欧李优系试管苗增殖关键技术研究

以欧李优系试管苗为试材,采用单因素试验设计,研究了不同生长调节物质组合、基本培养基类型、附加物和蔗糖浓度对试管苗生长状态和增殖效率的影响。结果表明:在MS+6-BA 0.5mg·L~(-1)+KT 0.5mg·L~(-1)+IBA 0.05mg·L~(-1)培养基上,附加水解乳蛋白(LH)300mg·L~(-1)、蔗糖35g·L~(-1)、琼脂5.8g·L~(-1),为欧李优系试管苗增殖的最佳培养条件。     

杜梨组培生根过程中多胺、内源激素及相关氧化酶活性的变化

【目的】探究杜梨组培苗生根诱导过程中内源激素、多胺类物质及相关氧化酶活性变化的生理响应机制。【方法】以长势相近的杜梨继代苗为试材,筛选优化了生根培养基配方,分别在生根诱导0、3、7、10、15 d后,测定分析了基部茎段多胺类物质、内源激素含量及关联酶活性。【结果】(1)激素配比2.0 mg·L~(-1)IAA+0.5 mg·L~(-1)IBA的生根效果良好,IAA和IBA两种激素共同诱导杜梨生根效果要优于单一激素处理;(2)在生根诱导0～15 d内,精胺(Spm)和亚精胺(Spd)含量呈现下降→升高→下降→升高的变化趋势,腐胺(Put)含量则呈现出下降→上升的变化趋势;内源激素IAA、ABA含量均呈现先下降后升高的趋势,最低值出现在第7天,GA含量也呈现先下降后上升的变化趋势,最低值出现在第3天,ZR含量呈现出下降→升高→下降的变化趋势;两种关联酶IAAO和PPO酶活性均呈现增高→降低→增高的趋势(;3)Spd与IAA、ABA、IAA/ABA IAA/ZR及IAAO酶活性均存在极显著正相关关系(p 0.01),IAA与Spd、GA、ABA及IAA/ABA、IAA/ZR、PPO酶活性在α=0.01水平达到极显著正相关。【结论】杜梨较适宜的生根培养基为:1/2MS+2.0 mg·L~(-1)IAA+0.5 mg·L~(-1)IBA+7.5 g·L~(-1)琼脂+25.0 g·L~(-1)蔗糖;IAA/ABA、IAA/ZR比值增大更有利于杜梨不定根的发生;多胺类物质中Spd含量与杜梨不定根发生紧密相关;生根诱导后期,GA含量增加对杜梨不定根发生并无明显的抑制作用。     

蔗糖浓度对葡萄试管苗生长及光合作用的影响

糖为植物生长发育提供能量,也是形态建成的物质基础。但培养基的蔗糖浓度对葡萄试管苗生长及光合作用的影响研究较少,以‘黑比诺’葡萄试管苗为试材,以GS为基本培养基、蔗糖浓度30g/L为对照,分别研究蔗糖浓度0、60g/L对‘黑比诺’葡萄试管苗生理指标和光合参数的影响。结果表明:蔗糖浓度为30g/L试管苗生长状况最佳,试管苗干鲜重、叶绿素含量、可溶性糖含量均显著高于其他2个处理,总糖含量无显著差异;蔗糖浓度60 g/L处理试管苗叶片可溶性蛋白含量显著高于其他2个处理,在高糖及无糖处理下,试管苗叶片蒸腾速率(E)、气孔导度(Gs)与净光合速率(Pn)均显著低于正常浓度处理;叶绿素a、叶绿素b、光合电子传递速率(ETR)、最大量子产量(Fv/Fm)在蔗糖浓度30 g/L处理下均显著高于其他2个处理,叶片中不同激素受蔗糖浓度的影响各不相同。综上,蔗糖浓度能够影响葡萄试管苗生物量、叶绿素相对含量、可溶性蛋白、可溶性糖及总糖含量变化,培养基蔗糖浓度过高或过低会影响叶绿素荧光参数的变化,进而影响光合作用。     

酿酒葡萄“赤霞珠”组织培养快繁技术优化

以酿酒葡萄"赤霞珠"为试材,采用组织培养法,研究了不同基本培养基与不同IBA浓度的组合及不同培养容器对酿酒葡萄"赤霞珠"试管苗生长的影响,以期优化酿酒葡萄"赤霞珠"试管苗培养技术体系。结果表明:适合"赤霞珠"试管苗组织培养的最佳培养基为1/2B5+0.2mg·L~(-1) IBA+30g·L~(-1)蔗糖+7g·L~(-1)琼脂+1g·L~(-1)活性炭;在透气膜直径为3.0cm,透光率为90%的玻璃培养容器中,"赤霞珠"试管苗生长健壮,移栽成活率最高,达96.67%。     

矮壮素对油莎豆生理特性及内源激素含量变化的影响

以油莎豆‘石研2号’(河南圆粒)为试材,在其结块茎前期,用不同浓度梯度依次为0(CK)、100、500、1 000、1 500、2 000mg·L~(-1)的矮壮素(CCC)进行喷施,测定油莎豆株高、叶片叶绿素含量、块茎的可溶性蛋白质和可溶性糖含量及内源激素含量,以研究植物生长调节剂矮壮素(CCC)对油料作物油莎豆生理特性及内源激素变化的影响。结果表明:矮壮素(CCC)施用浓度为500~2 000mg·L~(-1)时,均能显著降低株高(P0.05),并且可以提高油莎豆叶片叶绿素含量,以及块茎的可溶性蛋白质、可溶性糖的含量,其中经2 000mg·L~(-1)的矮壮素处理后效果最佳,株高降低了34.39%,叶片叶绿素和可溶性糖含量显著提高(P0.05),矮壮素(CCC)处理下油莎豆生长素(IAA)、赤霉素(GA3)、玉米素(ZR)均低于对照,脱落酸(ABA)含量高于对照,矮壮素(CCC)浓度与赤霉素(GA3)、玉米素(ZR)含量呈负相关性,与脱落酸(ABA)含量呈正相关性;矮壮素(CCC)会抑制内源激素生长素(IAA)、赤霉素(GA3)、玉米素(ZR)的合成,对脱落酸(ABA)有促进作用。综合分析表明,矮壮素(CCC)的浓度为2 000mg·L~(-1)时不仅可以使油莎豆抗倒伏,同时可以增强油莎豆的光合作用能力以及抗性。     

铅胁迫下萝卜芽苗菜内源激素的动态变化

以萝卜芽苗菜为试材,探讨了在不同浓度铅(100、300、500mg·L~(-1))胁迫下,4种内源植物激素(玉米素(ZR)、脱落酸(ABA)、赤霉素(GA3)、吲哚乙酸(IAA))以及IAA/ABA、GA3/ABA的动态变化。结果表明:ZR含量随铅浓度的升高而下降。ABA随着铅浓度的升高呈现出先下降后上升趋势,GA3含量则呈现出先上升后下降的趋势,在铅浓度为300mg·L~(-1)时达到最大值。IAA与GA3变化趋势保持一致,在铅浓度升高的条件下,含量先升后降,在铅浓度100mg·L~(-1)时达到峰值;生长促进类激素与衰老促进型激素的比值如IAA/ABA、GA3/ABA也随着铅浓度的升高,呈现出先上升后下降的趋势。表明铅胁迫能改变萝卜芽苗菜内源植物激素含量,进而调控萝卜植株的生长。     

金叶锦带组培技术

以金叶锦带的腋芽为外植体,采用组织培养法,通过在培养基中添加不同浓度激素,筛选最佳培养基,为金叶锦带的大面积推广提供技术支撑。结果表明:最佳诱导培养基为MS+0.6mg·L~(-1) 6-BA+0.1mg·L~(-1) NAA+蔗糖30g·L~(-1)+琼脂7g·L~(-1),诱导率达86.3%;最佳增殖培养基为MS+1.0 mg·L~(-1) 6-BA+1.0 mg·L~(-1) GA3+蔗糖30g·L~(-1)+琼脂7g·L~(-1),增殖系数7.250 6;最佳生根培养基为1/2MS+1.0mg·L~(-1) IBA+蔗糖30g·L~(-1)+琼脂7g·L~(-1),生根率100.0%。     

有性三倍体杂交兰‘黄荷兰’的快速繁殖

以‘黄荷兰’试管苗为试材,采用组织培养快速繁殖方法,研究了影响有性三倍体杂交兰‘黄荷兰’根状茎诱导、增殖、分化、生根壮苗和试管苗移栽的因素,以期建立‘黄荷兰’种苗工厂化生产技术体系。结果表明:横切茎尖的起始脱分化时间早于纵切,诱导率高于纵切。切割长度、外源激素、光照强度和有机附加物对根状茎的增殖影响显著,将根状茎切割成长0.50 cm接种到MS+6-BA 1.00 mg·L^-1+NAA 0.20 mg·L^-1+土豆80.00 g·L^-1+蔗糖30.00 g·L^-1+卡拉粉7.00 g·L^-1+AC 0.30 g·L^-1培养基中培养40 d,根状茎增殖系数为3.18。外源激素对根状茎的分化影响显著,将根状茎掰成长1.00 cm接入MS+6-BA 1.00 mg·L^-1+NAA 0.20 mg·L^-1+蔗糖20.00 g·L^-1+卡拉粉7.00 g·L^-1+AC 0.02 g·L^-1培养基中培养40 d,芽分化率和苗分化率分别为60.00%和57.50%。将4 cm高的苗转入1/2MS+6-BA 0.10 mg·L^-1+NAA 0.50 mg·L^-1+蔗糖20.00 g·L^-1+卡拉粉7.00 g·L^-1+AC 0.50 g·L^-1中培养50 d,平均株高和根数分别为7.32 cm和3.56条。4月和10月用水草移栽,试管苗成活率分别为98.67%和99.67%。上述研究结果说明,利用组织培养快速繁殖技术工厂化生产‘黄荷兰’种苗是可行的。     

喷施蔗糖对菜薹营养品质及产量的影响

为提高菜薹的营养价值、改善其综合品质,以菜薹‘油绿501’为试材,采用叶面喷施的方式,探究不同浓度的外源蔗糖溶液处理对菜薹营养品质及产量的影响。结果表明,质量浓度为0.1 g·L~(-1)和0.2 g·L~(-1)的蔗糖处理均能显著提高菜薹中可溶性糖含量,0.2 g·L~(-1)和0.4 g·L~(-1)的蔗糖处理均能显著提高其总酚、芥子油苷、花青素含量,且二者间促进效果差异不显著;不同浓度的蔗糖处理对菜薹单株产量的影响不显著。因此,在生产中可采用质量浓度为0.2 g·L~(-1)的蔗糖溶液喷施菜薹幼苗,提高其营养价值。     

6-BA和GA3对NaCl胁迫下铁皮石斛幼苗生长及可溶性糖含量的影响

以铁皮石斛为试材,在NaCl胁迫下,研究了6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)和赤霉素(GA3)对铁皮石斛幼苗生长、色素及可溶性糖含量的影响。结果表明:2.0mg·L~(-1) 6-BA可以显著提高NaCl胁迫下铁皮石斛幼苗根的生长率,而4.0mg·L~(-1) GA3则显著的提高其根的生长率,但二者均降低铁皮石斛茎的生长率;2.0mg·L~(-1) 6-BA则可以降低叶绿素b含量,而4.0mg·L~(-1)6-BA则可以提高叶绿素的含量,且不同浓度6-BA对叶绿素a和类胡萝卜素的含量无显著性影响;2.0mg·L~(-1) GA3均可以提高叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素的含量,而6.0mg·L~(-1) GA3则降低叶绿素b含量;4.0mg·L~(-1) 6-BA和6.0mg·L~(-1) GA3均可以提高可溶性糖含量。因此,添加适当浓度的外源植物激素可以促进铁皮石斛中可溶性多糖的合成与积累。     

麝香百合胚性愈伤组织状态的调整与植株再生

采用麝香百合假鳞茎诱导出的胚性愈伤组织,从氯化钴、ABA、蔗糖浓度以及光照条件等4个方面对胚性愈伤组织的状态进行调整,并利用活性炭进行了再生实验。结果表明：0.05 μmol·L^-1的氯化钴有利于提高体细胞胚的比例和愈伤组织的颗粒性,0.02 μmol·L^-1和0.01 μmol·L-1的氯化钴有利于愈伤体积增大和增殖系数提高;ABA随着其浓度提高,对胚性愈伤的长势、干湿程度、增殖体积和增殖系数的抑制效果逐渐明显,但对胚性愈伤比例和颗粒性的抑制效果不显著;光培养条件下,90 g·L^-1和60 g·L^-1蔗糖对麝香百合胚性愈伤的比例和颗粒性都有较好的影响,但在暗培养条件下,仅仅60 g·L^-1蔗糖的效果较好;光培养和暗培养对胚性愈伤的干湿程度和颗粒性都没有显著的影响;1 g·L-1的活性炭和基本培养基对愈伤的再生具有显著性的影响。综合结果,麝香百合胚性愈伤的最佳增殖方式和再生方式分别为：为采用光培养,培养基为MS + NAA 5.4 μmol·L^-1 + TDZ 0.4 μmol·L^-1 + CoC1₂ 0.05 μmol·L^-1 + 蔗糖60 g·L^-1和MS+活性炭(1g/L) +蔗糖30 g·L^-1 。     

锰对厚皮甜瓜生长发育和产量品质的影响

在深液流水培技术条件下研究不同锰素营养水平对厚皮甜瓜生长发育、产量和品质的影响。结果表明,当营养液中Mn2+浓度在0～1.0mg·L-1范围内时,厚皮甜瓜的生长发育速度和净光合速率随Mn2+浓度的提高而提高,产量和品质也相应提高;Mn2+浓度高于2.0mg·L-1时,厚皮甜瓜的生长发育速度、净光合速率及产量、品质明显下降;Mn2+浓度高于8.0mg·L-1时,厚皮甜瓜不能正常开花结果。厚皮甜瓜深液流水培营养液配方中Mn2+浓度以0.5～2.0mg·L-1为宜。     

慈姑茎尖组织培养与快速繁殖

以慈姑茎尖为外植体,用不同培养基进行组织培养,以所获得的试管苗为材料进行快速繁殖技术研究。结果表明,慈姑茎尖培养的最适启动培养基为MS+6-BA1.0mg·L~(-1)+NAA0.3mg·L~(-1);继代增殖的最适培养基为-S+6-BA3.0mg·L~(-1)+NAA0.1mg·L~(-1),增殖系数为4.35。     

施CO2时培养基糖浓度对文心兰试管苗生长的影响

 探讨了培养室内施CO2条件下，培养基中不同蔗糖浓度(30、20、10、5、2．5和0 g·L )对文心兰试管苗生长的影响．结果表明：无糖培养基中的试管苗可以以光合自养的方式正常生长，但生长速度略低；提高培养基糖浓度可以显著促进试管苗的生长，30 g·L (常规培养条件的糖浓度)与20 g·L 处理相比，株高、叶长、叶幅、根数、总鲜样质量和总干样质量等主要生长指标无明显差异，说明文心兰试管苗在施CO₂培养时，培养基中的糖仍是必要的，但可以适当减少用量。     

糖和氮对山楂组织培养新梢生根的影响

采用敞口山楂组培新梢研究糖和无机氮源对不定根形成的影响,含有高水平蔗糖的培养基比低水平蔗糖的培养基新梢生根率高。新梢对糖的这种反应与糖代谢和物理渗透都有关,用甘露醇作为渗透代替剂在低浓度蔗糖存在下无作用,当蔗糖浓度达到一定程度时(86.64mmol·1~(-1))能影响新梢的生根率。在培养基中分别加入NO_3~(-)-N或NH_4~(+)-N作为唯一氮源,或是在MS培养基中加入NO_3~-/NH_4~+比率为标准的混合氮源,在测试范围(0～120mmol·1~(-1))内均降低新梢的生根率,三者对生根的抑制作用大小顺序依次为NH_4~+>NO_3~(-)-NH_4~(+)-N>NO_3~(-)-N.NO_3~-/NH_4~+的比率影响生根。NO_3~-/NH_4~+比率与生根之间呈直线正相关。糖/氮比值高有利于生根。插穗中碳、氮的绝对量及碳/氮比率可作为山楂新梢生根的指标。     

Effect of ABA and sucrose on germination of encapsulated somatic embryos of guava (Psidium guajava L.)

Present study demonstrates the effect of sucrose and ABA on germination of encapsulated somatic embryos of guava (Psidium guajava L.). Sucrose and ABA at different concentrations were also evaluated for their effects on maturation and germination of somatic embryos. Mature somatic embryos developed on MS medium containing high concentration of sucrose (10%) or ABA (1.0 mg l⁻¹) showed inhibition in germination if they continued to be in same medium for 4 weeks. With increasing concentrations of sucrose (3–9%) or ABA (0.01–1.0 mg l⁻¹) in medium, percent germination of encapsulated somatic embryos decreased significantly. Encapsulated somatic embryos after storage on MS medium supplemented with 9% sucrose or 1 mg l⁻¹ ABA for different duration (0–60 days) germinated when they were transferred to medium containing 3% sucrose. About 20.8% and 37.5% encapsulated somatic embryos germinated after storage on ABA (1 mg l⁻¹) or sucrose (9%) for 60 days, respectively. Temporarily suppression in germination of encapsulated somatic embryos by high concentration of sucrose or ABA may be important for short-term conservation of elite genotype of guava.     

Effects of culture conditions on in vitro bulblet induction in the medicinal plant Amana edulis (Miq.) Honda

Amana edulis (Miq.) Honda is an important medicinal plant with a variety of anti-cancer properties, and it is of great importance to improve its reproductive rate through micropropagation technology to meet increasing demand. In the present study, in order to establish a rapid in vitro bulblet propagation protocol for A. edulis, an L₁₆ (4⁵) orthogonal design was used to investigate the effects of sucrose, 6-benzyladenine (6-BA), α-naphthaleneacetic acid (NAA), and macro-elements on bulblet induction. The results show that the sucrose concentration was the crucial factor for A. edulis bulblet initiation, followed by 6-BA and macro-elements, while NAA had the weakest effect. The optimal medium for in vitro bulblet induction was Murashige and Skoog medium supplemented with 0.1 mg·L^?1 6-BA, 0.01 mg·L^?1 NAA, and 100 g·L^?1 or 80 g·L^?1 sucrose (pH 5.8), in which A. edulis shoot clusters (without roots) were cultured at 5(±2)°C for 35 d or 60 d and then incubated at 23(±2)°C for 90 d. The entire cultivation process occurred in the dark. The present study demonstrates that this protocol can be used for the propagation of A. edulis.     

磨盘柿的合子胚挽救培养

 以‘西村早生’为父本与‘磨盘柿’杂交, 对杂交后的磨盘柿合子胚进行了挽救培养。利用正交试验法研究了改良MS培养基中N、蔗糖、6-BA和IBA浓度4个因素及其组合对磨盘柿合子胚萌发、生根及成苗的综合影响。结果表明: (1) 蔗糖浓度对合子胚的萌发生长影响最显著, 6-BA和IBA次之, N浓度仅对叶色的影响较大; (2) 最佳的培养基以(3 /4N) MS为基本培养基, 添加6-BA 0.1 mg·L - 1和IBA 0.02 mg·L ^{- 1} , 蔗糖最适浓度为50 g·L ^-1。     

测定百合花粉生命力的液体培养基研究

 以东方百合品种‘索蚌’的新鲜花粉为试材, 利用单因子试验比较了液体培养基中蔗糖浓度及硼、钙、镁、钾对其萌发的影响。在此基础上进行正交试验, 比较蔗糖、H₃BO₃ 、CaCl₂ 对百合花粉萌发的影响。试验结果表明: 蔗糖和H3BO3 对百合花粉萌发有极显著影响。适宜的花粉培养液为: 蔗糖100 g·L ^{- 1} +H₃BO₃ 20 mg·L ^{- 1} +CaCl₂ 20～30 mg·L ^{- 1}。纯水培养液会造成花粉原生质体破裂, 内含物外流;高浓度的蔗糖和盐会造成原生质体失水萎缩, 质壁分离, 这两种情况都抑制花粉萌发。     

蝴蝶兰花葶的离体培养

 蝴蝶兰花梗腋芽培养在含VW无机盐+肌醇100 mg·L^-1+VB₁10 mg·L^-1+VB₆ mg·L^-1+烟酸1 mg·L^-1+蔗糖20g·L^-1+BA 5.0 mg·L^-1的培养基上22°C培养，可分化出花葶。花葶切片在含Ms无机盐+肌醇100mg·L^-1 +VB₁10 mg·L^-1+VB₆1 mg·L^-1+烟酸1 mg·L^-1+蔗糖15 g·L^-1+BA 5.0 mg·L^-1+NAA0．5 mg·L^-1 的培养基上诱导分化不定芽。不定芽在同一培养基上继代增殖，在附加香蕉汁100 g·L 的Hyponex 1号生根培养基上壮苗生根。