秋水仙素处理‘罗田甜柿’获得12倍体再生植株

 以‘罗田甜柿’试管苗离体叶片为材料，研究了秋水仙素浓度及处理时间对诱导染色体倍性变异的影响。结果表明：0.3％秋水仙素处理4～6 d，可诱导染色体加倍; 与对照比较, 再生变异植株的气孔孔径增大，密度降低，根尖染色体数2n=12x=180，叶片DNA含量为对照的两倍。LI、LⅡ、LⅢ细胞层均加倍的证据表明，获得的倍性变异株为同质12倍体。     

杜仲四倍体的诱导与鉴定

 以杜仲籽苗为材料,采用秋水仙素药液处理生长点的诱变方法及茎尖细胞染色体数目检测和DNA相对含量测定的倍性鉴定方法,研究了秋水仙素药液浓度,处理时间的诱变效果。结果表明,诱变率因处理的药液浓度和处理时间而异,除0.05%处理48 h外,其它浓度（0.1%,0.2%,0.4%）均以处理12 h效果最好,变异株率在43.3%~63.3%, 最佳处理组合为0.1%秋水仙素处理生长点12 h, 变异株率和四倍体株率分别为63.3%和36.7%。在获得的148个变异株中,染色体计数表明47株植株为四倍体（2n=4x=68）,占31.76%;染色体计数结果进一步被流式细胞仪分析验证。四倍体植株表现出多倍体特征,叶片变厚,叶面积增大,叶形指数减小,保卫细胞增大,单位面积气孔数减少,叶绿体数明显增多。     

秋水仙素诱导三种紫薇多倍体的研究

 研究了秋水仙素处理浓度和时间对3种紫薇幼苗染色体加倍的诱导效应,通过染色体计数、流式细胞仪以及形态观察等方法进行了倍性鉴定。结果表明：秋水仙素诱导3种紫薇均得到了四倍体,0.5%～0.8%的秋水仙素处理紫薇和银薇48～96 h的变异率较高,其中以0.5%秋水仙素处理紫薇72 h的变异率最高,达54.17%。根尖染色体压片表明四倍体染色体数为：2n=4x=96,二倍体对照为：2n=2x=48。四倍体表现出叶片长、宽、厚均增大,气孔密度减小,气孔保卫细胞增大,保卫细胞内叶绿体数增加,花粉粒直径增大,花径、花瓣长、花瓣基部爪长均较二倍体明显增加,单朵花观赏价值大大提高。     

秋水仙素诱导西瓜多倍体的研究

研究了不同浓度秋水仙素处理对3个西瓜品系幼苗染色体加倍的诱导效应,通过形态观察、染色体计数以及流式细胞仪等方法进行了倍性鉴定。结果表明,秋水仙素诱导3个西瓜品系均得到了四倍体,0.3%的秋水仙素处理幼苗的变异率较高,其中以0.3%秋水仙素处理黄小玉母本的变异率最高,达15.1%。四倍体表现出叶片长、宽、厚均增大,花瓣大小和果皮厚度均较二倍体明显增加。根尖染色体压片检查表明,四倍体染色体数为2n=4x=44,二倍体对照为2n=2x=22。流式细胞仪检测结果表明,诱导不仅产生四倍体,还有嵌合体。     

姜四倍体离体诱导及其形态学分析

以丛生芽为材料,在离体培养条件下比较了秋水仙素不同浓度、不同处理时间诱导姜体细胞染色体加倍的效果。结果表明:以0.20%秋水仙素液体培养基处理8d的诱导效果最好,诱变率和成活率分别达到了42.86%和70.00%。根尖染色体压片检查发现,四倍体染色体数为2n=4x=44,二倍体对照为2n=2x=22。四倍体与二倍体相比表现出植株高大,茎秆变粗,叶片长、宽、厚均增大,叶片下表皮气孔密度减小,气孔和保卫细胞增大,保卫细胞内叶绿体数增加等特征,其中气孔密度及保卫细胞内的叶绿体数可作为鉴别四倍体与二倍体的重要性状。     

春石斛的多倍体诱导

 在离体培养条件下比较了秋水仙素不同浓度、不同处理时间诱导杂种春石斛体细胞染色体加倍的效果。结果表明, 0.06%秋水仙素处理12 h的诱变效果最佳, 诱变率达69.1%。用组织培养结合不定芽诱导技术获得了稳定的多倍体变异株。变异株与正常株形态差异明显, 气孔数及大小之间差异显著。二倍体对照2n = 2x = 38, 变异株2n = 4x = 76 (四倍体) , 同时也发现存在嵌合体现象。     

秋水仙素诱导中间锦鸡儿多倍体的研究

 以中间锦鸡儿（caragana intermedia）种子为试验材料,通过秋水仙素浸泡种子的方法研究了不同浓度及作用时间下秋水仙素对其染色体加倍的诱导效果。结果表明,直接浸泡种子,以0.3%秋水仙素浸泡48 h为最佳,诱变率为53.3%;种子经萌发12 h后再处理,以0.15%秋水仙素浸泡36 h诱变率最高,为73.3%。对变异株根尖进行染色体计数后发现,二倍体对照2n = 2x = 16,变异株2n = 3x = 24为三倍体,变异株2n = 4x = 32为四倍体,同时也发现存在嵌合体现象。     

苹果叶片离体培养中秋水仙素加倍效应的研究

用不同浓度的秋水仙素溶液处理苹果的栽培品种嘎拉试管苗的离体叶片，发现以０．５％的秋水仙素溶液处理４ｄ效果最佳，诱变频率达５６．１％。诱变后获得的四倍体植株在形态学和细胞学上均发生了明显变异。与对照株比较，变异株茎矮、粗壮、节间短、叶片厚、叶色浓绿；叶背面的气孔体积增大，单位面积气孔数目减少、茸毛数量增加；染色体数目加倍，２ｎ＝４ｘ＝６８（对照２ｎ＝２ｘ＝３４），细胞核核仁数目增加。梢端组织学切片证明，变异株中同质突变体的频率达７３％。     

切花非洲菊多倍体诱变初报

 以非洲菊‘阳光海岸’和‘白马王子’ (2n=2x=50) 品种为供试材料, 采用秋水仙素对其组培丛生芽进行离体诱导, 成功获得了四倍体植株。秋水仙素处理浓度和处理时间分别为0.02%、0.05%、0.10%和24、36、48 h。试验结果表明, 以0.10%的秋水仙素处理48 h诱导效果最佳, ‘阳光海岸’和‘白马王子’的丛生芽变异率分别为16%和10%。总体上看, 非洲菊对秋水仙素的敏感性较低。经气孔鉴定、染色体计数和形态学观察, 变异材料染色体数加倍(2n=4x=100) 。与二倍体相比, 变异材料气孔面积增大, 花序变大, 叶色变深, 叶尖变钝圆, 叶片质感变厚, 花梗直径变粗, 花梗基部花青素着色变深。最终分别获得稳定的‘阳光海岸’和‘白马王子’多倍体植株200余株和300余株。     

君子兰未成熟胚四倍体诱导及染色体数鉴定

 以君子兰（Clivia miniata Regel.）品种‘胜利’为试材,采用一种新型外植体未成熟胚,利用秋水仙素与组织培养相结合的方法,研究秋水仙素浓度、处理时间和不同胚龄对未成熟胚诱导加倍的影响。结果表明：在MS + NAA 2.0 mg · L-1 + BA 1.5 mg · L-1培养基上,0.01%秋水仙素处理180 d胚龄的未成熟胚20 d诱变效果最佳,四倍体诱变率最高,达30.8%,形态变化率达36.5%,死亡率为34.1%。经0.03%秋水仙素处理120 d胚龄的未成熟胚30 d诱变效果也较好,四倍体诱变率较高,达24.0%,形态变化率达21.1%,死亡率为46.7%。经染色体数观察,加倍处理后代中存在2x、4x和混倍体植株。随机调查了267株加倍处理植株,得到30株四倍体（2n = 4x = 44）、194株二倍体（2n = 2x = 22）和43株混倍体,平均四倍体诱变率为11.2%。秋水仙素处理出现的植株生长缓慢,生根明显较晚,叶片变宽变短等形态变化可以作为加倍的初期有效判断指标。     

苹果叶片离体培养中秋水仙素 加倍效应的研究

用不同浓度的秋水仙素溶液处理苹果的栽培品种嘎拉试管苗的离体叶片，发现以0.5 %的秋水仙素溶液处理4 d效果最佳，诱变频率达56.1 %。诱变后获得的四倍体植株在形态学和细胞学上均发生了明显变异。与对照株比较，变异株茎矮、粗壮、节间短、叶片厚、叶色浓绿；叶背面的气孔体积增大，单位面积气孔数目减少、茸毛数量增加；染色体数目加倍，2n＝4x＝68(对照2n＝2x＝34)，细胞核核仁数目增加。梢端组织学切片证明，变异株中同质突变体的频率达73 %。     

秋水仙碱诱导枣多倍体的研究

 以冬枣、临猗梨枣和辣椒枣一年生嫁接苗为试材, 以秋水仙碱为诱变剂诱导多倍体。结果表明: 临猗梨枣诱变率最高可达50 % , 最佳组合为0.15 %秋水仙碱处理茎尖18 h ; 冬枣和辣椒枣的诱变率最高可达43.3 % , 最佳处理组合分别为0.1 %/ 30 h 和0.15 %/ 18 h。变异材料的细胞染色体数(2 n = 4 x =44) 和单细胞DNA 含量均为二倍体对照的2 倍, 在辣椒枣中还出现了染色体数为2 n = 2 x + 2 = 26 及DNA含量为八倍体的细胞。四倍体变异材料均表现出叶长、叶宽、叶面积增大, 叶形指数减小, 节间长度变短等特征。另外, 还表现出叶片气孔保卫细胞增大, 叶绿体增多, 花粉粒增大, 畸形花粉增多, 四孔沟花粉出现及花粉粒育性降低等。     

秋水仙素离体诱导大花蕙兰多倍体试验

在离体培养条件下,以大花蕙兰“红宝石”原球茎为材料,比较了秋水仙素浸泡法和混培法在不同浓度、不同处理时间诱导大花蕙兰体细胞染色体加倍的效果。结果表明：无论是用秋水仙素溶液浸泡处理还是将秋水仙素加入培养基中混培处理,均可诱导大花蕙兰多倍体的产生。但以后者混培法效果较好,在秋水仙素浓度为3%,处理15 d的条件下,诱导率最高达30%。对变异株进行细胞学观察后发现,染色体为2n=4x=80,为四倍体;而二倍体对照染色体为2n=2x=40。     

彩色马蹄莲多倍体的诱导

 在离体培养条件下,比较了不同浓度、不同处理时间的秋水仙素诱导彩色马蹄莲体细胞染色体加倍的效果。经形态学和气孔观察,0.05%的秋水仙素处理24 h的诱变效果最佳,诱变率高达52%。用组织培养结合不定芽技术对变异株进行稳定,获得了稳定的多倍体。对变异株进行细胞学研究后发现,二倍体对照2n=2X=32,变异株2n=4X=64,为四倍体,另外还发现六倍体细胞的存在。     

金冠苹果成熟胚离体诱导四倍体的研究

 以自然授粉的‘金冠’苹果种子为材料，研究了秋水仙素处理成熟胚离体诱导四倍体技术和嵌合体分离方法。结果表明：将完整胚在0.5%秋水仙素+1%二甲基亚砜的混合溶液中暗处理48 h，然后接种在MS+TDZ 1.0 mg·L^-1+IBA 0.5 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1的再生培养基中，变异率高达10.6%。与二倍体相比，四倍体试管苗生长缓慢，节间变短，叶片增大，叶形指数趋小化，气孔密度降低，保卫细胞增大。经压片法鉴定茎尖染色体数和流式细胞仪分析DNA含量，表明多数变异植株为同质四倍体。利用叶片离体再生器官技术，从诱导获得的嵌合体植株中分离出同质突变体。     

秋水仙素诱导象鼻兰种子产生多倍体

以象鼻兰种子为试验材料,采用浸泡法,研究了秋水仙素处理对蝴蝶兰种子染色体加倍的影响,以期获得诱导多倍体的适宜条件。结果表明:秋水仙素浸泡法诱导种子染色体加倍时,种子在液体培养基中培养5d,再采用0.20%秋水仙素处理1d的处理效果最好,萌发率达到6.41%,高于1.96%的自然萌发率,四倍体、嵌合体诱导率分别达到了27.75%、34.84%;四倍体植株与二倍体植株相比,形态与气孔特征均发生了明显变化,形态特征表现为,植株粗壮、根系发达且粗壮、植株生长较快等;气孔特征表现为单位面积气孔数减少,气孔增大,长宽分别增长25.19%和26.19%。该研究得到了秋水仙素浸泡象鼻兰种子诱导染色体加倍的适宜条件且提高了象鼻兰种子的萌发率,获得了四倍体植株和嵌合体植株,为把象鼻兰优异基因高效导入栽培品种奠定了基础,为蝴蝶兰体细胞无性系变异新品种的培育提供了参考依据。     

秋水仙素处理对芦笋“达宝利”四倍体诱导效果的影响

以芦笋“达宝利”露白种子为试材,秋水仙素(添加2%DMSO)处理浓度和处理时间作为诱导因子,设计多个梯度的正交实验,研究秋水仙素对芦笋四倍体诱导率的影响,以期获得最佳的芦笋多倍体诱导条件。结果表明:最佳的秋水仙素处理组合为0.15%的秋水仙素(添加2%DMSO)处理16h,诱导率高达28.33%;经鉴定发现二倍体芦笋的染色体数目为20条,而四倍体染色体数目为40条;与二倍体相比,四倍体芦笋植株粗壮、叶片长度和直径增加,气孔细胞密度减少,气孔细胞体积增大,叶绿体数目和叶绿素含量增加。     

鄂柿1号离体叶片秋水仙素诱导和再生植株倍性鉴定

以鄂柿1号甜柿离体新梢叶片为外植体,研究了秋水仙素浓度及处理时间对诱导染色体倍性变异的影响。结果表明,0.5%秋水仙素处理4d左右,可诱导获得十二倍体再生植株,低浓度的秋水仙素不能产生加倍效应,高浓度会导致叶片死亡或严重抑制愈伤组织再生能力;与对照比较,再生变异植株叶片气孔孔径增大、密度降低,PA倍性分析叶片DNA含量为对照的2倍。因此,试验获得的倍性变异株初步确认为12倍体。     

秋水仙素诱导大葱多倍体的研究

 以章丘大葱种子为材料,研究了秋水仙素处理浓度和时间对大葱体细胞染色体加倍的效果,并利用形态观察,根尖细胞染色体计数及流式细胞仪等方法进行倍性鉴定。结果表明,0.8%秋水仙素处理48 h的诱变效果最佳。诱变植株存在明显“玻璃化”现象,生根困难,移栽后不能成活。通过组织培养去“玻璃化”,获得正常生长的四倍体植株。四倍体植株的细胞染色体数2n = 4x = 32,植株多倍体形态特征明显,植株生长健壮,叶色浓绿,叶面气孔变大,气孔密度减少;株高、葱白长度等与二倍体植株相比极显著增加。     

连翘二倍体与四倍体叶片特征比较

2009年采用秋水仙素溶液处理生长点的诱变方法和茎尖细胞染色体计数检测及流式细胞仪倍性鉴定方法首次诱导出连翘多倍体.经茎尖细胞染色体计数检测,变异植株茎尖细胞染色体数目为2n=6条,而原二倍体的染色体数目为2n= 28条,因此,变异植株(2n= 56)为四倍体.经流式细胞仪倍性分析验证,连翘四倍体体细胞DNA相对含量是...