢增加,但EBR处理MDA含量低于对照处理,显著提高了CAT活性,POD活性与对照相比下降,呈现缓慢升高趋势;EBR处理明显促进幼苗的生长,即使在接种软腐病菌期间,植株的长势也比对照强。说明EBR通过调节植物体内氧的代谢平衡,增强对软腐病的抗性。     

胡萝卜软腐欧氏杆菌菌落突变型生物学性状的研究

从腐烂马铃薯块上分离的221株Erwinia.carotouora pv.carotovora(以下简称ECC)中有91株为菌落突变型,在营养琼脂上生长不良,在TZC平板上菌落乳白色。与野生型菌株相比,它们的耐酸能力弱,存活时间短,对马铃薯块的致病力弱,其胞壁水解酶(果胶裂解酶和蛋白酶)活性低。从继代培养中分离的类似突变株可通过接种马铃薯块而得到恢复,而自然条件下分离的则不能。     

风信子软腐病病原的鉴定和杀菌剂试验

在上海生长的风信子发生软腐病的球茎中分离了菌株EP,对纯化的菌株EP进行传统方法鉴定;并进行16S rDNA序列同源性分析,结果表明EP与Erwinia carotovora subsp.carotovora 同源性达到97％,确定风信子软腐病病原为Erwinia carotovora subsp.carotovora...     

铁棍山药内生菌的分离及对白菜软腐菌拮抗菌的筛选

用涂布平板法从铁棍山药(Dioscoreaopposita Thunb. CV. Tiegun)中分离得到32株内生菌菌株。用抑菌圈法测定其对白菜软腐菌(Erwiniacarotovora var. carotovora)的拮抗作用,共得到11株对该病原菌有拮抗作用的菌株,占菌株总数的34.4%。其中抑菌圈直径大于或等于10mm的菌株有4株,分别是B-2、B-5、B-6和F-8,占菌株总数的12.5%,抑菌圈直径最大的可达15mm。对具有拮抗作用的菌株进行革兰氏染色和芽孢染色,结果表明:这11株菌株全为细菌,均无芽孢;革兰氏染色阳性(G+)的有4株,革兰氏染色阴性(G-)的有7株;有3株菌株为球菌,其余为杆菌。     

人参细菌性软腐病组织解剖研究

用人参软腐细菌「胡萝卜欧文氏菌胡萝卜软腐变种（Ｅｒｗｉｎｉａ ｃａｒｏｔｏｖｏｒａ ｐｖ。ｃａｒｏｔｏｖｏｒａ Ｄｙｅ）」接种参根后在２４－２５℃下培养２－１４ｈ，电镜扫描结果表明，接种参根２ｈ，病原细菌在参根表皮细胞定位，随着接种时间的延长，病原细菌向参根组织内部扩展并繁殖，接种６ｄ后可在参根各部位的组织中观察到大量的细菌。     

高温胁迫对马铃薯幼苗生长和部分生理指标的影响

(目的)高温逆境会严重抑制马铃薯生长发育,导致产量下降,造成严重经济损失,本论文通过分析高温胁迫对马铃薯幼苗生长情况和部分生理指标的影响,为马铃薯抗热性机制研究提供参考。(方法)实验以闽薯1号为材料,高温胁迫处理马铃薯植株,观测胁迫条件下植株生长情况变化,超氧阴离子(O2-)、丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)和脯氨酸(PRO)含量变化,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)等保护酶活性变化。(结果)结果表明高温对植株的株型,叶片大小,长势都造成了一定的影响;生理指标SOD呈现先上升后下降的趋势,POD与CAT则先下降后上升;MDA、O2-、H2O2、PRO含量都出现持续上升的趋势。(结论)幼苗体内活性氧的积累,膜质氧化加剧可能是导致马铃薯高温伤害的原因之一。     

在苏云金芽胞杆菌中高效和稳定表达AiiA蛋白

 【目的】摸索提高AiiA蛋白对AHLs分子的降解活性和对胡萝卜软腐欧文氏菌感染马铃薯产生病害的抑制能力的方法。【方法】苏云金芽胞杆菌的AiiA蛋白是一种胞内蛋白，能降解参与诱导调控多种植物病原菌致病基因表达的N-乙酰高丝氨酸内酯信号分子。本文采用两种方式来提高AiiA蛋白的活性，即利用苏云金芽胞杆菌S-层蛋白在细胞表面表达该蛋白以及利用苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白基因cry3Aa启动子来提高aiiA基因的表达量。为此构建该蛋白基因与细胞表面S-层蛋白的锚定区结合而成的融合蛋白基因slh-aiiA以及带有基因cry3Aa启动子的融合基因pro3A-aiiA。为了提高表达的稳定性以及去掉重组菌中非苏云金芽胞杆菌片段，本文构建了解离载体pBMB5401，并将上述两个融合基因单独或同时装入解离载体pBMB5401，分别得到重组质粒pBMBcaiiA，pBMB3aiiA和pBMB3439。转化苏云金芽胞杆菌无晶体突变株BMB171，随后导入温度敏感型辅助质粒pEG922，重组质粒在整合酶的作用下发生体内重组，消除了抗性基因等非必需片段。【结果】得到3个重组菌BMBcaiiAR，BMB3aiiAR和BMB3439R，在无抗性选择压力下的稳定性均在90%以上。融合蛋白SLH-AiiA及pro3A-AiiA在解离后的重组菌中得到表达，具有对AHLs分子的降解活性和对胡萝卜软腐欧文氏菌感染马铃薯产生病害的抑制能力。【结论】在苏云金芽胞杆菌中高效和稳定表达AiiA蛋白,可增强其对AHLs分子的降解活性和对胡萝卜软腐欧文氏菌感染马铃薯产生病害的抑制能力，当同时结合两种方式来表达AiiA蛋白时效果最好。     

几种杀菌剂对黄瓜细菌性斑点病及大白菜软腐病的抑制作用

采用抑菌圈法和含毒介质法测定几种杀菌剂对黄瓜细菌性斑点病和大白菜软腐病的抑制作用。结果表明,抑菌效果较好的为农用链霉素、新植霉素和水合霉素;丙森锌对黄瓜细菌性斑点病较好,而对大白菜软腐病则较差;氢氧化铜、噻菌铜及中生菌素抑制作用一般;春雷霉素抑菌活性较差。