红麻根结线虫病的初步研究

 根结线虫病是我国红麻上的一种主要病害。经4年在湖南、浙江、广东和广西等省(区)红麻主产区调查和鉴定,病原线虫有下列3个种:南方根结线虫(Meloidogyne incognita),爪哇根结线虫(M.javanica)和花生根结线虫(M.arenaria)。南方根结线虫是优势种,其在湖南阮江县砂壤土麻田1年可发生4代。文中并对最佳施药期作了讨论。     

用PhastSystem电泳仪快速鉴定根结线虫种类

 应用瑞典Pharmacia Biotech.公司开发的全自动快速水平电泳仪(PhastSystem)进行酯酶和苹果酸脱氢酶电泳,对云南省烟草和观赏植物一串红上的根结线虫进行快速鉴定,得出4种根结线虫:花生根结线虫(Meloidogyne arenaria)、爪哇根结线虫(M.javanica)、南方根结线虫(M.incognita)和北方根结线虫(M.hapla)。文章提供电泳方法,认为PhastSystem电泳仪是根结线虫种类快速鉴定的理想设备。     

十五种根结线虫病害的病原鉴定

 从全国的不同地区采集的15种植物根结线虫病的病原,按照国际根结线虫协作组综合鉴定方法,对每种病原进行了分类鉴定。其中,花生、葡萄、唐松草(均采自北京)根结线虫病的病原都属于北方根结线虫;月季根结线虫病的病原(北京)有一种是北方根结线虫,另一种是花生根结线虫2号小种;泡桐根结线虫病的病原(河南禹县)也属于花生根结线虫2号小种;烟草(河南郑州)、番茄(湖南长沙)、西瓜(湖南长沙)、白菜(江西南昌)、萝芙木(广西南宁)和栀子(广西南宁)根结线虫病的病原都属于南方根结线虫1号小种;在广西南宁采集的美登木根结线虫病病原有一种是南方根结线虫1号小种,另一种是爪哇根结线虫;黄瓜(北京)和柳树(广西桂林)根结线虫病的病原都属于爪哇根线虫;在广东海南岛采集的青皮象耳豆根结线虫病的病原是国际上没有报道过的新种,定名为象耳豆根结线虫(Meloidogyne enterolobii)。     

水稻中MPK5稳态失衡抑制拟禾本科根结线虫与水稻的亲和互作

 拟禾本科根结线虫(Meloidogyne graminicola)为水稻的重要土传病原,可严重为害水稻。本研究旨在探究水稻中丝裂原活化蛋白激酶5(MPK5)稳态失衡对拟禾本科根结线虫与水稻亲和互作的影响,并初步探讨其机制。首先,通过线虫侵染试验发现,在水稻中超表达和沉默MPK5 引发的MPK5 稳态失衡均可抑制拟禾本科根结线虫与水稻的亲和互作。qRT-PCR 分析结果显示,与水稻野生型不同,在MPK5 超表达和沉默水稻株系中MPK5 均受拟禾本科根结线虫诱导表达。同时,拟禾本科根结线虫可抑制MPK5 超表达株系中几丁质酶的表达,但诱导MPK5 沉默株系中病程相关基因PR5 与PR10 的表达。上述试验结果表明,MPK5 稳态失衡可导致MPK5 响应拟禾本科根结线虫的侵染,且在MPK5 超表达和沉默水稻株系中MPK5 介导水稻产生拟禾本科根结线虫抗性的机制不同。     

甘肃省黄芩根结线虫病病原种类鉴定

通过形态学与分子生物学相结合的方法对引起甘肃省陇西县黄芩根结线虫病的病原种类进行了鉴定,并采用室内人工接种的方法测定其对黄芩的致病性。结果表明,从黄芩根系分离的根结线虫其形态特征及测量值与北方根结线虫Meloidogyne hapla基本一致。该线虫种群rDNA-ITS和28S rDNA D2/D3序列与NCBI数据库中的北方根结线虫序列相似性分别为99.60%和99.74% (rDNA-ITS: JX024147; 28S rDNA D2/D3: MW288147)。贝叶斯系统发育树显示,该线虫群体与其他北方根结线虫群体聚为一支,置信度在95%以上。利用北方根结线虫特异性引物Mh-F/Mh-R扩增并测序得到457 bp的特异性片段。因此,基于形态学结合rDNA-ITS、28S rDNA D2/D3序列和特异性片段长度,将黄芩根结线虫病病原鉴定为北方根结线虫M.hapla。接种该线虫后的黄芩生长缓慢,叶片黄化,40 d后须根上有明显的根结。经分离鉴定,致病群体为北方根结线虫。综上所述,甘肃省陇西县黄芩根结线虫病病原为北方根结线虫M.hapla,该线虫对黄芩具有较强的致病性,其繁殖系数为1.997。     

广西根结线虫种类调查

从广西南宁、柳州、桂林、钦州等地区采集的35号植物根结线虫病标本,按照国际根结线虫协作组(IMP)综合鉴定方法,对种每根结线虫病的病原线虫进行分类鉴定,其结果如下:来自南宁的穗状鸡冠花、胡椒、雍菜、胡罗卜、芭蕉芋、鸡蛋果、芜荽(香菜)、苋莱、茄子、吉庆果,萝芙木、桅子根结线虫病的病原都属南方根结线虫(Meloidog- yne incognita)1号小种.凤仙花、辣椒、雍菜、番茄、美登木根结线虫病的病原有一种是南方根结线虫1号小种,另一种是爪哇根结线虫(M.javanica).甜叶菊、姜根结线虫病的病原有一种是南方根结线虫1号小种,另一种是花生根结线虫(M.ar- enaria)1号小种.罗汉果、丝瓜、红麻根线虫病的病原有一种是爪哇根结线虫,另结一种是花生根结线虫1号小种.来自柳州的吉庆果、四季海棠的根结线虫病的病原是爪哇根结线虫.黄麻、黄穗苋的根结线虫病的病原是南方根结线1号小种.红穗苋和独头鸡冠花的病原一种是南方根结线虫1号小种,另一种是爪哇根结线虫.来自桂林的罗汉果、黄麻、柳树根结线虫病的病原一种是南方根结线虫1号小种,另一种是爪哇根结线虫.荷包豆根结线虫的病原是南方根结线虫1号小种.来自合浦的花生根结线虫病的病原是花生根结线虫1号小种.浦北的芹菜根结线虫病的病原一种是南方根结线虫1号小种     

山药根结线虫病的发生与综合防治研究

调查研究结果表明,山药根结线虫病病原是根结线虫属(Meloidogyne)的多种根结线虫的混合群体,主要为花生根结线虫(M.arenaria)、南方根结线虫(M.incognita)和爪哇根结线虫(M.jauanica)。发病情况与山药品种、土壤质地、种植年限、山药栽子带病情况等因素有关。防治应采取综合防治的方法。     

薯蓣根结线虫病的初步研究

 山东省荷泽地区薯蓣上根结线虫病发生严重。分离鉴定结果表明,该病的病原线虫是花生根结线虫Meloidogyne arenaria。该病在每年4月末开始发生,线虫在一年内发生完整的4代,完成一代平均约需要40 d,有明显的世代重叠现象。线虫主要在地表以下20~40 cm的土层内分布和为害。当地种植的4个主要品种中,肿脖温发病最重,明豆子发病最轻。     

象耳豆根结线虫对抗病番茄品种VFNT的致病性研究

 象耳豆根结线虫是近年在我国发现的一种扩散迅速、寄主广泛、致病性强的根结线虫。为探究象耳豆根结线虫的强致病性原因,本研究用象耳豆根结线虫和南方根结线虫分别接种抗线虫番茄品种VFNT和感病番茄品种Rutgers,30 d后象耳豆根结线虫对VFNT和Rutgers的累计侵入率分别为14.1%和19.2%、虫瘿率为62.5%和81.6%,而此时南方根结线虫累计侵入率为0%和18.8%、虫瘿率为0%和68.5%,象耳豆根结线虫的侵染力和致病力显著强于南方根结线虫;通过侵染抗病番茄品种VFNT的病理切片以及根尖侵染早期胼胝质、活性氧染色发现象耳豆根结线虫的侵染不会激活Mi-1基因诱导的特异性抗性,在侵染早期南方根结线虫引起的胼胝质沉积量在72 h最大,是象耳豆根结线虫的2.0倍;体外H₂O₂应激测试发现,H₂O₂浓度为10～80 μmol·L^-1象耳豆根结线虫对H₂O₂的耐受性显著强于南方根结线虫。象耳豆根结线虫具有强致病性的原因可能是:具有更强的侵染力和活性氧耐受力;侵染不会激活Mi-1基因诱导的特异性抗性且侵染引起的胼胝质的积累量较低。     

河南省怀地黄根结线虫病发生分布与种类鉴定

对河南省焦作市田间辖区种植的怀地黄根结线虫病发生情况进行了调查与研究,并采用作物根结线虫特异性(sequence characterized amplified region SCAR)标记引物对其病原根结线虫PCR扩增检测,结合雌虫会阴花纹的比较形态学和rDNA-ITS区序列测序分析的方法对怀地黄病原根结线虫进行种类鉴定。结果表明,我国焦作地区怀地黄的根结线虫为南方根结线虫[Meloidogyne incognita (KofoldWhite) Chitwood]。本研究首次明确了河南省焦作地区怀地黄病原根结线虫为南方根结线虫。     

根结线虫种群的线粒体DNA分析

 在同工酶和形态学鉴定的基础上,利用引物#C2F3和#1108对42个根结线虫种群线粒体DNA (mtDNA)中的COⅡ和LrRNA间区域进行特异性PCR扩增,35个种群的扩增产物约为1.7kb,其中29个是南方根结线虫,6个是爪哇根结线虫;3个花生根结线虫种群的扩增产物约为1.1kb;1个种群的扩增产物约为0.7kb,为根结线虫属在中国的新记录种;3个北方根结线虫种群的扩增产物约为0.5kb。用单条2龄幼虫提取物作模板得到的结果与大量提取DNA作模板的结果相同。为了区分产生相同大小片段的南方根结线虫和爪哇根结线虫,用限制性内切酶HinfⅠ对扩增产物进行酶切,结果表明:所有供试的南方根结线虫都可以被HinfⅠ酶切,且产生约1.3和0.4kb的2个限制性片段;但供试的爪哇根结线虫种群不能被酶切。由此表明,利用mtDNA PCR及酶切实验可以作为快速而准确地鉴定常见根结线虫的方法。     

假格里尼翁苍白杆菌A-29对南方根结线虫的防治效果及其鉴定

南方根结线虫是一种重要的植物寄生线虫，严重发生时可造成巨大的经济损失。本研究测定了菌株A-29发酵液对南方根结线虫的致死效果和盆栽防效，并对其进行了种类鉴定。结果表明，菌株A-29发酵滤液原液、5倍液和10倍液处理南方根结线虫后，2龄幼虫的致死率在24 h和48 h后达71.09%～95.45%，卵的孵化抑制率4 d时为59.25%～87.86%，其死亡率随处理浓度的提高而增加；菌株A-29发酵液处理60 d后对番茄根结线虫的防治效果达75.00%，番茄植株鲜重、根系干重和植株高度分别增加38.41%、33.52%和20.01%；根据菌株A-29的形态特征、生理生化特征、16S rRNA基因序列及其系统发育关系，将其鉴定为假格里尼翁苍白杆菌Ochrobactrum pseudogrignonense。研究表明，菌株A-29不仅对南方根结线虫具有良好的致死效果，而且对番茄植株具有明显的促生作用，是一株具有应用前景的生防菌。     

防治南方根结线虫的根瘤内生细菌的筛选及鉴定

根结线虫的严重发生给农作物生产造成巨大经济损失，生物防治是控制该病的一种安全有效措施。本研究从448株根瘤内生细菌分离株中筛选出3株对南方根结线虫有较好防效的生防细菌Sneb1994、Sneb1995和Sneb2000，3个菌株发酵滤液对南方根结线虫2龄幼虫（J2）均有高毒杀活性，处理24 h校正死亡率达85%以上，同时对卵孵化具有抑制作用，并可促进番茄种子生长。盆栽试验结果表明，3个菌株发酵液灌根处理均能显著减少根结数和卵囊数，相对防效为37.95%~44.51%，同时促进番茄植株的生长。经形态特征、生理生化特性和16S rDNA序列分析，鉴定菌株Sneb1994、Sneb1995和Sneb2000分别为氧化微杆菌Microbacterium oxydans、油菜假单胞菌Pseudomonas brassicacearum和蜡样芽胞杆菌Bacillus cereus。氧化微杆菌为首次报道对根结线虫有效的生防菌株。这些根瘤内生细菌菌株的发掘，为植物线虫病害的生物防治提供了新的微生物资源。     

水稻拟禾本科根结线虫发生与防治

拟禾本科根结线虫是严重影响水稻产量的植物寄生线虫之一,已成为制约中国及亚洲地区水稻产量的重大问题。拟禾本科根结线虫寄主范围广泛,可危害高地、低洼地和深水水稻;通过巨细胞从水稻根中摄取营养物质,从而在根系上形成许多弯钩状根结;其食道腺分泌物可以直接对水稻产生危害,影响水稻细胞代谢和免疫,从而影响水稻产量。目前水稻抗根结线虫病的品种较少,主要通过化学药剂在苗床进行防治。本文对拟禾本科根结线虫的寄主范围、危害特性、侵染特点、致病机制及防治方法等进行了综述,并对将来通过基因编辑等遗传工程技术提高水稻品种抗性的策略进行了展望,以期为我国水稻拟禾本科根结线虫的防治提供理论依据。     

淡紫紫孢菌微菌核发酵滤液生防活性及代谢组学分析

淡紫紫孢菌是一种重要的生防真菌,在特定培养条件下可产生抗逆结构-微菌核。本文通过室内生测和温室盆栽试验,研究了淡紫紫孢菌微菌核发酵滤液对植物病原菌和根结线虫的抑制作用。结果表明,微菌核发酵滤液具有较强的杀线抑菌活性,其中对核盘菌生长抑制率达到70.5%,并显著降低菌核数量,滤液稀释10倍后对根结线虫二龄幼虫的致死率达到50%以上。用量为10 mL/株时对根结线虫病防效达到44.9%,黄瓜株高和茎粗分别增加21.6%和38.4%。同时,基于LC-MS构建了淡紫紫孢菌微菌核培养代谢组。分析表明,微菌核形成过程中芥酸、胡椒酚和泛酸等抑菌物质以及丁酸、咪唑乙酸等杀线化合物相对含量显著增加。本研究为揭示淡紫紫孢菌生防机制奠定了基础,为微菌核制剂的研发提供了理论依据。     

Histological Characterization of Resistance to Different Root-Knot Nematode Species Related to Phenolics Accumulation in Capsicum annuum

ABSTRACT In the pepper Capsicum annuum CM334, which is used by breeders as a source of resistance to Phytophthora spp. and potyviruses, a resistance gene entirely suppresses reproduction of the root-knot nematode (Meloidogyne spp.). The current study compared the histological responses of this resistant line and a susceptible cultivar to infection with the three most damaging root-knot nematodes: M. arenaria, M. incognita, or M. javanica. Resistance of CM334 to root-knot nematodes was associated with unidentified factors that limited nematode penetration and with post-penetration biochemical responses, including the hypersensitive response, which apparently blocked nematode migration and thereby prevented juvenile development and reproduction. High-performance liquid chromatography analysis suggested that phenolic compounds, especially chlorogenic acid, may be involved in CM334 resistance. The response to infection in the resistant line varied with root-knot nematode species and was correlated with nematode behavior and pathogenicity in the susceptible cultivar: nematode species that quickly reached the vascular cylinder and initiated feeding sites in the susceptible cultivar were quickly recognized in CM334 and stopped in the epidermis or cortex. After comparing our data with those from other resistant pepper lines, we suggest that timing of the resistance response and the mechanism of resistance vary with plant genotype, resistance gene, and root-knot nematode species.