平菇多酚氧化酶的特性研究

采用0.2mol/L磷酸盐缓冲溶液匀浆法从平菇中提取多酚氧化酶(PPO),并对该多酚氧化酶的酶学特性进行了研究。试验结果表明:以邻苯二酚为底物,该酶的最适pH值为6.8,最适温度为30℃,Km值为0.134mol/L,Vmax值为0.139U/min,70℃热处理7.5min或75℃热处理5min可完全钝化PPO的活性,10mmol/L的L-半胱氨酸能有效抑制PPO的酶活性。     

白玉菇多酚氧化酶的特性研究

采用0.2mol/L磷酸盐缓冲溶液匀浆法从白玉菇中提取多酚氧化酶(PPO),并对该多酚氧化酶的酶学特性进行了研究。试验结果表明:以邻苯二酚为底物,该酶的最适pH值为6.8,最适温度为35℃,Km值为0.08750mol/L,Vmax值为0.03753U/min,100℃热处理1.5min可完全钝化PPO的活性,10mmol/L的L-半胱氨酸能有效抑制PPO的酶活力。     

热处理对轻度加工竹笋品质和生理的影响

研究了20℃常温水和40、45、50℃热水处理5 min对轻度加工竹笋在10℃贮藏期间品质和生理的影响.结果表明:未经热处理的,呼吸强度和乙烯释放量逐渐降低;苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)活性迅速增加;促进总酚的积累;导致色泽值减小,褐变指数增大.40℃或45℃热水处理5 min不仅降低了轻度加工竹笋呼吸强度和乙烯释放量,而且抑制了PAL、PPO和POD的活性,从而保持较高的色泽值和较低褐变指数水平;但50℃热水处理5 min会产生热伤害,对轻度加工竹笋的贮藏反而不利.     

磁场和抑制剂对莲藕多酚氧化酶反应动力学的影响

通过添加Vc和外加磁场处理,研究莲藕多酚氧化酶(PPO)反应动力学的变化规律.以邻苯二酚为底物,莲藕PPO褐变反应动力学符合米氏方程所描述的单底物酶促反应动力学,Km为0.775 mol/L,Vmax为11.150 U/min.Vc对PPO有较强的抑制作用,反应动力学参数Km为0.081 mol/L,Vmax为3.243 U/min,呈现反竞争性抑制,表现为褐变出现滞后,随Vc浓度的增大滞后时间逐渐增长,且呈现S型趋势,并建立了相应的反应方程.不同磁场强度下,随着处理时间的变化,PPO活性呈现波动性.3.17 A/m磁场强度下处理4 h的酶液其反应动力学曲线表现为S型,并建立了相应的反应方程.     

金银花多酚氧化酶特异性与抑制剂动力学研究

对金银花多酚氧化酶底物特异性和不同抑制剂的抑制效应进行了动力学分析,结果表明:金银花多酚氧化酶的最适作用底物为绿原酸,Km值为0.0059 mmol/L。维生素C、4-己基间苯二酚、L-半胱氨酸对多酚氧化酶的抑制均属可逆抑制,其抑制类型分别属于混合性、竞争性、反竞争性,对游离酶的抑制常数KI分别为1.620、4.587、0 mmol/L,对酶-底物络合物的抑制常数KIS分别为1.995、0、3.780 mmol/L;柠檬酸的抑制效应属不可逆抑制。维生素C、4-己基间苯二酚、L-半胱氨酸、柠檬酸对金银花多酚氧化酶半抑制浓度分别为0.062、0.053、0.140、0.048 mmol/L。     

富士苹果中膜结合态多酚氧化酶分离纯化方法

以烟台红富士为原料,研究膜结合态多酚氧化酶(m PPO)的分离纯化条件,采用非离子型去污剂结合热诱导方法粗提,硫酸铵分级沉淀,DEAE Sepharose Fast Flow离子交换柱层析方法对m PPO进行纯化,并对其进行串联质谱(LC-MS/MS)分析鉴定。结果表明m PPO提取纯化最佳条件为:超声提取10 min,50%~80%饱和度硫酸铵沉淀,0.1 mol/L Na Cl梯度洗脱。纯化后的m PPO纯度提高了64.30倍,比活力高达387 032.97 U/mg。纯化后的m PPO经SDS-PAGE和Native-PAGE分析均为单一蛋白带,且为亚基分子量67 k Da的二聚体。经串联质谱分析及蛋白数据库鉴定此纯化蛋白为多酚氧化酶。     

高静压和热处理对蘑菇多酚氧化酶的钝化动力学分析

研究了高静压处理HHP(100～1 600 MPa,0.2～25 min)和热处理(55～80℃,0.2～20 min)对双孢蘑菇多酚氧化酶(polyphenoloxidase,简称PPO)的钝化效果,并分析了钝化动力学。随着处理压力、温度的升高和处理时间的延长,钝化效果增强。在600 MPa以下压力处理后,PPO活性残存率均大于88%,表明600 MPa以下处理压力对PPO的钝化效果较差。而800、1000、1200、1400和1600 MPa压力下处理25 min,PPO活性残存率分别下降到66.42%、52.83%、27.20%、2.20%和0.01%,表明800 MPa以上压力能有效钝化蘑菇PPO。应用一级动力学模型拟合热处理对PPO的钝化动力学,各温度条件下拟合的决定系数R2都在0.960以上,表明PPO的热钝化符合一级动力学模型;应用两段式模型对HHP钝化蘑菇PPO的动力学进行拟合,决定系数R2均大于0.982,HHP钝化蘑菇PPO符合两段式钝化动力学。     

肉桂醛复合保鲜剂对南美白对虾贮藏品质的影响

为延长南美白对虾贮藏期,对8种天然化合物的抑菌和南美白对虾多酚氧化酶( PPO)抑制活性进行了对比试验,发现肉桂醛同时兼具抑菌和抑制多酚氧化酶活性的双重效果.经酶反应动力学分析,证明肉桂醛是多酚氧化酶的非竞争性抑制剂.采用正交试验,对肉桂醛、植酸和海藻酸钠进行复配比较,确定复合保鲜剂的最佳组分为:肉桂醛质量分数0.10％、植酸质量分数0.05％、海藻酸钠质量分数0.50％.复合保鲜剂处理可有效抑制虾体菌落总数的增加和挥发性盐基氮的积累;同时还可抑制贮藏过程中的脂肪氧化,对感观品质具有良好的保持作用,在(4±1)℃条件下贮藏期可达8 ～10d,明显提高了南美白对虾贮藏过程中的品质和货架期.     

超高压对酱曲多酚氧化酶激活和钝化作用动力学研究

研究了超高压处理(100~500 MPa,1~20 min)和热处理(40、60、90℃,1~20 min)对酱曲多酚氧化酶(Polyphenoloxidase,PPO)活性的影响,并分析了PPO的压变动力学。试验结果表明:较低的超高压加工(HPP)处理(100~300 MPa)对酱曲PPO有激活作用,200 MPa处理10 min能最大限度地激活酱曲PPO,相对活性为135%;较高的HPP处理(350~500 MPa)对酱曲PPO有显著的钝化作用,且钝化效果随着压力的增加和处理时间的延长而逐渐增强,但随着处理时间的延长,钝化作用趋于一个最大值,该最大值在350、400、450、500 MPa时分别为74.0%、55.4%、62.8%、66.5%。通过动力学模型拟合发现:酱曲PPO的激活/钝化特征在不同压力范围表现不同。100~200 MPa的HPP处理对酱曲PPO的钝化符合两段式一级动力学模型(R2≥0.970);250~300 MPa的HPP处理对酱曲PPO的激活作用符合一级分数转换模型(R2≥0.994);而350~500 MPa的HPP钝化处理符合两段式动力学模型与一级动力学模型的混合模型(R2≥0.995)。试验结果为更进一步的探索研究奠定了理论基础。     

不同漂烫方式结合CaCl2预处理对哈密瓜品质的影响

采用热水(温度80、90和100℃;时间0.5~4 min)、100℃蒸气(时间0.5~4 min)和高压(压强100、200和300 MPa;时间1~9 min)3种处理方式,研究了不同漂烫方式和条件对哈密瓜品质的影响。在最佳漂烫工艺的基础上,研究了不同质量分数CaCl2溶液对哈密瓜块硬度保持效果的影响。研究结果表明:100℃蒸气漂烫能在钝化多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)活性基础上,较好地保持哈密瓜的硬度和维生素C含量。因此,选择漂烫条件为100℃蒸气、漂烫时间1 min,在此条件下PPO和POD残余活性分别为55.5%和46.0%,硬度为新鲜样品硬度的80%,维生素C仅损失13%。在此基础上,哈密瓜块经质量分数为1.0%CaCl2溶液处理,硬度保持效果最好,硬度和维生素C含量较对照组分别提高7.6%和6.8%。     

红酒提取物对南极磷虾贮藏过程中抗氧化效果的影响

采用不同浓度的红酒提取物溶液(0.1、0.5、1.0、2.0 g/L)对南极磷虾进行预处理,并以PPO活力、TBARS值、色泽变化和感官评价为指标,对贮藏在特定温度条件下(2℃和25℃)的南极磷虾抗氧化效果进行了研究.实验结果显示,2℃和25℃条件下红酒提取物最适质量浓度分别为0.1 g/L和0.5 g/L,在此条件下南极磷虾PPO活性、TBARS值及防黑变效果优于其他浓度及空白对照组,可以有效地保持南极磷虾的品质及延长货架期;南极磷虾波长450 nm的吸光度A450值变化和RGB值与贮藏时间呈良好的线性关系,可以考虑用作反映贮藏条件下南极磷虾抗氧化程度的指标.     

苦瓜的微波灭酶技术

在不同的微波处理、微波结合抗褐变剂处理条件下研究了苦瓜多酚氧化酶和过氧化物酶的微波灭酶技术.结果表明:微波功率越大,载样量越少,多酚氧化酶越易失活,而切片厚度在1 cm以下对其活性影响不大.当载样量为40 g时,样品预先在功率800 w的微波下处理1 min,再在质量浓度为0.1 μg/mL的EDTA钠盐溶液浸泡60 min,最后微波间歇处理3 min,则可使其中的多酚氧化酶活性完全钝化.过氧化物酶随微波功率增大而迅速失活,在载样量为40g、切片厚度为0.5 cm、微波功率为800 w条件下,处理1 min即可失活.     

小麦秸秆半纤维素丙酸法预处理降解动力学

研究了小麦秸秆丙酸法预处理过程中半纤维素的降解动力学.结果表明,半纤维素降解过程可分为0～60 min的快速降解和60 ～ 180 min的缓慢降解2个阶段.通过建立反应动力学方程,获得了小麦秸秆丙酸法预处理的化学反应速率常数和反应级数.当温度为60、70、80和90℃时,速率常数分别为1.98×10-4、1.67 × 10-3、1.79×10-2和4.42×10-2,反应级数分别为1.99、1.40、0.61和0.46.在一定温度和时间条件范围内的动力学研究表明,小麦秸秆的丙酸法预处理的平均反应活化能为180.16 kJ/mol,频率因子为5.27×1024 L/(mol·min).     

1-MCP处理和贮藏温度对黑宝石李果肉褐变的影响

为了探明李果实褐变机理并抑制褐变,研究了1-MCP处理和贮藏温度对黑宝石李果肉冷害褐变、机械伤褐变、多酚氧化酶(PPO)活性、总酚含量和乙烯释放的影响.结果表明,黑宝石李果实在(0±0.5)℃和(3±0.5)℃条件下分别贮藏75d和60d会发生果心的冷害褐变,在(7±0.5)℃下不会发生冷害褐变,但贮藏期短;机械伤诱导李果实在冷藏2d后发生近果皮处果肉的褐变症状.5μL/L 1-MCP处理李果实12h后,在(0±0.5)℃贮藏时可有效抑制冷害褐变和机械伤褐变,但在(3±0.5)℃和(7±0.5)℃时促进果肉褐变.PPO活性和总酚含量的变化与李果实褐变相关,但不是褐变的诱发原因.     

马铃薯片红外和漂烫灭酶工艺对比试验

对马铃薯片进行了红外和漂烫两种灭酶工艺的对比试验,得出两种处理后多酚氧化酶相对活性、亮度、色度及维生素C含量的变化.采用多元非线性拟合方法得到厚度为3 mm马铃薯片两种处理方法的最佳工艺参数:采用辐照度为4.0 kW/m2红外辐照处理,处理时间2.5 min,维生素C质量比为6.983 mg/( 100 g);采用漂烫处理,处理温度为100℃,处理时间4.0 min,维生素C质量比为7.068 mg/( 100 g).与传统的漂烫灭酶相比,红外灭酶缩短加工时间37.5％.     

山楂红豆果醋的制备工艺研究

本文以红豆和山楂为原料,采用α-淀粉酶糖化处理,通过酒精发酵和醋酸发酵制备红豆山楂果醋。分别以还原糖含量、酒精度和总酸含量为考察指标,通过试验确定红小豆山楂果醋制备最佳工艺条件:酶解温度70℃、酶最适pH值6.0、α-淀粉酶用量0.04%和酶解时间60min;乌衣红曲发酵时间为3d、醋酸菌接入量10%、发酵温度32℃和时间96h。     

外源MeJA和BR对番茄种子萌发及幼根生长的影响

以番茄‘新红49号’种子为试验材料，研究不同浓度梯度的外源茉莉酸甲酯（Methyl jasmonate，MeJA）和油菜素内酯（Brassinolide，BR）对番茄种子萌发的影响。研究结果表明:与对照组相比，5×10-5 μmol/L的MeJA处理对种子的萌发最佳，5×10-6 μmol/L的MeJA对根长有促进作用，但抑制芽的生长；1×10-5 μmol/L的BR处理下种子萌发率最高，且此浓度显著促进根和芽生长；激素混合处理中，MeJA浓度为5×10-4 μmol/L和BR为1×10-5 μmol/L处理对种子萌发促进效果最为明显，且5×10-4 μmol/L MeJA和1×10-5 μmol/L BR对根和芽长具有促进作用。研究可知，单激素处理对种子萌发和根长、芽长促进效果优于双激素处理，因此，适当浓度的MeJA和BR对番茄种子萌发具有促进作用。      

1-MCP处理和贮藏温度对黑宝石李果肉褐变的影

为了探明李果实褐变机理并抑制褐变，研究了1-MCP处理和贮藏温度对黑宝石李果肉冷害褐变、机械伤褐变、多酚氧化酶（PPO）活性、总酚含量和乙烯释放的影响。结果表明，黑宝石李果实在（0±0.5）℃和（3±0.5）℃条件下分别贮藏75d和60d会发生果心的冷害褐变，在（7±0.5）℃下不会发生冷害褐变，但贮藏期短；机械伤诱导李果实在冷藏2d后发生近果皮处果肉的褐变症状。5μL/L 1-MCP处理李果实12h后，在（0±0.5）℃贮藏时可有效抑制冷害褐变和机械伤褐变，但在（3±0.5）℃和（7±0.5）℃时促进果肉褐变。PPO活性和总酚含量的变化与李果实褐变相关，但不是褐变的诱发原因。     

微波法中性蛋白酶酶解大豆分离蛋白的条件研究

中性蛋白酶酶解大豆分离蛋白,利用微波法缩短水解时间,测定酶解液中氨基氮的含量判断酶解效率。通过单因素和优化酶解条件正交试验,分析酶用量、pH值、底物浓度、温度和反应时间对酶解的影响,筛选出中性蛋白酶的最适酶解条件:在温度50℃、pH值7.0、酶用量12%、底物浓度5%和酶解时间20min,氨基氮含量为42.98mmol/L。     

丙酸预处理小麦秸秆的纤维素水解动力学

利用丙酸法预处理小麦秸秆,测定了不同温度下反应产物中葡萄糖质量浓度,并根据Saeman模型,计算得到了纤维素水解和葡萄糖降解的动力学数据,其活化能分别为6.508 6×104J/mol和5.622 3×104J/mol。动力学分析表明:纤维素水解反应速度快,但是生成的葡萄糖容易发生降解;该模型的最优化反应条件为80℃和176 min,实验得到的葡萄糖质量浓度为8.89 g/L,与模型预测结果偏差很小。