铁皮石斛圆球茎增殖影响因素的研究

[目的]探讨培养基的不同组成对铁皮石斛圆球茎增殖的效果及影响,为提高其组培种苗的商业化生产效率提供技术参考。[方法]以无菌播种获得的铁皮石斛圆球茎为材料,对影响铁皮石斛圆球茎增殖的几种因素进行了研究。[结果]铁皮石斛圆球茎在1/2MS培养基中增殖效果较好;在1/2 MS＋NAA 0.5 mg/L培养基中加入BA 2.0 mg/L可促进铁皮石斛圆球茎增殖;培养基中加入天然物质有利于铁皮石斛圆球茎的增殖生长,以加入椰子汁100 ml/L为最佳。[结论]铁皮石斛圆球茎在1/2 MS＋NAA 0.5 mg/L＋BA 2.0mg/L＋椰子汁100 ml/L培养基上增殖效果最佳,增殖系数达到4.8。     

铁皮石斛愈伤组织稳定培养体系的建立

为了建立稳定的铁皮石斛愈伤组织培养体系,试验开展了铁皮石斛愈伤组织最佳外植体类型、诱导培养基配方以及继代培养基配方的筛选等研究。结果表明,采用铁皮石斛茎段为外植体,愈伤组织诱导效果最好;初步诱导出的愈伤组织在MS+2 mg·L~(-1)KT+2 mg·L~(-1)2,4-D+0.2 mg·L~(-1)NAA的培养基上能够诱导生长速度快、质地硬、结构松散的理想愈伤组织;经过筛选的愈伤组织在MS+0.5 mg·L~(-1) KT+1 mg·L~(-1) 2,4-D的培养基上进行继代培养,愈伤组织可以长时间保持理想状态。     

不同激素浓度对铁皮石斛高效快繁体系的影响

以MS培养基为基本培养基,采用正交试验设计方法探讨不同的激素与浓度组合对铁皮石斛愈伤诱导、芽分化与根诱导的影响。结果表明:以铁皮石斛幼叶为外植体,愈伤诱导的最适培养基为MS+1.25 mg/L 6-BA+1.5mg/L NAA;芽分化的最适培养基为MS+2.0 mg/L6-BA+0.8 mg/L NAA;根诱导的最适培养基为MS+0.75 mg/LIBA+NAA0.5 mg/L。同时研究发现,在一定的浓度范围内,较高浓度的NAA有利于铁皮石斛幼叶愈伤诱导,但对芽的分化有一定的抑制作用。在不定根的诱导中,6-BA对根的诱导有明显的抑制作用。     

猪笼草的组织培养

以猪笼草(Nepenthes mirabilis)腋芽为试材,研究猪笼草的组培快繁,结果表明,外殖体的建立以1/2 MS+6-BA1+NAA0.05 培养基液体培养春季(3～6月)进行最佳.愈伤组织(或不定芽)增殖以MS+6-BA1+Ad10+NAA0.1+100 ml/L椰子汁最佳,高浓度(200 ml/L)的椰子汁不利于愈伤组织(或不定芽)增殖;继代芽的增殖以MS+6-BA1.5+Ad1～5+NAA0.1+100～200 ml/L椰子汁最好;生根培养用1/2 MS+6-BA0.1+NAA1.0,20 d后可长出2～4条根.     

猪笼草的组织培养

以猪笼草（Nepenthes mirabilis) 腋芽为试材,研究猪笼草的组培快繁,结果表明,外殖体的建立以1／2MS＋6－BA1＋NAA0．05培养基液体培养春季（3－6月）进行最佳。愈伤组织（或不定芽）增殖以MS＋6－BA1＋Ad10 NAA0.1 100ml/L椰子汁最佳,高浓度（200ml/L)的椰子汁不利于愈伤组织（或不定芽）增殖;继代芽的增殖以MS＋6－BA1.5 Ad1-5 NAA0.1 100-200ml/L椰子汁最好,生根培养用1／2MS＋6－BA0.1 NAA1.0,20d后可长出2－4条根。     

安祖花愈伤组织增殖与分化培养基的优化

[目的]优化安祖花愈伤组织增殖与分化的培养基。[方法]以安祖花愈伤组织为材料,研究基本培养基、外源激素6-BA和NAA对其增殖、分化及分化苗质量的影响,同时检测内源激素含量的变化,观察分化苗的表型特征。[结果]安祖花愈伤组织增殖的适宜基本培养基为:改良MS(1/2NH4NO3+1/2CaCl2),增殖倍数达4.97倍。6-BA和NAA均影响安祖花愈伤组织的增殖、分化,在适宜的温度条件下,当6-BA浓度为0.75mg/L时,愈伤组织增殖较快,分化苗的质量好。安祖花愈伤组织增殖与分化适宜的NAA浓度范围为0.05~0.2mg/L。外源激素的变化引起了安祖花愈伤组织内源激素的改变。[结论]安祖花愈伤增殖与分化的适宜培养基为:MS(1/2NH4NO3+1/2CaCl2)+0.75mg/L6-BA+0.1mg/LNAA+30g/L白糖+7.0g/L琼脂粉(pH值5.8~6.0)。     

美国红枫种胚愈伤组织诱导、增殖培养技术研究初报

对美国红枫种胚进行愈伤组织的诱导、增殖培养研究的结果表明：愈伤组织诱导最适培养基为1/2MS＋6-BA2＋IAA0.5,最适增殖培养基为1/2MS＋6-BA2＋NAA0.5,诱导和增殖培养基均附加1．5％葡萄糖、0．8％琼脂;无机盐含量低利于愈伤组织的诱导。     

激素浓度和配比对蝴蝶兰离体培养的影响

以蝴蝶兰品种‘兄弟女孩’的再生幼芽为外植体,进行丛生芽增殖培养以及幼苗的生根培养,分析不同浓度及配比的细胞分裂素(6-BAP)与生长素(NAA)对蝴蝶兰丛生芽分化和增殖的影响,并研究了添加物椰子汁、香蕉泥、蛋白胨和酪蛋白对抑制外植体褐化的影响.结果表明:培养基1/2 MS+10.0 mg/L 6-BAP+0.1 mg/L NAA+ 200 mL/L椰子汁,丛生芽的增殖倍数最高;1/2 MS+2.0 mg/L 6-BAP+1.0 mg/L NAA+200 mL/L椰子汁+2 g/L活性炭,是蝴蝶兰壮苗生根的最佳培养基.培养基中添加椰子汁能抑制褐化,提高丛生芽增殖倍数,利于芽苗生长.     

玉竹愈伤组织诱导及其细胞悬浮培养体系的建立

以玉竹叶片和根状茎为外植体,研究植物生长调节剂、碳源和pH对玉竹愈伤组织诱导的影响以及植物生长调节剂对愈伤组织增殖的影响,通过正交试验初步建立并优化玉竹愈伤细胞的悬浮培养体系。结果表明,叶片和根状茎愈伤组织诱导的最佳培养基均为MS+1.0mg·L~(-1)?6-BA+0.5mg·L~(-1)?NAA+30%蔗糖,培养基最佳pH5.6,叶片和根状茎愈伤组织增殖的最佳植物生长调节剂组合均为2.0mg·L~(-1)?6-BA+0.8mg·L~(-1)NAA,且根状茎愈伤组织的诱导率和增殖倍数均明显高于叶片。根状茎愈伤细胞悬浮培养的最佳接种量80g·L-1,最佳植物生长调节剂组合1.5mg·L~(-1)6-BA+0.6mg·L~(-1)?NAA,细胞生长曲线与多糖含量变化曲线均呈"S"形,细胞最佳继代周期16d,多糖含量在培养14d时最高,培养基pH呈先下降后上升然后趋于稳定趋势。     

不同浓度的外源激素对香石竹组织培养的影响

研究了不同浓度的外源激素对香石竹组织培养过程中愈伤组织诱导、芽分化和芽增殖的影响。结果表明,愈伤组织的诱导与BA与NAA浓度比及KT浓度有关;芽诱导与BA、KT、NAA均有关;芽增殖与BA的浓度及BA和NAA的浓度比有关。MS+BA 0.3 mg/L+KT0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L培养基对愈伤组织诱导效果最好;最佳的芽分化培养基为MS+BA 0.5 mg/L+KT 0.5 mg/L+NAA 2.0 mg/L,芽分化率达65%;芽增殖培养基以MS+BA 0.3 mg/L+NAA 0.1 mg/L为最佳,增殖芽数最多,玻璃化率最低。     

几种因素对高山红景天愈伤组织诱导和增殖的影响

以高山红景天叶片为材料,研究了BA和NAA浓度对愈伤组织诱导的影响及MS培养基中氮和磷对愈伤组织增殖的影响。结果表明,在MS培养基中加入BA3mg／L和NAA0．3mg／L时高山红景天叶片愈伤组织的诱导效果好于其他BA和NAA浓度处理,诱导率达到62．2％。将诱导出的愈伤组织进行增殖培养时,将MS培养基中NH4＋／NO3-配比由原有的20／40mM调节为30／30mM,PO43-浓度为1．25mM时,愈伤组织增殖生长良好,增殖系数达16．3。     

铁皮石斛原球茎悬浮培养及其多糖积累的研究

将利用铁皮石斛种子诱导的原球茎在液体条件下培养,研究植物激素和有机添加物对原球茎增殖以及多糖积累的影响。结果表明,在N6液体培养基中附加1.0mg/L NAA+1.0mg/LKT+5%香蕉汁提取物+5%土豆汁提取物,最有利于铁皮石斛原球茎增殖和多糖积累,培养30d时,原球茎鲜质量达到122.9g/L,多糖含量在25d时达到24.2%。结果提示,利用液体培养规模化生产铁皮石斛原球茎是可行的,是铁皮石斛大田传统栽培方式的重要替代途径。     

蝴蝶兰离体培养影响因素研究

以蝴蝶兰品种‘郑农鸿运’的丛生芽为外植体,进行丛生芽增殖培养以及幼苗的生根培养,分析不同浓度及配比的细胞分裂素(6-BA)与生长素(NAA),椰子汁、香蕉泥、土豆汁、蛋白胨对蝴蝶兰丛生芽分化和增殖的影响。结果表明,1/3MS+3.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+150 mL/L椰子汁,蝴蝶兰丛生芽增殖倍数最高,蝴蝶兰壮苗与生根的最佳培养基为1/3MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+150 mL/L椰子汁;培养基上添加椰子汁能提高增殖倍数,利于苗子生长。     

紫叶加拿大紫荆组织培养研究

研究了外植体采集时间,不同质量浓度的6-BA、NAA、蔗糖以及不同部位茎段对紫叶加拿大紫荆增殖生长的影响,并初步研究了基本培养基I、BA、NAA对生根的影响。结果表明,紫叶加拿大紫荆外植体最佳的采集时期为5月;其增殖培养基为WPM+6-BA 1.5～2.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L,增殖系数最高达3.3;带愈伤组织的下部茎段的增殖效果好于不带愈伤组织上部茎段,上部茎段在高质量浓度的6-BA中增殖效果好;基本培养基、IBA质量浓度、NAA质量浓度对生根率有影响,最佳的配比是MS+IBA 5 mg/L+NAA 0.5 mg/L。     

铁皮石斛无菌播种技术研究

研究了铁皮石斛播种、原球茎分化及生根过程中不同激素种类、不同激素配比、不同添加物对其生长的影响,量化了透气性对生长量的影响。结果表明:激素不利于铁皮石斛种子的萌发;1/2MS的萌发率最高达97%,略高于MS的萌发率(95%);在铁皮石斛增殖分化的过程中,无激素愈伤分化更多,当6-BA、NAA激素配比为5∶2时利于苗分化,当6-BA与NAA达到10∶1时会产生畸形苗;当培养基中不含有任何激素时产生更多的愈伤组织且愈伤非常整齐。生根过程中,NAA的浓度过大反而影响生根的质量,以0.5 mg/L最佳;加入活性炭的培养基中,产生的根为白色的,在未加入活性炭的培养基中,根颜色多为绿色。石斛作为气生性兰科植物,对透气性具有一定的要求,透气性好对苗高及生根量都有很好的促进作用。     

铁皮石斛的组织培养与快速繁殖研究

以铁皮石斛(Demdrobium cardidum Wall.ex Lindl)无菌幼苗茎段为外植体,分别研究了不同基本培养基、天然附加物和植物生长调节剂对铁皮石斛原球茎、不定芽诱导、增殖和生根的影响.结果表明,在不定芽诱导和增殖中,4种基本培养基中以B5的效果最好.而芽增殖率则以B5基本培养基中添加O.1 mg/L6-BA的效果最好;在3种天然附加物中,以添加椰子汁对芽的增殖效果最好;原球茎的增殖以1.0 mg/L的NAA效果最佳,诱导生根则以1.0 mg/L的NAA效果最明显.     

铁皮石斛多倍体诱导研究

[目的]研究铁皮石斛的多倍体诱导。[方法]以铁皮石斛蒴果为材料,诱导萌发出铁皮石斛圆球茎,研究不同浓度的NAA、6-BA对铁皮石斛圆球茎增殖的影响;以秋水仙素作为诱导剂,研究不同浓度秋水仙素、处理时间对多倍体铁皮石斛诱导的影响。[结果]NAA浓度为1.5 mg/L、6-BA浓度为2.0 mg/L时,铁皮石斛圆球茎增殖效果最好;秋水仙素浓度越低、处理时间越短时,成活率越高、诱导率相对较低;随着秋水仙素浓度增大,处理时间延长,诱导率升高,但死亡率增大。[结论]秋水仙素浓度在0.15%、处理时间为48 h时,成活率达40%,诱导率为30%,效果最好。     

桂花愈伤组织的诱导与增殖

[目的]探索影响桂花愈伤组织诱导及增殖的激素组合。[方法]以紫银桂的幼叶、茎尖和幼胚为材料,对影响桂花愈伤组织形成和继代培养的激素组合进行研究。[结果]叶片、茎尖和幼胚在不同培养基中均能产生愈伤组织。在诱导培养基中NAA浓度为0.3 mg/L的条件下,当幼胚、幼叶和茎尖培养基中6-BA浓度分别为3.0、5.0和5.0 mg/L时,愈伤组织的诱导率最高。在诱导培养基中NAA浓度为0.5 mg/L的条件下,当幼胚、茎尖和幼叶培养基中6-BA浓度为3.0、3.05、.0 mg/L时,愈伤组织的诱导率最高。从节省成本的因素考虑,最适合愈伤组织增殖的激素组合应为6-BA 2.0+NAA 0.5 mg/L。[结论]该研究为桂花愈伤组织的诱导和增殖的进一步研究奠定了基础。     

红香蕉组培培养基的优化研究

采用正交设计法，研究红香蕉组培培养基中的无机盐、蔗糖及细胞分裂素等重要组成成分和细胞分裂素6－BA与生长素NAA的浓度配比对红香蕉快繁增殖的影响。结果表明：培养基中无机盐浓度对芽的诱导作用大于蔗糖浓度，细胞分裂素影响最小；在6－BA4.5mg／L的基础上，配合加入NAA0.3mg/L，芽的增殖效果更好。红香蕉增殖培养基最优化组合为：MS＋6－BA4.5mg/L NAA0.3mg/L 蔗糖2％。     

铁皮石斛丛生芽增殖的均匀试验

通过均匀试验筛选出铁皮石斛丛生芽增殖的适宜培养基,采用U9(95)试验表,考察6-BA、NAA、KT等激素及其浓度对铁皮石斛丛生芽增殖的影响。运用SPSS 17.0软件进行统计学分析,并建立多元回归方程。结果表明,植物激素6-BA、NAA、KT对铁皮石斛丛生芽的增殖均有一定的影响,其中,6-BA>NAA>KT,当6-BA、NAA、KT浓度分别为2.7、0.1、0.1mg·L-1时,丛生芽的增殖系数最大。并分析了不同附加物培养基对铁皮石斛丛生芽增殖的影响,得到最优培养基配方为:1/2MS+2.7 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1KT+0.1 mg·L-1NAA+200 g·L-1土豆汁。