盐析结合双水相萃取法提取纯化藻蓝蛋白

为探索螺旋藻中藻蓝蛋白的分离纯化方法。本文采用盐析和双水相萃取相结合的方法。盐析法:饱和度35%～75%的硫酸铵沉淀藻蓝蛋白,饱和度10%～30%的硫酸铵去除螺旋藻杂蛋白;双水相萃取法:由8%PEG4000、16%柠檬酸钠和4%氯化钾组成的双水相系统分离纯化盐析后的藻蓝蛋白。结果表明:经6步不同饱和度硫酸铵盐析后的藻蓝蛋白纯度(A620/A280)为3.1,再经双水相系统分离纯化可使藻蓝蛋白纯度达到4.0。采用盐析结合双水相萃取法提取纯化螺旋藻中的藻蓝蛋白,可大幅提高藻蓝蛋白的纯度,为大规模生产提供科学依据。     

白玉菇多酚氧化酶的特性研究

采用0.2mol/L磷酸盐缓冲溶液匀浆法从白玉菇中提取多酚氧化酶(PPO),并对该多酚氧化酶的酶学特性进行了研究。试验结果表明:以邻苯二酚为底物,该酶的最适pH值为6.8,最适温度为35℃,Km值为0.08750mol/L,Vmax值为0.03753U/min,100℃热处理1.5min可完全钝化PPO的活性,10mmol/L的L-半胱氨酸能有效抑制PPO的酶活力。     

平菇多酚氧化酶的特性研究

采用0.2mol/L磷酸盐缓冲溶液匀浆法从平菇中提取多酚氧化酶(PPO),并对该多酚氧化酶的酶学特性进行了研究。试验结果表明:以邻苯二酚为底物,该酶的最适pH值为6.8,最适温度为30℃,Km值为0.134mol/L,Vmax值为0.139U/min,70℃热处理7.5min或75℃热处理5min可完全钝化PPO的活性,10mmol/L的L-半胱氨酸能有效抑制PPO的酶活性。     

白灵菇多酚氧化酶的特性研究

采用0.2mol/L磷酸盐缓冲溶液匀浆法从白灵菇中提取多酚氧化酶(PPO),并对该多酚氧化酶的酶学特性进行了研究。试验结果表明:以邻苯二酚为底物,该酶的最适pH值为5.6、最适温度为40℃、Km值为9.36×10-3mol/L和Vmax值为8.11×10-3U/min,100℃热处理1.5min、95℃热处理2.5min或90℃热处理3.5min可完全钝化PPO的活性,10mmol/L的异VC钠能有效抑制PPO的酶活性。     

肉桂醛复合保鲜剂对南美白对虾贮藏品质的影响

为延长南美白对虾贮藏期,对8种天然化合物的抑菌和南美白对虾多酚氧化酶( PPO)抑制活性进行了对比试验,发现肉桂醛同时兼具抑菌和抑制多酚氧化酶活性的双重效果.经酶反应动力学分析,证明肉桂醛是多酚氧化酶的非竞争性抑制剂.采用正交试验,对肉桂醛、植酸和海藻酸钠进行复配比较,确定复合保鲜剂的最佳组分为:肉桂醛质量分数0.10％、植酸质量分数0.05％、海藻酸钠质量分数0.50％.复合保鲜剂处理可有效抑制虾体菌落总数的增加和挥发性盐基氮的积累;同时还可抑制贮藏过程中的脂肪氧化,对感观品质具有良好的保持作用,在(4±1)℃条件下贮藏期可达8 ～10d,明显提高了南美白对虾贮藏过程中的品质和货架期.     

大米碎米提取大米蛋白和制备淀粉基脂肪替代物的工艺研究

本文以大米碎米为原料,用0.1mol/LNaOH溶液处理后,离心后上清液和沉淀分别用于提取和制备大米蛋白和淀粉基脂肪替代物,以大米蛋白提取率和淀粉基脂肪替代物DE值为考察指标,通过正交试验分别确定硫酸铵盐析提取大米蛋白和淀粉基脂肪替代物制备的最佳工艺条件:pH值11、温度60℃、时间90min、(NH4)2SO4饱和度80%和pH值4.5、70%乙醇的体积比70%、时间60min、温度80℃。     

磁场和抑制剂对莲藕多酚氧化酶反应动力学的影响

通过添加Vc和外加磁场处理,研究莲藕多酚氧化酶(PPO)反应动力学的变化规律.以邻苯二酚为底物,莲藕PPO褐变反应动力学符合米氏方程所描述的单底物酶促反应动力学,Km为0.775 mol/L,Vmax为11.150 U/min.Vc对PPO有较强的抑制作用,反应动力学参数Km为0.081 mol/L,Vmax为3.243 U/min,呈现反竞争性抑制,表现为褐变出现滞后,随Vc浓度的增大滞后时间逐渐增长,且呈现S型趋势,并建立了相应的反应方程.不同磁场强度下,随着处理时间的变化,PPO活性呈现波动性.3.17 A/m磁场强度下处理4 h的酶液其反应动力学曲线表现为S型,并建立了相应的反应方程.     

液相色谱-质谱联用技术同时测定婴幼儿配方奶粉中甲基香兰素和乙基香兰素

建立了食品中甲基香兰素和乙基香兰素的高效液相色谱-串联四极杆质谱联用测定方法。该方法样品经酸沉蛋白后,以SB-C18柱(2.1×50mm,3.5μm)分离,流动相为甲醇和水(33∶67,V/V),电喷雾负离子MRM模式检测。该方法的检出限0.1mg/kg,线性范围0.01～1.0μg/mL,加标回收率80.0%～84.1%,相对标准偏差分别为1.55%和1.81%。     

蛋清肽酶解工艺及血管紧张素转化酶抑制活性研究

采用酶法制备蛋清肽,色谱纯化ACE抑制活性组分并鉴定其一级结构。通过考察底物质量分数、加酶量、酶解温度和pH值对水解度的影响,结合多元线性回归设计和二次回归正交组合设计建立蛋清ACE抑制肽酶解工艺模型,并经液相色谱串联质谱鉴定其一级结构。结果表明：最佳酶解工艺为底物质量分数8%、pH值10.73、加酶量12.14%及酶解温度56.80℃,酶解物纯化后半抑制质量浓度为0.18mg/mL。液相色谱串联质谱鉴定高活性组分中3种活性肽一级结构,氨基酸序列分别为     

快速测定食品中酸性橙Ⅱ残留

建立了食品中酸性橙Ⅱ残留的高效液相色谱-串联四极杆质谱联用测定方法。该方法经70%乙醇水溶液(含1%氨水)提取样品,以SB-C18柱(2.1mm×50mm,3.5μm)分离,流动相为甲醇和水(梯度洗脱),电喷雾负离子MRM模式检测。该方法的检出限5.0μg/kg,线性范围0.4～50.0μg/L,加标回收率90.1%～105.3%,相对标准偏差为5.49%。